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文档简介
2024-2025学年度高二下学期期末质量检测
生物试卷
注意事项:
1.答题前,考生务必将本人的姓名、准考证号等考生信息填写在答题卡上,并将条形码准
确粘贴在条形码区域内。
2.选择题答案使用2B铅笔填涂,如需改动,用橡皮擦干净后,再选涂其他答案标号;非选
择题答案使用0・5毫米的黑色墨水签字笔书写,字体工整、笔迹清楚。
3.请按照题号在各题的答题区域(黑色线框)内作答,超出答题区域书写的答案无效。
4.保持卡面清洁,不折叠,不破损。
5.考试结束,将答题卡交回。
一、选择题:本题共16小题,每小题3分,共48分。在每小题给出的四个选项中,只有一
项是符合题目要求的。
1.传统发酵技术与传统文化紧密相连,是中华饮食文化的重要组成部分。果酒;果醋、泡菜、腐乳、馒
头、酸奶的制作等离不开传统发醉技术。下列相关叙述错误的是()
A.果酒、馒头的制作离不开酵母菌
B.果醋、酸奶、泡菜的酸味都来自醋酸
C.参与腐乳制作的醉母、毛霉、曲霉都是真核生物
D.酒精发酵以及泡菜的制作都需要无氧条件
【答案】B
【解析】
【分析】制作果酒利用的是酵母菌进行无氧呼吸产生酒精的原理,在发酵初期通入空气可以使酵母菌进行
有氧呼吸并大量繁殖;醋酸菌是好氧微生物,在果醋发酵过程中必须持续通入空气;参与腐乳发酵的青
霉、毛霉、曲霉等都属于真核生物;泡菜、酸奶制作过程中使用的乳酸菌是一种厌氧细菌。
【详解】A、酵母菌既能进行有氧呼吸,也能进行无氧呼吸,是一类兼性厌氧微生物,果酒、馒头的制作
离不开酵母菌,A正确;
B、果醋的酸味来自醋酸,而酸奶、泡菜的酸味都来自乳酸,B错误;
C、腐乳的制作过程中,多种微生物参与了豆腐的发酵,如酵母、毛霉、曲霉等,其中起主要作用的是毛
霉,它们都是真核生物,C正确:
D、酒精发酵利用的是酵母菌的无氧呼吸,泡菜制作利用的是乳酸菌发酵过程,且乳酸菌为厌氧菌,故酒
精发酵以及泡菜的制作都需要无氧条件,D正确。
故选B
2.灭菌、消毒、无菌操作是微生物实验中常见的操作。下列叙述正确的是()
A.实验中所使用的培养基、涂布器、银子等物品可用干热灭菌
B.培养细菌的培养基,需先灭菌再加入酸性物质调pH
C.植物组织培养中外植体只能消毒,动物细胞培养基需添加•定量的抗生素以防止污染
D,为避免周围环境微生物的污染,常用紫外线与消毒液相配合对接种室、超净工作台灭菌
【答案】C
【解析】
【分析】1、消毒是指使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物(不包芽抱和抱
子),包括煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒法、紫外线消毒法。
2、杀菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所用的微生物(包括芽泡和狗子),包括灼烧灭菌、干热灭
菌、高压蒸汽灭菌。
【详解】A、培养基通常采用高压蒸汽灭菌法灭菌,涂布器、锻子进行灼烧灭菌,A错误:
B、培养基制备的正确流程为“先调pH,后灭菌”,若灭菌后再调pH会导致杂菌污染,B错误;
C、植物组织培养中,外植体需消毒,灭菌会杀死细胞;动物细胞培养基中添加抗生素可抑制细菌污染,C
正确;
D、紫外线与消毒液属于消毒手段,仅能减少微生物数量,无法达到灭菌效果,D错误。
故选Co
3.精氨酸依赖型谷氨酸棒状杆菌缺乏将鸟氨酸转化为精氨酸的酶,导致鸟氨酸在细胞内积累,这种菌可作
为马氨酸发酵的优良菌种。如图为野生型谷氨酸棒状杆菌经诱变获得精氨酸依赖型菌并进行筛选的过程示
意图,其中,待培养基甲上的菌落不再增加时,经过程②向培养基中添加物质a,继续培养,下列相关叙
述正确的是()
A,实验过程中用到的培养基和培养皿必须采用高压蒸汽灭菌法灭菌
B.紫外线照射可诱发基因突变或染色体变异,从而提而获得FI的菌株的概率
C.培养基甲是•种完全培养基,过程②向培养基甲中添加的物质a是精氨酸
D.菌落B是诱变产生的精氨酸依赖型菌种,可作为鸟氨酸发醉的优良菌种
【答案】D
【解析】
【详解】A、培养基通常采用高压蒸汽灭菌法灭菌,但培养皿属于玻璃器皿,除高压蒸汽灭菌外,也可采
用干热灭菌法,A错误;
B、谷氨酸棒状杆菌是原核生物,细胞内无染色体,只能发生基因突变,B错误;
