DB34-T 4488-2023 主要动物疫病定点监测技术规范

ICS11.220CCSB4134DB34/T4488—2023主要动物疫病定点监测技术规范Technicalregulationforfixed-pointmonitoringofmajoranimaldiseases2023-07-31发布2023-08-31实施安徽省市场监督管理局发布IDB34/T4488—2023本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由安徽省动物疫病预防与控制中心提出。本文件由安徽省农业农村厅归口。本文件起草单位：安徽省动物疫病预防与控制中心、望江县畜牧兽医技术推广中心、滁州市动物疫病预防与控制中心。本文件主要起草人：王倩、周迎春、李少炎、许青华、王维、王军、沈艳、刘华、段倩倩、苗文萍、陈曦、郑举、王立、陈静、金晓宇、杨庆琳、伍唯、何长生、朱良强。DB34/T4488—20231主要动物疫病定点监测技术规范本文件规定了主要动物疫病定点监测点选择、样品的采集、监测项目和方法、档案管理。本文件适用于主要动物疫病定点监测。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T16550新城疫诊断技术GB/T16551猪瘟诊断技术GB/T18090猪繁殖与呼吸综合征诊断方法GB/T18641伪狂犬病诊断方法GB/T18646动物布鲁氏菌病诊断技术GB/T18648非洲猪瘟诊断技术GB/T18936高致病性禽流感诊断技术GB/T26436禽白血病诊断技术GB/T27982小反刍兽疫诊断技术NY/T541兽医诊断样品采集、保存与运输技术规范NY/T680禽白血病病毒P27抗原酶联免疫吸附试验方法3术语和定义本文件没有需要界定的术语和定义。4定点监测点选择4.1基本原则定点监测点应符合当地动物养殖情况、流通模式、动物疫病流行特点，具有代表性。按照养殖环节、交易环节、屠宰环节和野禽栖息地，设置生猪、家禽、反刍动物疫病定点监测场点。定点监测点一经确定，不得随意更改，因特殊原因确需调整的，需选择其他符合条件的场点作为替4.2养殖环节监测点选择参照附录A中表A.1确定养殖场的大、中、小规模，参照附录A中表A.2确定定点监测点数量，按照当地大、中、小规模场数量占比确定定点监测点大、中、小规模场数量。2DB34/T4488—20234.3其他环节监测点选择根据当地情况，相应环节个选择1～2个定点监测点。4.4监测群体选择每个定点监测场点在选择监测群体时，要兼顾畜禽的不同类型、代次、品种，并覆盖不同养殖阶段的动物群体，并按照存栏比例分配监测群体数量。4.5监测频率每年2次，5～6月和11～12月各1次。也可根据不同疫病的流行特点、发生情况确定。5样品的采集5.1采样数量参照附录B确定每个监测点采样数量，不同群体的采集数量按存栏比例分配后随机采样。5.2采样方法按照NY/T541的规定执行，规范填写采样信息表（见附录C中表C.1～表C.15）。5.3样品编号5.3.1生猪样品编号血清样品以“AX1～AXn”模式编写，猪扁桃体以“AB1～ABn”模式编写，猪鼻/咽拭子以“AS1～ASn”模式编写。5.3.2家禽样品编号鸡、鸭、鹅分别用D、E、F表示，血清样品用X、蛋清样品用D、拭子样品用S、环境样品用H、野禽粪便用G表示，如鸡血清样品为DX1～DXn，鸭拭子样品为ES1～ESn，环境样品为H1～Hn，野禽粪便样品为G1～Gn其他同理。5.3.3反刍动物样品编号牛、羊分别用B、C表示，血清样品用X、脾脏样品用P、淋巴结样品用L，食道-咽部分泌物（O-P液）用Y表示，如牛血清为BX1～BXn，羊食道-咽部分泌物（O-P液）为CY1～CYn，其他同理。5.4样品的保存和运送按照NY/T541的规定执行。6监测项目和方法6.1非洲猪瘟6.1.1检测项目6.1.1.1病原学检测DB34/T4488—20233猪活体采集扁桃体样品、口鼻拭子和全血样品，死亡猪只可采集脾脏、扁桃体、淋巴结、肾脏、骨髓等组织样品，进行非洲猪瘟病毒核酸检测。