植物化学保护实验教案

农学专业植物化学保护实验教案2013-2014学年第二学期农学院植保教研室实验一农药常用剂型的加工制备一般由农药厂或化工厂制造出来的未经加工的农药产品统称为原药。固体的原药叫原粉，液体的原药叫原油。一、实验目的：掌握农药常用剂型的加工原理及方法。进一步了解它们的组成成分、物理性状及使用特点。二、实验材料及试剂六六六、敌敌畏、多菌灵、呋喃丹、高岭土、肥皂粉、乳化剂、苯、二甲苯等。三、实验仪器粗天平、研钵、60目、200目标准筛、恒温水浴锅、温度计、移液管、烧杯、玻璃棒等。四、实验方法及步骤1、粉剂制备（制备2%六六六粉剂）粉剂（dust）系用农药原药和填料，经过机械粉碎而成的粉状混合制剂。粉剂的规格标准为细度要求95%粉粒可通过200号筛目，水分含量不超过1.5%，pH值为6-8。原料配比（a.i）实验用量六六六2份高岭土100份将过200目筛的六六六称取实验需用量，并称过200目筛的高岭土实验用量，置研钵内，混合研磨均匀，即成。注：该法制备粉剂，要特别注意所用填料密度和比重应与所用的高浓度粉剂尽量保持一致，否则，当喷粉时可能会造成填料粉粒与药剂粉粒分离，即先喷出和后喷出粉状物的有效成分含量不一致。2、可湿性粉剂（制备25%多菌灵可湿性粉剂）可湿性粉剂（wettablepowder）系用农药原药、湿润剂和填料，经机械粉碎而制成的粉状混合物制剂。它易被水湿润，可分散和悬浮与水中，供喷雾使用。其标准为粉粒细度要求99.5%通过200目筛，水分含量不超过2.5%，湿润时间要求小于1.5min，悬浮率达50%以上。原料配比（a.i）实验用量叶蝉散25份茶枯粉10份肥皂粉1份陶土（干燥）加足到100份实验用量，分别称取过200目筛的各原料置研钵内，充分研至混匀，即成25%多菌灵可湿性粉剂。注：其与粉剂制备不同之处为粉碎（研磨）时间较粉剂长，转速要慢，若原药受热易软化，要间歇作业，“慢工出巧活”。它与乳油相比，由于该剂不含二甲苯等有机溶剂而利于环保，降低成本，而且具有包装运输方便，安全等优点。3、乳油（制备80%敌敌畏乳油）乳油（emulsifiableconcentrates）为农药原药、乳化剂和溶剂制成的单相液体，加水乳化为乳液。乳油为高浓度制剂，它在我国农药制剂总量中虽仅占20%左右，但其防治面积却占化学防治总面积的70-80%。该剂型具有加工工艺简单，理化性质稳定，使用时便于计量，以及药效好等优点。主要缺点是含有较多有机溶剂，喷洒后它一般不起到药效作用而且往往还污染环境。乳油外观透明，不分层，无沉淀物为合格。原料配比（a.i）实验用量95%敌敌畏80份乳化剂0203（或十二烷基苯磺酸钠、吐温40、吐温80等）5份二甲苯（苯）加足到100份步骤：①称取乳化剂1g置小烧杯内，加二甲苯（苯）1ml恒温水浴锅上（30℃）调稀②按用量吸取95%敌敌畏于另一小烧杯内，加二甲苯1.5ml恒温水浴锅上（30℃）搅拌2min。③将1倒入2内，并搅拌2min即成95%敌敌畏乳油。注意：配制时全部用具必须干燥无水分。4、颗粒剂（3%呋喃丹颗粒剂的制备）颗粒剂（granulars）系用农药原药、辅助剂和载体制成的粒状制剂。颗粒剂与粉剂相比：从生产上看，它具有粉尘污染小，可用载体种类多，比表面积小而提高储存防潮能力。从应用上看，着药目标强，有些助剂具有控制有效成分释放作用而延长残效，施药方式多种多样，而且对环境影响较小。其存在问题，主要是有些制剂的加工成本较高。用原药与过筛的（20-60目筛）载体（如煤渣）充分拌匀、混合，让药剂均匀地吸附在载体的外围制成颗粒剂。这种颗粒剂使用方便，成本低，药效期长。其质量标准为有效成分含量达到该剂型规定的标准：粒度，90%（重量）通过10-48号筛目；水分一般为＜3%；颗粒完整率≥85%，即破碎率≤15%；有效成分从载体上脱落率（粉状）＜5%（指包衣法颗粒剂）。原料配比（a.i）实验用量辛硫磷3份煤渣（砂子）加足100份将煤渣先经60目筛，将呋喃丹先溶在易挥发的有机溶剂（如丙酮）中，将此药液投入载体中，拌匀回收溶剂即成。五、作业1、在可湿性粉剂的加工过程中，影响其质量的因素有哪些？2、农药为什么要进行制剂加工？3、乳油与可湿性粉剂相比各有何优缺点？实验二农药对植物的药害试验生产中，常常因不正确地使用农药而引起了植物的药害，其原因主要有二方面：即药剂的性质、植物的反应和环境条件，为了确保作物的安全，必须在农药应用前进行药害试验。一、试验目的：掌握药害试验的基本方法。二、试验材料：供试药剂：供试植物：玉米种子仪器：分析天平、粗天平、培养皿、三角瓶、镊子、玻璃棒、量筒、移液管、吸耳球、烧杯、角尺。