C、培养基甲的作用是筛选诱变后的菌株。精氨酸依赖型菌不能自身合成精氨酸,若培养基甲是完全培养
基(含精氨酸),则所有菌株均可生长,无法筛选。实际培养基甲应为基本培养基(不含精氨酸),此时只
有野生型菌能生长,精氨酸依赖型菌不能生长。过程②添加的物质a是精氨酸,使精氨酸依赖型菌(原
木不能生长)得以生长(形成菌落B),C错误;
D、菌落A在不含精氨酸的培养基甲上能生长,为野生型菌(可合成精纸酸),菌落B在添加精氨酸后才
生K,说明是精氨酸依赖型菌,其缺乏将鸟氨酸转化为精氨酸的酶,导致鸟氨酸积累,可作为鸟氨酸发酵
的优良菌种,D正确。
故选Do
4.谷氨酸棒状杆菌生长的最适pH为7.0,通过以下代谢途径发酵生产L—谷氨酰胺。下列叙述正确的是
()
用心一通谷氨酸脱氢酶,小£”谷氨酰胺合成酶八一.3
葡萄糖一丙酮酸°一酮戊一酸------------->卜谷氨酸最适pH为5.6»L•谷氨酰胺
谷氨酸合成酶,最适pH为7.0〜8.0
A.通过发醉_L程从微生物细胞中提取的单细胞蛋白,可制成微生物饲料
B.发酵初期控制pH为7.0,后调为5.6,有利于提高L-谷氨酰胺产量
C.通过光学显微镜观察,可以判断发酵过程中是否发生球状细菌污染
D.发醉结束后,采用过滤、沉淀的方法将菌体分离和干燥即可获得产品
【答案】B
【解析】
【详解】A、单细胞蛋白即微生物菌体,不需要从微生物细胞中提取,A错误;
B、谷氨酸棒状杆菌生长的最适pH为7.0,谷氨酰胺合成酶最适pH为5.6,因此发酵初期控制pH为7.0,
有利于增加谷氨酸棒状杆菌的数量,后调为5.6,有利于提高谷氨酰胺合成酶的活性,进而提高L-谷氨酰
胺产量,B正确;
C、虽然谷氨酸棒状杆菌呈杆状、而球状细菌为球状,但通过光学显微镜观察,不能判断发酵过程中是否
发生球状细菌污染,可通过电镜观察或利用稀释涂布平板法,通过观察菌落特征,判断是否发生球状细菌
D.过程④和⑤的培养基中添加生长素和细胞分裂素的浓度、用最比例有差异
【答案】A
【解析】
【详解】A、过程②用PEG诱导原生质体融合,杂种细胞只含有I个细胞核,且细胞壁再生是在融合后的
杂种细胞培养过程中,不是PEG诱导时,A错误;
B、植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶,不同植物的细胞里结构和成分可能存在差异,因此酶处理时
间可能不同,B正确;
C、过程④是脱分化过程,该过程一般不需要光照,脱分化形成的愈伤组织是不定形的薄壁组织团块,C
正确;
D、据图可知,过程④表示脱分化形成愈伤组织,过程⑤表示再分化以及个体发育形成植株丙的过程。过
程④脱分化和⑤再分化的培养基中均需要添加生长素和细胞分裂素,但在两个过程中比例有差异,D正
确。
故选Ao
7.有关“DNA粗提取与鉴定"DNA扩增"琼脂糖凝胶电泳”实验的叙述,错误的是()
A.提取DNA时,在研磨液中加入切碎的洋葱,充分研磨后过渡取沉淀物进行粗提取
B.琼脂糖凝胶浓度的选择需要考虑待分离DNA片段的大小
C.PCR扩增反应体系中dNTP(脱氧核糖核甘三磷酸)既可以为扩增提供原料,也可以为子链的合成提供
能量
D.将DNA丝状物溶于2mol/L的NaQ溶液中,然后加入二苯胺试剂,沸水浴加热5min,试管冷却后溶液
呈现蓝色
【答案】A
【解析】
【分析】DNA不溶于酒精,而某些蛋白质溶于酒精;鉴定DNA时,需要先将DNA溶解在NaCl溶液中,
再与二苯胺溶液混合,并在水浴加热条件下呈现蓝色。
【详解】A、使用洋葱提取DNA时,先在切碎的洋葱中加入适量洗涤剂和食盐,充分研磨后过滤,取滤液
进行粗提取,A错误;
B、琼脂糖凝胶浓度影响凝胶孔径大小,浓度高适合分离小片段DNA,浓度低适合大片段,因此需根据待
分离DNA片段大小选择浓度,B正确;
C、PCR反应中,dNTP作为原料参与子链合成,其特殊的化学键水解可为反应提供能量,C正确;
D、DNA溶于2moi/LNaCl溶液后,加入二苯胺试剂,沸水浴加热会与DNA结合显蓝色,步骤描述正
确,D正确。
故选A。
8.如图为动物细胞培养过程中细胞增殖情况的变化曲线,图中B、E两点表示经筛选、分装后继续培养。
下列判断错误的是()
A.B点之前的培养称为原代培养,B之后的培养称为传代培养
B.AB和DE段发生了接触抑制现象,需用胰蛋白酶处理
C.细胞培养应在含95%02和5%C0z的培养箱中进行培养,COz的作用是维持培养液的pH