6.1.1.2血清学检测要与病原学样品相对应，猪活体采集全血分离出血清样品，进行非洲猪瘟病毒抗体检测。6.1.2检测方法按照GB/T18648的规定执行，采用荧光PCR方法检测非洲猪瘟病毒核酸，采用酶联免疫吸附实验方法（ELISA）检测非洲猪瘟病毒抗体。6.1.3检测结果统计填写实验室检测结果统计表（见附录C中表C.3和表C.15）。6.2禽流感6.2.1检测项目6.2.1.1病原学检测活禽采集咽喉和泄殖腔双拭子，野禽可采集新鲜粪便，死亡禽可采集气管、肺脏、脑、肠（包括内容物）、肝脏、脾脏、肾脏、心脏等组织样品，进行禽流感病毒核酸检测。6.2.1.2血清学检测要与病原学样品相对应，活禽采集全血分离出血清样品，进行禽流感病毒抗体检测。6.2.2检测方法按照GB/T18936的规定执行，采用荧光RT-PCR方法检测H5、H7和H9亚型禽流感病毒核酸，采用血凝抑制实验方法（HI）检测H5、H7和H9亚型禽流感病毒抗体。6.2.3检测结果统计填写实验室检测结果统计表（见附录C中表C.6和表C.15）6.3.1检测项目6.3.1.1病原学检测猪活体采集扁桃体、水泡液、水泡皮样品，牛羊活体采集食道-咽部分泌物（O-P液）、水泡液、水泡皮样品，屠宰场或死亡动物可采集淋巴结、脊髓、心脏肌肉等组织样品，进行口蹄疫病毒核酸检测。6.3.1.2血清学检测要与病原学样品相对应，猪、牛、羊活体采集全血分离出血清样品，进行口蹄疫病毒抗体检测。6.3.2检测方法按照GB/T18935的规定执行，采用荧光RT-PCR方法检测口蹄疫病毒核酸，采用液相或固相阻断酶联免疫吸附试验方法检测O型和A型口蹄疫病毒抗体。DB34/T4488—202346.3.3检测结果统计填写实验室检测结果统计表（见附录C中表C.3、表C.9、表C.12和表C.15）。6.4小反刍兽疫6.4.1检测项目6.4.1.1病原学检测羊活体采集眼鼻拭子，屠宰场或死亡动物采集淋巴结、脾脏、胸腺、肠粘膜、肺脏等组织样品，进行小反刍兽疫病毒核酸检测。6.4.1.2血清学检测要与病原学样品相对应，羊活体采集全血分离出血清样品，进行小反刍兽疫病毒抗体检测。6.4.2检测方法按照GB/T27982的规定执行，采用荧光RT-PCR方法检测小反刍兽疫病毒核酸，采用酶联免疫吸附实验方法（ELISA）检测小反刍兽疫病毒抗体。6.4.3检测结果统计填写实验室检测结果统计表（见附录C中表C.12和表C.15）。6.5布鲁氏菌病6.5.1检测项目牛羊活体采集全血分离出血清样品，进行布鲁氏菌抗体检测。6.5.2检测方法检测布鲁氏菌抗体。6.5.3检测结果统计填写实验室检测结果统计表（见附录C中表C.9和表C.12）。6.6猪瘟6.6.1检测项目6.6.1.1病原学检测猪活体采集扁桃体样品，死亡猪只可采集扁桃体、淋巴结、胰脏、脾脏、回肠、肝脏和肾脏等组织样品，进行猪瘟病毒核酸检测。6.6.1.2血清学检测要与病原学样品相对应，猪活体采集全血分离出血清样品，进行猪瘟病毒抗体检测。6.6.2检测方法DB34/T4488—20235按照GB/T16551的规定执行，采用荧光RT-PCR方法检测猪瘟病毒核酸，采用酶联免疫吸附实验方法（ELISA）检测猪瘟病毒抗体。6.6.3检测结果统计填写实验室检测结果统计表（见附录C中表C.3和表C.15）。6.7猪繁殖与呼吸综合征6.7.1检测项目6.7.1.1病原学检测猪活体采集扁桃体样品，死亡猪只可采集肺脏、扁桃体、淋巴结、脾脏等组织样品，进行猪繁殖与呼吸综合征病毒核酸检测。6.7.1.2血清学检测要与病原学样品相对应，猪活体采集全血分离出血清样品，进行猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体检测。6.7.2检测方法按照GB/T18090的规定执行，采用荧光RT-PCR方法检测猪繁殖与呼吸综合征病毒核酸，采用酶联免疫吸附试验方法（ELISA）检测猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体。