1.-生物无机化学-(金属化合物的抗癌特性)

生物无机化学金属化合物的抗癌特性辛伟贤教授化学系及生物医药与先进材料研究中心

Prof.RaymondWai-YinSUN

DepartmentofChemistry&ResearchInstituteforBiomedicalandAdvancedMaterialsE-mail:rwysun@Mar2014新年快乐23课程大纲第1章

金属化合物的抗癌特性第2章

绪论生物无机化学的发展历史生物体中的无机元素及其生物功能第3章

重要的生物配体第4章

应用生物无机化学的若干研究领域

离子探针及其应用

一、金属配离子探针

二、稀土荧光探针

三、荧光法研究药物与生物大分子的相互作用

无机药物化学

一、无机药物化学的研究范围

二、铂类配合物抗癌药

三、非铂类金属抗癌药物

四、硒药物

五、其他重要的金属药物5生物化学家依靠生物化学理论和新技术，结合物理和无机化学的理论和方法，研究生物体中的无机元素和化合物，更多地侧重从生物学的角度研究这些物质对生物体的生理和病理作用。无机化学家则用它们熟悉的化学理论和方法从分子水平研究生物体系。由于生物大分子结构极为复杂，要彻底阐明它的作用机制十分困难。目前，生物无机化学的研究方法之一是创造在不同程度再现生命现象的模拟体系，以加深对生命过程的认识。无机生物化学与生物无机化学的区别6金属化合物的抗癌特性化学生物学无机化学无机生物化学7生物化学vs化学生物学生物化学是研究生物体中的化学进程的一门学科。尿素的合成过程。化学生物学通过用化学的理论和方法研究生命现象、生命过程的化学基础，通过探索干预和调整疾病发生发展的途径和机理，为新药发现中提供必不可少的理论依据。“化学生物学是采用化学的手段，如运用小分子或人工设计合成的分子作为配体来直接改变生物分子的功能”。斯图亚特·L·施莱伯（英语：StuartL.Schreiber，1952年2月6日－）就职于美国哈佛大学和麻省理工及哈佛名下的博大研究所(BroadInstitute)。他引领化学生物学长达20余年。克雷伯氏循環811学士（香港城市大学，应用化学，1996–99)

AcidityinHongKongRainwater香港雨水的酸度研究助理（香港城市大学，1999)

LuminescenceErbium-dopedsol-gelmaterials发光掺铒溶胶-凝胶材料研究助理（香港大学，2000)

7-azaindoleasmaterialforlight-emittingdiode

7-氮杂吲哚作为发光二极管材料博士（香港大学，2000–04)

Theanti-cancerpropertiesofgold(III)porphyrincomplexesandtheirderivatives金（Ⅲ）卟啉配合物及其衍生物的抗癌特性博士后（香港大学，2006–2009）

Anti-cancer/anti-HIV/anti-HBVpropertiesofmetalcomplexesandmetal-basednanoparticles金属配合物和金属纳米粒子为基础的抗癌/抗艾滋病病毒/抗乙肝病毒特性环境科学材料科学光化学医药化学12金属化合物的抗癌特性化学生物学无机化学生物学什么是癌症13癌症

正常细胞变异引发癌症14癌症是一组可影响身体任何部位的多种疾病的通称。使用的其它术语为恶性肿瘤和赘生物。癌症的一个定义特征是快速产生异常细胞，这些细胞超越其通常边界生长并可侵袭身体的毗邻部位和扩散到其它器官。这一过程被称之为转移。转移是癌症致死的主要原因。/mediacentre/factsheets/fs297/zh/重要事实癌症是全球一个主要死亡原因，在2008年造成760万人死亡（约占所有死亡人数的13%）。每年，大多数癌症死亡由肺癌、胃癌、肝癌、结肠癌和乳腺癌造成。癌症的最常见类型在男女之间存有差别。大约有30%的癌症死亡源自五种主要行为和饮食危险因素：高体重指数、水果和蔬菜摄入量低、缺乏运动、使用烟草及饮酒。烟草使用是最重大致癌风险因素，它导致全球22%的癌症死亡，以及全球71%的肺癌死亡。如乙肝病毒和丙肝病毒以及人乳头瘤病毒等致癌感染导致的死亡病例在低收入和中等收入国家多达20%。2008年，在癌症死亡总数中，大约70%的癌症死亡发生在低收入和中等收入国家。全世界癌症死亡人数预计将继续上升，到2030年将超过1310万。15临床常用的抗癌药物顺铂多柔比星卡铂奥沙利铂紫杉醇卡培他滨吉非替尼伊立替康吉西他滨干扰素长春瑞滨铂(II)药物有机化合物人类（重组）蛋白16现在治疗癌症存在的问题高死亡率抗药性癌细胞转移严重的副作用研发新药17尽管医学在不断进步，但是对于具有抗药性和晚期癌症的治疗方案还是很少NewDrugDiscovery新藥研製和開發需要大量时间…大多在美国和欧洲在未来十多年，中国和香港非常需要研发新药有些地区性疾病，例如鼻咽癌和肝癌，它们的治疗方案很少18?新的候选药物？靶蛋白?拓扑异构酶内质网微管蛋白线粒体等等…其他的抗癌机制?NewDrugDiscovery新藥研製和開發铂(II)药物有机化合物人类（重组）蛋白1920顺铂

