GBT 21852-2025 化学品 分配系数（正辛醇-水）高效液相色谱法试验

化学品分配系数(正辛醇-水)高效液相色谱法试验Chemicals—Partitioncoefficient(n-octanol/water)—2026-02-01实施2026-02-01实施国家市场监督管理总局国家标准化管理委员会I本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。本文件代替GB/T21852—2008《化学品分配系数(正辛醇-水)高效液相色谱法试验》,与GB/T21852—2008相比，除结构调整和编辑性改动外，主要技术变化如下：a)删除了“pH-metric法也可用于测定离子型化学物质的分配系数”(见2008年版的3.1);b)更改了lgPow计算的内容(见第4章，2008年版的3.1);c)更改了“死时间t。的测定”的内容(见8.2,2008年版的6.3);d)更改了“数据与报告”的内容(见第10章，2008年版的第8章)。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由全国危险化学品管理标准化技术委员会(SAC/TC251)提出并归口。本文件起草单位：生态环境部固体废物与化学品管理技术中心、广东省科学院微生物研究所(广东省微生物分析检测中心)、生态环境部南京环境科学研究所、沈化测试技术(南通)有限公司、上海化工院检测有限公司、贵州健安德科技有限公司、上海市检测中心、粤港澳生态环境科学中研究院、平顶山市慧鑫源生物科技有限公司、中检科健(天津)检验检测有限责任公司。本文件及其所代替文件的历次版本发布情况为：——-2008年首次发布为GB/T21852—2008;GB/T21852—20251本文件确立了分配系数(正辛醇-水)的高效液相色谱(HPLC)法试验的试验原理，规定了受试物信本文件适用于测定lgPo值在0～6的化学物质的分配系数，特殊情况下也可扩展至1gPo值在6～10的化学物质；不适用于强酸、强碱、金属络合物、与洗脱液发生反应的化学物质和表面活性剂。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于GB/T21853化学品分配系数(正辛醇-水)摇瓶法试验GB/T21855化学品与pH有关的水解作用试验3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。分配系数partitioncoefficient受试物在互不相溶的两相介质中达到平衡时的浓度之比。正辛醇-水分配系数n-octanol/waterpar受试物在正辛醇-水两相介质中达到平衡时的浓度之比。4试验原理本文件描述的HPLC法是在填充键合了长烃链硅胶固定相的分析柱上进行分离的过程。受试物进入色谱柱后，随着流动相沿色谱柱运动的同时，在溶剂流动相和烃类固定相之间进行分配。化学物质在柱中的保留时间值与其烃-水分配系数成比例，亲水性化学物质先洗脱，亲脂性化学物质后洗脱。保留时间与死时间之间的关系以容量因子k表示，见公式(1)。式中：k—容量因子；tR——受试物的保留时间；2to——死时间，即溶剂分子通过分析柱的平均时间。本方法无需定量的分析方法，只需测定保留时间值。受试物的正辛醇-水分配系数可通过实验测得其容量因子k,代入公式(2)计算得出。lgPow=a+b×1gk………a,b—线性回归系数；公式(2)可由参比物的1gP对参比物的lgk作线性回归所得。对于可解离化学物质可测定其在非解离形态(游离酸或游离碱)下的分配系数，此时试验介质为适当的缓冲液。对于游离酸，缓冲液的pH值低于pK;对于游离碱，缓冲液pH值高于pK。如果lgP。值用于环境危害分级或环境风险评估，则试验应在相应的环境pH值范围内，即pH值在5.0～9.0的条件下进行。受试物中如有杂质，将影响色谱峰的准确归属，因此干扰结果分析。对于色谱峰不能完全分离的混合物，记录lgPo值的上下限和每个1gP值所对应色谱峰的面积百分比。如果混合物是一组同系物，计算其lgPow的加权平均值，以每个Po值所对应色谱峰的面积百分比来计算。所有占总面积百分比不小于5%的色谱峰，均纳入计算，见公式(3)。lgPowi—第i个组分的lgPo值，无量纲；A;——第i个组分的色谱峰面积；A--—峰的面积总和。5受试物信息5.1在试验前，应掌握受试物的下列必备信息：a)解离常数；b)结构式；c)流动相中溶解度。5.2按照GB/T21855的规定测定的水解信息。6参比物为了建立受试物的测定容量因子k与其P的相关性，需至少用6个点绘制校准曲线。因此应选择合适的参比物。选用的参比物的lgPo应涵盖受试物的lgPow值，即至少有一个参比物的Po数值大于受试物Pow值，另一个参比物的Pow数值小于受试物P值，特殊情况下可用外推法。宜选择与受试物结构相关的物质作为参比物。用于校准的参比物的lgP。值应为可靠的试验数据。对于1gPo大于或等于4的受试物，如不能获得可靠的试验数据，可采用计算值。若使用外推值，则极限值应予以注明。3其lgPow值见附录A。对于可解离的化学物质，表A.1中的数据为其非解离形态的数值。配有低脉冲泵和匹配的检测系统的液相色谱仪。紫外(UV)-可见检测器(测定波长210nm)或示效，因此尽量降低固定相极性基团的含量。可用商品化的微粒反相试验期间温度变化不大于±1℃。