核酸检测作业流程及管理办法

核酸检测作业流程及管理办法引言核酸检测作为疫情防控、传染病诊断及公共卫生事件处置的核心技术手段，其作业流程的规范性与管理体系的完善性，直接影响检测质量、生物安全及防控效能。本文结合临床实践与行业规范，系统梳理核酸检测全流程操作要点及管理要求，为医疗机构、第三方检测机构及基层防疫单位提供实操指引。一、核酸检测作业流程（一）采样前准备工作1.物资筹备依据检测任务量，提前准备采样耗材（咽/鼻拭子、采样管及保存液、条码标签）、防护装备（医用防护服、N95口罩、面屏、双层手套、鞋套）、消毒用品（75%酒精、含氯消毒剂）、信息登记设备（扫码枪、纸质登记表）等。所有物资需在有效期内，且经质量检测合格（如采样管无泄漏、保存液无浑浊）。2.人员培训组织采样人员、信息登记员、转运人员开展专项培训，内容涵盖：采样操作规范（如咽拭子采样的“扁桃体-咽后壁”擦拭手法、鼻拭子的“沿鼻道底部深入+旋转”动作）、个人防护穿脱流程（重点强化“脱防护服时避免污染内层衣物”）、应急处置（如受检者呕吐时的“立即停止采样+覆盖消毒+更换区域”流程）、信息登记准确性（确保受检者姓名、身份证号、采样时间与样本唯一码精准关联）。3.场地设置采样点需严格划分清洁区、半污染区、污染区，并设置医护通道与受检者通道（避免交叉感染）。清洁区用于存放物资、穿脱防护装备；半污染区为样本整理、暂存区；污染区为采样操作区。场地需通风良好，张贴“一米线”“采样流程”等标识，配备应急医疗箱（含晕车药、创可贴、抗过敏药）。（二）采样实施阶段1.人员组织受检者通过“线上预约+现场核验”或“现场登记”方式，凭身份证/健康码完成信息录入，生成唯一采样码。采样人员遵循“一人一管一消毒”原则，每采集1人后，用75%酒精擦拭采样台、更换手套（或对手套消毒），避免样本间交叉污染。2.采样操作规范咽拭子：受检者头后仰、张口发“啊”音，采样人员持拭子轻柔擦拭双侧咽扁桃体及咽后壁（避免触及舌部，减少呕吐反射），停留时间≥3秒，确保采集上皮细胞。鼻拭子：拭子沿鼻道底部缓缓深入1~1.5厘米，贴鼻腔内壁旋转≥3圈（幼儿可适当缩短深度，避免哭闹挣扎导致黏膜损伤）。采样后，将拭子折断（或旋入）采样管，旋紧盖子，贴好条码标签，放入生物安全袋。3.个人防护管理采样人员全程规范穿戴防护装备（防护服需覆盖全身、口罩无漏气、面屏无污渍）；受检者采样前30分钟避免进食、饮水、吸烟，采样时摘除口罩（仅露出口鼻），采样后立即佩戴，减少暴露风险。（三）样本转运环节1.转运箱准备使用生物安全转运箱，箱内放置冰排（或温控设备），确保样本在2~8℃环境下转运。转运前，对转运箱内外表面用含氯消毒剂（500mg/L）喷洒消毒，检查箱锁密封性。2.样本交接采样点与实验室专人交接，填写《样本转运交接单》，记录样本数量、编号、采集时间、转运时间、箱内温度等信息，双方签字确认。若转运过程中温度超出范围（如＞8℃或＜2℃），需立即采取补救措施（如更换冰排）并记录原因。3.转运时限普通样本应在采集后4小时内送达实验室；疑似阳性、急诊样本优先转运，确保“采样-检测”全流程≤6小时（特殊情况需延长时，需经上级主管部门批准）。（四）实验室检测流程1.样本接收实验室设专人接收样本，核对交接单与样本标签信息（如编号、采集时间、受检者信息），检查样本管是否泄漏、保存液是否足量。不符合要求的样本（如管盖松动、保存液浑浊）退回采样点，记录原因并要求重采。2.核酸提取与扩增在生物安全柜内进行样本开盖、核酸提取（严格遵循试剂说明书操作，避免气溶胶污染）。扩增阶段设置阴性对照、阳性对照、质控品，实时监控扩增曲线与Ct值（如阴性对照无扩增、阳性对照Ct值在试剂要求范围内），确保检测结果可靠。3.质量控制每日检测前，对核酸提取仪、PCR扩增仪进行校准（如检查温度准确性、孔间均一性）；定期参加国家级/省级室间质评，对检测偏差（如结果假阳性/假阴性）及时分析整改（如排查试剂失效、操作失误）。（五）结果报告与反馈1.结果审核检测人员对结果初步审核（确认曲线正常、对照有效），由上级检验师复核，确保“样本编号-受检者信息-检测结果”一一对应。2.报告发布通过官方平台（如健康码系统、检测机构公众号）或医疗机构内网发布结果，受检者凭采样码查询。阳性结果需立即电话通知受检者及属地疾控部门，同步启动流调溯源；阴性结果按规定时效（如≤24小时）发布，确保信息公开透明。3.异常处理若出现结果异常（如仪器故障、试剂污染），立即暂停检测，排查原因（如更换试剂、清洁设备），重新采集样本或复检，记录处理过程（如“2023年X月X日，因扩增仪故障导致5份样本复检，复检结果均为阴性”）。二、核酸检测管理办法（一）组织管理体系1.