DB5333∕T 32-2024 《滇黄精组培苗生产技术规程》

ICS65.020.20

CCSB38

5333

怒江州地方标准

DB5333/T32—2024

滇黄精组培苗生产技术规程

TechnicalRegulationsonPropagationofPolygonatum

kingianumviaTissueCulture

2024-01-24发布2024-02-24实施

怒江州市场监督管理局  发布

DB5333/T32—2024

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定

起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。

本文件由云南省农业科学院药用植物研究所、怒江昂可达生物科技开发有限公司提出。

本文件由怒江州市场监督管理局归口。

本文件起草单位：云南省农业科学院药用植物研究所、怒江昂可达生物科技开发有限公司。

本文件主要起草人：杨美权、张金渝、起明菊、杨天梅、杨维泽、李后江、许宗亮、左应梅、李纪

潮、黄国敏、张昌平、黄振懿、潘永兴。

I

DB5333/T32—2024

滇黄精组培苗生产技术规程

1范围

本文件规定了滇黄精组培苗生产的术语和定义、培养准备、外植体采集和处理、接种、驯化、出苗、

包装、标识和运输。

本文件适用于云南怒江境内滇黄精组培苗生产管理。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，

仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本

文件。

NY/T2306花卉种苗组培快繁技术规程

DB5333/T17滇黄精规范化种植种子种苗质量要求

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1

滇黄精（Polygonatumkingianumcoll.etHemsl）

百合科黄精属草本植物，其干燥根茎是《中华人民共和国药典》2020年版一部收录的黄精药材的植

物基源之一，为食药两用植物。

3.2

组织培养

利用植物细胞的全能性，采集滇黄精幼嫩叶片或不定芽，通过无菌操作，在人工控制条件下进行培

养以获得再生的完整滇黄精植株。

3.3

外植体

从鲜活植物体上获取的用于植物组织培养的组织或器官。

3.4

驯化

组培苗瓶苗从人工控制的培养条件到自然环境适应的过渡过程。

3.5

1

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缩略语

MS：是植物组培常用的一种基本培养基，由Murashige和Skoog发明的，以两人名字的缩写命名。

6-BA：6-Benzylaminopurine，6-苄氨基腺嘌呤。

NAA：Naphthylaceticacid，萘乙酸。

IBA：Indole-3-butyricacid，吲哚丁酸。

AC：Activecarbon，活性炭。

4培养准备

4.1生产场地与设备

按照NY/T2306中的规定执行。

4.2容器和器械清洗

容器采用650ml组培瓶。清洗按照NY/T2306中的规定执行。

4.3培养基配制

以MS培养基为基本培养基，配制方法见附录A。添加琼脂4.0g/L～4.5g/L，蔗糖30g/L，调节pH

值为5.8；激素的具体用量和比例应根据不同培养基类型、品种特性及其在培养中的表现加以适当调整

和优化。

诱导培养基：MS+6-BA2.0mg/L。

继代增殖培养基：MS+6-BA3.0～4.0mg/L+NAA0～1mg/L。

生根培养：1/2MS+NAA0～1mg/L+IBA0～1mg/L+AC0.5g/L。

4.4灭菌

培养基配制完毕后，分装至组培瓶中，在121℃下高压灭菌15min～20min，并尽快取出使其冷却

备用。

5外植体采集和处理

5.1外植体的选择

长势良好、大小近似的滇黄精不定芽或顶部具叶柄幼嫩叶。

5.2外植体的采集

于晴天清晨或傍晚，用经酒精消毒的医用剪刀剪取，采集后用洁净吸水纸吸去表面水分备用。若30

min内不能处理，则需装入自封袋中，排除空气后密封保存。长途运输需0℃～5℃冷藏保存。

5.3外植体的清洁

外植体在加有适量洗衣粉的自来水中浸泡刷洗后。滴加2滴～3滴吐温-80，震摇10min～15min后

用自来水冲淋60min～80min。

5.4外植体的消毒

2

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将洗净的外植体，转移至超净台，用75%酒精消毒20s，后用无菌水涮洗3次～4次。

