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2025年食品检验检测技能竞赛试题(B卷)【附答案】一、单项选择题(每题2分,共20题,40分)1.以下哪种食品添加剂的检测需采用高效液相色谱串联质谱法(HPLCMS/MS)?A.苯甲酸(GB5009.28)B.亚硝酸盐(GB5009.33)C.黄曲霉毒素B₁(GB5009.22)D.糖精钠(GB5009.28)2.依据GB4789.22022《食品安全国家标准食品微生物学检验菌落总数测定》,若10⁻²稀释度平板菌落数为325CFU,10⁻³稀释度平板菌落数为35CFU,10⁻⁴稀释度平板菌落数为3CFU,应报告的菌落总数为()。A.3.2×10⁴CFU/gB.3.5×10⁴CFU/gC.3.2×10³CFU/gD.3.5×10³CFU/g3.测定食品中铅含量时,若使用石墨炉原子吸收光谱法(GFAAS),推荐的基体改进剂是()。A.硝酸钯B.硝酸镁C.磷酸二氢铵D.氯化钯4.以下关于食品采样的描述,错误的是()。A.液体样品采样前需充分混匀,分层样品应分别采集各层B.固态样品应从不同部位随机抽取,总样品量不少于2倍检验量C.微生物检测样品需在04℃冷藏运输,4小时内送检D.辐照食品采样时需单独包装,避免与非辐照样品交叉污染5.GB27612021《食品安全国家标准食品中真菌毒素限量》规定,婴幼儿配方食品中黄曲霉毒素M₁的限量为()。A.0.5μg/kgB.0.1μg/kgC.1.0μg/kgD.0.3μg/kg6.测定葡萄酒中酒精度时,正确的操作是()。A.直接取50mL样品,蒸馏后测定馏出液体积B.样品需调节pH至中性后蒸馏,避免挥发性酸干扰C.蒸馏时需加入沸石,冷凝管出口需浸入接收液液面下D.酒精度计算公式为(馏出液体积/样品体积)×100%7.以下哪种微生物检测不需要使用选择性培养基?A.金黄色葡萄球菌(BairdParker琼脂)B.沙门氏菌(XLD琼脂)C.大肠埃希氏菌(VRBA琼脂)D.菌落总数(PCA琼脂)8.实验室质量控制中,“空白试验”的主要目的是()。A.验证仪器稳定性B.排除试剂或环境引入的干扰C.确认标准曲线线性D.评估检测方法精密度9.测定乳粉中水分含量时,若采用直接干燥法(GB5009.32016),恒重的判定标准是两次称量差不超过()。A.1mgB.2mgC.3mgD.5mg10.关于食品中农药残留检测的前处理,以下操作正确的是()。A.蔬菜样品用乙腈提取,加入无水硫酸镁和氯化钠盐析B.水果样品用甲醇提取,直接过C18固相萃取柱净化C.谷物样品需先粉碎至20目以下,用石油醚脱脂后再提取D.所有样品均需经冷冻干燥处理,避免水分影响提取效率11.依据GB4789.102016《食品安全国家标准食品微生物学检验金黄色葡萄球菌检验》,定性检测时,挑取BairdParker平板上典型菌落进行血浆凝固酶试验,阳性结果的判断标准是()。A.24小时内血浆完全凝固B.4小时内血浆出现絮状凝固C.8小时内血浆呈半凝固状态D.12小时内血浆无变化12.测定食用植物油酸价时,滴定终点的判定是()。A.酚酞指示剂由无色变为粉红色,30秒不褪色B.甲基红指示剂由红色变为黄色C.溴甲酚绿指示剂由黄色变为蓝色D.百里酚酞指示剂由无色变为蓝色13.以下哪种仪器需要定期进行计量检定?A.实验室pH计B.可调式移液器(1001000μL)C.超净工作台D.高压蒸汽灭菌锅14.食品中挥发性盐基氮(TVBN)的测定原理是利用()。A.蛋白质水解产生氨基酸,与茚三酮显色B.氨和胺类物质在碱性条件下挥发,用硼酸吸收后滴定C.亚硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化,再与N1萘基乙二胺偶联显色D.脂肪氧化产物与硫代巴比妥酸反应生成红色物质15.依据GB131042014《食品安全国家标准食糖》,白砂糖的色值应≤()IU。A.60B.150C.300D.60016.