甲醇-水混合液中水的比例不低于25%。通常甲醇：水体积比为3:1的混合液，在流速1mL/min条件下，可在1h内将1gP值为6的化学物质洗脱。对1gPo大于6的化学物质，可通过降低流动相的极洗脱液的pH值对可解离受试物非常关键，应保持在色谱柱工作的pH范围内(通常为2～8)。宜使用缓冲液保持pH的稳定。当以有机相-缓冲液为流动(如正烷基甲基酮)中约7个化学物质的保留时间值得到。通过对不同碳原子数对应的保留时间4A—-—k(nc+1)/k(nc),为一常数；tR(ne)——所测同系物中，nc个碳原子的化学物质对应的保留时间；to——死时间，即溶剂分子通过分析柱的平均时间。t。可从斜率A和截距(1-A)t。求得。8.3回归方程选取适宜的参比物，以其lgk对lgP。作图。参比物的lgP。值应与目标受试物的lgPo值相近。测定时，6种～10种参比物同时进样，测保留时间。记录仪宜与检测器系统相联。用所得相应的容量因子k的对数1gk对1gPo作图。考虑柱效变化的影响，按至少一天一次的时间间隔做回归方程。受试物以最小可检测量进样。通过两次平行测定保留时间。受试物的分配系数用插值法将计算的容量因子带入校准曲线所得。很高和很低的分配系数由外推法计算，在这种情况下应注意要标明回归直线的置信区间。如果受试物的保留时间值超出了参比物保留时间值的范围，应列出极限值。9质量保证与质量控制为提高测定的可信度，应进行平行试验。试验有效性满足以下条件。a)重复性：在相同测定条件下、选用同一组参比物重复测定的lgPo值，变化范围在±0.11g单位内。b)复现性：如果在选用不同组参比物的条件下重复测定，则结果是不同的。典型情况下，一组受试物其1gk与lgPo的相关系数R约为0.9,相当于lgPow(正辛醇-水分配系数)的偏差在±0.51gc)多实验室间的比对试验表明，按照本文件描述的方法测得的1gPo值与按照GB/T21853的方法测得的lgPo值差异在±0.51g单位之间。通过由结构相关参比物得到的校准曲线，可得到最为准确的结果。10数据与报告试验报告中包括以下内容。a)如果估算分配系数，则记录估算值和所用方法；如果用计算方法，则应充分记录包括数据库认证和所选择的分子片段的详细信息。e)洗脱谱图(色谱图)。f)t。及其测定过程。g)保留时间数据和从文献中引用的用于计算的参比物的lgPow值。h)拟合回归直线(lgk对1gPo)的详细信息和相关系数，包括置信区间。5i)保留时间平均值数据和受试物内插lgP。值。6(资料性)推荐的参比物本文件推荐的参比物见表A.1。表A.1推荐的参比物参比物(中文名)参比物(英文名)CAS号12-Butanone(Methylet234乙酰苯胺56789乙酰苯肉桂醇肉桂酸(反式)3.89(顺式)4.44(反式)苯7参比物(中文名)参比物(英文名)甲苯1-萘酚乙苯(苯乙烷)麝香草酚(百里酚)1,4-二氯苯蔡62,4-二硝基-6-仲丁基酚2,4-Dinitro-6-sec-b1,2,4-三氯苯菲荧蒽滴滴涕(DDT)8(资料性)Pa的计算方法B.1概述Pow的计算值通常用来：a)选择所采用的实验方法；b)使用本文件的方法时选择试验条件(参比物、甲醇-水混合洗脱液配比);c)检查由实验方法得到的数值的合理性；d)评估什么时候实验方法不能应用。B.2计算方法的原理计算方法是根据分子的理论片段原理。分子断裂成适当的亚结构后，已知这些亚结构可靠的lgP。w值。通过对片段值求和对分子内相互作用修正后得到1gPow。B.3计算值的可靠性通常，随着对化学物质研究复杂性的增加，其计算方法的可靠性将随之降低。对低分子量并只有一个或两个功能团的简单分子，用片段法和实测法得到的结果偏差在0.1lgPo～0.31gPow之间。误差幅度取决于所用片段常数的可靠性、识别分子内相互作用的能力(如氢键)和修正项的正确应用。对于可解离的化学物质，应考虑电荷和解离度带来的影响。最先由Fujita等人引入的疏水性取代基常数π定义按公式(B.1)计算：式中："X——疏水性取代基常数修正后的分配系数以10为底的对数；lgPow——分配系数以10为底的对数；lgPo(PhX)——芳香族化合物衍生物的分配系数以10为底的对数；lgPo(PhH)———母体化合物的分配系数以10为底的对数。π法主要针对芳香族化合物。式中：lgPow——分配系数以10为底的对数；a;——分子中给定片段的数目；f;——第i个片段的lgPo的贡献值；A;——相互作用项。相互作用项以一个单一常数Cm(又称万能常数)的整倍数表示。Cm和f;可由825个化学物9质的1054个实验Po值利用多重回归分析而确定。Hansch-Leo法按公式(B.3)进行计算：式中：lgPow——分配系数以10为底的对数；a;——相应的发生的频率；f;——第i个片段的1gPo的贡献值；b;—相应的发生的频率；F;——第j个修正项(因子)。原子和基团的片段值、修正项的表由试验和实验值Pow的误差推导而来，修正项划分为不同类型。d)联合方法。对于复杂分子1gPow的计算已有了改进，如果将分子分成较大的亚结构，而这些亚结构的lgPo值是可获得的(如从已有的测定数据),那么,片段(如杂环、蒽醌、偶氮苯)可用Fujita-Hansch-π法、Rekker法或Hansch-Leo法的片段常数来获取。B.4注意事项采用B.3的计算方法，需注意以下方面。a)当计算需要修正因子时，计算方法仅对部分或全部解离的化学物质适用。b)假设存在分子