生物实验技巧与操作测试问题及答案

生物实验技巧与操作测试问题及答案一、选择题（每题2分，共20题）（针对医学检验及临床实验室操作规范）1.在进行血细胞计数时，血涂片的制备应遵循什么原则？A.细胞分布均匀，厚度一致B.细胞堆积紧密，便于观察C.留有大量空白背景D.尽量减少白细胞污染2.使用显微镜观察细胞时，若视野模糊，应首先调节哪个部件？A.物镜转换器B.聚焦环C.光圈大小D.目镜焦距3.离心机的转速单位是什么？A.rpm（转/分钟）B.rps（转/秒）C.g（重力加速度）D.Hz（赫兹）4.在进行ELISA实验时，封闭剂的常用浓度是多少？A.0.1%BSAB.1%BSAC.5%BSAD.10%BSA5.配制培养基时，pH值通常控制在多少范围内？A.6.5-7.5B.5.0-6.0C.7.5-8.5D.9.0-10.06.在PCR实验中，引物退火温度通常是多少？A.50-60℃B.60-70℃C.70-80℃D.80-90℃7.使用移液器吸取液体时，正确的手部姿势是什么？A.按下按钮至第一停止点B.快速按下按钮至第二停止点C.缓慢释放按钮D.以上均正确8.在进行琼脂糖凝胶电泳时，DNA片段的迁移速率与什么因素成正比？A.分子大小B.电场强度C.琼脂糖浓度D.以上均正确9.实验室常用的消毒剂是哪种？A.75%酒精B.95%酒精C.0.1%氯化钠D.0.5%过氧化氢10.在进行细胞培养时，培养箱的CO₂浓度通常控制在多少？A.5%B.10%C.15%D.20%二、填空题（每空1分，共10空）（针对生物技术实验操作细节）1.在进行酶活性测定时，应严格控制______和______等环境条件。2.纯化蛋白质时，常用的层析技术包括______和______。3.细胞固定常用的方法有______、______和______。4.实验室废弃物分类处理时，有机溶剂应归为______类。5.配制0.1mol/L的盐酸，需使用浓盐酸______mL（密度1.19g/mL）。6.PCR反应体系通常包含______、______和______等关键组分。7.在进行免疫组化实验时，切片脱蜡需使用______和______试剂。8.细胞计数时，使用血球计数板的标准计数区域是______。9.实验室常用的灭菌方法是______和______。10.细胞培养的冻存液通常包含______和______成分。三、简答题（每题5分，共4题）（针对临床实验室质量管理）1.简述血清生化检测中，样本采集的注意事项有哪些？2.解释什么是“空白对照”及其在实验中的作用。3.如何避免PCR实验中的“非特异性扩增”？4.简述实验室生物安全等级的分类及特点。四、操作题（每题10分，共2题）（针对微生物实验流程）1.简述制备无菌平板的步骤及关键点。2.描述革兰染色法的操作流程及结果判读。答案及解析一、选择题答案1.A2.B3.A4.A5.A6.B7.D8.D9.A10.A解析：1.血涂片制备需细胞分布均匀，便于计数和分析，过密或过稀均影响结果。2.显微镜模糊时，应优先调节聚光镜或载物台高度，确保焦距清晰。3.离心机转速单位为rpm，表示每分钟旋转次数。4.ELISA封闭剂常用0.1%BSA，能有效封闭非特异性位点。5.培养基pH通常控制在6.5-7.5，最接近人体生理环境。6.PCR引物退火温度一般在55-65℃，60-70℃最为常用。7.移液器正确操作需依次按下第一和第二停止点，缓慢释放液体。8.DNA电泳迁移速率与分子大小、电场强度和凝胶浓度均相关。9.75%酒精是实验室常用消毒剂，能有效杀灭细菌和病毒。10.细胞培养需5%CO₂维持pH稳定。二、填空题答案1.温度、pH值2.凝胶层析、离子交换层析3.甲醇固定、甲醛固定、醋酸固定4.有害化学5.83.36.Taq酶、引物、模板DNA7.二甲苯、无水乙醇8.中央大方格（3.0mm×3.0mm）9.高压蒸汽灭菌、干热灭菌10.DMSO、胎牛血清三、简答题答案1.血清生化检测样本采集注意事项：-避免空腹采集（空腹8-12小时）；-使用肝素抗凝管避免溶血；-采集后立即混匀，防止凝血；-标本需在4℃保存，2小时内送检。2.空白对照的作用：-排除试剂或操作污染的影响；-用于校正背景吸收值，提高结果准确性。3.避免PCR非特异性扩增的方法：-优化引物设计，避免重复序列；-提高退火温度；-添加DMSO或甘油提高特异性。4.生物安全等级分类及特点：-BSL-1：低风险病原体（如大肠杆菌），开放实验室操作；-BSL-2：中等风险病原体（如乙肝病毒），需二级生物安全柜；-BSL-3：高风险病原体（如SARS），需三级实验室和正压防护；-BSL-4：高风险气溶胶病原体（如埃博拉），全封闭负压操作。四、操作题答案1.制备无菌平板步骤及关键点：-将培养基（如琼脂）加热融化，调节pH；-用三角瓶灭菌后冷却至45-50℃；-超净工作台内倾倒培养基（每皿15-20mL）；-待凝固后倒置保存，防止水分蒸发。关键点：避免二次污染，培养基温度过高易导致气泡。2.革兰染色法流程及结果判读：-步骤：初染（结