Rosenberg,B.;etal,Nature,1969,222,385.目前，临床已经应用了许多顺铂类的化合物，而且也正在研究一些新的铂类抗癌药物Metal-BasedTherapeuticAgents(Platinum,Pt)铂(II)

化合物抗癌药物与DNA结合如何发现顺铂的抗癌特性？一个偶然+细心的求证21如何发现顺铂的抗癌特性？电场对大肠杆菌生长的影响电场能够抑制大肠杆菌的生长?2223用于抗癌的无机药物顺铂cis-diamminedichloroplatinum(II)cisplatin铂电极电解的物质能够抑制大肠杆菌的生长B.Rosenbergetal.,Nature

1965,205,698大肠杆菌24(1965,205,698)(Nature1969,222,385)铂抗癌药物的发现:从实验室到临床应用顺铂能对肿瘤起作用吗?

顺铂抑制肿瘤生长Negativecontrol给予顺铂治疗第8天(singleinjection8mg/kg)21天后死亡!肿瘤质量:3g完全抑制3年后才死亡8 12 16 208 12 16 20 362526Rosenberg1965-1969PhaseITrialsNationalCancerlnstituteJohnsonMatthey/EngelhardResearchCorporation1970-1975BristolMyers

1978顺铂药物的发展历史27细胞质

[Cl-]=4mM血浆[Cl-]=100mM顺铂的作用机制顺铂的水解形成DNA加成物胞嘧啶鸟嘌呤DNA结构的构象变化DNA自我修复响应细胞死亡-H2O28PtIV:

Y=Cl-,OH-,OAc-,...X=Leavinggroup:Cl-,OAc-,…X2=O2CCO22-,...N=am(m)ine:

NH3,C6H11NH2,…N2=dach,en,...临床前期候选药物CHIP

JM216

tetraplatinCI-973临床通过顺铂(1978)卡铂(1988)奥沙利铂(2002)顺铂结构模体:

AnalogDevelopmentClClJM216(oral)JM216是第一个进入临床试验的口服铂（Ⅳ）药物。与顺铂无交叉耐药，与鬼臼素有协同抗癌作用，毒性为骨髓抑制，Ⅱ期单药临床研究表明，该药对小细胞肺癌、顽固性前列腺癌有效，对其它一些癌种的临床试验正在进行之中。60-120mg/m2肾毒性Worldwide$180M(1998)(Bristol-MyersSquibb)Cisplatin(1978)卡铂(1988)~900mg/m2骨髓移植Worldwide$673M(2004)(Bristol-MyersSquibb)奥沙利铂(2002)Dose:DLT:临床通过的铂抗癌化合物200mg/m2神经毒性$1525M(2004)(Sanofi-Synthelabo)29Pt抗癌药物的发展:AMD4731.顺铂类似物2.多核Pt配合物3.Pt的靶向药物:促进药物的运输-聚合物,micelles,受体调控31DNAbindingmodesofPt(II)complexes

Eastman,A.;etal,Pharmacol.Ther.,1987,34,707.Reedijk,J;etal,Biochemistry,1995,34,12912.铂多核配合物夹住DNA磷酸基FarrellN,P;etal,J.Am.Chem.Soc.,2006,128,16092.药物与DNA链间/同链

