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文档简介
2025年诊断免疫学试题及答案一、单项选择题(每题2分,共30分)1.关于化学发光免疫分析(CLIA)与酶联免疫吸附试验(ELISA)的比较,错误的是:A.CLIA的灵敏度通常高于ELISAB.ELISA需终止反应,CLIA无需终止C.CLIA的线性范围窄于ELISAD.CLIA可实现全自动化检测2.抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)检测中,间接免疫荧光法(IIF)显示胞浆型(c-ANCA),最可能对应的靶抗原是:A.髓过氧化物酶(MPO)B.蛋白酶3(PR3)C.弹性蛋白酶D.组织蛋白酶G3.流式细胞术检测T细胞亚群时,CD4⁺/CD8⁺比值降低常见于:A.系统性红斑狼疮(SLE)活动期B.艾滋病(AIDS)进展期C.类风湿关节炎(RA)稳定期D.多发性骨髓瘤4.用于新生儿溶血病诊断的主要免疫学检测是:A.直接抗人球蛋白试验(Coombs试验)B.间接抗人球蛋白试验C.血型抗体效价测定D.红细胞渗透脆性试验5.关于肿瘤标志物CA125的临床意义,正确的是:A.特异性诊断卵巢癌B.升高仅见于妇科肿瘤C.可用于监测卵巢癌疗效D.妊娠期不会出现升高6.自身免疫性甲状腺疾病(AITD)患者血清中最常检测到的抗体是:A.抗甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)B.抗胰岛素抗体(IAA)C.抗平滑肌抗体(SMA)D.抗线粒体抗体(AMA)7.免疫比浊法测定血清IgG时,影响结果准确性的关键因素是:A.抗原抗体的比例B.反应时间C.温度D.比色杯清洁度8.诊断原发性B细胞免疫缺陷病的金标准是:A.血清免疫球蛋白定量检测B.流式细胞术检测B细胞表面CD19⁺C.疫苗接种后特异性抗体应答试验D.基因检测9.用于检测超敏反应I型的主要试验是:A.血清总IgE测定B.嗜碱性粒细胞脱颗粒试验C.皮肤点刺试验D.淋巴细胞转化试验10.关于免疫荧光技术中荧光素标记抗体的要求,错误的是:A.荧光素与抗体的结合比例(F/P)需优化B.标记后抗体应保持免疫活性C.荧光素发射波长需与激发光匹配D.标记抗体可长期保存于4℃,无需分装11.检测循环免疫复合物(CIC)的聚乙二醇(PEG)沉淀法,其原理是:A.PEG破坏CIC的电荷平衡,使其沉淀B.PEG与CIC中的补体成分结合C.PEG增强CIC的免疫原性D.PEG抑制非特异性蛋白沉淀12.抗磷脂抗体综合征(APS)的标志性抗体是:A.抗心磷脂抗体(aCL)B.抗双链DNA抗体(dsDNA)C.抗核糖体P蛋白抗体(rRNP)D.抗SSA抗体13.流式细胞术检测白血病免疫表型时,常用的髓系标志是:A.CD3、CD4B.CD19、CD20C.CD13、CD33D.CD56、CD1614.细胞因子检测中,液相芯片技术(Luminex)的优势是:A.可同时检测单个样本中的多种细胞因子B.灵敏度高于ELISAC.无需标准品校准D.操作步骤简单,无需洗涤15.诊断阵发性睡眠性血红蛋白尿(PNH)的关键免疫学指标是:A.红细胞CD55、CD59表达缺失B.血清补体C3水平降低C.抗红细胞抗体阳性D.血红蛋白尿检测二、多项选择题(每题3分,共15分,少选、错选均不得分)1.属于免疫标记技术的有:A.免疫荧光技术B.放射免疫分析(RIA)C.免疫比浊法D.化学发光免疫分析(CLIA)2.自身抗体检测的质量控制要点包括:A.选择经认证的检测方法B.设立阳性、阴性对照C.注意不同方法的结果差异(如IIF与ELISA)D.仅依赖单次检测结果即可诊断3.流式细胞术在移植免疫中的应用包括:A.检测供受者HLA配型B.监测移植后T细胞亚群动态C.检测群体反应性抗体(PRA)D.评估移植物抗宿主病(GVHD)风险4.关于肿瘤标志物联合检测的原则,正确的是:A.选择器官特异性高的标志物组合B.联合检测可提高敏感性和特异性C.所有肿瘤均需5种以上标志物联合D.需结合临床症状和影像学结果5.