测定食品中二氧化硫残留量时,盐酸副玫瑰苯胺法(GB5009.342016)的显色反应需在()条件下进行。A.强酸性B.弱酸性C.中性D.弱碱性17.以下关于实验室生物安全的描述,错误的是()。A.微生物检测实验室需配备生物安全柜(BSCⅡ级)B.阳性菌液废弃前需经121℃高压灭菌30分钟C.操作结核分枝杆菌等高致病性微生物时需在BSCⅢ级实验室进行D.实验人员接触样品后需用75%乙醇消毒双手18.测定婴幼儿配方食品中钙含量时,若使用原子吸收光谱法,需加入()消除磷酸根的干扰。A.氯化镧B.硝酸锶C.EDTAD.柠檬酸19.依据GB299212021《食品安全国家标准预包装食品中致病菌限量》,即食水产制品中沙门氏菌的限量要求是()。A.n=5,c=0,m=0B.n=5,c=1,m=0C.n=5,c=0,m=1CFU/gD.n=5,c=2,m=020.以下哪种检测方法属于快速检测技术?A.实时荧光PCR检测沙门氏菌B.凯氏定氮法测定蛋白质C.气相色谱法测定脂肪酸组成D.原子荧光法测定砷含量二、判断题(每题1分,共10题,10分)1.食品中大肠菌群的MPN计数法(GB4789.32016)中,若所有稀释度的乳糖胆盐发酵管均未产气,则报告大肠菌群为0MPN/g。()2.测定食品中铅含量时,微波消解后的样品需赶酸至近干,避免硝酸残留影响原子化效率。()3.食品添加剂日落黄的检测可采用高效液相色谱法,以C18色谱柱分离,紫外检测器(254nm)测定。()4.实验室超纯水的电导率应≤0.1μS/cm(25℃),可用于配制痕量元素检测试剂。()5.冷冻饮品(如冰淇淋)的微生物采样量应不少于250g,需在18℃以下冷冻保存运输。()6.测定葡萄酒中甲醇时,气相色谱法的内标物通常选择正丙醇。()7.GB27622017《食品安全国家标准食品中污染物限量》规定,稻谷中镉的限量为0.2mg/kg,糙米中镉的限量为0.4mg/kg。()8.食品中过氧化值的测定(GB5009.2272016)中,滴定用硫代硫酸钠标准溶液需在暗处放置15分钟后再滴定,避免碘挥发。()9.微生物检测用培养基高压灭菌时,121℃灭菌15分钟适用于所有培养基,包括含有不耐热成分的培养基。()10.食品中甜蜜素(环己基氨基磺酸钠)的检测可采用气相色谱法,需先经亚硝酸钠盐酸衍生化生成环己醇亚硝酸酯。()三、简答题(每题5分,共6题,30分)1.简述实验室内部质量控制的常用方法(至少列出5种)。2.简述食品中黄曲霉毒素B₁检测的前处理步骤(以免疫亲和柱净化法为例)。3.测定乳制品中三聚氰胺时,为何需使用三氯乙酸乙腈溶液提取?若采用高效液相色谱法,色谱条件应如何选择(流动相、检测波长)?4.简述大肠埃希氏菌O157:H7的检测流程(依据GB4789.362016)。5.食品中农药多残留检测时,QuEChERS前处理技术的主要步骤是什么?关键试剂(如无水硫酸镁、PSA、C18)的作用分别是什么?6.实验室检测结果出现“假阳性”可能的原因有哪些?如何验证结果的准确性?四、案例分析题(20分)某市场监管部门抽检一批市售婴幼儿配方乳粉(1段),委托你实验室检测以下项目:蛋白质(GB5009.52016)、黄曲霉毒素M₁(GB5009.242016)、菌落总数(GB4789.22022)、阪崎克罗诺杆菌(GB4789.402016)。检测结果如下:蛋白质含量:12.5g/100g(标准要求:12.018.0g/100g)黄曲霉毒素M₁:0.08μg/kg(标准限量:≤0.1μg/kg)菌落总数:2.5×10⁴CFU/g(标准限量:≤10⁴CFU/g)阪崎克罗诺杆菌:未检出(标准要求:n=5,c=0,m=0)问题:(1)判断该批次产品是否合格?说明各项目的判定依据。(2)若菌落总数检测中,10⁻³稀释度平板菌落数为250CFU(2个平行平板),10⁻⁴稀释度平板菌落数为25CFU(2个平行平板),计算菌落总数并说明报告规则。