6.7.3检测结果统计填写实验室检测结果统计表（见附录C中表C.3和表C.15）。6.8猪伪狂犬病6.8.1检测项目猪活体采集全血分离出血清样品，进行猪伪狂犬病病毒抗体检测。6.8.2检测方法按照GB/T18641的规定执行，采用酶联免疫吸附实验方法（ELISA）检测猪伪狂犬病病毒gB抗体和gE抗体。6.8.3检测结果统计填写实验室检测结果统计表（见附录C中表C.3）。6.9新城疫6.9.1检测项目6.9.1.1病原学检测活禽采集咽喉和泄殖腔双拭子，野禽可采集新鲜粪便，死亡禽可采集脑、肺脏、脾脏、肾脏、肠（包括内容物）、气管、肝脏、心脏等组织样品，进行新城疫病毒核酸检测。6.9.1.2血清学检测DB34/T4488—20236要与病原学样品相对应，活禽采集全血分离出血清样品，进行新城疫病毒抗体检测。6.9.2检测方法按照GB/T16550的规定执行，采用荧光RT-PCR方法检测新城疫病毒核酸，血凝抑制实验方法（HI）检测血清学样品中新城疫病毒抗体。6.9.3检测结果统计填写实验室检测结果统计表（见附录C中表C.6和表C.15）。6.10禽白血病6.10.1检测项目6.10.1.1病原学检测活禽采集新鲜禽蛋的蛋清，进行禽白血病病毒p27抗原检测。6.10.1.2血清学检测要与病原学样品相对应，活禽采集全血分离出血清样品，进行禽白血病病毒抗体检测。6.10.2检测方法按照GB/T26436的规定执行，采用酶联免疫吸附实验方法（ELISA）检测血清中禽白血病病毒J亚群和A-B亚群抗体，按照NY/T680的规定执行，采用酶联免疫吸附实验方法（ELISA）检测蛋清中禽白血病病毒p27抗原。6.10.3检测结果统计填写实验室检测结果统计表（见附录C中表C.6）。7档案管理整理所有相关材料并归档，保存期不少于6年，专人管理。DB34/T4488—20237养殖场的规模与定点监测点的确定A.1参照表A.1确定养殖场的大、中、小规模。表A.1动物饲养规模参考划分表猪头羽羊只牛头A.2参照表A.2确定定点监测点数量。表A.2定点监测场点数量表预期流行率(%)5%6%7%8%9%10%5DB34/T4488—20238监测点采样数量表B.1场群内个体血清学监测抽样数量表5%6%7%8%9%10%DB34/T4488—20239表B.2场群内个体病原学监测抽样数量表1%2%3%4%5%注：预期病原学阳性率595％置信水平、100％试验敏感性条件下，不同可接受误差9信息表基本信息表、采样信息表、实验室检测结果统计表参见表C.1～表C.15。表C.1猪场基本信息表养殖场名称：填表时间：年月日市村9病死动物处理方式售卖、深埋、焚烧、堆肥、丢弃、其饮水来源自来水、井水、河水、其他）是否空舍消毒不消毒、分娩舍消毒、保育舍消毒、分娩舍和保母猪流产率(%)哺乳仔猪存活率(%)育成猪存活率(%)9表C.2猪场样品信息表养殖场名称：填表时间：年月日1234567899表C.3实验室检测结果统计表（猪场）养殖场名称：填表时间：年月日数数数数数数数数数数数数数数体体9表C.4禽场基本信息表养殖场名称：填表时间：年月日市村病死动物处理方式售卖、丢弃、喂狗、无害化处理、饮水来源自来水、井水、河水、其他）高峰产蛋率(%)死淘率(%)9表C.5禽场样品信息表养殖场名称：填表时间：年月日 1234567899表C.6实验室检测结果统计表（禽场）养殖场名称：填表时间：年月日9表C.7牛场基本信息表养殖场名称：填表时间：年月日市村疫苗来源府采购）方圆3公里内是否有其他家畜养殖场、交易市场或屠）？饮水来源自来水、井水、河水、其他）流产率(%)死淘率(%)9表C.8牛场样品信息表养殖场名称：填表时间：年月日1234567899表C.9实验室检测结果统计表（牛场）养殖场名称：填表时间：年月日9表C.10羊场基本信息表养殖场名称：填表时间：年月日市村养殖方式放牧、舍饲）胎衣的处理方式丢弃、喂狗、无害化处理））？饮水来源自