DB54∕T 0356-2024 犏牛人工授精技术操作规程

ICS65.020.30

CCSB43

54

西藏自治区地方标准

DB54/T0356—2024

犏牛人工授精技术操作规程

2024-04-21发布2024-05-21实施

西藏自治区市场监督管理局  发布

DB54/T0356—2024

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定

起草。

本文件由西藏自治区动物疫病预防控制中心（西藏自治区畜牧总站）提出。

本文件由西藏自治区农业农村标准技术委员会归口。

本文件起草单位：西藏自治区动物疫病预防控制中心（西藏自治区畜牧总站）。

本文件主要起草人：达瓦、仁增顿珠、拉巴次仁、拉旺扎西、陈瑶、次仁多吉、孙锋博、张楠、刘

楠、措姆。

I

DB54/T0356—2024

犏牛人工授精技术规程

1范围

本文件规定了犏牛人工授精术语定义、人工授精准备、发情鉴定、输精前的准备、输精、妊娠诊

断等。

本文件适用于犏牛养殖集中区域内的犏牛养殖场、散养户及配种站人工授精技术人员及其他相关从

业人员的技术操作。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文

件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB4143牛冷冻精液

GB/T5458液氮生物容器

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1

犏牛

牦牛与黄牛杂交后所产生的第一代杂种统称为犏牛，公犏牛无繁育能力。

3.2

冷冻精液

将原精液用稀释液等温稀释、平衡后快速冷冻，在液氮中保存。犏牛的冷冻原精液来源是安格斯肉

牛，精液分装细管冻精剂型。

3.3

人工授精

人为利用器械采取公畜的精液，经过检查和处理后，再用器械输入到母畜的生殖道内，使之受胎的

一种方法。

3.4

发情鉴定

通过外部观察或直肠把握检查方式确定母牛发情的方法，犏牛以直肠把握法为主要依据。

3.5

发情周期

2

DB54/T0356—2024

初情期后，每隔一定时间会发情一次，通常将这次发情开始至下次发情开始、或这次发情结束至下

次发情结束所间隔的时期，称为发情周期，犏牛的发情周期为18d～24d。

3.6

能繁母犏牛

达到生殖年龄且具有生殖能力的母犏牛。

4人工授精准备

4.1固定式与活动式相结合

犏牛养殖集中区建设配种点，每个配种点配备配种架、液氮罐、人工授精器械，消毒液、液体石蜡

等用于犏牛的配种工作。针对路途相对较远的地方，配种员携带配种仪器设备开展巡逻式配种。

4.2仪器设备

试验台、桌布、显微镜、载玻片、盖玻片、液氮罐、液氮、细管冻精、输精器、输精器外套、玻璃

瓶、玻璃棒、烧杯、温度计、镊子、一次性手套、常用消毒剂、纱布、卫生纸、热水壶、毛巾、脸盆、

肥皂等。

5发情鉴定

犏牛整体上呈季节性发情，发情季节主要集中在6月-9月份，但集中管理模式下可常年发情，夜晚

的发情率高于白天，下雨后天气转阴时发情率高，具体见附录A。

5.1外部观察

通过母牛的外部表现症状和行为变化判断是否发情和发情程度。

5.2阴道检查法

主要观察生殖器变化，用开膣器使阴道开张，观察外阴部的肿胀、流出的粘液、分泌物和子宫颈口

的变化，判断母牛发情与否。

5.3直肠检查

通过直肠检查卵巢，触摸卵泡发育程度，判断发情程度及排卵时间。

6输精前的准备

6.1器具清洗和消毒

凡是触碰冻精和母牛生殖道的器具都应进行清洗和消毒。金属器械清洗后，待自然条件下冷却后待

用。使用前用75%酒精消毒干净，有条件的地方使用高压锅对金属器具进行消毒。器械消毒，可以在121

摄氏度，气压在102.9kPa下消毒20分钟后取出使用。

6.2冷冻精液的准备

3

DB54/T0356—2024

冷冻精液应浸泡在液氮生物容器中贮存，定时补充液氮，保证细管冻精深埋于液氮面10cm以下，液

氮生物贮存应符合GB/T5458有关规定，冻精在液氮容器外停留时间不得超过5s。

6.3冷冻精液的解冻

用长柄镊子从液氮罐中取出细管冻精，寻找冻精不得超过10s，停留部位应距颈管上口8cm以下。冻

精取好后放入38±2℃水中，解冻5s～10s，待全部融化后，取出擦干即可，用细管剪剪开不带棉塞的一

端细管冻精封口，剪口应正，断面应齐，将有棉塞的一端装在输精器推杆上，套上外保护套备用。解冻

后的精液应在15min内输精，以防止对精子的第二次冷打击。根据季节的不同，注意输精前输精器的保

温措施，若路程较远，可将准备好的输精器放于贴身衣物内保暖,精液解冻后保存时间不应超过1h。

6.4冻精质量检查

在显微镜下检查做直线前进运动的精子占整个精子数的35%以上、视为合格，35%以下的弃之，冻精