D.E点后的细胞大多数具有异倍体核型,可连续传代
【答案】C
【解析】
【详解】A、人们通常将动物组织消化后的初次培养称为原代培养,分瓶后的培养称为传代培养。B、E两
点表示经筛选、分装后继续培养。故B点之前为原代培养,B点之后进行了传代培养,A正确;
B、在AB段和DE段细胞几乎生长停滞,可能发生了接触抑制,需要用胰蛋白酶处理,然后继续分瓶培
养,B正确;
C、细胞培养应在含95%空气和5%CCh的培养箱中进行培养,C错误;
D、E点后的细胞大多数具有异倍体核型,其遗传物质有可能会发生改变,具有癌变的特征,可连续传
代,D正确。
故选C。
9.2019年1月,中国科学家首次利用CRISPR/Cas9技术,获得一只生物节律核心基因BMALI敲除的舜猴
甲,并通过体细胞核移植技术,获得5只生物节律紊乱的克隆狭猴,用于研究生物节律机制,技术流程如
图所示(①②表示操作过程)。下列说法正确的是()
采集卵母细胞匈去核的卵母细胞一|
0f重构胚多只敲除BMAL1
»代孕猴一►
敲除BMAL1基因的殊猴甲——►成纤维细胞」基因的克隆源猴
A.BMALI基因只存在于下丘脑细胞内并在下丘脑细胞中表达进而影响生物节律
B.采集到的卵母细胞需在体外培养至MII期,去核后作为动物体细胞核移植的受体细胞
C.①去核的目的是使克隆舜猴的遗传物质全部求自有价值的供体细胞细胞核
D.②通过电融合法使两细胞融合形成的重构胚需培养至桑甚胚或原肠胚再转至代孕雌猴子宫内
【答案】B
【解析】
【分析】I、题图是通过核移植技术克隆狮猴的技术流程,①表示显微操作去核,②表示电融合法使两细
胞融合。
2、动物细胞培养条件:(1)无菌无毒环境:无菌——对培养液和所有培养用具进行无菌处理;在细胞培
养液中添加一定量的抗生素;无毒———定期更换培养液,防止细胞代谢产物积累对自身造成危害。(2)
营养成分:所需营养物质与体内基本相同,例如需要有糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等,
还需加入血清、血浆等天然成分。培养基类型:合成培养基(将细胞所需的营养物质按其种类和所需数量
严格配制而成的培养基)。(3)温度、pH:大多数哺乳动物适宜温度为36.5±0.5℃,多数细胞生存的适宜
pH为7.2〜7.4。(4)气体环境:通常采用培养皿或松盖培养瓶,将其置于含95%空气加5%CCh的混合气
体的培养箱中进行培养。02是细也代谢所必需的,CO2主要作用是维持培养液的pH。
【详解】A、卜.丘脑与生物节律的控制有关,BMALI基因是生物节律核心基因,存在于动物全身体细胞
内,但只在下丘脑相关细胞中表达进而影响生物节律,A错误;
B、采集到卵母细胞需在体外培养至MII期,再进行①显微操作,去核后作为动物体细胞核移植的受体
细胞,B正确;
C、①去核的目的是使克隆舜猴的细胞核中的遗传物质来自供体细胞细胞核,C错误;
D、②通过电融合法使两细胞融合形成重构胚,需用物理法或化学法激活发育至桑甚胚或囊胚阶段后再移
植至经同期发情处理的代孕雌猴子宫内,D错误。
故选B。
10.青蒿素主要用于恶性疟疾的症状控制以及耐氯哇虫株的治疗。为了快速检测青蒿素,科研人员利用细
胞工程技术制备了抗青蒿素的单克隆抗体,其基本操作过程如下图。下列相关叙述正确的是()
射
给
小鼠注
牛
素
青
一
舒
白
白
血
蛋
清
抗
结
原
合
小鼠骨髓瘤细胞
A.过程①注射抗原的目的是增加小鼠体内的单克隆抗体的量
B.过程③常使用选择培养基,融合细胞能生长,未融合细胞均不能生长
C.若细胞乙均由细胞两两融合而成,则细胞乙、丙、T相同分裂期时染色体组数目完全相同
D.过程④常使用克隆化培养和抗原一抗体杂交技术进行筛选,其筛选原理和目的与过程③相同
【答案】C
【解析】
【详解】A、过程①为注射抗原,目的是诱导小鼠产生具有免疫能力的B淋巴细胞,A错误;
B、过程③是筛选杂交瘤细胞,常使用选择培养基,杂交瘤细胞能生长,自身融合和未融合细胞均不能生
长,B错误;
C、因细胞甲和小鼠骨髓瘤细胞均来源于小鼠,两种细胞染色体组数相同,若细胞乙均由细胞两两融合
而成,则细胞乙和经筛选后的丙、丁(都是杂交瘤细胞)的染色体组数一定相同,C正确;
D、过程③是筛选杂交瘤细胞,过程④用克隆培养和抗原一抗体杂交技术得到能产生特定抗体的杂交瘤细
胞,两者原理和目的不同,D错误。
故选C。