免疫缺陷病实验室诊断的主要内容包括:A.体液免疫功能检测(如Ig定量)B.细胞免疫功能检测(如T细胞亚群)C.补体系统检测(如C3、C4)D.基因检测(如BTK、IL2RG突变)三、名词解释(每题4分,共20分)1.免疫比浊法2.抗核抗体谱(ANAs)3.流式细胞术免疫表型分析4.细胞因子检测的液相芯片技术5.肿瘤标志物的联合检测策略四、简答题(每题8分,共32分)1.简述ELISA双抗体夹心法的原理及关键步骤。2.自身免疫病实验室诊断的分层策略包括哪些内容?3.流式细胞术在免疫缺陷病诊断中的具体应用有哪些?4.化学发光免疫分析(CLIA)与酶联免疫吸附试验(ELISA)的主要区别有哪些?五、案例分析题(共33分)案例1(10分):患者女性,32岁,反复发热、面部红斑、关节痛3月,查血常规示白细胞3.2×10⁹/L,血小板85×10⁹/L;尿常规:蛋白(++),红细胞(+);免疫学检查:抗核抗体(ANA)1:1000(颗粒型),抗双链DNA抗体(dsDNA)阳性(滴度1:320),补体C30.4g/L(正常0.8-1.5g/L)。问题:(1)最可能的诊断是什么?依据是什么?(5分)(2)还需补充哪些免疫学检测以支持诊断?(5分)案例2(11分):患儿男性,4岁,反复肺部感染(每年6次以上),曾患化脓性中耳炎。体检:扁桃体发育不良。实验室检查:血清IgG2.1g/L(正常5.0-12.0g/L),IgA0.1g/L(正常0.5-2.0g/L),IgM0.2g/L(正常0.4-2.0g/L);流式细胞术检测B细胞(CD19⁺)占淋巴细胞0.3%(正常5%-15%);T细胞亚群(CD3⁺、CD4⁺、CD8⁺)正常。问题:(1)最可能的免疫缺陷病类型是什么?诊断依据?(6分)(2)需进一步做何种检查以明确病因?(5分)案例3(12分):患者男性,58岁,体检发现CEA15ng/mL(正常<5ng/mL),CA19-987U/mL(正常<37U/mL)。既往有慢性萎缩性胃炎病史,无明显腹痛、消瘦。腹部CT未见占位性病变。问题:(1)如何解释肿瘤标志物升高?(6分)(2)后续随访建议有哪些?(6分)答案一、单项选择题1.C2.B3.B4.A5.C6.A7.A8.C9.C10.D11.A12.A13.C14.A15.A二、多项选择题1.ABD2.ABC3.BCD4.ABD5.ABCD三、名词解释1.免疫比浊法:基于抗原抗体特异性结合形成免疫复合物,通过检测反应体系中浊度变化(光散射或透射光减弱)来定量抗原或抗体的技术。分为透射比浊法和散射比浊法,常用于血清蛋白(如Ig、补体)的定量检测。2.抗核抗体谱(ANAs):一组针对细胞核内不同成分(如DNA、组蛋白、非组蛋白、核仁抗原等)的自身抗体的总称。包括抗双链DNA抗体(dsDNA)、抗可提取核抗原抗体(ENA,如抗Sm、抗RNP等),是自身免疫病(如SLE、干燥综合征)的重要诊断指标。3.流式细胞术免疫表型分析:利用荧光标记的单克隆抗体识别细胞表面或胞内抗原,通过流式细胞仪检测细胞的荧光强度和散射光特性,对细胞进行定性、定量及功能分析的技术。常用于白血病分型、免疫细胞亚群(如T/B/NK细胞)检测。4.细胞因子检测的液相芯片技术:基于微球的多指标并行检测技术,将不同荧光编码的微球偶联特异性抗体,与样本中的细胞因子结合后,加入生物素标记的检测抗体和荧光素标记的链霉亲和素,通过流式细胞仪同时检测微球的编码荧光和报告荧光,实现单个样本中多种细胞因子的同步定量。5.肿瘤标志物的联合检测策略:针对单一肿瘤标志物敏感性或特异性不足的问题,选择2-3种器官特异性高、互补性强的标志物联合检测(如结直肠癌联合CEA、CA19-9、CA72-4),以提高早期诊断率、疗效监测和复发预警的准确性,同时需结合临床及影像学结果综合判断。四、简答题1.ELISA双抗体夹心法原理及关键步骤:原理:用纯化的特异性抗体(捕获抗体)包被固相载体,加入待测样本(含抗原),抗原与固相抗体结合;洗涤后加入酶标记的特异性抗体(检测抗体),形成“固相抗体-抗原-酶标抗体”复合物;洗涤后加入底物,酶催化底物显色,颜色深浅与样本中抗原含量正相关。