检验科血常规操作规范培训指南

演讲人：日期:检验科血常规操作规范培训指南目录CATALOGUE01血常规基础理论02标准化操作流程03质量控制要点04生物安全管理05结果审核与报告06常见问题处理PART01血常规基础理论检测项目临床意义用于评估贫血或红细胞增多症，反映机体携氧能力。RBC降低常见于缺铁性贫血、慢性炎症等，升高可能与脱水、真性红细胞增多症相关；Hb是贫血诊断的核心指标，其变化趋势可指导治疗疗效监测。红细胞计数（RBC）与血红蛋白（Hb）WBC升高提示细菌感染、炎症或血液系统疾病（如白血病），降低可能与病毒感染、放射损伤或药物抑制有关。中性粒细胞比例增加常见于急性感染，淋巴细胞增多可见于病毒感染或结核病。白细胞计数（WBC）及分类计数PLT减少可能导致出血倾向（如免疫性血小板减少症、再生障碍性贫血），增多可能与骨髓增殖性疾病、缺铁性贫血或术后反应相关，需结合其他指标综合判断。血小板计数（PLT）通过血细胞通过微孔时产生的电阻变化计数细胞数量并区分体积，广泛应用于红细胞、血小板及白细胞总数的检测，但无法精确区分白细胞亚型。检测原理与方法学电阻抗法（库尔特原理）利用激光散射和荧光标记分析细胞内部结构（如核酸含量），实现白细胞五分类（中性粒、淋巴、单核、嗜酸/碱粒细胞），提高异常细胞检出率。流式细胞术结合荧光染色溶血后血红蛋白与试剂反应生成稳定化合物，通过比色法测定浓度，需定期校准以规避试剂变异导致的误差。血红蛋白测定（氰化高铁法）03标本类型与要求02末梢血（毛细血管采血）适用于婴幼儿或特殊人群，但易受挤压导致组织液稀释或血小板活化，结果稳定性低于静脉血，需注明采血部位并优先检测。标本储存与运输室温保存不超过4小时，冷藏（4℃）可延长至24小时但可能影响血小板计数；运输需避免剧烈震荡，防止溶血或细胞破碎影响结果准确性。01静脉血（EDTA抗凝）为血常规检测的金标准标本，要求采血后轻柔颠倒混匀8-10次，避免凝血或血小板聚集，2小时内完成检测以减少细胞形态变化。PART02标准化操作流程检测前样本准备严格遵循无菌操作原则，使用EDTA抗凝真空采血管采集静脉血，确保采血量符合要求（2-3mL）。采集后立即轻柔颠倒混匀8-10次，避免凝血或溶血，并在试管上清晰标注患者姓名、ID号及采集时间。样本采集与标识采集后样本需在4小时内送检，运输过程中避免剧烈震荡或极端温度。若需暂存，应置于18-25℃环境，避免冷藏或冷冻导致细胞形态改变。样本运输与保存接收样本时需检查是否溶血、脂血或凝块，若有异常需记录并联系临床重新采集。同时核对申请单信息与样本标识是否一致，避免张冠李戴。样本质量评估仪器准备与校准每日开机后执行自动冲洗和背景检测，确保本底计数合格。定期进行仪器校准（如每月一次），使用配套校准品验证WBC、RBC、HGB等参数的准确性，偏差需控制在±3%以内。上机检测规范步骤样本检测操作混匀样本后轻柔吸样，避免气泡产生。上机时选择自动进样模式或手动模式（需注意吸样深度），监测仪器报警信息（如Clog、Turbidity等），异常时需按规程处理。质控品检测每批次检测前、中、后均需运行三个水平质控品（低、中、高值），结果在控方可签发报告。若失控需分析原因（如试剂、校准、维护问题）并记录纠正措施。自动复检规则设置对触发规则的样本进行血涂片染色镜检，评估细胞形态（如异型淋巴细胞、血小板聚集等），必要时采用不同方法学（如光学法PLT）验证结果。复检结果需与初检数据比对，差异显著时需复核校准或联系临床。人工复检流程复检记录与报告详细记录复检原因、方法及结果，报告单需标注“已复检”及复核者签名。若复检结果与初检不一致，需与临床沟通并建议动态监测或进一步检查。根据国际血液学复检指南（如ISLH-41规则），在LIS系统中预设触发条件（如WBC>30×10⁹/L、PLT<50×10⁹/L、HGB突变>20g/L等），仪器报警时自动提示复检。复检规则与执行PART03质量控制要点质控品选择与保存选用与检测系统匹配的质控品，严格遵循储存条件（如避光、低温），确保稳定性；开封后需标注启用时间并定期验证有效性。质控频次与规则每日检测前、中、后均需运行质控，采用Westgard多规则（如1₂₅、1₃₅）判断失控，记录偏差并分析原因。失控处理流程立即暂停样本检测，排查试剂、仪器、操作步骤等环节，纠正后重新运行质控直至结果在控，并填写失控报告存档。室内质控操作规范室间质评执行标准样本接收与检测收到质评样本后核对标识，按常规检测流程操作，禁止特殊处理或重复检测，确保结果反映真实水平。数据上报与审核对比同组实验室均值与标准差，识别系统性误差（如校准偏移），制定校准或人员复训等纠正措施。在规定时间内提交原始数据，由主管审核检测逻辑性（如红细胞与血红蛋白比值），异常值需附书面说明。