11.胚胎工程的许多技术,实际上是在体外条件下,对动物自然受精和早期胚胎发育条件进行的模拟操
作。因此,了解哺乳动物受精和早期胚胎发育的规律十分重要。下列相关叙述正确的是()
A.在自然条件下,哺乳动物的受精过程和早期胚胎的发育均在子宫中完成
B.胚胎发育早期,细胞的数最不断增加的同时,胚胎的总体积也不断增加
C.桑甚胚期,会出现透明带破裂,胚胎从其中伸展出来,这一过程叫作孵化
D.囊胚期,胚胎细胞逐渐分化,形成的内细胞团将来发育成胎儿的各种组织
【答案】D
【解析】
【分析】哺乳动物胚胎发育的重要阶段:(1)卵裂期:在透明带内进行的,特点是细胞分裂方式为有丝分
裂,细胞的数量不断增加,但胚胎的总体积并不增加,或略有缩小。(2)桑柩胚:32个细胞左右的胚胎。
(3)囊胚:细胞开始分化,其中个体较大的细胞叫内细胞团将来发育成胎儿的各种组织;而滋养层细胞
将来发育成胎膜和胎盘;胚胎内部逐渐出现囊胚腔。(4)原肠胚:内细胞团表层形成外胚层,下方细胞形
成内胚层,由内胚层包围的囊腔叫原肠腔。
【详解】A、在自然条件下,哺乳动物的受精过程在输卵管中完成,A错误;
B、胚胎发育早期,细胞的数量不断增加的同时,胚胎的总体积基木不变或略有减小,B错误;
C、囊胚的扩大会导致透明圈破裂,胚胎伸展出来,这一过程叫作孵化,发生在囊胚期,C错误;
D、囊胚期,细胞开始分化,其中个体较大的细胞叫内细胞团将来发育成胎儿的各种组织,D正确。
故选D。
12.研究人员仿照制备乳腺生物反应器的思路,制备了一种膀胱生物反应器用其获得人体特殊功能蛋白
W,基本过程如下图所示。下列有关叙述错误的是()
雄性动物雌性动物W基因载体
精子卵子——
.重组表达载体
.।①l"।—
一~~
受精卵跖赢举代孕母休卜》口基因动物卜fp福—>[w
A.图中①和③过程代表的操作分别是显微注射和胚胎移植
B.转基因动物乳腺上皮细胞与膀扰上皮细胞的遗传信息不同
C.需用激素对代孕母体进行同期发情处理
D.与乳腺生物反应器相比,膀胱生物反应器不受转基因动物性别和年龄的限制
【答案】B
【解析】
【详解】A、图中①表示将目的基因导入受体细胞,利用受精卯作为重组表达载体的宿主细胞常采用显微
注射的方法将载体注入,③表示胚胎移植,A正确;
B、转基因动物乳腺上皮细胞与膀胱上皮细胞是体细胞有丝分裂再经分化而来,遗传信息相同,B错误;
C、对代孕母体进行同期发情处理,以使其子宫处于与供体相同的生理状态,C正确;
D、由于只有雌性动物哺乳期才能产奶,因此与乳腺生物反应器相比,膀胱生物反应器不受转基因动物性
别和年龄的限制,D正确。
故选B。
13.为降低寄生虫疫苗候选抗原蛋白异位表达毒性等副作用,研究者将增强绿色荧光蛋白(EGFP)基因与
线虫肌动蛋白(Act-1)启动子核心片段重组,利用大肠杆菌表达荧光蛋白,来确定Act-1基因启动子核心
片段活性,其主要步骤如图所示。下列叙述正确的是()
p-EGFP侦粒
注:Ori表示复制原点;AmpR表示氨苫青霉素抗性基因。
A.利用PCR扩增Acl-I基因启动子时,需用到SalI酶和Hindlll酶
B.在添加氨苇青霉素的培养基上,获得的菌落均能发出荧光
C.Ori可能富含G—C碱基对,有利于DNA从此处开始解旋
D.启动子与质粒重组前需添加XhoI酶的识别序列
【答案】D
【解析】
【分析】PCR是利用DNA在体外摄氏95。高温时变性会变成单链,低温(经常是60笛左右)时引物与单
链按碱基互补配对的原则结合,再调温度至DNA聚合酶最适反应温度(72。(3左右),DNA聚合酶沿着磷
酸到五碳糖(5:3)的方向合成互补旋。基于聚合酶制造的PCR仪实际就是一个温控设备,能在变性温度,
复性温度,延伸温度之间很好地进行控制。
【详解】A、利用PCR扩增Act-1基因启动子时,无需加入Sal[能和HindHI陋,而是在引物上引入这两
种前的识别序列,A错误;
B、在添加氨苇青霉素的培养基上获得的菌落有两种:导入空白质粒的大肠杆菌和导入重组质粒的大肠杆
菌,只有后者能发出荧光,B错误;
C、Ori可能富含A—T碱基对,氢键数量少,DNA不稳定,有利于DNA从此处开始解旋,C错误:
D、启动子的两边为SalI酶和Hindlll酶序列,重组质粒中酶识别序列为XhoI酶和HindUI酶序列,因此
启动子与质粒重组前需添加Xhol酶的识别序列,以便质粒与基因重组,D正确。
故选D。
14.为了研究多种血糖调节因子的作用,我国科学家开发出胰岛素抵抗模型鼠。为扩增模型鼠(黑鼠)数
