NSCLC分子靶向药物讲课文档

NSCLC分子靶向药物第1页，共38页。EGFREML4-ALKKRAS第2页，共38页。人类表皮生长因子受体(HER)家族属于酪氨酸激酶(TK)的跨膜蛋白受体包括４个成员分别是：HER1（EGFR）、HER2（Erb2）HER3(Erb3)、HER4(Erb3)能调节细胞生长、分化、迁移及其他细胞反应EGFR及其家族蛋白第3页，共38页。人类表皮因子HER1（EGFR）是一个170kb的糖蛋白,包括细胞外配体结合域、跨膜亲脂域和细胞内TK域。EGFR结构第4页，共38页。关于EGFR突变最早报道于1985年,在脑胶质细胞瘤中突变造成了EGFR细胞外域的部分缺失,最常见于EGFRⅧ的缺失，这些突变激活EGFR信号传导，并在肿瘤的形成过程中作为“driver”突变。EGFR突变机制第5页，共38页。目前已有的抗EGFR的分子靶向药物有西妥昔单抗、帕尼单抗、厄洛替尼、吉非替尼和阿法替尼EGFR及分子靶向药物第6页，共38页。

西妥昔单抗是人鼠嵌合的IgG1单克隆抗体。作用机制包括：阻断EGFR信号传导通路、抗体依赖的细胞介导的细胞毒性作（ADCC）、补体依赖的细胞毒作用（CDC)以及使EGFR受体内陷。EGFR分子靶向药物：西妥昔单抗第7页，共38页。帕尼单抗是全人源化的IgG2单克隆体。作用机制：阻断EGFR信号传导通路。在结直肠癌一、二线治疗中对于K-ras野生型的患者，帕尼单抗联合化疗对比单用化疗提高了无进展生存PFS,但总生存OS无统计学差异。EGFR分子靶向药物：帕尼单抗第8页，共38页。EGFR分子靶向药物：小分子化合物厄洛替尼和吉非替尼是EGFR酪氨酸激酶抑制剂，阻止肿瘤的生长及增加肿瘤的凋亡。阿法替尼是一种抗EGFR的第二代分子靶向治疗药物，能不可逆地阻断ErbB家族蛋白，针对EGFR基因不常见突变如G719X、L861Q、S768I等NSCLC患者有一定疗效。第9页，共38页。EGFR常见敏感突变包括第19号外显子的缺失突变和第21号外显子的L859R点突变共占90%左右。不常见突变约占10%包括G719X、L861Q、S768I等EGFR的常见和不常见突变第10页，共38页。临床研究中指出厄洛替尼可使NSCLC患者获益，无论EGFR状态、EGFR内含子CA重复序列状态，但最大的获益者见于EGFR基因突变的患者。临床研究证实吉非替尼对比卡铂/紫杉醇提高NSCLC患者PFS。小分子化合物的临床研究第11页，共38页。EGFR-TKI常见耐药机制最常见耐药机制是继发性的EGFR突T790M，造成吉非替尼不能有效地抑制EGFR激酶的活性；研究发现，约50％继发性吉非替尼耐药患者出现EGFR第20号外显子T790M突变，造成EGFR与吉非替尼结合能力下降。第12页，共38页。其次，部分耐药机制产生的原因是原癌基因肝细胞生长因子受体（MET）的扩增，在EGFR突变的NSCLC细胞中，MET基因扩增激活PI3K\AKT\PKB信号通路，引起对吉非替尼的耐药。EGFR-TKI常见耐药机制第13页，共38页。HER2是家族中第一个被发现与肿瘤相关的成员，HER2没有已知的配体，迄今为止４种HER2靶向药物被批准用于HER2过表达的乳腺癌，包括曲妥珠单抗、拉帕替尼、帕妥珠单抗、单克隆抗体结合物(TDM1)。HER家族成员：HER2及其药物第14页，共38页。曲妥珠单抗是一人源化IgG1单克隆抗体。作用机制它通过与HER2胞外域结合阻碍其同源异源二聚体形成，从而抑制HER2胞内的TK磷酸化，它的主要作用机制包括阻断信号传导通路、ADCC、CDC、受体内陷作用、抗血管生成作用以及防止胞外受体脱落。HER2靶向药物：曲妥珠单抗

第15页，共38页。HER2靶向药物：拉帕替尼拉帕替尼是一种口服的双靶点的小分子化合物，它能可逆性的与HER2、EGFR胞内TK的ATP位点结合，从而抑制胞内的信号传导。前瞻性的研究数据表明，在HER2过表达的乳腺癌治疗中,拉帕替尼与曲妥珠单抗有协同作用。第16页，共38页。HER2靶向药物：帕妥珠单抗帕妥珠单抗是一个人源化IgG1的单克隆抗体，与HER2胞外域2结合(曲妥珠单抗与HER2受体胞外域4结合)阻断HER2与家族其它成员的二聚体形成和信号传导。研究中显示帕妥珠单抗与曲妥珠单抗具有协同作用。第17页，共38页。

HER2靶向药物：单克隆抗体结合物(TDM1)