结合(e.g.,顺铂)DNA插入Lippard,S.J.,etal.,Proc.Natl.Acad.Sci.USA,1974,71,3839Che,C.-M.,etal.,Chem.Commun.,2005,71,4675Aldrich-Wright,J.R.,etal.,DaltonTrans.,2004,11452011年,我们做了以下工作:Sun,R.W.-Y.;Chow,A.L.-F.;Li,X.-H.;Yan,J.J.;Chui,S.S.-Y.;Che,C.-M.ChemicalScience,2011,2,728.一种有氮杂环卡宾配体(NHC)铂（II）环金属化合物可以发冷光32(1)把细胞放入96孔板中新药物对癌细胞毒性试验(2)把不同剂量

放入96孔板中(3)等待48或72小时33四唑盐(黄色)甲瓒(紫色)λmax=550nm在活细胞内体外细胞毒性试验药物的浓度34MTT法检测癌细胞毒性试验35药物的浓度所有的细胞存活所有的细胞死亡半数抑制率Pt-1a对HeLa（子宫颈癌）,HepG2（肝癌）,SUNE1（鼻咽癌细胞）CCD-19Lu(人类正常肺成纤维细胞)的半数抑制值浓度(μM)体外细胞毒性评价:铂的(II)化合物Pt-1a对Hela细胞（子宫颈癌细胞）有高细胞毒性,半数抑制率是57nM~对肺成纤维母细胞毒性少于200倍>比顺铂抗癌能力强260倍在体内抗癌活性研究:给予小鼠腹腔注射Pt-1a3mg/kg能明显抑制55±11%(0.78±0.19g)NCI-H460（人非小细胞肺癌细胞株）肿瘤的生长

Pt-1a

没有引起小鼠死亡,通过测量小鼠的体重，发现给药的小鼠没有明显的体重下降含氮杂环卡宾(NHC)

配体的环金属铂（II）配合物Sun,R.W.-Y.;Chow,A.L.-F.;Li,X.-H.;Yan,J.J.;Chui,S.S.-Y.;Che,C.-M.ChemicalScience,2011,2,728.RegularUnitedStatesPatentApplicationNo.:US12/913,395filedon27October,2010;PCTPatentApplicationNo.PCT/CN2010/001705filedon27October201036RegularUnitedStatesPatentApplicationNo.:US12/913,395filedon27October,2010;PCTPatentApplicationNo.PCT/CN2010/001705filedon27October2010At298K,发射波长λmaxat546nm发射量子产率(Ф)of0.23发冷光Pt(II)探针用于细胞成像含氮杂环卡宾(NHC)

配体的环金属铂（II）配合物

应用发光显微镜定位Pt-1a药物在癌细胞内位置应用线粒体绿色荧光探针定位

,揭示了Pt-1a

能在细胞质内聚集Pt-1a37DMSO-treatedphaseHoeschtalpha-tubulin形态学:

网状一样的微管Pt-1atreatedLossofnetwork-likemorphology,mainlylocalizedaroundthecytoplasmicrim微管失去完整性EffectofPt-1ainmicrotubuleintegrityCMChe,CWYMan,RWYSun,unpublishedwork38过渡金属?Q:CPtAuCrVCaSeLi99mTcFeMgCuGdIFZnAgAl67GaBN2ONOSBaNaK药物的元素周期表PSbBiMnMoCoSiSrSnTi133Xe201TlAs90Y188Re153Sm40必需元素矿物质补充(e.g.Fe,Cu,Zn,Co,Se)诊断物质核磁共振成像(e.g.Gd,Mn)X光线检查(e.g.Ba,I)治疗药物(e.g.Pt,Au,Li,Bi,Ag,Sb&As)药物无机化学

靶向元素控制药物毒性螯合疗法酶抑制剂放射性药物诊断

(e.g.99mTc)治疗(e.g.186Re)41为什么金属药物这么重要?金属药物

vs有机药物独特的物理/化学性质

(e.g.,氧化还原和电子转移);不同金属离子或者是同一金属离子不同氧化态，它们配位的配位构型不同(e.g.,平面四边行,八面体和直线型)基于金属的超分子聚合物或者是有光活性的金属化合物，它们的（光）物理活性十分特别42金（Au）氧化态:(-Ito+V)在生物系统中的相对稳定性:0,+Iand+IIIAu(0): 金单质/纳米粒子Au(I): d10

