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文档简介
《达乌里秦艽种苗质量分级》编制说明一、工作简况(一)立项情况2025年10月内蒙古蒙草草业科技有限公司向内蒙古标准化协会提出《达乌里秦艽种苗质量分级》团体标准立项申号批准《达乌里秦艽种苗质量分级》立项。(二)提出单位:内蒙古蒙草草业科技有限公司(三)归口单位:内蒙古标准化协会内蒙古蒙草草业科技有限公司、内蒙古农业大学、武川县汇德兴业林业生态开发有限公司、蒙草生态环境(集团)股份有限公司、内蒙古亿赫本草生物科技有限公司、赤峰市阿鲁科尔沁旗农牧局。(五)起草人:高若凡、高守舆、张跃华、花梅、孟兴业、王俊杰、赵冬莲、乌英嘎、刘雅楠、田振东、雷瀚、段嘉蕾、李晓杰、张晓明。二、制定标准的目的和意义种苗是中药材生产的最基本、最重要的生产资料。中药材种苗质量的稳定与否直接影响药材的质量稳定性。其中,种苗质量标准化是实现中药材生产规范化很重要的一方面。达乌里秦艽GentianadahuricaFischer.又称小秦艽、达版《中国药典》,达乌里秦艽与大叶秦艽、粗茎秦艽、麻花秦艽均是药材秦艽的基原植物,是我国常用大宗中药材之一,也是蒙药的重要药材之一,距今己有两千多年的栽培历史。达乌里秦艽喜凉爽、湿润气候,耐寒,在内蒙古、甘肃、四川、陕西、宁夏、山西、青海、新疆、西藏及河北等省(区)等地均有分布。生于海拔800~4500m的草原、山地草甸、灌木丛、山坡林下或草丛中。经预测,达乌里龙胆在内蒙古的生态适宜产区面积最大。随着达乌里秦艽的药效物质基础成分研究不断深入,目前报道从达乌里秦艽的根和花中分离得到的化合物成分已达40多种。其中中药以其干燥根入药,具有清热阵痛、祛风湿等功效。蒙药以其花入药,在清热、解毒、止咳、镇痛等方面具有良好的药理作用,主治咽喉肿痛、瘟热、肺热咳嗽等症。目前大叶秦艽、粗茎秦艽和麻花秦艽的人工繁育和栽培技术已趋于成熟,甘肃、陕西、云南、四川、青海、吉林等地均有栽培技术的研究报告,并形成了相应的地方标准进行推广。甘肃省培育了大叶秦艽新品种并制定了种子繁育、育苗、栽培的地方标准,青海省建立了秦艽的SOP生产技术规程和麻花秦艽的仿生栽培技术标准,云南省主要发布了粗茎秦艽的栽培技术规程。目前,达乌里秦艽技术已有部分报道,也实现了小面积扩繁,山西省研究机构开展了达乌里秦艽野生变家种技术、加工技术的研究,内蒙古自治区中医药研究所对达乌里秦艽的育苗移栽、野生抚育技术开展了比较系统的研究。但目前对种苗质量分级尚无标准规范,这不仅不利于达乌里秦艽药材的规范化生产,还可能影响其产量和质量。本研究在对内蒙古呼和浩特市武川县产区1~6年龄及以上生达乌里秦艽种苗的调查与测定基础上,采用主成分分析和K-中心点聚类分析结合生产实际情况制定达乌里秦艽种苗质量分级标准,使其应用于生产,规范中药材达乌里秦艽的生产过程,提高产量,增加农民收入有积极意义,为达乌里秦艽种苗的标准化、规范化及产业化进程奠定基础。三、编制过程(一)分工情况内蒙古蒙草草业科技有限公司接到立项批准后,组建了专门工作组,明确了负责人和业务能力强、工作责任心强的参编人员组成课题组。由项目负责人张跃华牵头,主要参加人员高若凡、高守舆、花梅、孟兴业、王俊杰等负责指标验证及标准技术内容编制,开展起草标准基础稿的工作。助理工程师高守舆内蒙古蒙草草业科技有限公司赵冬莲工程师(二)起草阶段项目组于2024年5月开始开展人工种植达乌里秦艽示范基地40余亩,结合大田人工移栽、种植相关经验,并对达乌里秦艽科学研究进展进行充分的文献资料查阅,为本标准框架设计和关键参数的确定提供依据。同时,拟定达乌里秦艽种苗质量分级试验取样方案,并于2025年在呼和浩特市武川县哈乐镇开展各年龄达乌里秦艽种苗的取样、指标测定等工作,对达乌里秦艽进行了多方面的数据收集、整理、分析和验证。依据数据分析处理结果,并按照内蒙古标准化协会团体标准的编制要求,2025年10月由内蒙古蒙草草业科技有限公司及协作起草单位内蒙古农业大学、武川县汇德兴业林业生态开发有限公司、蒙草生态环境(集团)股份有限公司、内蒙古亿赫本草生物科技有限公司、赤峰市阿鲁科尔沁旗农牧局提出《达乌里秦艽种苗质量分级》团体标准制定申请,编写形成标准草案,报送内蒙古标准化协会,立项评审会通过立项。