T∕HBIQA 0003-2025 动物源性食品中52种β-内酰胺类药物残留量的测定 液相色谱-串联质谱法

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T/HBIQA河北省检验检疫学会团体标准T/HBIQA0003—202552β液相色谱-串联质谱法Determinationof52β-LactamresiduesinanimalderivedfoodsLiquidchromatography-tandemmassspectrometry2025-11-13发布 2026-01-01实施河北省检验检疫学会发布T/HBIQA0003—2025T/HBIQA0003—2025前 言本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利，本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由河北省检验检疫学会提出并归口。本文件起草单位：石家庄市疾病预防控制中心、河北医科大学。本文件主要起草人：王可、李璐、赵伟、连靠奇、李思思、强春钰、马玲、郭爱静、邢骞文、夏翠。T/HBIQA0003—2025T/HBIQA0003—2025PAGEPAGE152β-液相色谱-串联质谱法范围本文件规定了动物源性食品中52种β-内酰胺类药物残留量检测的制样和液相色谱-串联质谱测定方法。G52种β（GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法本文件没有需要界定的术语和定义。原理试样中的β-内酰胺类药物用乙腈-水溶液提取，提取液经分散固相萃取净化，氮吹浓缩后用乙腈-0.1%甲酸水溶液复溶，液相色谱-串联质谱测定，基质外标法定量。试剂除另有规定外，试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。乙腈（CH3CN）甲酸（CH2O2）0.1%1.0mL1000mL5.2.2 0.1%（1:1,v/v）50mL0.1%（5.2.1）50mL5.2.3 乙腈-0.1%（1:9,v/v）10mL90mL0.1%（5.2.1）乙腈-（2:1,v/v）25mL50mL。乙腈-（3:1,v/v）25mL75mL。标准品β92.2%A表A.1。（100μg/mL）52β-（5.3）10mg（0.1mg）于100mL棕色容量瓶中，用乙腈-水溶液（5.2.4）溶解并定容至刻度，-18℃避光保存。（10.1010mL棕色-（5.2.4）8.18.2（5.4.2）（5.4.3）0.5μg/L2μg/L5μg/L10μg/L20μg/L50μg/L100μg/L材料（C18）：40µm~60µm。0.22µm。-（ESI）10000r/min。6.6 0.01g0.00001。样品经粉碎、均质后置入样品瓶中，密封，并做上标记。-18℃下保存。提取称取1.00g（精确至0.01g）试样于50mL离心管中，加入12mL乙腈-水溶液（5.2.5），2000r/min涡旋振荡3min，在4℃下以10000r/min离心5min，转移上清液9mL至15mL离心管中，待净化。净化将0.3gC1（5.59L5L14下10000n56mL40℃1mL-0.1%0.22μm--C18（150mm×2.1mm，3.5µm）A0.4%B1；0.5mL/min；d)40；e)进样量：5µL。表1 梯度脱件时间（min）A（%）B（%）0.09643.59643.69557.59557.692810.592810.6881212.5881212.6841614.5841614.6821820.5821820.6208021.5208021.696424.0964（ESI+）；（MRM）；其他参考质谱条件见附录A中的表A.1。-ββ偏差为±40%。8.3.18.3.2-52β-B。取空白试样，除不加标准溶液外，采用与试样相同的测定步骤进行平行操作。试样中β-内酰胺类药物的残留量按标准曲线或公式（1）计算：式中：

