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文档简介
第1节细胞中化合物第2章组成细胞的分子.根据你的生活经验,说说哪些植物器官的细胞中富含糖类、脂质或蛋白质?怎样从植物器官中提取这些化合物?答案:植物的叶肉细胞、果实细胞和种子细胞中通常含有较多的糖类、脂质、蛋白质。如:禾谷类的果实、种子中含淀粉较多;甘蔗的茎和甜菜的根含蔗糖较多;花生、芝麻的种子中含脂质较多;大豆种子中含蛋白质较多。提取方法:设法将细胞破碎,再将这些物质提取出来。课题导入目标引领1.检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质2.组成细胞的物质的特殊性独立自学?还原糖+斐林试剂脂肪+蛋白质+双缩脲试剂___50℃~65℃温水浴砖红色沉淀苏丹Ⅲ染液橘黄色紫色1.还原糖:具有还原性的糖常见还原糖:葡萄糖、果糖、半乳糖、乳糖、麦芽糖常见非还原糖:蔗糖、淀粉2.原理:
还原糖+斐林试剂砖红色沉淀水浴加热斐林试剂甲液:乙液:0.1g/mLNaOH0.05g/mLCuSO4等量混合,现配现用。思考:鉴定还原糖时使用的斐林试剂为何要现配现用?因为斐林试剂很不稳定,配置好的Cu(OH)2悬浊液放置一段时间后,会形成沉淀,影响实验效果。其次是Cu(OH)2放置久了会发生分解反应,形成部分黑色CuO,也会影响实验结果。所以应将甲液和乙液分别保存,使用时现配现用。常见的还原糖和非还原糖引导探究1.还原糖的检测和观察选材:含糖量较高、_____________的植物组织结论:组织样液中含有_____________白色或近于白色可溶性还原糖砖红色沉淀不能选绿色叶片、西瓜、血液等材料,防止颜色的干扰。选苹果或梨匀浆:富含还原糖且没有其他颜色干扰。2.应用尿糖的检测(定性)尿糖检测对照组实验组正常人尿液+斐林试剂待测尿液+斐林试剂水浴加热观察颜色变化水浴加热观察颜色变化1.原理蛋白质+双缩脲试剂紫色0.1g/mLNaOH双缩脲试剂A液B液0.01g/mLCuSO4二、蛋白质的检测和观察先加1mLA液,再加4滴B液。蛋白质+Cu2+碱性环境紫色络合物思考:鉴定蛋白质时,加入试剂B后,如果没有产生紫色反应,可能的原因是什么?可能加入的双缩脲试剂B过量,CuSO4在碱性溶液中生成大量的蓝色Cu(OH)2絮状沉淀,会遮蔽实验中所产生的紫色,影响观察结果。蛋白质的检测和观察选材与制备:蛋清稀释液或豆浆滤液
结论:组织样液中存在________
4滴紫色
蛋白质蛋清(原则:富含蛋白质且色浅)注意:组织样液一般要稀释,否则与双缩脲试剂反应后会粘固在试管壁上,不易刷洗。【拓展】双缩脲试剂最初是用来检测双缩脲的。双缩脲试剂可以检测含有两个及两个以上肽键的化合物。由于蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键,因此,蛋白质可与双缩脲试剂发生颜色反应。比较项目斐林试剂双缩脲试剂作用成分使用方法原理反应条件检测还原糖检测蛋白质甲液:0.1g/mLNaOH乙液:0.05g/mLCuSO4A液:0.1g/mLNaOHB液:0.01g/mLCuSO4甲液与乙液等体积混合使用,现配现用。先加较多A液,再加少量B液。Cu(OH)2被还原糖还原成Cu2O砖红色沉淀。蛋白质在碱性条件下与Cu2+络合,生成紫色络合物。水浴加热(50~65℃)碱性环境、常温比较斐林试剂和双缩脲试剂1.原理脂肪+苏丹Ⅲ染液→橘黄色脂肪被苏丹Ⅲ染成橘黄色2.选材:富含脂肪且色浅花生种子:富含脂肪且没有其他颜色干扰。三、脂肪的检测和观察脂肪的检测和观察苏丹Ⅲ
低倍镜
橘黄色
