免疫学检验试题及答案

免疫学检验试题及答案一、单项选择题（每题2分，共40分）1.抗原抗体反应中，影响沉淀反应最主要的因素是（）A.温度B.离子强度C.抗原抗体的比例D.反应时间答案：C2.双抗体夹心法ELISA检测的抗原类型是（）A.半抗原B.小分子单价抗原C.大分子多价抗原D.变性抗原答案：C3.流式细胞术检测细胞表面标志物时，常用的荧光染料FITC的发射光波长约为（）A.488nmB.525nmC.633nmD.670nm答案：B4.免疫浊度法中，导致“钩状效应”的主要原因是（）A.抗原浓度过高B.抗体浓度过高C.缓冲液pH偏离等电点D.反应时间过短答案：A5.下列肿瘤标志物中，对原发性肝癌特异性较高的是（）A.CEAB.CA19-9C.AFPD.CA125答案：C6.抗核抗体（ANA）检测的金标准方法是（）A.间接免疫荧光法（IIF）B.ELISAC.免疫印迹法（WB）D.化学发光法答案：A7.补体C3降低最常见于（）A.系统性红斑狼疮（SLE）活动期B.过敏性紫癜C.类风湿关节炎（RA）D.多发性骨髓瘤答案：A8.免疫荧光技术中，直接法与间接法的主要区别在于（）A.检测的抗原类型不同B.标记的抗体是否为特异性抗体C.反应时间长短D.需不需要洗涤步骤答案：B9.免疫印迹法（WB）的关键步骤是（）A.抗原变性与电泳分离B.封闭非特异性结合位点C.加入酶标二抗D.底物显色答案：A10.血清总IgE升高最常见于（）A.原发性免疫缺陷病B.寄生虫感染C.多发性骨髓瘤D.慢性淋巴细胞白血病答案：B11.结核菌素试验（PPD试验）属于（）A.Ⅰ型超敏反应B.Ⅱ型超敏反应C.Ⅲ型超敏反应D.Ⅳ型超敏反应答案：D12.化学发光免疫分析中，吖啶酯作为发光底物的特点是（）A.需过氧化氢参与发光B.发光持续时间长C.发光反应无需催化剂D.对pH敏感答案：C13.检测抗链球菌溶血素O（ASO）时，常用的方法是（）A.免疫浊度法B.直接凝集试验C.间接血凝试验D.补体结合试验答案：A14.以下不属于自身抗体的是（）A.抗dsDNA抗体B.抗甲状腺球蛋白抗体（TgAb）C.抗HIV抗体D.抗中性粒细胞胞浆抗体（ANCA）答案：C15.流式细胞术检测细胞周期时，常用的DNA染料是（）A.FITCB.PEC.PI（碘化丙啶）D.APC答案：C16.免疫固定电泳（IFE）主要用于检测（）A.单克隆免疫球蛋白B.补体成分C.细胞因子D.肿瘤标志物答案：A17.新生儿溶血病（HDN）的实验室诊断主要检测（）A.母亲血清中的IgG类血型抗体B.胎儿血清中的IgM类血型抗体C.母亲血清中的IgM类血型抗体D.胎儿红细胞表面的补体成分答案：A18.以下关于免疫比浊法的描述，错误的是（）A.分为透射比浊和散射比浊B.反应体系需保持抗原抗体比例合适C.可用于检测IgG、IgA、IgMD.检测灵敏度高于ELISA答案：D19.抗磷脂抗体（APL）检测的临床意义主要是（）A.诊断系统性硬化症B.预测血栓形成和习惯性流产C.评估类风湿关节炎活动度D.辅助诊断多发性肌炎答案：B20.以下哪种方法可同时检测多种细胞因子（）A.ELISAB.流式细胞术（CBA）C.免疫印迹法D.放射免疫法（RIA）答案：B二、填空题（每空1分，共20分）1.免疫球蛋白中分子量最大的是__________，血清中含量最高的是__________。答案：IgM；IgG2.补体经典激活途径的激活物是__________，旁路激活途径的激活物是__________。答案：抗原抗体复合物；细菌脂多糖（或酵母多糖、凝聚的IgA）3.流式细胞术中，前向散射光（FSC）反映细胞的__________，侧向散射光（SSC）反映细胞的__________。答案：大小；内部结构（颗粒度）4.ELISA试验中，常用的酶标记物是__________和__________。答案：辣根过氧化物酶（HRP）；碱性磷酸酶（AP）5.自身免疫病中，抗Sm抗体是__________的特异性标志抗体；抗CCP抗体对__________的诊断特异性较高。答案：系统性红斑狼疮（SLE）；类风湿关节炎（RA）6.