电子构型

直线型配合物Au(III): d8

平面正方形43Caesiumauride(Cs+Au-)Goldpentafluoride（AuVF5)三價金也是一種常見的氧化態，例子有三氯化金（AuCl3）、三氧化二金（Au2O3）、氯金酸（HAuCl4，可由金溶於王水得到）等，为d8结构，呈平面正方形构型。一價金是最常見的氧化態，多为与较“軟”的配體（如硫醚、硫醇负离子及叔膦）形成的配合物，通常呈直线形结构。金的符號為Au，來自金的拉丁文名稱（Aurum）。而Aurum來自Aurora一词，是“灿烂的黎明”的意思。在古墨西哥的阿兹台克人使用的语言中，黄金的写法是teocuitlatl，意思是“上帝的大便”。44d10

电子构型d8什么颜色？金(I)化合物金(III)化合物纳米金溶液(diameter~10nm)45金的药物历史~1500BC18901935-1985古人用金属金驱赶疾病和辟邪金(I)被用来治疗结核病发现金(I)化合物可以用来治疗风湿性关节炎1979发现金(I)化合物有抗癌活性Chem.Rev.1999,99,2589Dtsch.Med.Wochenstr.1890,16,756J.Lab.Clin.1935,20,827Cancer1979,1965GlobalEffortsonGoldMedicinesProf.FrankShawIIIIllinoisStateUniversityAnti-cancerGold(I)compoundsProf.PeterSadlerTheUniversityofWarwickGold(I)anti-cancercompoundsProf.LuigiMessoriUniversitàdiFirenzeAnti-cancergold(III)compoundsProf.DoloresFregonaUniversityofPadovaAnti-cancergold(III)compoundsProf.IngoOttTechnischeUniversitatBraunschweigAnti-cancergold(I)compoundsProf.SusanBerners-PriceGriffithUniversityAnti-cancergold(I)compounds46Prof.Chi-MingCheTheUniversityofHongKongAnti-cancergold(I)/(III)compoundsPAuSBau,R.etal.J.Am.Chem.Soc.1998,120,9380金诺芬

金(I)化合物可以作为抗关节炎药物Gold(I)phosphineandN-heterocycliccarbenecompounds

抗癌药物Berners-Price,S.J.,etal.Metallomics,2011,3,863Berners-Price,S.J.,etal.Coord.Chem.Rev.,2007,251,1889.Berners-Price,S.J.,etal.DaltonTrans,2006,3708含金的药物Lorber,etal,Cancer

1979,1965在体外的抗癌活性47硫氧还蛋白还原酶Coord.Chem.Rev.,2009,253,1692一些最新发展的关于金(III)抗癌化合物:蛋白酶体Coord.Chem.Rev.,2009,253,1649金(III)二硫代氨基甲酸酯化合物CancerRes.,2006,66,1047848金(III)化合物在生理条件下:或者

金(III)化合物作为具有前景的抗癌药物在发展过程中存在的问题金与含硫醇的生物分子不可逆结合，例如

半胱氨酸

S-conjugate-beta-裂解酶

和谷胱甘肽

(GSH);专一性不强;细胞吸收差;低溶解性…高毒性(肝脏)/抗药性49改善金(III)化合物抗癌功效的方法稳定金(III)离子;改善稳定性

(1)

修饰与含S生物分子的亲和性(2,3,4)引入对癌细胞有靶向作用的基团/增加一些亲水性基团

(2,4,6)药物包于胶囊中,将药物缓慢释放(1,4,5,6)阳离子

(5,6)能有效地与带负电的磷脂双分子膜作用，促进细胞对药物的吸收稳定性差高毒性抗药性专属性不强细胞吸收差溶解性低…目前存在的难题潜在方案:5051卟啉是有潜在疗效的药物在肿瘤细胞中，金卟啉与g-四联体作用(潜在的端粒酶抑制剂)Hurley,L.H.,etal.

CancerRes.1999,59,639卟啉

稳定金属离子4.065ÅAuIII+[带负电荷的卟啉离子]2-

配体

[金III(卟啉)]+为了稳定金(III)离子表小檗碱Groenlandicine药根碱罗丹明-123(targetingmitochondrialmembrane)地喹氯铵Anti-CancerPlanarLipophilicCationsMKT-077(Phase1clinicaltrial)Terephthalanilidederivatives(clinicaltrialinearly1960s)一些已经被报道的经典有机化合物:黄连素巴马亭黄连碱黄连根茎中具有生物活性的成分黃連金(I)-卡宾化合物金(III)化合物-平面四边行构型金属平面型亲脂性阳离子金属亲脂阳离子的优势(vs有机阳离子):容易进行结构修饰;可以通过一锅法制备;容易进行大量制备例如:在24小时内很容易制备(10克)!!!金(III)卟啉534.065Å金(III)卟啉具有抗癌活性Sun,R.W.-Y.,Ph.D.Thesis,TheUniversityofHongKong,2004.;Che,C.-M.;Sun,R.W.-Y.;Sun,H.;etal.,Chem.Commun.,2003,1718.金(III)卟啉