三、方法步骤：1、拌种法：种子药剂处理：试验采用同一品种，籽粒大小基本一致，主要发芽率高而整齐的玉米种子6份，每份50g，将其中5份分别放入150ml三角瓶中，再分别称药剂为玉米种子重的0.15、0.30、0.60、1.20，分别装入上述三角瓶中（注意编号），用塞子塞紧瓶口，充分振荡2min使药剂均匀附在玉米种子表面。培养沙的制备：用清水反复漂洗通过20目筛的沙土，除去粘土，可溶性物质及其他杂质，然后用稀盐酸处理除去碳酸盐类，再用清水反复洗涤，直至不呈酸性反应为止，最后用蒸馏水洗涤一次在120℃以内温度下烘干（为了更好观察根的生长情况，可在沙中加入0.5-1%进行发芽试验：将上述干沙750g置于磁盒中，加入150ml蒸馏水搅拌均匀（即含量约为20%）然后在直径9cm的培养皿中放入此湿沙60g，轻刮平后，用镊子挑取已拌药的玉米种子50粒均匀放入培养皿中，再稍将玉米种子压平，再加湿沙40g于玉米种子表面，覆盖均匀后置于25℃温箱中进行发芽试验，每浓度重复3结果的检查与记载3天检查发芽势，7天检查发芽率，并观察芽和根的生长情况，检查时可在各处理随机取10株，测其芽和根的长度（根长一般是量其长的根三支，取其平均数）求出其平均长度，并记录其对药剂的反应。拌种法试验结果统计供试药剂名称、浓度估计药害级别芽的生长情况根的生长情况发芽势（%）发芽率（%）平均芽势（mm）对药剂的反应根的数量平均根长对药剂的反应实验三杀菌剂的毒力测定生长速率法是杀菌剂毒力测定的常规方法之一。其原理是将不同浓度的一定量的药液和一定量的热的培养基混合，待冷却凝固后，接供试菌，适温培养一定时间，以菌丝生长速率来判定药剂的毒力大小。生长速率法操作较简单，重现性强，结果精确可靠。对供试菌的要求是菌丝易在培养基上迅速平铺生长，边缘整齐，产生孢子缓慢。一、实验用具恒温箱、烘箱、高压灭菌锅、打孔器、接种针、培养皿、容量瓶、三角瓶、吸管、酒精灯、镊子等。二、实验材料供试菌、琼脂、马铃薯、葡萄糖、供试药剂、链霉素等。三、实验方法1、菌饼制备：用接种针将供试菌从斜面转接到平板上，培养一定时间，用打孔器沿菌落边缘打取菌饼。2、含毒培养基的制备：将所试药剂配成一系列浓度梯度，准确吸取1ml药液于培养皿内，加入9ml50℃PDA培养基，事先加入少量链霉素，充分混匀，置平板使凝固。每处理重复33、移接菌饼：用镊子夹取菌饼，菌面向下接于含毒培养基中心，每皿一块。放入恒温箱中，培养一定时间，用十字交叉法测量菌落直径。四、实验结果分析将实验结果记入表中，按最小自乘法求得药剂对供试菌的抑制中浓度（EC50）。药剂浓度（mg/kg）一定时间后菌落直径（mm）抑制率（%）CK实验四杀虫剂的毒力测定一、实验目的1、掌握杀虫剂毒力测定的操作技术和基本方法。包括触杀毒力测定—点滴法和胃毒毒力测定—叶片夹毒法。2、通过测定结果，求得回归方程，并计算出LD50。二、实验原理、实验流程或装置示意图1、杀虫剂触杀毒力测定—点滴法。点滴法是采用一种精密定量的微量点滴器将药剂点滴到昆虫的某一部位，然后间隔一定的时间观察其死亡率的方法。2、杀虫剂胃毒毒力测定—叶片夹毒法。胃毒毒力测定是利用昆虫的贪食性，尽量避免触杀、熏蒸作用的干扰，使昆虫在取食正常食物的同时将毒剂摄入消化道，经肠壁细胞吸收进入血液，随血液循环到达作用部位而使昆虫中毒、死亡。三、实验设备及材料1、主要仪器设备：微量点滴仪、打孔器、培养皿等。2、主要实验材料、用品及用具：试验昆虫、农药、丙酮、新鲜面粉浆糊、白菜叶片、容量瓶、吸管、镊子、试管等。四、实验方法步骤及注意事项1、点滴法测定杀虫剂的触杀毒力。①配制药液：将药剂配制成适当的浓度梯度。②点滴处理：用微量点滴器吸取药液。安装并调适好仪器，从对照到低浓度到高浓度点滴。③结果分析：得出毒力回归方程及LD50，并进行检验。2、叶片夹毒法测定杀虫剂的胃毒毒力。①药剂准备：将药剂用丙酮稀释成5-7个浓度梯度，最好呈等差数列，梯度浓度要适宜。②试虫准备：选择从田间采回的大小一致的菜青虫幼虫，分放在试管中，用纱布封口，每管一头，饥饿5-6个小时。③饲料准备：将新鲜的白菜叶片用自来水冲洗干净，用打孔器打成圆叶片，放入垫有湿纱布的培养皿中保湿。④夹毒叶片制作：用微量点滴器从低浓度开始，在每一圆叶片上点滴1l药液，和另一片涂有一薄层面粉浆糊的圆叶片对贴，贴上后就不要再移动。每浓度20张夹毒叶片。以点滴⑤饲喂试虫：每头试虫给一张夹毒叶片，让试虫取食。2小时后检查，凡是吃完夹毒叶片的投放清洁的无毒白菜叶片继续饲喂，凡是未吃完夹毒叶片的，则弃去此虫，不计入试验中，24小时后检查试虫生存率或死亡情况并记录。④结果分析：得出毒力回归方程及LD50，