(三)征求意见阶段2025年11月,编制单位按照立项审查的意见进行了修改,形成了《达乌里秦艽种苗质量分级》征求意见稿,报送内蒙古标准化协会进行网上公示征求意见。2025年X月,编制组征求了相关领域内XXX、XXX、XXX等X家单位的X位专家的意见和建议。编制组按照专家们的意见,对标准征求意见稿进行了进一步修改。编制组共收到X条修改意见,其中X条予以采纳,X条未采纳,完成征求意见稿的修改,形成送审稿。(五)报批阶段乌里秦艽种苗质量分级》地方标准审查会,审查委员会听取标准起草组介绍标准编制说明,对标准文本逐条审查,并形成会议纪要。工作组认真听取审查意见,仔细整理会议纪要和修改意见,完善送审材料,形成报批稿,报送内蒙古标准化协会审批发布。四、制定标准的原则和依据,与现行法律、法规、标准的关系(一)原则和依据(1)科学性原则本标准的制定是在查阅相关文献并进行大量试验研究和数据分析的基础上完成,给出具体指标和测试方法,列举了所需数据及其来源,确保评估结果的先进性、实用性、可靠性和科学性。(2)实用性原则本标准的制定充分考虑了达乌里秦艽种苗分级定级的可操作性,注重每项检验指标的针对性,力求生产检验部门使用本标准的实用性,便于推广应用。(3)先进性原则本标准的制定充分研究了达乌里秦艽种苗生产现状和技术水平的发展趋势,积极应用现代技术,注重种苗分级标准指标验证的先进性,力求标准具有前瞻性。2、编制依据本标准严格依据GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。本标准编制遵循“科学性、先进性、统一性、经济性、适用性、先进性、协调一致性和规范性”的原则,在广泛调查研究的基础上,通过大量试验及数据分析研究,结合我区达乌里秦艽生产实际情况,并参照国内相关标准制定了本标本文件所有内容应符合强制性国家标准、行业标准与地方标准,若与其相抵触时,以国家标准、行业标准为准,参考和引用的标准已作为规范性引和文件列入本“规范”文(二)与现行法律、法规、标准的关系本标准制定符合《中华人民共和国标准化法》《地方标准管理办法》等相关法律、法规、政策的规定,属于内蒙古地区首次提出制定,不存在与相关法律法规相抵触之处,也不与其他标准相冲突。五、主要条款的说明,主要技术指标、参数、试验验证的论述(一)主要条款说明2.规范性引用文件3.术语和定义4.质量分级5.检验方法6.评定方法(二)主要技术指标、参数、试验论证的论述(1)主要技术指标、参数本标准规定了达乌里秦艽种苗的术语和定义、质量分级、检验方法、评定方法。本标准适用于内蒙古自治区达乌里秦艽种苗生产及质量检验。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1达乌里秦艽GentianadahuricaFischer.又名小秦艽、达乌里龙胆,在植物分类学上归属于龙胆科(Gentianaceae)龙胆属(Gentiana),是一种多年生草本植物,其药用部位为干燥根茎。3.2种苗Seedling可用于大田移栽的活体植株。3.3芦头Rhizome指达乌里秦艽植株的根茎部,是连接地上部分叶片与地下部分根系的过渡性器官。3.4侧根LateralRoot从达乌里秦艽主根上发生的二级分支根。4质量分级4.1质量分级要求:种苗须形态完整、颜色正常、无机械损伤、无腐烂病斑。4.2质量分级标准:依据达乌里龙胆主根长、主根粗、侧根数进行分级。5检验方法5.1主根长检测取100~200根种苗,用钢直尺或卷尺对种苗芦头以下主根的长度进行测量(精确至小数点后一位记录数据并计算平均值,组间最大允许误差为±5%。5.2主根粗检测取100~200根种苗,用游标卡对芦头以下主根的最大直径进行测量(精确至小数点后两位记录数据并计算平均值,组间最大允许误差为±5%。5.3侧根数检测取100~200根种苗,用目测的方法对侧根数进行测量计数,计算平均值,组间最大允许误差为±5%。