Au–N=2.032–2.033ÅAuIII金(III)卟啉:金(III)离子在卟啉环中央;在生理条件下金属不会降解.5455StabilityevaluationStableinBuffersolution(e.g.,Tris-bufferedsalinewith5%DMSO);Solutionwithsulfur-containingprotein(e.gFetalBovineSerum,10%v/v)Solutionwithbiologicalreductant(e.g.GSH,2mM)Che,C.-M.;*Sun,R.W.-Y.;Yu,W.-Y.;Ko,C.-B.;Zhu,N.;Sun,H.*ChemicalCommunications,2003,1718–1719.Physiologicallystablegold(III)porphyrincomplexeswithpromisinganticanceractivities

是什么颜色？5657Invitrocytotoxicity(MTTassay)Nasopharyngealcarcinoma鼻

咽癌

(SUNE1)Leukemia血

癌(HL-60)Hepatocellularcarcinoma肝

癌(HepG2)Oralepithelioidcarcinoma口

腔癌

(KB-3-1)Cervicalepithelioidcarcinoma子宫颈癌(HeLa)約60倍效力高於臨床常用的順鉑(cisplatin).Che,C.-M.;*Sun,R.W.-Y.;Yu,W.-Y.;Ko,C.-B.;Zhu,N.;Sun,H.*ChemicalCommunications,2003,1718–1719.58HKUAuP1ashowsselectivetoxicitytowardcancercellsCancercellsNormalcellsInvitrocytotoxicity(MTTassay)Normalperipheralbloodmononuclearcells(PBMCs)(2)HKUAuP1a體外細胞毒性試驗正常外周血單個核細胞顯示了對癌細胞的選擇性正常細胞(低毒性)癌細胞(高毒性)金（Ⅲ）卟啉金(III)卟啉具有抗癌活性

在体内:先诱导小鼠产生结肠癌,成神经细胞瘤,肝癌(HCC),鼻咽癌(NPC)和黑色素瘤，金-1a

能抑制小鼠体内肿瘤的生长蛋白质组学/转录组学研究表明

金-1a

能诱导线粒体介导的细胞凋亡Chem.Sci.2014,5,1579.Chem.Commun.,

2013,49，4364.Int.J.Nanomedicine,2012,7,731.Chem.Commun.,2011,47,9554.Am.J.Transl.Res.,2011,3,479ActaOncologica,

2011,50,719.Chem.Eur.J.,2010,16,3097.CancerRes.,2010,70,329.DaltonTrans.,

2010,39,7700.CancerLett.,2010,294,159.Coord.Chem.Rev.2009,253,1682.TaiwanPatentNo.338692entitledMethodsforusingGold(III)ComplexesasAnti-TumorandAnti-HIVAgentsCancer,2009,115,4459.Int.J.Cancer,2009,124,1971.Brit.J.Cancer,2009,101,342.Biochem.Pharmacol.,2008,75,1282.Eur.J.Pharmacol.,2007,554,113Int.J.Cancer,2006,118,1527.Proteomics,2006,6,131.CancerRes.,2005,65,11553.ChemBioChem,2004,5,1293.Chem.Commun.,2003,1718.RegularUnitedStatesPatentApplicationNo.:US61/255,668filedon27October2010;PCTPatentApplicationNo.:PCT/CN2010/001706filedon27October2010.Cancer-cellmetastasisExpressionofnegatively

chargedsialicacidRepulsionofthecancercellsCancercellmigration/invasionAnti-canceragentswithcationiccharge65Gold(III)porphyrinasananti-metastaticagent(癌细胞移转)

