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2025年大学《化学生物学》专业题库——RNA干扰对基因表达影响考试时间:______分钟总分:______分姓名:______一、选择题(每题2分,共20分)1.下列哪一项不是RNA干扰的生物学意义?A.基因表达调控B.抗病毒防御C.位点特异性重组D.基因组稳定性维持2.Dicer酶在RNA干扰过程中主要作用是:A.合成siRNAB.加载siRNA到RISCC.切割mRNAD.降解miRNA3.RISC复合物中,具有切割mRNA功能的组分是:A.siRNAB.Argonaute蛋白C.RNA引物D.DNA聚合酶4.下列哪一项不是RNA干扰的类型?A.有限干扰B.全局干扰C.基因敲除D.基因过表达5.RNA干扰现象最早是在哪种生物中发现的?A.果蝇B.草履虫C.植物细胞D.哺乳动物细胞6.RNA干扰药物的研发主要基于RNA干扰的哪种特性?A.序列特异性B.保守性C.不稳定性D.相容性7.下列哪一项不是RNA干扰相关的研究技术?A.荧光定量PCRB.NorthernblotC.WesternblotD.DNA测序8.RNA干扰过程中,siRNA的长度通常为:A.21-23ntB.25-27ntC.29-31ntD.33-35nt9.下列哪一项因素不影响siRNA的稳定性?A.序列特异性B.二级结构C.甲基化修饰D.pH值10.RNA干扰在农业育种中的应用主要体现在:A.基因治疗B.转基因作物的改良C.抗病毒感染D.基因诊断二、填空题(每空1分,共10分)1.RNA干扰的全称是__________。2.生成siRNA的关键酶是__________。3.RISC复合物中的guideRNA是__________。4.RNA干扰主要通过降解__________来沉默基因表达。5.RNA干扰药物通常需要通过__________递送到细胞内。三、简答题(每题5分,共15分)1.简述RNA干扰的分子机制。2.简述RNA干扰在基因功能研究中的应用。3.简述RNA干扰药物的研发过程。四、论述题(10分)试述RNA干扰技术在未来疾病治疗中的应用前景及可能面临的挑战。五、综合题(15分)设计一个实验方案,利用RNA干扰技术沉默某种病原菌的关键基因,并简要说明实验步骤和预期结果。试卷答案一、选择题1.C2.A3.B4.D5.A6.A7.D8.A9.D10.B二、填空题1.RNA干扰2.Dicer3.siRNA4.mRNA5.递送载体三、简答题1.RNA干扰的分子机制:首先,长双链RNA(dsRNA)在Dicer酶的作用下被切割成双链小干扰RNA(siRNA)。然后,siRNA被加载到RISC(RNA诱导沉默复合物)中,其中一条链(guideRNA)作为引导链,另一条链被切除。最后,RISC复合物识别并结合目标mRNA,通过Argonaute蛋白的切割活性将mRNA降解,从而抑制基因表达。2.RNA干扰在基因功能研究中的应用:通过构建siRNA表达载体或使用合成siRNA,可以特异性地沉默某个基因的表达,从而研究该基因的功能。这种方法可以用于筛选基因、研究信号通路、分析基因调控网络等。3.RNA干扰药物的研发过程:首先,筛选出针对目标基因的特异性siRNA序列。然后,设计和构建siRNA药物递送系统,例如脂质体、病毒载体等。接下来,在细胞水平和动物模型中测试siRNA药物的效率和安全性。最后,进行临床试验,评估siRNA药物在人体中的疗效和副作用。四、论述题RNA干扰技术在未来疾病治疗中的应用前景广阔,可以用于治疗多种遗传病、传染病和癌症。例如,可以通过构建siRNA药物来沉默致病基因的表达,从而治疗基因缺陷引起的疾病。此外,RNA干扰技术还可以用于开发抗病毒药物,通过沉默病毒基因来抑制病毒复制。然而,RNA干扰药物的研发也面临一些挑战,例如siRNA的递送效率低、免疫原性等问题。此外,RNA干扰技术的脱靶效应也需要进一步研究和解决。五、综合题实验方案设计:1.筛选病原菌关键基因的siRNA序列:通过生物信息学分析,筛选出病原菌中一个对病原菌生存至关重要的基因(例如毒力基因)。然后,设计并合成针对该基因的siRNA序列。2.构建siRNA表达载体:将合成的siRNA序列克隆到表达载体中,构建siRNA表达载体。3.递送siRNA到病原菌细胞内:选择合适的递送方法,例如电穿孔、脂质体介导等,将siRNA表达载体递送到病原菌细胞内。4.评估RNA干扰效果:通过检测病原菌的生长曲线、毒力变化等
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