6评定方法按4.2质量分级标准进行判定,当任意一项指标值低于该等级标准时,则应判定为下一级别种苗。(2)试验论证达乌里秦艽种质来源于内蒙古呼和浩特市武川县哈乐镇汇德兴业林业生态开发有限公司种植基地(111.76°E,分别采取1~6年及以上生的达乌里秦艽种苗。取达乌里秦艽地上部及50cm土层以内的根系。每个年份采用随机选取样法选取30株,使用游标卡尺分别测定株高、根茎、主根长和主根粗四项指标。参照张磊(张磊.黄花苜蓿的抗寒性评价与指标筛选[D].新疆农业大学,2022.)方法计算侧根数后,剪下地上部及芦头,用清水冲净残留泥土,并用吸水纸吸干水分,称取鲜重。分别将地上、地下根系部分装入烘干后牛皮纸袋中,至于烘箱105℃中杀青,65℃烘至恒量后,用电子天平分别称取地上、地下干重(精确至0.01g)并记录数据。1.3种苗质量分级:使用Excel进行数据统计,使用SPSS26.00进行主成分分析和K-中心点聚类分析,结合生产实际情况,对聚类分析结果制定分级标准,使用Orgin2021进行绘图。1.4种苗成活率及药用成分测定将不同分级的达乌里秦艽种苗移栽至呼和浩特市新城区蒙草种业中心研发百草园资源圃(111.78°E,40.90°N,海拔1100m于移栽后60d检测种苗成活率。采取不同等级达乌里秦艽种苗新鲜样品送至公司进行代谢物测序。参考宝钢、李彩峰及《中华人民共和国药典》中对达乌里秦艽药用成分的鉴定(宝钢,图诺木拉,朝格巴达拉夫,等.龙胆属秦艽组植物化学成分及药理作用研究进展[J].中成药,2024,46(08):2689-2697;李彩峰,李旻辉,朱翔慧,等.内蒙古地区达乌里秦艽资源分布及化学成分研究进展[J].内蒙古中医药,2019,38(01):106-107国家药典委员会.中华人民共和国药典:四部[S].北京:中国医药科技出版,2020:282.)。取得数据后,对代谢组数据进行均一化处理后,汇总并进行方差分析。2结果与分析2.1种苗农艺性状统计分析对小秦艽主根长和主根粗等八项指标进行统计分析。结果发现,地上部鲜重变异系数最大变化最大,为110.07%。其次为地下部鲜重、地上部干重、地下部干重、主根粗、测根数、株高和主根长,分别为109.89%、96.03%、79.25%、53.56%、50.99%、31.28%和31.20%。株高变异系数最小,为31.28%,地上部鲜重变异系数最大变化最大,为110.07%。这表明不同生长年龄小秦艽地上部变化较大。以上结果表明小秦艽种苗的各项指标差异显著。指标Indexes最小值Minimum最大值Maximum平均值±标准差Mean±SD变异系数Coefficientofvariation(%)主根长Mainrootlength(cm)5.62714.20±45931.29主根粗Mainroot4.99±2.7254.51thickness(mm)地下部鲜重Undergroundfreshweight(g)地上部鲜重0.319.741.65±1.81109.89Freshweightaboveground(g)0.238.641.83±2.02地下部干重Undergrounddryweight(g)0.112.580.69±0.5579.25地上部干重Dryweightaboveground(g)0.083.630.74±0.7196.03侧根数Numberoflateralroots5.0021.0010.19±4.2541.68株高2.228.51±2.6631.282.2种苗农艺性状主成分分析达乌里秦艽种苗等级的评价是不同组织、多种性状协调后的综合表现,单项指标不能精准的作为评价种苗等级的评价依据。因此对达乌里秦艽的8项指标进行主成分分析(图(Kaiser-Meyer-Olkin,KMO)检验值为0.650,八个指标间相关性较强,符合主成分分析要求。