结果分析与改进每日清洁与检查按厂商指南执行光电校准、流量校准，更换关键部件（如鞘液过滤器）后需进行性能验证。定期校准与验证故障应急处理建立常见报警代码应对预案（如堵孔、压力异常），备妥备用耗材，确保停机不超过4小时以保障报告时效性。使用专用清洁剂擦拭进样针、混匀模块，检查废液管路是否通畅，记录液路压力及本底计数异常。仪器日常维护流程PART04生物安全管理防护服穿戴标准操作前需检查防护服完整性，穿戴时确保覆盖全身皮肤，袖口及裤脚需扎紧，避免血液或体液渗透。高风险操作需加戴防水围裙及双层手套。口罩与护目镜选择根据操作风险等级选择N95口罩或外科口罩，护目镜需具备防雾功能且完全贴合面部。气溶胶产生操作必须使用全面罩式防护设备。手套更换频率每完成一项检测项目或接触不同患者样本后立即更换手套，破损或污染时需即刻更换。脱除手套时应采用内卷式方法避免外表面接触皮肤。个人防护装备使用医疗废物处理规范终末处理监控委托具有资质的处理机构时，需留存处理联单并定期审核处理效果。采用高温焚烧处理的需监测二噁英排放指标，确保符合环保标准。转运与暂存标准转运人员需持证上岗并使用专用密闭推车，暂存间应配备紫外线消毒装置和冷藏设施。废物交接需完整记录种类、重量及交接双方信息。分类收集要求锐器必须投入防穿刺专用容器，感染性废物使用双层黄色医疗垃圾袋密封，化学性废物需单独标识存放。容器装载量不得超过3/4容积。职业暴露应急流程锐器伤处置程序立即从近心端向远心端挤压伤口，流动水冲洗15分钟并用碘伏消毒。填写职业暴露登记表后24小时内完成HIV、HBV等血清学检测。预防性用药方案HBV暴露后未接种疫苗者需注射高效价免疫球蛋白，HIV暴露需在2小时内启动PEP治疗方案。所有用药需在感染科医师指导下完成28天疗程。黏膜暴露处理发生眼部暴露时使用洗眼器持续冲洗10分钟，口腔暴露需用生理盐水反复漱口。所有黏膜暴露均需评估暴露源感染风险等级。PART05结果审核与报告结果异常判断标准白细胞（WBC）计数异常低于3.5×10⁹/L提示白细胞减少症，高于11×10⁹/L可能为感染、炎症或血液系统疾病，需结合中性粒细胞、淋巴细胞比例进一步分析。血小板（PLT）异常范围低于100×10⁹/L需警惕出血风险，高于450×10⁹/L可能为反应性血小板增多或骨髓增殖性疾病，需排除假性升高因素。血红蛋白（HGB）异常阈值成年男性低于120g/L或高于180g/L，成年女性低于110g/L或高于160g/L，需结合临床病史判断贫血、脱水或真性红细胞增多症等可能。危急值报告制度包括血红蛋白低于60g/L或高于200g/L、白细胞低于1.0×10⁹/L或高于50×10⁹/L、血小板低于20×10⁹/L或高于1000×10⁹/L等，需立即复核并通知临床。危急值项目清单发现危急值后，操作人员需双人复核结果，记录复核时间及人员信息，并通过电话或信息系统10分钟内通知主治医师，留存沟通记录。报告流程规范化要求临床科室签署危急值接收确认单，并追踪患者后续处理情况，确保闭环管理，避免漏诊或延误治疗。临床反馈追踪报告单审核签发三级审核机制初级检验人员完成初检后，由资深技师进行技术审核，最终由授权签字人签发报告，确保结果准确性。异常结果标注规则对超出参考范围的指标需标注箭头（↑/↓）并附简要注释，如“建议结合铁代谢检查”或“需排除感染可能”。报告格式标准化统一使用实验室信息管理系统（LIS）生成报告单，包含患者信息、样本类型、检测方法、参考区间及审核人员电子签名，避免手写误差。PART06常见问题处理干扰因素识别排除样本溶血干扰溶血会导致红细胞计数偏低、血红蛋白假性升高，需通过观察样本颜色和离心后上清液状态进行判断，必要时重新采集样本。脂血或黄疸干扰高脂血症或胆红素异常可能影响光学法检测结果，可通过稀释样本或采用替代检测方法（如血红蛋白氰化法）减少误差。冷凝集现象低温环境下红细胞可能自发凝集，导致计数异常，需将样本置于37℃水浴箱中复温后重新检测，并记录处理过程。血小板聚集干扰EDTA依赖性血小板聚集会造成假性血小板减少，可通过更换抗凝剂（如枸橼酸钠）或手工计数法复核结果。仪器报警处理方案立即执行仪器自动冲洗程序，若无效则手动使用酶清洗液浸泡检测小孔，检查样本是否存在纤维蛋白或微小凝块。堵孔报警处理核实试剂瓶条码有效期及剩余量，更换新批次试剂后执行定标和质控程序，确保检测系统稳定性。试剂不足或过期报警检查负压管路是否漏气或堵塞，校准液路系统压力传感器，必要时联系工程师进行气压模块维护。压力异常报警010302结合散点图或直方图分析异常细胞群，启动复检规则（如镜检确认幼稚细胞或异型淋巴细胞）。结果异常标记（Flag）处理04定期审核操作手册，根据最新行业指南（如CLSI标准）更新样本采集