CN120285108A 一种利水通淋的黄花制剂及其制备方法 （江西省保灵动物保健品有限公司）

(19)国家知识产权局(71)申请人江西省保灵动物保健品有限公司地址330000江西省宜春市靖安县工业园香田新区申请人江西省农业技术推广中心(72)发明人王红英朱芸舒亦婷李瑾瑾曹会军王伟(74)专利代理机构北京云嘉湃富知识产权代理有限公司11678A61K47/42(2017.01)A61P31/04(2006.01)A61P31/10(2006.01)A61K36/899(2006.01)(54)发明名称本发明涉及药物制剂技术领域，尤其涉及一种利水通淋的黄花制剂及其制备方法。上述利水通淋的黄花制剂的原料按质量份包括：一枝黄花500-600份，马鞭草50-150份，白车前草100-300份，葫芦壳50-200份，白前50-250份，金银花10-100份，鱼腥草10-100份，壳聚糖苯甲酸钠10-20份，硫酸软骨素1-10份，水8000-12000份。本发明具有很好的清热解毒、利尿通淋显增加尿量，促进尿中Na'排出，减少K+流失，同0球菌菌21.一种利水通淋的黄花制剂，其特征在于，其原料按质量份2.根据权利要求1所述利水通淋的黄花制剂，其特征在于，壳聚糖的脱乙酰度88-92%。3.根据权利要求1所述利水通淋的黄花制剂，其特征在于，甘露聚糖肽中，总糖所占质量百分比为88-90%,氨基酸所占质量百分比为5-6%。4.一种如权利要求1-3任一项所述利水通淋的黄花制剂制备方法，其特征在于，包括如下步骤：S1、将壳聚糖溶于苹果酸溶液中，加入抗坏血酸钠避光搅拌1-2h,得到预处理壳聚糖；冷冻干燥后微波处理2-6min,液氮冷冻粉碎得到预混原料；对预混原料采用动态逆流提取1-2h;然后进行加压提取1-2h,压滤得到提取液；S4、将提取液减压浓缩，加入预处理壳聚糖、甘露聚糖肽，40-50℃搅拌10-30min,加入5.根据权利要求4所述利水通淋的黄花制剂制备方法，其特征在于，S1中，苹果酸溶液的质量分数为0.1-0.5%。6.根据权利要求4所述利水通淋的黄花制剂制备方法，其特征在于，S1中，避光搅拌的温度为40-50℃。7.根据权利要求4所述利水通淋的黄花制剂制备方法，其特征在于，S2中，微波处理的功率为600-700W,微波温度为40-50℃。8.根据权利要求4所述利水通淋的黄花制剂制备方法，其特征在于，S2中，动态逆流提取过程中，料液比为1:10-12,提取温度为40-50℃,动态逆流循环流速6-8L/min。9.根据权利要求4所述利水通淋的黄花制剂制备方法，其特征在于，S2中，加压提取温度为70-80℃;压滤压强为0.1-0.3MPa。10.根据权利要求4所述利水通淋的黄花制剂制备方法，其特征在于，S3中，减压浓缩至相对密度为1.1-1.2,减压浓缩温度为55-65℃,真空度为-0.06～-0.08MPa。3技术领域[0001]本发明涉及药物制剂技术领域，尤其涉及一种利水通淋的黄花制剂及其制备方背景技术易尿路感染。[0003]目前复杂性尿路感染逐年增高，这与抗生素滥用紧密相关，氟喹诺酮类对尿路感染主要致病菌大肠杆菌的耐药率已突破60%,第三代头孢菌素(如头孢曲松)仍是淋病一线用药，但大肠杆菌对其耐药率显著上升，头孢曲松对产ESBL大肠杆菌耐药率从2010年的5.3%升至2023年的17.1%。传统中医药在尿路感染治疗中虽具有独特优势，实验研究证实，金银花、连翘等清热解毒药材对金黄色葡萄球菌(革兰氏阳性菌)的体外抑菌率高，但对淋球菌(革兰氏阴性双球菌)的抑菌效果较低，这种差异源于淋球菌的外膜低通透性及主动外排系统高表达。