量,科学家通过诱导模型鼠体细胞转化获得iPS细胞,继而利用iPS细胞培育出与模型鼠遗传特性相同的
克隆鼠,具体步骤如图所示。下列相关叙述正确的是()
黑鼠
体细胞iPS细胞
2^2
诱导因子
1/端以②一②
特殊处理队/重构胚代孕白鼠X鼠
灰鼠双细内细胞中5细
胞胚团失活胞注入
的囊胚
A.黑鼠的体细胞在诱导因子的作用下转化为iPS细胞的过程类似植物细胞的再分化过程
B.为了获得更多的双细胞胚,可对灰鼠注射促性腺激素,使其超数排卵
C.可取重构胚的滋养层细胞进行性别鉴定,以确定X鼠的性别
D.图中X鼠的体色可能为白色、灰色或黑色
【答案】B
【解析】
【详解】A、黑鼠体细胞转化为iPS细胞是脱分化,类似植物脱分化,不是再分化,A错误;
B、对灰鼠注射促性腺激素可超数排卵,获得更多双细胞胚,B正确;
C、重构胚的滋养层细胞来自于灰鼠,该细胞团与灰鼠性别一致,不决定最后克隆鼠X的性别,C错误;
D、X鼠遗传物质来自黑鼠,体色应为黑色,D错误。
故选B。
15.生物安全是指国家有效防范和应对危险生物因子及相关因素威肋、生物技术能够稳定健康发展,人民
生命健康和生态系统相对处于没有危险和不受威胁的状态,生物领域具备维护国家安全和持续发展的能
力。下列说法错误的是()
A.生物武器只包含致病菌类和病毒类,其攻击范围广,传播途经多、传播时具有潜伏期
B.我国禁止生殖性克隆人的实验,对治疗性克隆实验也进行严格审杳
C.在转基因工作中科学家会采取很多方法防止基因污染,如阻断淀粉储藏使花粉失活
D.为避免可能产生的基因歧视,基因检测机构不能随意泄露基因检测的结果
【答案】A
【解析】
【详解】A、生物武器不仅包括致病菌类和病毒类,还可能包含毒素及基因重组的致病生物等,A错误;
B、我国明确禁止生殖性克隆人,但对治疗性克隆(如干细胞研究)进行严格监管,B正确;
C、转基因作物可通过阻断花粉形成(如花粉败育技术)避免基因污染,阻断淀粉储藏导致花粉失活是可
行方法,C正确:
D、基因检测结果涉及隐私,泄露可能导致基因歧视,因此需严格保密,D正确。
故选Ao
16.肝细胞中的延胡索酰乙酰乙酸水解酶基因突变会导致酪氨酸血症。下图是研究人员利用基因编辑技术
纠正病人来源肝细胞,成功治疗酪氨酸血症小鼠的过程,为治疗人类酪氨酸血症奠定理论基矶。相关叙述
准确的是()
A.酪氨酸血症的发生说明基因能通过控制蛋白质的结构控制生物性状
B,过程②需在培养液中添加琼脂、葡萄糖、干扰素动物血清等物质
C.过程③需敲入正常的延胡索酰乙酰乙酸水解酶基因,井敲除相关抗原基因
D.基因编辑后的人源肝细胞植入小鼠分化为完整肝脏,是治疗小鼠酪氨酸血症的关键
【答案】C
【解析】
【分析】在进行细胞培养时,首先要对新鲜取材的动物组织进行处理,或用机械的方法,或用胰蛋白陋、
胶原蛋白酶等处理一段时间,将组织分散成单个细胞。然后,用培养液将细胞制成细胞悬液,再将细胞悬
液放入培养瓶或培养皿内,置于适宜环境中培养。
【详解】A、酪氨酸血症是由于肝细胞中的延胡索酰乙酰乙酸水解酶基因突变,导致酶不能正常合成,进
而影响代谢过程,这说明基因能通过控制酶的合成来控制代谢,进而控制生物性状,而不是控制蛋白质的
结构,A错误;
B、动物细胞培养过程中,培养液中需要添加葡萄糖、动物血清等物质,但不需要添加琼脂,琼脂是用于
植物组织培养的凝固剂,B错误;
C、过程③基因编辑是为了纠正病人来源肝细胞,所以需要敲入正常的延胡索酰乙酰乙酸水解酶基因,同
时敲除相关抗原基因,以避免免疫排斥反应,C正确:
D、基因编辑后的人源肝细胞植入小鼠后,是通过肝细胞发挥正常功能来治疗小鼠酪氨酸血症,而不是分
化为完整肝脏,D错误。
故选C
二、非选择题:本题共5小题,共52分。
17.贾氏贡醋是河南三门峡的传统名产,最初以柿子为主,随着工艺的发展,其原料已拓展到苹果、大
枣、山楂、葡萄等多种水果,这鳍不同的原料在酿造的过程中被加入,使贾氏贡醋更加富有营养。贾氏贡
醋正是这些原料通过糖化、酒精发酵和醋酸发酵制成。请回答下列问题:
(1)贾氏贡醋在酿造过程中一般需经过酒精发酵,此阶段需在_____(填“有氧”或“无氧”)条件下进行,
其中起主要作用的微生物的代谢类型是______。
(2)在果酒的基础上进行的醋酸发酵过程中,发生的主要反应(写反应方程式),该过程改变
的条件有(至少写出2点)。
(3)制作果酒和果醋的过程中,均会引起发酵液的pH(熏“变大”或"变小'’),其中涉及到的物质分