(3)若黄曲霉毒素M₁检测时,空白试验结果为0.02μg/kg,样品测定值为0.10μg/kg,是否需要扣除空白?最终结果应如何报告?五、实操技能题(附加题,30分,可选答)题目:鲜切蔬菜中大肠菌群的MPN计数(依据GB4789.32016)操作要求:1.样品前处理:称取25g样品,加入225mL无菌磷酸盐缓冲液(PBS),均质1分钟。2.稀释与接种:取1mL样液至9mLPBS(10⁻¹),依次稀释至10⁻²、10⁻³。3.接种乳糖胆盐发酵管:每个稀释度接种3管,每管接种1mL(10⁻¹、10⁻²、10⁻³各3管)。4.培养与观察:36℃±1℃培养48小时,观察产气情况。5.结果记录与MPN计算:根据产气阳性管数,查表得出MPN值。评分标准:无菌操作规范性(5分):均质器、移液管、试管的无菌处理。稀释梯度准确性(5分):稀释倍数计算、移液体积误差(≤±0.05mL)。接种操作(5分):发酵管标记、接种量一致性。培养条件控制(5分):培养温度、时间的准确性。结果判定(10分):产气判断标准(小倒管有气泡)、MPN表查取正确性。参考答案一、单项选择题1.C2.B3.A4.B5.B6.B7.D8.B9.A10.A11.A12.A13.B14.B15.A16.B17.C18.A19.A20.A二、判断题1.×(需确认所有稀释度均未产气,报告“未检出”或“<3MPN/g”)2.√3.×(日落黄最大吸收波长约482nm,应使用可见光检测器)4.√5.×(冷冻饮品采样量不少于200g,运输温度≤15℃)6.√7.×(糙米中镉限量为0.2mg/kg,稻谷为0.2mg/kg)8.√9.×(含不耐热成分的培养基需采用过滤除菌或降低灭菌温度)10.√三、简答题1.常用方法:①空白试验;②平行样测定(相对偏差≤10%);③加标回收率试验(回收率80%120%);④标准物质(RM)或质控样检测(结果在允许范围内);⑤人员比对;⑥设备比对;⑦方法验证(精密度、准确度、线性范围等)。2.前处理步骤:①称取样品(如奶粉5g),加入70%甲醇水提取液,均质振荡30分钟;②离心取上清液,过0.45μm滤膜;③将滤液以12mL/min流速通过免疫亲和柱,用去离子水淋洗柱子;④用甲醇洗脱黄曲霉毒素B₁,收集洗脱液;⑤氮气吹干,用甲醇水复溶,供HPLC或LCMS/MS测定。3.三氯乙酸用于沉淀蛋白质,乙腈可提取三聚氰胺并降低溶液极性;HPLC条件:C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈0.01mol/L庚烷磺酸钠(pH=3.0,磷酸调节)=10:90(V/V),检测波长240nm。4.检测流程:①前增菌(BPW,36℃±1℃培养68小时);②选择性增菌(mEC+novobiocin,42℃±1℃培养1824小时);③分离(CTSMAC或山梨醇麦康凯琼脂,36℃±1℃培养1824小时);④生化鉴定(三糖铁、靛基质等试验);⑤血清学试验(O157和H7因子血清凝集);⑥必要时进行毒力基因检测(stx1、stx2)。5.QuEChERS步骤:①样品均质后,加入乙腈提取;②加入无水硫酸镁(除水)和氯化钠(盐析),离心分层;③取上清液至含有PSA(吸附极性杂质如果酸、糖)、C18(吸附非极性杂质如脂肪)和无水硫酸镁的净化管,振荡离心;④取上清液过0.22μm滤膜,供GCMS或LCMS/MS测定。6.假阳性原因:①试剂污染(如引物、抗体交叉反应);②样品交叉污染(前处理时未分区操作);③仪器残留(色谱柱、进样针残留目标物);④操作误差(加样错误、显色时间过长)。验证方法:①重复检测(同一样品平行测定);②使用不同方法验证(如LCMS/MS复核ELISA结果);③检测空白样品(确认无外源污染);④使用标准物质同步检测(确认方法可靠性)。四、案例分析题(1)不合格。判定依据:蛋白质:12.5g/100g在标准要求范围内(合格);黄曲霉毒素M
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