脂肪的检测结果“三滴”:第一滴:2-3滴苏丹Ⅲ第二滴:1-2滴50%的酒精(洗浮色)第三滴:1滴清水(制片)检测脂肪的实验是唯一用显微镜观察的实验?为什么用酒精洗浮色?用水可以吗?不行,因为苏丹Ⅲ溶于酒精,不溶于水注意事项:(1)、检测还原糖时应水浴50~65度加热
加热试管中的溶液时,用试管夹夹住试管上部,放入盛开水的大烧杯中加热,注意试管底部不要接触烧杯底部,同时试管口不要朝向实验者,以免试管内溶液沸腾时冲出试管,造成烫伤。
检测还原糖实验是唯一要水浴加热的实验注意事项:(2)、检测脂肪时,切片要薄,否则显微镜下可能会看到一半清楚一半模糊的物像。用苏丹Ⅲ染色时间不宜过短(染色不充分,脂肪颗粒染色过浅,不宜观察);不宜过长(样品中的脂肪可能溶解,洗浮色时被洗掉,观察不到被染色的脂肪)
(3)唯一需要显微镜——
鉴定,实验中要用
,其作用是
。脂肪50%的酒精溶液洗去浮色(4)、斐林试剂是甲乙两液等量混匀后立即使用,即现配现用(放置时间过长会有沉淀析出,反应减慢或者不反应)。颜色变化:
浅蓝色→棕色
→砖红色沉淀(5)、双缩脲试剂是先加如A液1ml,摇匀,再加入B液4滴,摇匀.颜色变化:
无色
→
浅蓝色
→
紫色1、检测蛋白质时,加入B液后没有观察到紫色反应有可能是因为B液过量,生成大量的蓝色Cu(OH)2,遮盖了实验中产生的紫色2、斐林试剂的乙液可以通过用蒸馏水稀释作为双缩脲试剂中的B液使用(或者减少乙液用量)来检测蛋白质目标升华课堂练习1、用斐林试剂鉴定可溶性还原糖时,
溶液颜色的变化过程是()A、无色→砖红色(沉淀)B、浅蓝色→砖红色(沉淀)C、浅蓝色→蓝色→砖红色(沉淀)
D、浅蓝色→棕色→砖红色(沉淀)
D当堂诊学2、在用双缩尿试剂鉴定蛋白质实验时,正确的操作是()A、2ml蛋白质稀释液先加0.1g/ml的NaOH,再加3—4滴0.01g/ml
CuSO4溶液。B、2ml蛋白质稀释液先加3—4滴0.01g/ml
CuSO4溶液,再加0.1g/ml的NaOH
C、2ml蛋白质稀释液,同时加3—4滴0.01g/ml
CuSO4和0.1g/ml的NaOH混合液。D、在NaOH和CuSO4混合液中加入蛋白质稀释液。A3、用苏丹Ⅲ染液对脂肪组织进行染色时,可用来冲洗浮色的药品是()A、HCI;B、H2O;C、50%的酒精;D、无水酒精。4、下列哪个实验用到显微镜()A、可溶性还原糖的鉴定;
B、蛋白质的鉴定;C、脂肪的鉴定;D、淀粉的鉴定。CC5、下列哪种试剂在使用过程中,必须经过加热()A、斐林试剂鉴定可溶性还原糖的过程中;
B、苏丹Ⅲ
在鉴定动物组织中的脂肪时;
C、双缩尿试剂鉴定蛋白质时;
D、碘化钾溶液鉴定淀粉时。6、下列糖中能与斐林试剂反应产生砖红色沉淀的是()A、淀粉;B、果糖;C、蔗糖;D、纤维素。AB7下列可用于脂肪鉴定的实验材料是
()
(A)苹果(B)梨(C)卵白(D)花生种子
8花生子叶细胞内的圆形透亮的小颗粒与苏丹Ⅲ染液发生了颜色反应.形成
()(A)蓝色(B)橘黄色(C)红色(D)紫色BD9下列关于实验操作步骤的叙述中,正确的是()(A)用于鉴定可溶性还原糖的斐林试剂甲液和乙液,可直接用于蛋白质的鉴定(B)脂肪的鉴定实验中需要用显微镜才能看到被染成橘黄色的脂肪粒(C)鉴定可溶性还原糖时,要加入斐林试剂甲液摇匀后,再加入乙液(D)用于鉴定蛋白质的双缩脲试剂A液与B液要混合均匀后.再加入含样品的试管中,且必须现配现用B10将面团包在纱布中在清水中搓洗,鉴定黏留在纱布上的黏稠物质和洗出的白浆用的试剂分别是()(A)碘液.苏丹Ⅲ染液
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