质量检测应符合GB4143。

6.5母牛的保定

经发情鉴定确定输精的母畜，将其牵入配种架内保定好，注意安全措施。

6.6母牛外阴部的清洁

输精前，带上输精器外套后，并对保定母畜外阴部周围的粪便、污物用温肥皂水清洗干净，然后用

消毒液（高锰酸钾水）清洗一遍。

6.7输精准备

将剪去封口的细管精液迅速装入输精器管内，输精器进入塑料外套管，管口顶紧外套管中固定圈，

向前推到头，外套管后部与输精器后部螺纹处拧紧，全部结合要紧密备用。

7输精

7.1输精时间

最佳输精时间为母牛接收爬跨后的10h～18h。母牛接受爬跨后8h～12h为第一次输精时间，第二次

输精时间为母牛接受爬跨后16h～20h。在发情盛期、后期各输精1次，两次输精的时间间隔为8h～12h。

7.2输精方法

7.2.1触摸卵泡法

在卵泡薄、满而软、有弹性和波动明显，成熟葡萄状，有一触即破的感觉，接近成熟排卵时及时输

精。6h-8h后在卵泡未破裂之前，再输精一次。

7.2.2直肠把握法

母犏牛个体与牦牛接近，生殖器官组织结构主要表现为子宫角发达、子宫体短小,子宫颈长5cm～

10cm,外壁直径3cm～6cm，子宫颈口小，内有明显的三个具有许多细小而紧缩的皱璧的子宫颈环，子宫

颈宫口几乎临近角间沟纵隔。输精员将手指甲剪短磨光，左手手臂套上乳胶手套，涂上一层润滑剂，五

指并拢呈锥形，伸入直肠，掏出粪便。动作要轻柔，左手臂进入直肠25cm～30cm，在直肠内触摸并握住

子宫颈，左手稍微下压，使阴门张开，右手持输精管（枪）由阴门缓缓插入，先稍向上斜插，避开尿道

4

DB54/T0356—2024

口，然后再向下平插至子宫颈口，将输精器前端插入子宫颈口内3cm-4cm(约经过2个-3个皱襞），若能

确定左右两侧具体卵泡发育位置，可将输精器继续伸向卵泡发育侧输精；若不能确定具体位置，则将输

精器微微后拉再行输精。输精后缓缓将输精器拔出，并适当按摩阴蒂，以防止精液倒流，可有效提高受

胎率。

7.3输精部位及输精量

将精液输到接近子宫角间沟分岔部的子宫体内，一次输0.25ml，一个情期输精两次。

7.4注意事项

输精过程要严格按照慢插、适深、轻注、缓出、防倒流的原则进行，直肠检查或输精时母牛努责、

肠道形成空洞时，不要硬性抓捏，防止损伤母犏牛阴道壁、子宫颈口和子宫体。

8妊娠诊断

妊娠诊断时间一般在输精后第一个发情周期开始到两个月。未妊娠的母牛进行查胎补配，已妊娠的

母牛进行加强饲养管理，做好保胎、防流工作。

8.1外部观察

母犏牛妊娠后，经过2个-3个情期后，周期性发情停止，食欲增进，营养状况改善，毛色润泽，性

情变得温顺，行为变安稳，体重增加。妊娠中后期腹围增大，甚至可观察到胎动，乳房逐渐肿大。

8.2直肠检查法

输精后三个情期未发情，通过直肠检查卵巢、子宫角的形状、质地变化来判断是否妊娠。主要根据

子宫角的卵巢黄体的变化进行诊断，妊娠母牛子宫角两侧不对称，孕角侧卵巢比另一侧卵巢大，孕角有

波动感，卵巢有妊娠黄体突出于排卵侧卵巢表面，黄体质地柔软、丰满、顶端触感凸起。

具体方法为先摸到子宫颈，再将中指向前滑动，寻找角间沟，然后将手向前、向下、再向后分别触

摸两个子宫角及卵巢的变化。一般怀孕20d～25d，孕角侧卵巢比另一侧卵巢大，并有黄体，子宫壁较厚，

有弹性；怀孕60d，孕角大小为空角的两倍左右，波动感明显，角间沟变得宽平，子宫向腹腔下垂；怀

孕90d，孕侧子宫角变大，直径8㎝～13㎝，波动明显，角间沟消失，有时可触摸到绿豆大小的子叶。

9记录

包括配种母牛编号、畜主、输精时间、输精操作人员、冻精号、精子活力、品种、供应商、妊娠检

查、产犊日期见附录B,以及受胎率，繁殖率计算方法见附录C。上述内容可用表格的形式记录。

5

DB54/T0356—2024

A

A

附录A

（规范性）

表1母犏牛发情表现

期别发情初期发情盛期发情末期

母犏牛鸣叫不安，人靠近竖起

母犏牛极度不安，食欲停止，

耳朵摇头，食欲减退，经常爬母犏牛性欲减退，不再爬跨其它牛，由狂躁转为

外部表现性欲旺盛，尾巴翘起，接受爬

跨其它牛，但拒绝公牛或者其安静。

跨，爬跨其它牛。

他母犏牛的爬跨。

外阴轻微红肿，阴道粘膜充血，外阴部明显肿胀，流出粘液增

生殖器官变化流出稀薄透明多，尾部毛发被其他牛趴跨时外阴部肿胀减退，粘液变稠，呈黄白色。

液体。翻起来的现象。

直肠检查子宫松软，卵泡体积

直肠检查子宫变软，卵巢有一直肠检查子宫颈变松软，卵泡壁变薄，波动明显，

增大，直径1～1.5cm，突出于

卵泡发育程度侧增大，有卵泡，无弹性，此成熟葡萄状，有一触即破的感觉，此期约维持8～

卵巢表面，弹性强，有波动感。

期维持10h左右。10h。

此期约维持8～12h。

B

B

C

附录B

（规范性）

表2母犏牛配种记录表

C

D

母畜公畜备注

发情日期输精日期妊娠检查

冻活

序畜主编胎检是产品供货厂