免疫缺陷病中，X-连锁无丙种球蛋白血症（XLA）主要表现为__________细胞缺陷；DiGeorge综合征主要表现为__________细胞缺陷。答案：B；T7.化学发光免疫分析分为__________发光和__________发光两类，其中吖啶酯属于前者。答案：直接；间接（或酶促）8.结核菌素试验的原理是__________型超敏反应，阳性结果提示__________。答案：Ⅳ；曾感染过结核分枝杆菌或接种过卡介苗9.免疫浊度法中，为避免“钩状效应”，需对__________浓度过高的样本进行__________处理。答案：抗原；稀释10.抗核抗体（ANA）的常见荧光模式包括__________、__________、核仁型和着丝点型。答案：均质型；颗粒型（或周边型）三、简答题（每题8分，共40分）1.简述ELISA双抗体夹心法的原理及操作步骤。答案：原理：利用针对同一抗原分子上两个不同表位的单克隆抗体，一个作为捕获抗体包被于固相载体表面，另一个作为检测抗体标记酶（如HRP）。待测样本中的抗原与捕获抗体结合后，再与酶标检测抗体结合，形成“包被抗体-抗原-酶标抗体”复合物。加入底物（如TMB）后，酶催化底物显色，颜色深浅与样本中抗原浓度呈正相关。操作步骤：①包被：将捕获抗体稀释后加入微孔板，4℃过夜；②封闭：加入牛血清白蛋白（BSA）或脱脂奶粉，阻断非特异性结合位点；③加样：加入待测样本（或标准品），37℃孵育30分钟；④加酶标抗体：加入酶标记的检测抗体，37℃孵育30分钟；⑤洗板：用洗涤液（如PBS-Tween）洗板3-5次，去除未结合的成分；⑥显色：加入底物溶液（如TMB-H2O2），避光反应15-20分钟；⑦终止：加入终止液（如2MH2SO4），终止显色反应；⑧比色：用酶标仪在特定波长（如450nm）测定吸光度值，通过标准曲线计算抗原浓度。2.流式细胞术检测T细胞亚群的主要步骤及临床意义。答案：主要步骤：①样本采集：采集外周静脉血，用EDTA抗凝；②分离单个核细胞（PBMC）：通过密度梯度离心（如Ficoll）分离；③荧光标记：加入荧光素（如FITC、PE）标记的抗CD3、CD4、CD8单克隆抗体，避光孵育20-30分钟；④溶血：加入溶血素破坏红细胞，离心洗涤去除碎片；⑤上机检测：将样本加入流式细胞仪，通过激光激发荧光，检测各亚群的荧光强度；⑥数据分析：通过软件分析CD3+（总T细胞）、CD3+CD4+（辅助/诱导T细胞）、CD3+CD8+（抑制/细胞毒性T细胞）的比例及绝对计数。临床意义：①评估细胞免疫功能：如HIV感染时CD4+T细胞计数显著下降（<200/μL提示艾滋病期）；②诊断免疫缺陷病：如原发性T细胞缺陷（DiGeorge综合征）表现为CD3+T细胞减少；③监测器官移植排斥反应：急性排斥时CD4+/CD8+比值升高；④指导免疫治疗：如肿瘤患者免疫检查点抑制剂治疗前需评估T细胞亚群状态。3.简述自身抗体检测的临床意义及常用方法。答案：临床意义：①辅助诊断自身免疫病：如抗dsDNA抗体是SLE的特异性指标，抗Jo-1抗体提示多发性肌炎；②评估疾病活动度：如SLE活动期抗dsDNA抗体滴度升高，缓解期下降；③判断预后：高滴度抗rRNP抗体与SLE神经精神症状相关；④鉴别诊断：如抗线粒体抗体（AMA）M2型阳性支持原发性胆汁性胆管炎（PBC）。常用方法：①间接免疫荧光法（IIF）：以组织或培养细胞（如HEp-2细胞）为基质，检测ANA的荧光模式；②ELISA：定量检测特异性抗体（如抗CCP、抗dsDNA）；③免疫印迹法（WB）：同时检测多种自身抗体（如ENA谱）；④化学发光法：灵敏度高，适合自动化检测（如抗甲状腺过氧化物酶抗体）；⑤免疫沉淀法：检测抗Sm抗体等分子量较小的核抗原抗体。4.免疫浊度法检测血清IgG的原理及注意事项。答案：原理：免疫浊度法基于抗原抗体特异性结合形成免疫复合物，使反应液浊度增加。当抗体过量时，复合物的量与抗原浓度呈正相关。通过检测反应液对光的散射（散射比浊）或透射（透射比浊）强度，可计算抗原（IgG）的浓度。速率散射比浊法通过检测单位时间内浊度的变化速率，提高检测灵敏度和速度。