别是________
(4)先制果酒再制果醋的原理是。
【答案】(1)①.无氧②.异养兼性厌氧型
(2)①.CzHsOH+ChJ^CH3coOH+H2O+能量②.通入氧气、升高温度
(3)①.变小②.二氧化碳、醋酸
(4)酒精发酵是用酵母菌将葡萄糖转化为乙醇,酿醋的醋酸菌可以将乙醇变为乙醛,再将乙醛变为乙酸(醋
酸)
【解析】
【分析】1、参与果酒制作的微生物是酵母菌,其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。2、参与果醋制作的微
生物是醋酸菌,其新陈代谢类型是异养需氧型.果醋制作的原理:当氧气、糖源都充足时,醋酸菌将葡萄
汁中的糖分解成醋酸.当缺少糖源时,醋酸菌将乙醇变为乙醛,再将乙醛变为醋酸。
【小问I详解】
酒精发酵是利用酵母菌将匍萄糖转化为酒精的过程,酵母菌在无氧条件下进行酒精发酵,其代谢类型是异
养兼性厌氧型。所以此阶段需在无氧条件下进行,起主要作用的微生物(酵母菌)的代谢类型是异养兼性
厌氧型。
【小问2详解】
在果酒的基础上进行醋酸发酵,是乙醇在醋酸菌的作用下转化为醋酸的过程,反应方程式为C2H5OH+O2
鲁CH3coOH+H2O+能量。醋酸菌是好氧菌,最适生长温度为30-35(,而醉母菌酒精发酵时一般将温度
控制在18-3OC,所以该过程改变的条件有通入氧气、温度由18-3OC调整为30-35(。
【小问3详解】
在制作果酒过程中,酵母菌无氧呼吸产生二氧化碳,二氧化碳溶丁水形成碳酸,使发酵液pH变小:在制
作果醋过程中,醋酸菌产生醋酸,也会使发醉液pH变小。所以制作果酒和果醋的过程中,均会引起发酵
液的pH变小。涉及到的物质分别是二氧化碳和醋酸。
【小问4详解】
先制果酒再制果醋的原理是:酵母菌在无氧条件下进行酒精发酵产生果酒,当氧气和糖源充足时,醋酸菌
可将葡萄糖分解成醋酸;当缺少糖源时,醋酸菌可将乙醇变为乙醛,再将乙醛变为醋酸,所以在果酒的基
础上可以进行醋酸发醉。
18.某污水处理厂欲处理一批含伸元素和硝酸盐浓度较高的污水,研究人员通过对人肠道微生物的分离与
筛选,得到了耐碎的反硝化细菌,它能在无氧环境中将硝酸盐转化为氮气(2NO3+10C-
+I2H+-…TN2OTN2)。分离耐伸的反硝化细菌具体步骤如下:采集健康人体的新鲜粪便样本。
(1)配制培养基以筛选耐种的反硝化细菌:该培养基中含有适宜浓度的,从而有利于该菌的生
长,抑制其他微生物的生长。此种培养基属于培养基。接种:取采集的人体新鲜粪便样品
0.3g,接种至该培养基上。
(2)耐碎反硝化细菌的分离与纯化:取200〜30()piL上述培养液,均匀地涂布在已经添加了5mmol/LAs3+
和lOmmoI/LNO;的细菌固体培养基上。在涂布接种前,随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了•段时
间,这样做的目的是_____;涂布完成后,将平板置于温度为的恒温培养箱中培养24h。挑取长
势比较良好、形态大小不同的菌落利用平板划线法进行分离纯化,用该种方法进行接种时,接种工具是
,该接种工具的灭菌方法是________。最后为了鉴别分离的菌株是否为反硝化细菌,在此培养
基中可加入,适宜条件下培养获得单菌落,再进行选择纯化。
(3)用稀释涂布平板法对细菌进行计数时,将稀释倍数为IO'的菌液样品().lmL接种在5个平板上,培养
一段时间后,平板上的菌落数分别为29、50、52、57、303,则每升原菌液样品中细菌数为个。
(4)测定菌株在不同碑浓度下的生长、繁殖能力:挑取单菌落加入到液体培养基中进行培养,吸取1mL
菌液离心收集菌体后,分别接种到含有Ommol/L、ImmolL、2inmol/L>5mmol/L、lOmmol/LAs?和
lOmmolLNO.的液体培养基中,测定其OD值(OD值越大,表明菌体数量越多),并绘制曲线如下图。
结合曲线可以得出结论:
【答案】(1)①.As3+和硝酸盐(2).选择
(2)①.检测培养基平板灭菌是否合格②.37C③.接种环④.灼烧灭菌⑤.酸碱指
示剂
(3)5.3x15个
(4)当神浓度低时,该菌能生长:过高浓度的神使该菌株的生长繁殖受到抑制
【解析】
【分析】在微生物学中,将允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基,
称为选择培养基。