[0004]同时，传统煎煮工艺导致挥发性抑菌物质大量流失，现代药理学研究揭示，传统中药配伍存在药材煎煮工艺破坏挥发性抑菌物质，导致有效成分损失率高。而且现有制剂在膀胱黏膜滞留时间短，难以穿透致病菌形成的微菌落结构，疗效不尽如人意。发明内容[0005]本发明的目的是为了解决现有技术中存在的缺点，而提出的一种利水通淋的黄花制剂及其制备方法。份，马鞭草50-150份，白茅根100-300份，车前草100-300份，葫芦壳50-200份，白前50-250[0007]优选地，壳聚糖的脱乙酰度88-92%。[0008]优选地，甘露聚糖肽中，总糖所占质量百分比为88-90%,氨基酸所占质量百分比为5-6%。[0010]S1、将壳聚糖溶于苹果酸溶液中，加入抗坏血酸钠避光搅拌1-2h,得到预处理壳聚均匀，冷冻干燥后微波处理2-6min,液氮冷冻粉碎得到预混原料；对预混原料采用动态逆流提取1-2h;然后进行加压提取1-2h,压滤得到提取液；[0012]S4、将提取液减压浓缩，加入预处理壳聚糖、甘露聚糖肽，40-50℃搅拌10-30min,4加入苯甲酸钠、硫酸软骨素、水，调节体系pH值为5.8-6,低频超声处理10-20min。痹及多种感染性疾病。[0020]鱼腥草，味辛，性寒。归肺经[0021]优选地，S1中，苹果酸溶液的质量分数为0.1-0.5%。[0022]优选地，S1中，避光搅拌的温度为40-50℃。[0023]优选地，S2中，微波处理的功率为600-700W,微波温度为40-50℃。[0024]优选地，S2中，动态逆流提取过程中，料液比为1:10-12,提取温度为40-50℃,动态逆流循环流速6-8L/min。[0025]优选地，S2中，加压提取温度为70-80℃;压滤压强为0.1-0.3MPa。[0026]优选地，S3中，减压浓缩至相对密度为1.1-1.2,减压浓缩温度为55-65℃,真空度为-0.06～-0.08MPa。[0027]优选地，S3中，低频超声处理频率为20-25kHz,超声功率为100-150W。[0028]有益效果：[0029]本发明采用一枝黄花与马鞭草、白茅根、车前草、葫芦壳、白前、金银花、鱼腥草复配，不仅具有广谱抗菌作用，抑制病原微生物的黏附与增殖，而且可降低炎症因子释放，减轻尿路黏膜炎症，并增强局部免疫应答；其中车前草、白茅根、葫芦壳复配，既可抑制肾小管对Na+重吸收，明显促进尿中Na的排出并减少K流失，又能缓解输尿管平滑肌痉挛，改善排尿不畅的问题。[0030]本发明采用真空冷冻处理配合液氮冷冻超微粉碎，可促使细胞结构因冰晶形成产生微孔，提高后续提取时溶出速率，同时显著增强体系比表面积，与后续动态逆流提取配合，提取效率得到显著提高；本发明S2中各项操作配合，可避免高温导致挥发油损失，显著降低有效成分损失率。[0031]而药用级壳聚糖在苹果酸溶液中形成阳离子复合物，与抗坏血酸钠协同发挥抗氧化稳定作用，并通过氢键和疏水作用与甘露聚糖肽产生分子间缔合，这种缔合结构可延长活性成分在尿路上皮细胞的滞留时间，缓释效果优异。[0032]本发明具有很好的清热解毒、利尿通淋作用，不仅具有明显的抑菌、抗炎作用，而5且能明显增加尿量，促进尿中Na+排出，减少K流失，同时稳定性高、重现性好，更加适合工业化的生产。[0033]图1为实施例5和对比例1-3所得黄花制剂的抑菌直径对比图。[0034]图2为实施例5组、对比例1组、对比例2组、对比例3组和空白对照组的扭体次数对比图。[0035]图3为实施例5组、对比例1组、对比例2组、对比例3组和模型组给药后4h内尿量变化图。[0036]图4为实施例5组、对比例1组、对比例2组、对比例3组和模型组给药后4h内尿液中K、Na含量对比图。