职责分工卫生健康部门：统筹核酸检测工作，制定政策、调配资源（如协调跨区域检测支援）。疾控中心：负责技术指导、质量监督、阳性样本溯源（如开展病毒基因测序）。医疗机构/第三方机构：承担采样、检测任务，确保流程合规（如每日上报检测数据）。社区/企事业单位：配合组织人员、维护秩序（如提前通知受检者采样时间、准备场所）。2.协同机制建立“卫健+疾控+医疗机构+社区”联动机制，如采样点物资短缺时，卫健部门2小时内协调应急物资；检测能力不足时，统筹区域内实验室资源（如调用移动PCR方舱），确保任务按时完成。（二）人员管理规范1.资质要求采样人员需具备执业医师/护士/检验技师资质，经生物安全培训并考核合格；检测人员需持临床检验资格证，熟悉PCR实验室操作规范（如“三区分离”“防气溶胶污染”）。2.培训考核定期组织人员参加理论培训（如《新冠病毒核酸检测技术规范》更新要点）和实操考核（如采样手法规范性、防护服穿脱流程）。考核不合格者暂停上岗，重新培训直至通过。3.健康管理采样、检测人员每日监测体温、健康状况，出现发热、呼吸道症状等及时报备，调离工作岗位（避免带病作业），待康复后经核酸检测阴性方可返岗。（三）物资管理要求1.采购储备建立物资采购台账，选择资质合规的供应商（如提供医疗器械注册证、质检报告）。根据检测量动态储备物资：采样管储备量为日均检测量的1.5倍，防护用品按“每人每日2套”标准储备，避免短缺或积压。2.使用监管物资使用实行“专人管理、按需领取、用后登记”，严禁浪费（如采样管重复使用）或挪用（如防护装备转作他用）。过期物资（如超过保质期的试剂）及时清理，记录销毁情况（如“2023年X月X日，销毁过期采样管XX支，由医疗废物处置公司转运”）。（四）质量管理体系1.室内质控实验室每日检测时设置阴阳性对照和质控品，绘制质控图（监控检测精度）；定期对设备进行维护（如清洁PCR扩增仪光学模块）、校准（如用标准品验证核酸提取仪回收率）。2.室间质评积极参加国家级、省级室间质评活动，对检测结果偏差（如与参考结果不符）及时分析整改（如优化提取试剂、调整扩增参数），持续提升检测能力。3.流程追溯建立样本全流程追溯系统，记录采样（人员、时间、地点）、转运（箱号、温度、交接人）、检测（仪器、试剂、操作者）、报告（审核人、发布时间）各环节信息，便于问题溯源和责任认定。（五）安全管理措施1.生物安全实验室严格分区（试剂准备区、样本制备区、扩增区），人员按流程操作（如“样本制备区仅存放样本相关物资”）；医疗废物（如采样拭子、废弃防护装备）按感染性废物处理，双层包装后由专业机构转运处置（禁止混入生活垃圾）。2.环境消毒采样点每日采样结束后，用含氯消毒剂（500mg/L）喷洒地面、擦拭物体表面（如采样台、门把手）；实验室每次检测后，对生物安全柜、工作台进行消毒（如紫外线照射30分钟），定期开展空气消毒（如过氧化氢雾化）。3.职业防护为工作人员购买职业暴露保险，制定暴露应急预案：如被样本污染皮肤/黏膜，立即用清水冲洗（黏膜需用生理盐水冲洗），报告并就医（必要时接种疫苗或使用抗病毒药物）。（六）信息管理规范1.数据安全受检者信息加密存储（如采用“哈希加密”处理身份证号），仅限授权人员访问；定期备份数据（如每日24时自动备份至云端），防止丢失。严禁泄露受检者隐私（如将检测结果截图转发无关人员），违反者依法追责。2.系统维护信息系统（如采样登记系统、结果发布平台）定期更新、漏洞修复，确保运行稳定。出现故障时，启动应急预案（如人工登记、临时发布纸质报告），避免信息延误。三、保障措施（一）应急响应机制制定核酸检测应急预案，针对样本泄漏、设备故障、突发疫情等情况，明确处置流程：样本泄漏：立即隔离污染区，用含氯消毒剂覆盖消毒，报告疾控部门，评估环境风险。设备故障：启用备用设备（如备用PCR扩增仪），联系厂家维修，记录故障时间与影响样本量。定期开展应急演练（如每季度1次），提升团队协作和处置能力。（二）监督考核机制卫生健康部门联合疾控中心，每月对采样点、实验室进行监督检查，重点检查：流程合规性（如采样手法、样本转运温度）；质量控制（如室内质控图、室间质评结果）；安全管理（如医疗废物处置、环境消毒记录）。对存在问题的单位下达整改通知书，限期整改；整改不力的，暂停检测资质（直至符合要求），并通报批评。（三）宣传培训机制1.公众宣传通过社区公告、短视频、公众号等渠道，宣传核酸采样注意事项（如“采样前30分钟不进食”“采样时配合张嘴”），提升受检者依从性，减少采样误差。2.人员培训建立常态化培训机制，邀请行业专家开展线上线下培训（如每月1次线上直播），分享最新检测技术、感控要求（如“奥密克戎变异株采样注意