单克隆抗体结合物（TDM1）是一种新型的单克隆抗体结合物，由曲妥珠单抗结合真菌毒素DM1（又称美登素）组成。美登素是一种微管蛋白抑制剂，曲妥珠单抗作为它的载体识别肿瘤细胞的HER2。TDM1被批准用于HER2阳性的转移性乳腺癌的二、三线治疗。第18页，共38页。HER家族成员：HER3作用机制与EGFR、HER2的结构具有相似性，但它只有非常小的激酶活性，不能自行启动下游信号通路，但是HER3能够与其他受体(特别是HER2受体)结合形成异源二聚体,参与信号传导，使细胞生长失控和恶性化。第19页，共38页。HER3的靶向治疗间接对HER3的治疗可能是一种可行的策略以及针对二聚体的形成也是一种治疗策略，单克隆抗体会结合到HER3受体胞外域的配体结合位点，阻碍了HER2与HER3或HER家族其他成员结合。此外，针对下游信号传导通路上蛋白激酶也是潜在的治疗靶点。第20页，共38页。HER家族成员：HER4作用机制HER4的研究尚少，肿瘤中异常基因启动子甲基化与HER4的表达成负相关。目前已在乳腺癌及HER4低表达的肿瘤中发现甲基化的HER4基因启动子。HER4信号能促进乳腺癌细胞分化和抑制其生长，HER4常在乳腺癌中作为预后良好的预测指标。第21页，共38页。EGFREML4-ALKKRAS第22页，共38页。ALK基因融合的产生间变性淋巴瘤激酶(ALK)基因是胰岛素受体超家族的成员，2007年在75例NSCLC患者中发现5例携带棘皮动物微管相关蛋白4（EML4）ALK融合突变基因，并且发现EML4-ALK融合基因有致瘤性，EML4与ALK基因都位于2号染色体短臂上由于其中1个基因倒置而产生。第23页，共38页。

EML4－ALK融合基因，相关研究已经证实，EML4－ALK可通过丝裂原活化蛋白激酶－分裂原活化蛋白激酶－细胞外调节蛋白激酶、磷脂酰肌醇3－激酶－蛋白激酶B和ras信号传导及转录激活因子－3信号通路促进肿瘤细胞的增殖、分化、抗凋亡。

ALK融合基因作用机制第24页，共38页。目前荧光原位杂交（FISH)是美国FDA唯一批准的检测ALK基因融合的方法，是检测EML4－ALK融合基因的金标准。ALK基因融合检测技术（一）第25页，共38页。

ALK基因融合检测技术（二）免疫组织化学（IHC)是一种经济简便的诊断方法，其敏感性低于FISH法，可用作FISH法前对EML4－ALK融合基因的预筛查。第26页，共38页。ALK基因融合检测技术（三）利用ＲT－PCＲ分别检测了104例肺癌，仅1例肺癌标本中发现了EML4－ALK的mＲNA，显示PCＲ方法检测ALK融合基因仍需强化。高通量测序的确可以发现未知的融合类型，但是目前测序成本太昂贵，令其不太适合在临床上应用。第27页，共38页。

接受克唑替尼治疗ALK阳性的NSCLC患者常常出现药物抵抗，并发生中枢神经系统转移，可能与克唑替尼在脑脊液中的浓度远低于血浆有关。ALK靶向药物：克唑替尼第28页，共38页。ALK靶向药物耐药机制耐药机制可能涉及到基因突变和基因扩增，其中突变代表是L1196M突变活性增加，继而导致耐药，其他耐药突变还包括G1269A、C1156Y、L1152Ｒ、G120Ｒ、S1206Y、1151Tins、F1174C、D1203N。第29页，共38页。

新药开发针对克唑替尼的耐药现象（一）2014年第2代靶向药物色瑞替尼(Ceritinib)用于克唑替尼不耐受的ALK阳性患者。目前，针对ALK－L1196M和EGFR－T790M双突变的口服TKIAP26113，和针对ALK－L1196M及C1156Y突变的CH5424802，均在临床实验中。

ALK靶向药物第30页，共38页。

新药开发针对克唑替尼的耐药现象（二）另一类新药是HSP90抑制剂，作为分子伴侣抑制剂，通过稳定和调节ALK蛋白，加快其蛋白降解从而达到治疗效果。目前HSP90抑制剂类新药Ganetespib、Onalespib、IPI－504等均处于研发中

ALK靶向药物第31页，共38页。EGFREML4-ALKKRAS第32页，共38页。

KRAS基因编码位于细胞质内的G蛋白家族，参与生长因子对细胞生长、增殖等调控作用的多个环节。

KRAS基因结构第33页，共38页。

KRAS突变主要发现在肺腺癌中，占NSCLC的15%-20%，腺癌的30%-35%，主要是吸烟患者。KRAS突变位点在12、13和61密码子，超过90%的突变发生在12密码子。

KRAS基因突变第34页，共38页。

目前还没有针对KRS的有效靶向治疗药物上市，已经有多项临床试验正在进行中，主要针对下游信号通路MAPK和AKT/PI3K激酶抑制剂（如MEK或MTOR抑制剂）针对RAS下游信号通路可能对KRAS突变细胞有效。Selumetinib通过抑制MEK1/2信号转道通路，下调KRAS基因的表达。

KRAS靶向药物第35页，共38页。KRAS靶向药物:司美替尼2012年ASCO会上公布了一项随机、双盲II期临床研究，研究纳入了IIIb期-IV期KRAS基因突变的一线化疗后进展的NSCLC患者，分别给予多西他赛（75mg/m2），联合selumetinib（75