[0037]下面结合具体实施例对本发明作进一步解说。[0038]实施例1车前草100g,葫芦壳50g,白前50g,金银花10g,鱼腥草10g,脱乙酰度90%的药用级壳聚糖10g,抗坏血酸钠1g,甘露聚糖肽5g,苯甲酸钠[0041]S1、将药用级壳聚糖溶于100g质量分数为0.1%的苹果酸溶液中，加入抗坏血酸钠避光搅拌1h,搅拌温度为40℃,得到预处理壳聚糖；均匀，真空冷冻干燥后微波处理2min,微波温度为40℃,微波功率为600W,采用液氮冷冻粉液比为1:10,提取温度为40℃,动态逆流循环流速6L/min;然后进行加压提取1h,加压提取[0043]S3、将提取液减压浓缩至相对密度为1.1,减压浓缩温度为55℃,真空度为-0.06MPa,加入预处理壳聚糖、甘露聚糖肽，在温度40℃搅拌10min,加入苯甲酸钠、硫酸软骨素、去离子水，调节体系pH值为5.8-6,低频超声处理10min,超声频率为20kHz,超声功率为[0045]一种利水通淋的黄花制剂，其原料包括：一枝黄花600g,马鞭草150g,白茅根300g,车前草300g,葫芦壳200g,白前250g,金银花100g,鱼腥草100g,脱乙酰度90%的药用级壳聚糖20g,抗坏血酸钠5g,甘露聚糖肽15g,苯甲酸钠20g,硫酸软骨素10g,水12000g。[0046]上述利水通淋的黄花制剂制备方法，包括如下步骤：[0047]S1、将药用级壳聚糖溶于200g质量分数为0.5%的苹果酸溶液中，加入抗坏血酸钠避光搅拌2h,搅拌温度为50℃,得到预处理壳聚糖；[0048]S2、将一枝黄花、马鞭草、白茅根、车前草、葫芦壳、白前、均匀，真空冷冻干燥后微波处理6min,微波温度为50℃,微波功率为700W,采用液氮冷冻粉6碎至平均粒径≤10μm,得到预混原料；对预混原料采用动态逆流提取2h,纯化水为溶剂，料液比为1:12,提取温度为50℃,动态逆流循环流速8L/min;然后进行加压提取2h,加压提取温度为80℃,0.3MPa压滤得到提取液；[0049]S3、将提取液减压浓缩至相对密度为1.2,减压浓缩温度为65℃,真空度为-0.08MPa,加入预处理壳聚糖、甘露聚糖肽，在温度50℃搅拌30min,加入苯甲酸钠、硫酸软骨素、去离子水，调节体系pH值为5.8-6,低频超声处理20min,超声频率为25kHz,超声功率为[0051]一种利水通淋的黄花制剂，其原料包括：一枝黄花520g,马鞭草120g,白茅根150g,车前草250g,葫芦壳80g,白前200g,金银花40g,鱼腥草80g,脱乙酰度90%的药用级壳聚糖12g,抗坏血酸钠4g,甘露聚糖肽8g,苯甲酸钠18g,硫酸软骨素3g,水11000g。[0053]S1、将药用级壳聚糖溶于120g质量分数为0.4%的苹果酸溶液中，加入抗坏血酸钠避光搅拌80min,搅拌温度为48℃,得到预处理壳聚糖；均匀，真空冷冻干燥后微波处理3min,微波温度为48℃,微波功率为620W,采用液氮冷冻粉碎至平均粒径≤10μm,得到预混原料；对预混原料采用动态逆流提取100min,纯化水为溶剂，料液比为1:10.5,提取温度为48℃,动态逆流循环流速6.5L/min;然后进行加压提取100min,加压提取温度为73℃,0.25MPa压滤得到提取液；[0055]S3、将提取液减压浓缩至相对密度为1.15,减压浓缩温度为58℃,真空度为-0.07MPa,加入预处理壳聚糖、甘露聚糖肽，在温度48℃搅拌15min,加入苯甲酸钠、硫酸软骨素、去离子水，调节体系pH值为5.8-6,低频超声处理18min,超声频率为21kHz,超声功率为[0057]一种利水通淋的黄花制剂，其原料包括：一枝黄花580g,马鞭草80g,白茅根250g,车前草150g,葫芦壳180g,白前100g,金银花80g,鱼腥草40g,脱乙酰度90%的药用级壳聚糖18g,抗坏血酸钠2g,甘露聚糖肽12g,苯甲酸钠12g,硫酸软骨素7g,水9000g。