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文档简介
ICS65.020.30
CCSB43
45
广西壮族自治区地方标准
DB45/T100—2023
代替DB45/T100-2003
种鸡人工授精技术规范
Technicalspecificationforpracticeartificialinseminationfor
breedingchicken
2023-08-10发布2023-09-30实施
广西壮族自治区市场监督管理局发布
DB45/T100—2023
前言
本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定
起草。
本文件代替DB45/T100—2003《种鸡人工授精技术规范》,与DB45/T100—2003相比,除结构调整
和编辑性改动外,主要技术变化如下:
a)完善输精用器的内容;
b)增加了使用一次性塑料滴管的要求;
c)明确训练公鸡的程序;
d)规范表述采精方法及程序的要求;
e)规范表述精子活力检测的要求;
f)增加种公鸡精子活力检测的频率、精子分析仪检测精液品质;
g)规范输精方法;
h)规范输精管的使用和输精量的要求。
本文件的某些内容可能涉及专利,本文件的发布机构不承担识别专利的责任。
本文件由广西壮族自治区农业农村厅提出并宣贯。
本文件由广西畜牧业标准化技术委员会归口。
本文件起草单位:广西壮族自治区兽医研究所、广西壮族自治区畜牧研究所。
本文件主要起草人:廖玉英、秦黎梅、彭昊、黄英飞、朱敏、孙俊丽、马春霞、吴翠兰、覃仕善、
白慧丽。
I
DB45/T100—2023
种鸡人工授精技术规范
1范围
本文件规定了种鸡人工授精技术的术语和定义、用具和仪器、人员要求、种公鸡的选择与训练、采
精、精液品质检査、精液稀释、输精、档案管理。
本文件适用于广西壮族自治区行政区域内种鸡的人工授精。
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文件,
仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本
文件。
NY5027无公害食品畜禽饮用水质
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
3.1
种鸡人工授精artificialinseminationforbreedingchicken
用人工方法将采集合格的种公鸡精液输入种母鸡生殖道内,使母鸡卵子受精的方法。
3.2
采精semencollection
借助于专门器具,人工采集公鸡精液的技术方法。
3.3
输精inseminationorsemendeposition
将原精液或稀释后的精液,用输精器械输入种母鸡生殖道内。
4用具及仪器
4.1集精杯
用于收集精液,可用有刻度的试管、离心管等。
4.2采精杯
用于采精,呈漏斗状,末端封闭。
4.3保温瓶或保温杯
用于精液保温或短时间保存。
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4.4温度计
用于测量保温瓶或保温杯内实际温度。
4.5输精器
用于输精,有刻度的胶头滴管、25μL~50μL的微量移液器或特制输精枪及一次性专用塑料枪头。
4.6毛剪
用于剪去公鸡肛门周围的羽毛。
4.7消毒锅或消毒柜
用于授精器具的消毒、烘干。
4.8仪器及其他用具
显微镜、载玻片、试纸、毛刷等。
4.9清洗消毒
将集精杯、采精杯、输精器等器具用洗涤剂洗刷污垢,用水冲洗干净,用水水质应符合NY5027的
规定,再用蒸溜水冲洗1~2次,然后用纱布或锡箔纸包好,放入消毒锅或消毒柜消毒15min~30min,
烘干备用。同时配置75%酒精棉用于采精前对公鸡肛门周围进行消毒。
5人员要求
人员必须经过专业培训,考核合格后上岗。
6种公鸡的选择及训练
6.1选择
6.1.1公鸡选择
公鸡经育成期2~3次选择后,配种前2w~3w对公鸡进行最后一次选择。选留体格健壮、体重达标,
冠、肉髯等第二性征明显、腹部柔软,按摩时有肛门外翻,交配器勃起等性反射的公鸡,公母比例范围
为1:20至1:40。
6.1.2疫病检测
种公鸡上笼前筛查鸡白痢病和禽白血病,阳性鸡淘汰,只保留两种疫病检测结果都是阴性的合格种
公鸡。
6.1.3种公鸡饲养管理
种公鸡单独饲养,饲养所用饲料符合本品种营养需求,水质符合NY5027要求。
6.2训练
6.2.1受训公鸡单笼饲养3w~4w。
2
DB45/T100—2023