HKUAuP1a

prolongssurvivalofNPC-metastasis-bearingmiceandinhibitsNPC-associatedmetastasis.延長鼻咽癌小鼠生存期;抑制鼻咽癌相關轉移.肝肺金（Ⅲ）卟啉肿瘤干细胞(CSCs)一些癌细胞具有自我更新和分化的能力.与肿瘤细胞的发生，增殖和复发有关.通过提高GSH,和降低ROS产生抗药性.抗肿瘤干细胞的治疗肿瘤衰退探索金-1a的抗癌活性…66肿瘤干细胞在不贴壁的培养基中能聚集成球细胞成球实验金-1aC.T.Lum,A.S.-T.Wong,M.C.M.Lin,C.-M.Che*andR.W.-Y.Sun*,Chem.Commun.,inpress.U-87MG人类恶性胶质瘤细胞具有肿瘤干细胞的性质Gold-1a

在浓度低达0.05μM时就能减少U-87MG成球抑制肿瘤干细胞自我更新能力6768对金(III)卟啉进行结构修饰，从而改变它的生物特性有效地卟啉结构-亲脂性细胞吸收细胞毒性抗血管生成性质与B淋巴细胞瘤-2基因（Bcl-2）亲和性促进荧光染料DAPI的细胞吸收Sun,R.W.-Y.;Li,C.K.-L.;Ma,D.-L.;Yan,J.J.;LokC.-N.;Leung,C.-H.;Zhu,N.;Che,C.-M.2010,16,309768CytotoxicityevaluationCytotoxicactivities:>1a>5a3SUNE1cells(nasopharyngealcarcinoma,NPC)>2>cisplatin>+4aEffectofLipophilicityonCytotoxicityCellularUptake(i)Lipophilicityincrease,IC50valuesdecrease(highercytotoxicity)Ingeneral,(ii)Lipophilicityincrease,CellularuptakeenhancedSignallingpathwaysandtargetsforanti-cancertherapeuticsMolecularMechanismsofCancerpathwayThioredoxinreductase(TrxR)20SproteosomeproteindisulfideisomerasescarbonicanhydrasesThioredoxinExamplesofoverexpressedthiol-containingproteinsincancercellsImportantcellulartargetsforcancerincludinglungcarcinomaTyrosinekinasesTopoisomerasesWntbeta-cateninsignallingpathway71TargetingThiol-/Seleno-ContainingProteinsbyGoldCompoundsGold(III)compoundGold(I)compoundIntrinsicallyhavehighbindingaffinitiestoS/SegroupsThioredoxinreductase(TrxR)20SproteosomeproteindisulfideisomerasescarbonicanhydrasesThioredoxinCancerCellSeveralS-/Se-containingproteinsareover-expressed,Eligiblecellulartargets

forGoldMedicines;InCancerCells,Identifiedgold(I)/gold(III)compoundsHKUAu1gold-1aIC50(TrxR):2.7nMIC50(TrxR):50nMGold(I)thioureaTight-bindingTrxRinhibitor,targetingtotheredoxactivecysteineandselenocysteineresiduesGold(III)dithiocarbamateProteasomeinhibitor,inducingaccumulationofubiquitinatedproteinat900nM72Beforegold(III)treatmentAftergold(III)treatmentTumorreductionupontreatmentofthegold(III)complexDinuclearGold(III)ComplexwithAnti-CancerActivities

IC50valuesagainstcancercells:0.05µMto0.3µMCancercellselectivity~40foldsovernormalcellsSignificantlyprolongedsurvival(45daysvs30days)ofHCC-bearratR.W.-Y.Sun,C.-N.Lok,T.T.-H.Fong,C.K.-L.Li,Z.F.Yang,T.Zou,A.F.-M.Siu,andC.-M.Che,ChemicalScience,2013,4,1979.Genotoxicity–NO

invitrogenotoxicityinAmestests.–NO

invitrochromosomalmutationobservedin

CHLchromosomalmutationassay.–NO

invivogenotoxicityobservedin

mousebonemarrowmicronucleusassay.Localirritation,antigenicityandsensitizationassays.–NO

invivosensitizationsymptomobservedinmicemodel–NO

invivoirritation,antigenicitysymptomobservedinrabbitbloodvessel(earregion)modelcontrolBloodvessel(earregion)ofaAu3-treatedrabbitAu3doesnotinduceapparentgenemutationAu3doesnottriggerapparentimmuno-response

invivoSafetyandPharmacokineticevaluationofAu374Sub-chronictoxicology&pharmacokineticsevaluationBeagledogsSingleandrepeated-dosetreatmentTianjinInstituteofPharmaceuticalResearch(TIPR)天津市新药安全评价研究中心(SFDAapproved)GaoyaoKangdaLaboratoryAnimalScience&