【小问1详解】
配制选择培养基的目的是筛选目的菌株,本题中是筛选耐碎的反硝化细菌,故该选择培养基中应含有适宜
浓度的As3卜和硝酸盐,从而有利于耐伸的反硝化细菌的生长,抑制其他微生物的生长;在微生物学中,将
允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基,称做选择培养基,故此种培
养基属于选择培养基。
【小问2详解】
在耐碎反硝化细菌的分离与纯化过程中,为检测培养基平板灭菌是否合格,需要在涂布接种前随机取若干
灭菌后的空白平板先行培养一段时间;由于是从人体新鲜粪便中取样,故涂布完成后,将平板置于温度为
37c的恒温培养箱中培养24h;挑取K势比较良好、形态大小不同的菌落利用接种环进行平板划线法进行
分离纯化,接种环在使用时需要进行灼烧灭菌;最后为了鉴别分离的菌株是否为反硝化细菌,在此培养基
中可加入酸碱指示剂,适宜条件下培养获得单菌落,再进行选择纯化。
【小问3详解】
对菌落数在30~300的平板上的菌落数进行计数,平均菌落数为(50+52+57)/3=53,则每升原菌液样品中细
菌数为:53/0.1x1(px10M.3x1心个。
【小问4详解】
分析题意可知,OD值越大,表明菌体数量越多,题图显示,在0mmol/LAs3+和lOmmol/LNCh-的液体培养
基中,OD值最大,说明菌体数量最多;在lmmol/LAs3+和10mmol/LNO3-的液体培养基中,OD值比
Ommol/LAs3和lOmmol/LNCh-的液体培养基中的OD值明显降低,说明菌体数量减少;2mmol/LAs^'和
lOmmol/LNCh-的液体培养基、5mmol/LAs3+和lOmmol/LNCh-的液体培养基中,OD值相似,比
lmmol/LAs3,和10mmO1/LNO3-的液体培养基中的OD值明显降低,说明菌体数量继续减少;而
1Ommol/LAs31^lOmmol/LNCh-的液体培养基、20mmol/LAs?'和lOmmol/LNCh-的液体培养基中,OD值更
低,说明菌体生长繁殖受到明显的抑制作用,故可以得出结论:当神浓度低时,该菌能生长;过高浓度的
碑使该菌株的生长繁殖受到抑制。
19.我国中科院的研究团队利用细胞工程和基因编辑技术,成功培育出世界上首例只有双母亲来源的孤雌
小鼠和双父亲来源的孤雄小鼠,实现了哺乳动物的同性繁殖。实验流程如图所示,请分析I可答:
激活、培养、转化基因编辑
©-------------->
孤雌小鼠
卵细胞孤雌胚胎干细胞逑曾鬻甲
(phESC)将人的phESC
入去核C____
激活、培养、转化基因,
*-----------------------------------乙孤雄小鼠
精子孤雄胚胎干细胞具卵细胞细胞核
(ahESC)特点的ahESC
(1)体外培养动物细胞时,首先应保证其处于的环境,除了适宜的营养物质、温度等条件外,
还需要CO2培养箱培养。
(2)JIJ对雌性小鼠进行超数排卵处理可得到大量卵母细胞。
(3)要培育孤雄小鼠需要将糖子和具卵细胞细胞核特点的ahESC同时注入去核的卵母细胞形成重构胚,
此卵母细胞应在体外培养到MII期,对卵母细胞进行去核时,可以采用(至少答出两种)方法
进行处理,可利用的方法对乙进行处理得到了多只孤雄小鼠。
(4)ahESC与精子和去核卵母细胞融合后,得到的融合细胞的性染色体组成可能是。
(5)据图分析只依赖雄性小鼠不能得到孤雄小鼠,请写出两个支持这个判断的理由。
理由1:;
理由2:。
【答案】(1)无菌无毒
(2)促性腺激素(3)①.显微操作、紫外线短时间照射、梯度离心、化学物质处理②.胚
胎分割
(4)XX、XY、YY
(5)①.需要将ahESC和另一个精子一起注入到一个去核卵细胞中②.重构胚必须移植到雌性小
鼠的体内才能发育为个体
【解析】
【分析】I、卵细胞激活转化成phFSC,通过基因编辑技术获得具精子细胞核特点的phESC,获得甲,从
而得到孤雌小鼠。
2、精子激活转化成ahFSC,通过基因编辑技术获得具卵细胞细胞核特点的ahESC,获得乙,从而得到孤
雄小鼠。
【小问1详解】
体外培养动物细胞时,由于培养液中含有丰富的营养,因此,为了避免杂菌污染,首先应保证其处于无菌
无毒的环境。
【小问2详解】
用促性腺激素对雌性小鼠进行超数排卵处理可得到大量卵母细胞,而后需要将卵母细胞培养到减数第二次
分裂中期。
【小问3详解】