经酒精消毒后的外植体，用0.1%升汞溶液消毒15min，无菌水涮洗6次～8次。

经升汞消毒的外植体，用无菌滤纸吸去表面水分，同时伤口处切除0.2cm～0.5cm。

5.5消毒废液的处理

使用过的氯化汞溶液按照国家有关剧毒化学品使用的法规进行回收处理。

6接种

6.1初代培养

接种外植体所用培养基为诱导培养基，将外植体经切分处理后接入诱导培养基上，不定芽按极性斜

插入诱导培养基中，叶柄平铺于培养基表层。使其下端和培养基紧密接触。接种材料在培养容器内均匀

分布，接种完毕立即盖好瓶盖并作好标记，注明材料名称、接种日期等事项。

6.2增殖培养

待愈伤组织或不定芽形成后，要将愈伤或不定芽切成0.5cm小块转接至增殖培养基，注意不可过深。

一般45d～50d继代一次，直至增殖小苗达到需要的数量,不宜超过6代。

6.3生根培养

将增殖的不定芽切割成单个完整的幼芽并切去愈伤，将其按极性插入生根培养基中。生根培养40

d～50d发育出完整根系，即可出瓶。

6.4培养条件

培养温度为25℃±2℃，用光强2000lx～3000lx白光光照，每日光照12h。

7驯化

7.1出瓶准备

培养瓶内长出3条以上长2.0cm～3.0cm的不定根时，连瓶移至遮阴率60%～80%的自然光温室大棚

内继续培养3d～4d；后拧松瓶盖继续在温室大棚内培养3d～4d。

7.2出瓶

将滇黄精组培苗从瓶内取出，用清水洗净基部培养基。用稀释500倍的多菌灵浸泡根部2min～3min，

按5cm×10cm的密度，栽植于泥炭土与珍珠岩（1:1）的混合基质中，在苗床上搭建塑料小拱棚或种植

于大棚中。

7.3温湿度要求

7.3.1温度

苗床温度白天温度控㓡在30℃以下，夜间温度控制在15℃以上。

7.3.2空气湿度

3

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开始驯化10d内，完全关闭小拱棚，空气湿度控制在90%以上。驯化后10d～20d，打开小拱棚两

侧，空气湿度控制在50%～80%，驯化20d后，逐步打开小拱棚至完全打开。

7.3.3基质湿度

组培苗驯化期间基质含水量控制在50%～60%。

7.4施肥管理

小拱棚膜完全揭开后开始施肥，首次施肥采用水溶性复合肥（15:15:15），配制成0.1%的浓度喷施，

后浓度逐步增加至0.5%，施肥间隔时间为7d～15d。

7.5病虫害防控

参照附录B进行滇黄精组培苗的主要病虫害防治。

8出苗

8.1出苗要求

根系发育良好，植株生长健壮，无病虫害，无明显机械损伤，具1片及以上叶片，茎基部直径1.0cm

及以上的小块茎时出苗。

8.2种苗分级

符合DB5333/T17中的规定。

9包装、标识和运输

9.1包装

以100苗为单位，用塑料袋包裹根及茎基部，将装袋苗放入包装箱。

9.2标识

外包装贴上标识，注明品种（含品系）、规格、等级、数量、生产者、发货日期等信息。

9.3运输

装车和搬运时勿倒置，运输途中避免日晒、雨淋。

4

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A

A

附录A

（资料性）

MS培养基的组分及含量

名称成分含量（mg/l）

NH4NO31650

KNO31900

大量元素20*

MgSO4.7H2O370

KH2PO4170

CaCl2.2H2O440

Na2.-EDTA37.25

铁盐50*

FeSO4.7H2O27.85

甘氨酸2.0

盐酸硫胺素0.1

有机物100*盐酸吡哆醇素盐酸毗哆醇素0.5

烟酸0.5

肌醇100

MnSO4.4H2O22.3

ZnSO4.7H2O8.6

H3BO36.2

微量元素KI0.83

Na2MoO4.2H2O0.25

CuSO4.5H2O0.025

CoCl2.6H2O0.025

5

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B

B

附录B

（资料性）

滇黄精组培苗主要病虫害及其防治方法

病虫害名称危害部位及症状防治方法

根茎腐病根茎部：症状表现为叶片黄花枯萎，茎基部加强通风，降低基质湿度；病害发生时可

或根状茎出现红棕色病斑，严重时缢缩腐烂用75%多菌灵可湿性粉剂800倍液或70%恶

霉灵可湿性粉剂4000倍液灌根。

炭疽病叶片：从叶尖或叶缘开始发生，从水渍状褐