关键步骤:①包被抗体(浓度、pH、时间);②封闭(防止非特异性结合);③样本孵育(温度、时间);④酶标抗体孵育(浓度、特异性);⑤洗涤(去除未结合成分);⑥底物反应(避光、时间控制);⑦终止反应(如加硫酸)后比色测定。2.自身免疫病实验室诊断的分层策略:①初筛试验:检测抗核抗体(ANA)、类风湿因子(RF)等敏感性高但特异性低的指标,用于广范围筛查;②确认试验:针对初筛阳性者,检测特异性抗体(如SLE的抗dsDNA、抗Sm;RA的抗CCP抗体),提高诊断特异性;③补充试验:检测炎症指标(如CRP、ESR)、补体水平(如C3、C4降低提示免疫复合物激活)、组织病理学(如肾活检)等,评估疾病活动度和器官损伤;④动态监测:定期复查抗体滴度及相关指标,观察治疗反应(如SLE活动期dsDNA滴度升高,缓解期下降)。3.流式细胞术在免疫缺陷病诊断中的应用:①B细胞缺陷:检测CD19⁺B细胞数量(如X连锁无丙种球蛋白血症患者B细胞缺失);②T细胞缺陷:分析CD3⁺总T细胞、CD4⁺/CD8⁺亚群比例(如SCID患者CD3⁺T细胞显著减少);③联合免疫缺陷:同时检测T/B/NK细胞(如NK细胞缺陷患者CD56⁺细胞减少);④功能检测:通过细胞内细胞因子染色(如检测CD4⁺T细胞分泌IFN-γ能力)评估T细胞功能;⑤基因相关标记:如检测IL-2受体α链(CD25)表达缺失(提示X连锁高IgM综合征)。4.CLIA与ELISA的主要区别:①信号产生机制:CLIA利用化学发光反应(酶或直接标记发光物质),ELISA利用酶催化底物显色;②灵敏度:CLIA灵敏度更高(可达pg/mL级),ELISA通常为ng/mL级;③线性范围:CLIA线性范围更宽(可达4-6个数量级),ELISA受限于显色反应线性范围;④检测速度:CLIA多为全自动,耗时短(30-60分钟);ELISA需手动操作步骤多(2-4小时);⑤稳定性:CLIA无显色反应的终止步骤,结果稳定性更好;ELISA易受显色时间、温度影响;⑥成本:CLIA仪器和试剂成本较高,ELISA相对低廉。五、案例分析题案例1(1)最可能的诊断:系统性红斑狼疮(SLE)。依据:①临床表现:反复发热、面部红斑、关节痛(符合SLE典型症状);②实验室检查:白细胞、血小板减少(血液系统受累);蛋白尿、血尿(肾脏受累);ANA高滴度阳性(1:1000)、dsDNA阳性(SLE特异性抗体);补体C3降低(提示免疫复合物激活补体)。符合2023年ACR/EULARSLE分类标准(总分≥10分确诊,本例中:临床症状3分+血液系统2分+肾脏2分+免疫学(dsDNA)3分+补体降低2分,总分12分)。(2)需补充的免疫学检测:①抗Sm抗体(SLE高度特异性抗体);②抗SSA/SSB抗体(排除重叠干燥综合征);③抗磷脂抗体(评估APS风险);④24小时尿蛋白定量(评估肾脏损伤程度);⑤免疫球蛋白(IgG、IgA、IgM)及补体C4(全面评估补体系统)。案例2(1)最可能的免疫缺陷病类型:X连锁无丙种球蛋白血症(XLA,Bruton病),属于原发性B细胞免疫缺陷病。诊断依据:①临床表现:反复化脓性感染(肺部、中耳炎),扁桃体发育不良(B细胞发育障碍的典型体征);②实验室检查:血清IgG、IgA、IgM均显著降低(体液免疫严重缺陷);③流式细胞术:B细胞(CD19⁺)几乎缺失(占0.3%),T细胞亚群正常(提示仅B细胞受累);④年龄及性别:男性患儿(X连锁隐性遗传,男性发病)。(2)进一步检查:①基因检测:检测BTK(Bruton酪氨酸激酶)基因是否存在突变(XLA的致病基因);②母亲及女性亲属的carrier检测(BTK基因携带者可表现为B细胞数量减少);③疫苗接种后特异性抗体应答试验(如接种肺炎球菌多糖疫苗后检测抗体滴度,XLA患者无应答);④影像学检查:评估有无支气管扩张(慢性感染并发症)。案例3(1)肿瘤标志物升高的可能解释:①良性疾病:慢性萎缩性胃炎可能导致CEA、CA19-9轻度升高(非特异性);②实验室误差:需复查确认是否为持续性升高(单次升高可能为检测误
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