注意事项：①样本处理：避免溶血（血红蛋白可干扰浊度）、脂血（需离心去除乳糜颗粒）；②抗体浓度：需确保抗体过量，避免“钩状效应”（高浓度抗原导致浊度下降）；③校准与质控：使用标准品校准仪器，定期做室内质控（如Levey-Jennings质控图）；④线性范围：检测前需将样本稀释至仪器线性范围内，否则结果不准确；⑤温度与时间：反应需在恒定温度（如37℃）下进行，严格控制孵育时间，避免非特异性沉淀。5.简述新生儿溶血病（HDN）的实验室诊断方法。答案：①血型鉴定：检测母亲和新生儿的ABO、Rh血型（重点RhD抗原）；②直接抗人球蛋白试验（DAT）：检测新生儿红细胞表面是否结合IgG类血型抗体（阳性提示红细胞被抗体致敏）；③游离抗体试验：检测新生儿血清中游离的IgG类血型抗体（阳性提示可能存在溶血）；④抗体释放试验：通过加热或酸化使新生儿红细胞表面结合的抗体释放到溶液中，再用标准红细胞检测（特异性最高，阳性可确诊）；⑤母亲血清抗体效价测定：对Rh阴性母亲，妊娠中晚期检测抗D抗体效价（>1:64提示胎儿风险高）；⑥胆红素检测：监测新生儿血清总胆红素（尤其是未结合胆红素）水平，评估溶血严重程度。四、案例分析题（每题10分，共20分）案例1：患者女性，32岁，反复面部红斑、脱发1年，加重伴关节痛2周。查体：双面颊蝶形红斑，口腔黏膜溃疡。实验室检查：血常规示血小板85×10⁹/L（正常100-300×10⁹/L）；尿常规：蛋白（++），红细胞15/HP；免疫学检查：ANA（1:1024，均质型），抗dsDNA抗体（+），补体C30.4g/L（正常0.8-1.6g/L），抗Sm抗体（+）。问题：1.最可能的诊断是什么？依据是什么？2.需进一步完善哪些检查？3.简述抗dsDNA抗体检测的临床意义。答案：1.诊断：系统性红斑狼疮（SLE）活动期。依据：①临床表现：面部蝶形红斑、脱发、口腔溃疡、关节痛；②实验室检查：血小板减少（血液系统受累）、蛋白尿（肾脏受累）；③免疫学异常：高滴度ANA、抗dsDNA抗体阳性（SLE特异性指标）、补体C3降低（提示免疫复合物激活补体）、抗Sm抗体阳性（SLE标志性抗体）。2.进一步检查：①24小时尿蛋白定量（评估肾脏损伤程度）；②肾穿刺活检（明确病理类型，指导治疗）；③抗心磷脂抗体（评估血栓风险）；④C反应蛋白（CRP）、红细胞沉降率（ESR）（评估炎症活动度）；⑤肝肾功能（监测药物副作用）；⑥胸部CT（排查肺间质病变）。3.抗dsDNA抗体临床意义：①诊断SLE的特异性>95%，与疾病活动度高度相关（活动期滴度升高，缓解期下降）；②与SLE肾损害密切相关（阳性者更易发生狼疮性肾炎）；③可作为治疗监测指标（疗效好时滴度降低）；④少数其他自身免疫病（如混合性结缔组织病）或慢性肝炎患者也可阳性，但滴度较低。案例2：患儿男性，18月龄，反复肺炎5次，近3月出现鹅口疮。查体：发育落后，颈部可触及肿大淋巴结。实验室检查：IgG1.2g/L（正常5-12g/L），IgA0.05g/L（正常0.2-3.0g/L），IgM0.1g/L（正常0.5-2.0g/L）；CD19+B细胞占淋巴细胞0.5%（正常10-20%）；基因检测示Bruton酪氨酸激酶（BTK）基因突变。问题：1.最可能的诊断是什么？依据是什么？2.需与哪些疾病鉴别？3.简述免疫球蛋白替代治疗的注意事项。答案：1.诊断：X-连锁无丙种球蛋白血症（XLA，Bruton病）。依据：①临床表现：男性婴幼儿（X连锁隐性遗传），反复细菌感染（肺炎、鹅口疮），发育落后；②实验室检查：血清IgG、IgA、IgM显著降低；③B细胞缺如（CD19+B细胞<2%）；④基因检测：BTK基因突变（XLA的致病基因）。2.鉴别诊断：①普通变异型免疫缺陷病（CVID）：多见于成人，B细胞数量正常或减少，无BTK突变；②严重联合免疫缺陷病（SCID）：T细胞和B细胞均缺陷，表现为更严重的机会性感染（如卡氏肺孢子虫肺炎）；③婴儿暂时性低丙种球蛋白血症：多见于6-18月龄，IgG可自行恢复正常，无B细胞减少；④先天性胸腺发育不全（Di