6.2.2在训练前,剪除肛门周围2cm~4cm的羽毛。
6.2.3在配种前2w~3w,开始采精训练,将公鸡逐只捉出,一只手抓住鸡的两腿、紧压腹部保定,
另一只手反复进行背部按摩,直至引起公鸡的性反射。
6.2.4采精训练时间相对固定,每天1次或隔天1次,一旦训练成功,则应在固定时间采精。
6.2.5经3~4次训练,大部分公鸡都能采到精液。经多次训练仍不能建立条件反射的公鸡应淘汰。
7采精
7.1概述
采用按摩采精法。由2人操作,1人保定公鸡,1人按摩与收集精液。
7.2保定公鸡
将公鸡逐只捉出,一手抓住鸡的两腿、紧压腹部保定,使公鸡头部向前,尾部朝向与采精者平行,
呈自然交配姿势。
7.3按摩与收集精液
采精者一只手的中指与无名指夹住采精杯,杯口朝外。另一只手按摩公鸡背侧数次,引起公鸡性反
射后,手迅速转向尾下方,并用拇指与食指跨捏于泄殖腔上缘两侧,当公鸡泄殖腔外翻并露出交配器时
适当挤压,精液流出时即用采精杯承接精液。
7.4人工采精频率
采用隔日采精或连采2d~4d停1d。
7.5采精量
正常情况下,每只公鸡每次采精量为≥0.3mL。
7.6采精注意事项
7.6.1采精动作应迅速轻柔,人员相对固定,环境应安静。
7.6.2在公鸡射精时,手应要捏紧泄殖腔两侧,待排精完毕后再松开。
7.6.3精液受污染应废弃不用。
7.6.4采到的合格精液置于38℃~40℃的保温瓶或杯中,20min内用完。
8精液品质检查
8.1外观性状检查
正常的鸡精液为乳白色,精液中混有尿酸盐时会出现絮状物,混有粪便时会呈浅黄褐色,精液透明
呈水渍状说明精子密度下降,颜色呈现微红色说明泄殖腔粘膜出血并混入精液。只使用正常精液。
8.2活力检查
8.2.1采精后20min内进行,取精液和生理盐水以1:100的比例混匀,取1滴置于载玻片一端,放上
盖玻片。
8.2.2在37℃条件下,用200倍~400倍显微镜检查。以呈直线前进运动的精子数占所有精子数的百
3
DB45/T100—2023
分率评定精子活力,占10%的为0.1级、20%的为0.2级,以此类推,以100%的为1级,80%以上可
用。
8.2.3等级越高,受精能力越强,圆周运动、摆动的精子均无受精能力。
8.3密度检查
8.3.1估测法
用一个玻璃棒蘸取或用吸管吸取一滴精液涂于载玻片上,置于400倍显微镜观察。视野内精子的分
布可以分为3个等级,B级以上可用。
——A级:视野布满精子,精子间无空隙,每毫升精液有精子40亿以上。
——B级:视野中精子之间有1个精子的空隙,每毫升精液有精子20亿~40亿。
——C级:精子间空隙有2个以上,毎毫升精液有精子20亿以下。
8.3.2计数法
8.3.2.1用红血球计数器计数。检查前在400倍显微镜下找到计数板上的计数室,用红血球吸管吸取
精液至0.5刻度处,吸取3%的盐水至101刻度处,用右手拇指和中指分别按住吸管玻璃柱两端翻动几
次,使精液与盐水混合均匀。
8.3.2.2将混合液挤出两滴,再把吸管口放于计数板表面的前部,挤岀一滴混合液,让其流入计数板中
间的槽内,调整显微镜的微调旋钮,寻找计数室,计数时在方框内选取5个计数室进行精子计数。
8.3.2.3压在计数室边线上的精子,计数时计头不计尾、计左不计右、计上不计下。
8.3.2.4将5个计数室的精子依次用计数器记录,5个方格内精子总数的0.1倍即是精子密度。
8.4精子分析仪检测精液品质
8.4.1将待测精液样品用生理盐水或者精液稀释液进行稀释,确保单个视野内有200左右精子数,一
般100倍稀释就可达到要求,具体按实际情况而定。
8.4.2将leja定容玻片置于恒温载物台37℃预热2min~3min。
8.4.3选择所需使用的物种参数设置,并在相应的信息栏输入试样信息,包括动物号、品种、精液量、
稀释比例、剂量信息等。
8.4.4取3µl稀释后精液加到leja玻片的一个小室,点击“即时叠加”,确保是否所有精子头部蓝
色尾部红色状态。
8.4.5点“捕获”获取精液质量分析指标。
8.4.6左右调节显微镜载物台,更换视野再分析,建议检测5~6个不同视野。
8.4.7保存数据。
9精液稀释
9.1通常用原精液输精,如需稀释,比例以1:1为宜。
9.2稀释液常用生理盐水(0.9%的氯化钠溶液)、葡萄糖生理盐水或专用精液稀释液。
9.3采精后应尽快稀释,将精液和稀释液分别装于试管中,并同时放入38℃~40℃保温瓶或恒温箱
中。
9.4稀释时稀释液应沿装有精液的试管壁缓慢加入,轻轻转动,使均匀混合。加入稀释液后不能急速
晃动或用吸管、玻璃棒快速搅动。
4
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