X=A×Cs×V1×1000As×V2×m×1000

…………（1）X——试样中被测物残留量的数值，单位为微克每千克（μg/kg）；A——试样溶液中被测物的峰面积；Cs——标准溶液中被测物浓度的数值，单位为纳克每毫升（ng/mL）；V1——提取液总体积的数值，单位为毫升（mL）；As——标准溶液中被测物的峰面积；V2——用于氮吹的上清液体积，单位为毫升（mL）；m——试样质量的数值，单位为克（g）。灵敏度2.58.0µg/kg，1.5µg/kg5.0µg/kg47β-内酰胺类药物的检出限为1.0µg/kg，定量限为3.0µg/kg。准确度本方法对鸡肉、鸡蛋、牛奶和鱼肉及其制品中头孢丙烯在8.0µg/kg~50.0µg/kg添加浓度的回收率为80%~100%。本方法对鸡肉、鸡蛋、牛奶和鱼肉及其制品中头孢替安、头孢拉定、双氯西林和氟氯西林在5.0µg/kg~50.0µg/kg添加浓度的回收率为75%~110%。47种β-3.0µg/kg~50.0µg/kg添70%~115%。精密度本方法相对标准偏差≤20%。T/HBIQA0003—2025T/HBIQA0003—2025PAGEPAGE10附 录 A（资料性）参考质谱条件参考质谱条件1)：5500V；550℃；50psi；40psi；55psi。表A.152种β-内酰胺类药物的英文名称、CAS号、参考保留时间、监测离子对、去簇电压和碰撞能中文名称英文名称CAS号保留时间（min）离子对（m/z）去簇电压（V）碰撞能（eV）比阿培南Biapenem120410-24-41.40351.1/110.1*22.777.9351.1/170.128.082.1头孢替安Cefotiam61622-34-21.76526.3/174.3*20.977.8526.3/353.017.169.1阿莫西林Amoxicillin26787-78-02.48366.2/114.1*26.575.14366.2/208.217.465.8头孢吡肟Cefepime88040-23-72.64481.3/396.0*16.7120.1481.3/86.018.1118.1多尼培南Doripenem148016-81-32.63421.1/274.2*23.494.0421.1/342.220.697.0头孢唑兰Cefozopran113359-04-93.90516.1/120.2*19.871.0516.1/251.126.869.2头孢布烯Ceftibuten97519-39-64.84411.1/268.1*20.290.1411.1/211.123.193.2阿扑西林Aspoxicillin63358-49-64.95494.3/250.0*25.4105.0494.3/349.124.8109.3头孢匹林Cefapirin24356-60-35.94424.2/291.9*20.477.8424.2/152.130.777.9头孢他啶Ceftazidime72558-82-86.77547.2/468.0*17.275.9547.2/396.224.187.8美罗培南Meropenem96036-03-27.11384.1/141.0*21.080.8384.1/340.215.677.0头孢地尼Cefdinir91832-40-57.10396.2/226.9*20.258.0396.2/125.838.289.01)AABSCIEX5500中文名称英文名称CAS号保留时间（min）离子对（m/z）去簇电压（V）碰撞能（eV）氨苄西林Ampicillin69-53-47.20350.1/106.1*24.050.2350.1/159.718.051.1头孢氨苄Cephalexin15686-71-27.23348.2/157.8*14.879.0348.2/106.242.070.8头孢匹罗Cefpirome84957-29-97.24515.3/396.0*17.4128.4515.3/120.319.989.6头孢唑肟Ceftizoxime68401-81-07.43384.0/227.2*27.180.2384.0/126.042.2102.2头孢拉定Cefradine38821-53-38.52350.1/176.1*16.268.0350.1/108.331.063.9西司他丁Cilastatin82009-34-59.44359.1/97.0*32.995.0359.1/202.020.679.8头孢他美Cefetamet65052-63-39.61398.1/241.1*20.579.2398.1/126.138.176.6头孢克肟Cefixime79350-37-110.29454.3/285.0*21.283.2454.3/210.226.0123.0美西林Mecillinam32887-01-710.51326.1/167.2*30.598.2326.1/139.339.9111.3头孢噻肟Cefotaxime63527-52-610.73456.0/396.0*15.383.9456.0/324.119.897.8头孢特仑新戊酯Cefterampivoxil82547-58-810.74480.2/396.2*19.289.8480.2/324.223.180.1头孢曲松Ceftriaxone73384-59-510.96555.1/396.1*18.782.6555.1/166.934.279.4法罗培南Faropenem106560-14-911.82308.0/178.2*23.385.9308.0/222.117.070.0头孢甲肟Cefmenoxime65085-01-011.72512.2/324.0*23.890.1512.2/167.131.584.6头孢丙烯Cefprozil92665-29-712.13390.3/208.0*13.940.1390.3/183.611.340.0头孢呋辛Cefuroxime55268-75-212.49442.2/364.1*14.155.1442.2/336.219.359.2头孢唑啉Cefazolin27164-46-112.70455.2/323.4*15.465.0455.2/295.138.9178.0头孢硫脒Cefathiamidine33075-00-213.79473.3/201.1*30.6149.2473.3/275.326.7148.1头孢地嗪Cefodizime69739-16-814.66585.2/396.1*20.866.4585.2/166.936.7100.0中文名称英文名称CAS号保留时间（min）离子对（m/z）去簇电压（V）碰撞能（eV）替卡西林Ticarcillin34787-01-414.97385.1/160.1*20.698.0385.1/114.247.196.0头孢匹胺Cefpiramide70797-11-415.45613.1/257.3*37.7130.1613.1/285.125.3129.9头孢孟多钠Cefamandolesodium30034-03-815.70463.1/347.0*12.9129.2463.1/158.023.7130.3羧苄西林Carbenicillin4697-36-316.48379.3/160.2*24.0117.9379.3/220.118.9109.0头孢哌酮Cefoperazone62893-19-017.74646.3/290.3*30.8151.0646.3/142.943.1136.4头孢噻呋Ceftiofur80370-57-618.85524.1/241.0*24.6112.0524.1/210.130.3120.0头孢泊肟酯Cefpodoximeproxetil87239-81-419.47558.2/410.1*22.8105.1558.2/428.122.277.9头孢他美酯Cefetametpivoxil65243-33-619.47512.2/241.1*24.295.9512.2/398.127.2109.9苯唑西林Oxacillin1173-88-219.47402.3/160.1*18.9101.9402.3/243.119.0126.1甲氧西林Methicillin61-32-519.48381.1/165.0*27.194.2381.1/222.123.377.2头孢呋辛酯Cefuroximeaxetil64544-07-619.48528.1/406.1*30.5120.3528.1/364.138.3130.4萘夫西林Nafcillin985-16-019.48415.2/199.1*19.2111.8415.2/255.930.2114.0青霉素ⅤPenicillinV87-08-119.48351.1/160.1*16.081.3351.1/114.246.076.9美洛西林Mezlocillin51481-65-319.49540.3/296.2*27.0130.0540.3/324.018.4118.2青霉素GPenicillinG61-33-619.49335.1/159.9*16.074.1335.1/175.919.181.0阿洛西林Azlocill