对印母细胞进行去核时,可以采用显微操作、紫外线短时间照射、梯度离心、化学物质处理方法进行处
理,还可利用胚胎分割的方法对乙进行处理得到了多只孤雄小鼠。
【小问4详解】
ahESC细胞中的性染色体组成为X或Y,而精子中的性染色体组成也是X或Y,精子与去核卵母细胞融
合后再与ahESC细胞融合获得孤雄小鼠,则其性染色体可能是XX、XY或YY。
【小问5详解】
结合图示可知,只依赖雄性小鼠“不能”得到孤雄小鼠,这是因为要获得孤雄小鼠需要将ahESC和另一个精
子一起注入到一个去核卵细胞中,而卵细胞来自雌性小鼠,另外获得的重构胚必须移植到雌性小鼠的体内
才能发育为个体,可见离开雌性个体不能获得孤雄小鼠。
20.红色荧光蛋白(RFP)常作为检测目的基因足否表达的标记物。研究人员将RIT基因与FI的基因(序
列如图2所示)构建为融合基因,然后导入靶细胞中使其表达为一条多肽。回答下列问题:
启动子口的基因RFP终止子
XI■
图1
5-AGCTA(;CAATGCTC...AT(;AACT(;C(;CA-3,
3-TC(}Ar('(;TTACGAG……TACTTGAC(X,(;T-5,
图2
(1)通过PCR扩增目的基因时,需要设计一对引物,引物的功能是一。根据图2中目的基因的碱基序
列分析,研究人员设计的下列几种引物中可用来扩增目的基因的是—o
①5-AGCTAGCA一3'②5-TCGATCGT-3,
③5'一ACGCGTCA一3‘④5,一TGCGCAGT-3'
(2)将融合基因导入受体细胞时,需要构建基因表达载体。构建基因表达载体时需要使用一来切割融
合基因和质粒,然后再使用—来连接两者。
(3)据图1分析,该融合基因在受体细胞中翻译时RFP与目的蛋白合成的顺序是—,因此在连接两个
基因时需要去除目的基因序列中决定—的部分和RFP基因序列中决定—的部分,这样翻译出来的才是
一条肽链(后两空填“起始密码子”或“终止密码子”)。
(4)将融合基因导入受体细胞后,若动物细胞中出现一,则说明FI的基因成功表达。若需要进一步确
定目的基因是否表达出蛋白质,则可用—法进行检测。
【答案】(1)①.与模板链结合,使DNA聚合酶从引物的3,端延伸子链②.①和④
(2)①.限制的②.DNA连接航
(3)①.先翻译目的基因,再翻译RFP②.终止密码子③.起始密码子
(4)①.红色荧光②.抗原抗体杂交
【解析】
【分析】基因工程的工具有限制性核酸内切酶、DNA连接酶和载体。基因工程的操作程序包括四个步
骤:目的基因的筛选与获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。
基因表达载体的构建是基因工程的核心步骤。一个完整的基因表达载体包括目的基因、标记基因、启动
子、终止子等。启动子是一段有特殊序列结构的DNA片段,位于基因的上游,紧挨转录的起始位点,它
是RNA聚合酶识别和结合的部位,有了它才能驱动基因转录出mRNA,最终表达出人类需要的蛋白质。
终止子相当于一盏红色信号灯,使转录在所需要的地方停下来,它位于基因的下游,也是一段有特殊序列
结构的DNA片段。
【小问1详解】
引物的功能是与模板链结合,使DNA聚合酶从引物的3,端延伸子链。引物一般和目的基因的3,端相
连,根据碱基互补配对原则,选项中与图2中目的基因的3,端碱基序列互补的是5-AGCTAGCA-3'和
是5-TGCGCAGT-3',所以可用来扩增目的基因的是①和④。
【小问2详解】
构建基因表达载体时常用限制酶来切割融合基因和质粒,然后用DNA连接酶来连接两者。
【小问3详解】
由图1可知,启动子的作用是启动基因转录的,因此该融合基因在受体细胞中翻译时先翻译目的基因,
再期译RFP。要使翻译出来的是一条肽链,需要去除目的基因序列中决定终止密码子的部分和RFP基
因序列中决定起始密码子的部分。
【小问4详解】
将融合基因导入受体细胞后,若动物细胞中出现红色荧光,则说明红色荧光蛋白(RFP)基因表达,进而
说明目的基因成功表达,进一步确定目的基因是否表达出蛋白质则可用抗原抗体杂交法进行检测。
21.干扰素是一类具有抗病毒、抑制细胞增殖等多种功能的糖蛋白。研究发现盛鼠纤维母细胞体外培养
时,细胞增殖到一定程度会分泌。-干扰素,使这些细胞迅速死亡。研究人员通过基因工程的方法获得P干
扰素。回答下列问题:
(
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