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15DeterminationofImazethapyrresidueinalfalfa-Highperformanceliq2022-06-24发布DB15/T2602—2022 1 1 1 1 1 2 2 2 3 4 5IDB15/T2602—2022本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定本文件由内蒙古自治区畜牧业标准化技术委员会(SAM/TC1DB15/T2602—2022苜蓿中咪草烟残留量的测定高效液相色谱法GB/T6682分析实验室用水规格和试验):):):):):):125.10甲醇一碳酸钠溶液(1+1,v/v):量取100mL甲醇,加入100mL碳酸钠溶液(5.9),混匀。5.11磷酸溶液(1+9,v/v):量取10mL磷酸,用水稀释定容至100mL。5.15标准品:咪草烟(C15H19N303):纯度不小于95%,或经国家认证并授予标准物质证书的标准物的标准储备液,保存于-18℃冰箱内,可使用6个月。5.17标准使用液:准确吸取0.10mL咪草烟的标准储备液(5.16)至10mL容量瓶内,用甲醇稀释定容至刻度,配制成10.0μg/mL的标准溶液,于-18℃冰箱内避光保存,可使用1个月。5.18标准系列工作液:分别吸取浓度为10.0μg/mL咪草烟标准液0.25mL、0.50mL、1.00mL、5.20微孔过滤膜(尼龙):13mm×0.22μm。6.1高效液相色谱仪:配有紫外检测器(或二极管阵列检测器)。6.2电子天平:感量0.01mg和0.01g。6.3离心机:转速大于等于4000r/min。6.9样品筛:筛孔尺寸1.0mm。加入30mL的甲醇一碳酸钠溶液(5.10),混匀,超声提取30min,用磷酸溶液(5.11)调至pH=2.5,于4000r/min离心10min,收集上清液于分液漏斗中,用50mL二氯甲烷(5.4)萃取两次(25mL+25mL),3强阳离子交换固相萃取柱SCX(5.19)净化,用1mL水、1mL甲醇(5.2)活化固相萃取柱,试样全部过柱,用1mL水、1mL甲醇(5.2)淋洗固相萃取柱,再用6mL氨水-甲醇(5.12)洗脱,收集流出液于10mL比色管中,整个固相萃取过程流速不超过1mL/min。洗mL水-甲醇(5.13)溶解、涡旋混匀,过0.22μm微孔过滤膜(5.20),待测。b)流动相:A:乙酸(5.14)+B:乙腈(5.1)=60+40(v/v);按照8.3.1测定条件,将标准工作液(5.18)注入以标准工作液(5.18)的浓度为横坐标,以峰面积为纵坐标,绘制标准曲线。按照8.3.1测定条件,将待测样品溶液注入高效液相色谱仪中进行测试。待测样品溶液中目标物质试样中咪草烟含量X按式(1)计算:DB15/T2602—2022V——试样溶液定容体积,mL;m——试样的称样量,g。注:测定结果用算术平均值表示,保留两位有效数字。4DB15/T2605(资料性)高效液相色
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