PC1与PC2累计方差贡献率为77.6,这表明PC1和PC2可对八个指标进行解释,建立主成分表达式为:PC1=0.284*主根长(cm)+0.310*主根粗(mm)+0.469*根鲜重(g)+0.446*地上部鲜重(g)+0.426*侧根数+0.472*株高(cm)PC2=0.540*主根长(cm)+0.518*主根粗(mm)-0.338*根鲜重(g)-0.328*地上部鲜重(g)+0.336*侧根数-0.324*株高(cm)从PC1和PC2可以看出,八个指标的系数有一定差异,这表明6个指标在质量评价中的贡献率不同。计算特征向量和权重后发现,权重前三指标分别为主根长、主根粗和侧根数。因此,本研究选择主根长、主根粗和侧根数作为达乌里秦艽种苗质量的关键评价指标。指标Parameter第一主成分Principalcomponent1第二主成分Principalcomponent2权重影响顺序WeightanalysiInfluenceorder特征向量Eigenvectors载荷Loadingmatri特征向量Eigenvectors载荷Loadingmatri主根长Mainrootlength0.2840.5100.5410.79224.103主根粗Mainrootthickness0.3100.5560.5180.75924.481地下部鲜重Undergroundfreshweight地上部鲜重0.4690.841-0.338-0.4959.095Freshweightaboveground侧根数0.4460.800-0.328-0.4818.476Numberoflateral0.4260.7650.3360.49324.312roots株高Plantheight0.4720.848-0.324-0.4759.564图1各指标主成分分析2.3种苗K-中心点聚类分析采用SPSS软件对上述结果进行K聚类分析,对数据进行分类,得到5个聚类中心所占比例分别为3.56%、32.36%、指标Indexes聚类分级Clustercente12345主根长Mainrootlength主根粗4.939.287.18Mainrootthickness6.634.783.03侧根数Numberoflateralroots3.359.276.444.47百分比percentage(%)9.5632.3625.71对主根长、主根粗和侧根数进行聚类方差分析。结果表明,达乌里秦艽主根长、主根粗和侧根数的聚类间距差异均达到极显著水平(p<0.01表4说明此三项指标适合作为达乌里秦艽种苗质量等级划分的指标。指标Indexes聚类Cluster误差ErrorFSig.均方Meansquaredf均方Meansquaredf主根长Mainrootlength(cm)715.2074518.2180主根粗Mainrootthickness(mm)252.68240.456553.7670侧根数Numberoflateralroots625.44140.965647.87402.4标准的制定据最终聚类中心值和方差分析结果,结合达乌里秦艽生产实际,制定两种达乌里秦艽种苗质量等级划分标准。2.4.1不区分苗龄种苗质量分级标准不区分种苗苗龄,依据达乌里秦艽主根长、主根粗、侧根数对达乌里秦艽种苗进行质量分级(表5)。级别Grade主根长Mainrootlength(cm)主根粗Mainrootthickness(mm)侧根数Numberoflateralroots特级苗Extragradeseed≥20.2一级苗Firstgradeseed16.9~20.16.10~8.81二级苗Secondgradeseed3.82~6.09三级苗Thirdgradeseed9.8~16.72.47~3.816~8等级外苗Extra-gradeseed<9.8<2.47<62.4.1区分苗龄种苗质量分级标准区分种苗苗龄,按照苗龄一至六年龄及以上种苗并依据达乌里秦艽主根长、主根粗、侧根数对达乌里秦艽种苗进行级别Grade主根长Mainrootlength(cm)主根粗Mainrootthickness(mm)侧根数Numberoflateralroots特级苗Extragradeseed≥12.8一级苗Firstgradeseed9.4~12.72.26~2.475~6二级苗Secondgradeseed7.2~9.31.94~2.254~5级别Grade主根长Mainrootlength(cm)主根粗Mainrootthickness(mm)侧根数Numberoflateralroots三级苗Thirdgradeseed6.4~7.13~4等级外苗Extra-gradeseed<6.3<1.62<3级别Grade主根长Mainrootlength(cm)主根粗Mainrootthickness(mm)侧根数Numberoflateralroots特级苗Extragradeseed≥13.6一级苗Firstgradeseed3.21~3.45二级苗Secondgradeseed9.8~12.73.04~3.207~8三级苗Thirdgradeseed7.2~9.72.66~3.035~6等级外苗Extra-gradeseed<7.2<2.66<5级别Grade主根长Mainrootlength(cm)主根粗Mainrootthickness(mm)侧根数Numberoflateralroots特级苗Extragradeseed≥16.9一级苗Firstgradeseed3.62~4.54二级苗3.26~3.618~9级别Grade主根长Mainrootlength(cm)主根粗Mainrootthickness(mm)侧根数NumberoflateralrootsSecondgradeseed三级苗Thirdgradeseed3.11~3.256~7等级外苗Extra-gradeseed<8.40<3.11<6级别Grade主根长Mainrootlength(cm)主根粗Mainrootthickness(mm)侧根数Numberoflateralroots特级苗Extragradeseed≥18.7一级苗Firstgradeseed4.82~5.55二级苗Secondgradeseed4.30~4.81三级苗Thirdgradeseed3.28~4.297~8等级外苗Extra-gradeseed<13.80<3.28<7级别Grade主根长Mainrootlength(cm)主根粗Mainrootthickness(mm)侧根数Numberoflateralroots特级苗Extragradeseed≥19.6一级苗Firstgradeseed5.01~7.49二级苗3.93~5.00级别Grade主根长Mainrootlength(cm)主根粗Mainrootthickness(mm)侧根数NumberoflateralrootsSecondgradeseed三级苗Thirdgradeseed9.2~10.63.62~3.92等级外苗Extra-gradeseed<9.2<3.62<10级别Grade主根长Mainrootlength(cm)主根粗Mainrootthickness(mm)侧根数Numberoflateralroots特级苗Extragradeseed一级苗Firstgradeseed17.2~20.98.60~9.56二级苗Secondgradeseed6.39~8.59三级苗Thirdgradeseed5.58~6.38等级外苗Extra-gradeseed<12.4<5.58<102.5移栽成活率本研究制定的达乌里秦艽种苗分级标准中,所用各级种苗移栽成活率分别为76.92%、63.46%、59.04%、40.38%和即用此标准进行分级会明显影响种苗移栽成活率。级别Grade成活率/%特级苗Extragradeseed一级苗Firstgradeseed63.46±1.25b二级苗Secondgradeseed59.04±1.64c三级苗Thirdgradeseed40.38±0.56d等级外苗Extra-gradeseed31.7±0.92e注:不同小写字母表示在不同分级中差异显著(p<0.05下同。2.6药用成分对达乌里秦艽根系四大类17种药用成分进行
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