[0059]S1、将药用级壳聚糖溶于180g质量分数为0.2%的苹果酸溶液中，加入抗坏血酸钠避光搅拌100min,搅拌温度为42℃,得到预处理壳聚糖；均匀，真空冷冻干燥后微波处理5min,微波温度为42℃,微波功率为680W,采用液氮冷冻粉碎至平均粒径≤10μm,得到预混原料；对预混原料采用动态逆流提取80min,纯化水为溶剂，料液比为1:11.5,提取温度为42℃,动态逆流循环流速7.5L/min;然后进行加压提取80min,加压提取温度为77℃,0.15MPa压滤得到提取液；[0061]S3、将提取液减压浓缩至相对密度为1.15,减压浓缩温度为62℃,真空度为-0.07MPa,加入预处理壳聚糖、甘露聚糖肽，在温度42℃搅拌25min,加入苯甲酸钠、硫酸软骨素、去离子水，调节体系pH值为5.8-6,低频超声处理12min,超声频率为24kHz,超声功率为7[0063]一种利水通淋的黄花制剂，其原料包括：一枝黄花550g,马鞭草100g,白茅根200g,车前草200g,葫芦壳130g,白前150g,金银花60g,鱼腥草60g,脱乙酰度90%的药用级壳聚糖15g,抗坏血酸钠3g,甘露聚糖肽10g,苯甲酸钠15g,硫酸软骨素5g,水10000g。[0065]S1、将药用级壳聚糖溶于150g质量分数为0.3%的苹果酸溶液中，加入抗坏血酸钠避光搅拌90min,搅拌温度为45℃,得到预处理壳聚糖；均匀，真空冷冻干燥后微波处理4min,微波温度为45℃,微波功率为650W,采用液氮冷冻粉碎至平均粒径≤10μm,得到预混原料；对预混原料采用动态逆流提取90min,纯化水为溶剂，料液比为1:11,提取温度为45℃,动态逆流循环流速7L/min;然后进行加压提取90min,加压提取温度为75℃,0.2MPa压滤得到提取液；[0067]S3、将提取液减压浓缩至相对密度为1.15,减压浓缩温度为60℃,真空度为-0.07MPa,加入预处理壳聚糖、甘露聚糖肽，在温度45℃搅拌20min,加入苯甲酸钠、硫酸软骨素、去离子水，调节体系pH值为5.8-6,低频超声处理15min,超声频率为22.5kHz,超声功率[0069]一种利水通淋的黄花制剂，其原料包括：一枝黄花550g,马鞭草100g,白茅根330g,车前草200g,白前150g,金银花60g,鱼腥草60g,脱乙酰度90%的药用级壳聚糖15g,抗坏血酸钠3g,甘露聚糖肽10g,苯甲酸钠15g,硫酸软骨素5g,水10000g。[0071]S1、将药用级壳聚糖溶于150g质量分数为0.3%的苹果酸溶液中，加入抗坏血酸钠避光搅拌90min,搅拌温度为45℃,得到预处理壳聚糖；空冷冻干燥后微波处理4min,微波温度为45℃,微波功率为650W,采用液氮冷冻粉碎至平均粒径≤10μm,得到预混原料；对预混原料采用动态逆流提取90min,纯化水为溶剂，料液比为1:11,提取温度为45℃,动态逆流循环流速7L/min;然后进行加压提取90min,加压提取温度为75℃,0.2MPa压滤得到提取液；[0073]S3、将提取液减压浓缩至相对密度为1.15,减压浓缩温度为60℃,真空度为-0.07MPa,加入预处理壳聚糖、甘露聚糖肽，在温度45℃搅拌20min,加入苯甲酸钠、硫酸软骨素、去离子水，调节体系pH值为5.8-6,低频超声处理15min,超声频率为22.5kHz,超声功率为120W。