DB15∕T 2045-2020 甜菜组培快繁技术规程

ICS65.020.20

CCSB05

DB15

内蒙古自治区地方标准

DB15/T2045—2020

甜菜组培快繁技术规程

Technicalcodeofpracticeofcultureandrapidpropagetiononsugarbeet

2020-12-24发布2021-01-24实施

内蒙古自治区市场监督管理局发布

DB15/T2045—2020

前言

本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定

起草。

本文件由内蒙古自治区农牧厅提出。

本文件由内蒙古自治区农业标准化技术委员会（SAM/TC20）归口。

本文件起草单位：内蒙古自治区农牧业科学院。

本文件主要起草人：白晨、李晓东、张惠忠、张自强、王良、韩平安、张必周、赵尚敏、付增娟、

鄂圆圆、郑文哲、张辉。

I

DB15/T2045—2020

甜菜组培快繁技术规程

1范围

本文件确立了培养基、外植体的获取、灭菌与萌发、无菌苗获取、甜菜组培扩繁和移栽等技术要求。

本文件适用于甜菜组培快繁技术操作的全过程。

2规范性引用文件

本文件没有规范性引用文件。

3术语与定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1

种球bulb

甜菜的果实。

3.2

腋芽axillarybud

发生于叶的近轴面与茎的夹角处的定芽。

3.3

花序inflorescence

花序轴及其着生在上面的花的通称。

4培养基

4.1琼脂粉培养基

用于甜菜种球的萌发。成分为（1L）：琼脂粉7.5g。

4.2诱导分化培养基

用于甜菜无菌苗诱导分化培养。成分为（1L）：MS培养基4.74g，蔗糖30g，NAA（萘乙酸）0.7mg，

KT（激动素）1.2mg，琼脂粉7.5g。

4.3继代培养基

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用于甜菜无菌苗的继代培养。成分为（1L）：MS培养基4.74g，蔗糖30g，NAA0.5mg，KT0.4mg，

琼脂粉7.5g。

4.4生根培养基

用于甜菜无菌苗的生根培养。成分为（1L）：MS培养基4.74g，蔗糖30g，NAA1.2mg，琼脂粉

7.5g。

5外植体的获取

5.1种球的获取+

选取健康、籽粒饱满、外观完好的甜菜种球。

5.2腋芽的获取

在甜菜生殖生长期，选择生长健壮、无损伤、无病虫害的甜菜植株，剪取幼嫩主枝或侧枝。

5.3花序的获取

在甜菜生殖生长期，选择生长健壮、无损伤、无病虫害的甜菜植株，剪取现蕾花序的末端约20cm。

6灭菌与萌发

6.1灭菌前准备

制备无菌水、75%酒精，0.1%升汞，80%次氯酸钠。

6.2种球消毒

将甜菜种球磨光，用百菌清（烟剂型）密闭熏蒸24h后，在超净工作台中移至灭过菌的三角瓶中，

随后用75%酒精消毒2min，无菌水漂洗3次，接着用0.1%的升汞处理20min，无菌水漂洗3次，最后

将消毒后的种子接种于琼脂粉培养基上，每三角瓶（100ml）25粒。

6.3腋芽消毒

取回的主枝或侧枝剪成保留1～2个腋芽小段，装入烧杯放在自来水下冲洗1h，冲洗后在超净工作

台上用75%酒精消毒1min，无菌水洗3次，接着用80%次氯酸钠消毒12min，无菌水洗3次，洗完后

按照形态学上端向上接种到继代培养基中，每三角瓶（100ml）6个小段。

6.4花序消毒

室外取回的花序放入烧杯中，放到自来水下冲洗花序1h，冲洗后将花序切成1.5cm左右长度的花

序小段，在超净工作台上将花序小段首先用75%酒精消毒1min，无菌水洗3次，接着用80%次氯酸钠

消毒2min～3min，无菌水洗3次，洗完后按照形态学上端向上接种到继代培养基中，每三角瓶（100ml）

6个小段。

7无菌苗获取

7.1种球成苗

2

DB15/T2045—2020

置于组培室培养，23℃条件下进行培养，7d～10d即可萌发。待芽长2.0cm～2.5cm时，带子

叶一起切下，接种到新的继代培养基中。培养环境：温度23℃，光照强度3000Lux，光照时间14h。

培养20d～25d成苗。

7.2腋芽成苗

在组培室内培养，培养环境：温度23℃，光照强度3000Lux，光照时间14h。腋芽培养20d～25d

即可长出新芽，切下新芽接种到新的继代培养基上，约20d可得到健壮无菌苗。

7.3花序成苗

在组培室内培养，培养环境：温度23℃，光照强度3000Lux，光照时间13h。花序培养30d～40d

即可长出新芽。切下新芽接种到新的继代培养基上，约20d可得到健壮无菌苗。

8甜菜组培扩繁

8.1诱导分化培养

在超净工作台上，选取健壮无菌苗，接种于分化培养基中进行分化诱导培养。培养环境：温度23℃，

光照强度3000Lux，光照时长为14h。

8.2继代培养

当诱导的丛生芽长到约1cm～2cm，在超净工作台中将丛生芽分切为单苗，接种于继代培养基中进

行继代培养。培养环境：温度23℃，光照强度3000Lux，光照时间14h。

8.3生根培养

将生长健壮的丛生芽分切成1cm～2cm单芽，接种到生根培养基中。培养环境：温度23℃，光照

强度3000Lux，光照时间14h。20d～30d即可诱导出新生根。

9移栽

9.1炼苗

去掉封口膜，在组培室锻炼2d～3d。

9.2室内移栽

选择根系生长健壮的组培苗从三角瓶中移出，用自来水浸泡根部12h，洗净根部残留培养基，移栽

到花盆中（育苗土由蛭石和田园土构成，二者比例为1:1），并遮阳，定期浇水，室内培养7d～14d。

9.3大田移栽

待盆栽幼苗生长至4-6片真叶时，