[0075]一种利水通淋的黄花制剂，其原料包括：一枝黄花550g,马鞭草100g,白茅根200g,车前草200g,葫芦壳130g,白前150g,金银花60g,鱼腥草60g,脱乙酰度90%的药用级壳聚糖18g,甘露聚糖肽10g,苯甲酸钠15g,硫酸软骨素5g,水10000g。均匀，真空冷冻干燥后微波处理4min,微波温度为45℃,微波功率为650W,采用液氮冷冻粉8碎至平均粒径≤10μm,得到预混原料；对预混原料采用动态逆流提取90min,纯化水为溶剂，料液比为1:11,提取温度为45℃,动态逆流循环流速7L/min;然后进行加压提取90min,加压提取温度为75℃,0.2MPa压滤得到提取液；[0078]S2、将提取液减压浓缩至相对密度为1.15,减压浓缩温度为60℃,真空度为-0.07MPa,加入药用级壳聚糖、甘露聚糖肽，在温度45℃搅拌20min,加入苯甲酸钠、硫酸软骨素、去离子水，调节体系pH值为5.8-6,低频超声处理15min,超声频率为22.5kHz,超声功率[0080]一种利水通淋的黄花制剂，其原料包括：一枝黄花550g,马鞭草100g,白茅根200g,车前草200g,葫芦壳130g,白前150g,金银花60g,鱼腥草60g,脱乙酰度90%的药用级壳聚糖15g,抗坏血酸钠3g,甘露聚糖肽10g,苯甲酸钠15g,硫酸软骨素5g,水10000g。[0082]S1、将药用级壳聚糖溶于150g质量分数为0.3%的苹果酸溶液中，加入抗坏血酸钠避光搅拌90min,搅拌温度为45℃,得到预处理壳聚糖；均匀，真空冷冻干燥后微波处理4min,微波温度为45℃,微波功率为650W,机械粉碎至平均粒径≤10μm,得到预混原料；对预混原料采用动态逆流提取90min,纯化水为溶剂，料液比为1:11,提取温度为45℃,动态逆流循环流速7L/min;然后进行加压提取90min,加压提取温度为75℃,0.2MPa压滤得到提取液；[0084]S3、将提取液减压浓缩至相对密度为1.15,减压浓缩温度为60℃,真空度为-0.07MPa,加入预处理壳聚糖、甘露聚糖肽，在温度45℃搅拌20min,加入苯甲酸钠、硫酸软骨素、去离子水，调节体系pH值为5.8-6,低频超声处理15min,超声频率为22.5kHz,超声功率[0085]采用实施例5和对比例1-3所得黄花制剂进行体外抗菌试验，具体如下：将金黄色葡萄球菌、粪链球菌、大肠杆菌、普通变形杆菌分别接种营养琼脂平板，淋球菌接种巧克力色平板，白色念球菌接种沙保氏琼脂平板；在各琼脂板上打孔，孔径5mm,将实施例5和对比例1-3所得黄花制剂分别稀释至100倍后加入各琼脂板的孔内，置37℃温箱内培养24h,淋球菌置37℃CO₂温箱内培养24h,统计各组各琼脂平板上药物抑菌直径。[0086]如图1所示，实施例5和对比例1-3所得黄花制剂对金黄色葡萄球菌、粪链球菌、大肠杆菌、普通变形杆菌、淋球菌、白色念球菌均具有不同程度的抑菌作用，其中对金黄色葡萄球菌、淋球菌的抑菌作用最强；而实施例5所得黄花制剂对各菌株的抑菌效果均为最强，优于对比例1-3(P<0.05)。[0087]以昆明种小鼠为实验对象，采用实施例5和对比例1-3所得黄花制剂进行小鼠镇痛试验，具体如下：取50只雄性小鼠(体重20±2g),随机分为5组(每组10只),分别为实施例5组、对比例1组、对比例2组、对比例3组和空白对照组，依次予以为5g/kgbw)、对比例1所得黄花制剂(剂量为5g/kgbw)、对比例2所得黄花制剂(剂量为5g/鼠腹腔注射0.6%冰醋酸溶液0.2mL/只致痛，立即观察记录小鼠在20min内出现的扭