DB4201∕T 562-2018 红掌组培育苗生产技术规程

ICS65.020.20

B62

DB4201

武汉市地方标准

DB4201/T562—2018

红掌组培育苗生产技术规程

2018-08-28发布2018-09-28实施

武汉市质量技术监督局发布

DB4201/T562—2018

前言

本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。

本标准由武汉市农业科学院提出并归口。

本标准由武汉市农业科学院作物研究所起草。

本标准主要起草人：王德欢、施先锋、陈祖平、周谟兵、葛米红、梁欢、孙玉宏、李爱成、张娜、

宋奎琳、杨皓琼。

I

DB4201/T562-2018

红掌组培育苗生产技术规程

1范围

本标准规定了红掌组培育苗生产的设施条件、试管苗的生产、穴盘苗的培育及出圃规格。

本标准适用于武汉地区红掌组培苗的生产，其他地区可参考使用。

2范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。

凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T8321（所有部分）农药合理使用准则

NY/T2306-2013花卉种苗组培快繁技术规程

3设施条件

场地及主要设施应符合NY/T2306-2013。

4试管苗的生产

4.1物品准备

4.1.1培养基配制

4.1.1.1以MS培养基为基本培养基，添加琼脂粉7.0g/L～8.0g/L，蔗糖20g/L～30g/L，并根据

不同培养阶段添加适量植物生长调节物质，调节pH值为5.8～6.0。

4.1.1.2愈伤组织诱导培养基：MS+6-BA0.5mg/L～2.5mg/L+2,4-D0.5mg/L～1.5mg/L+NAA

0.1mg/L～0.5mg/L。

4.1.1.3不定芽分化培养基：MS+6-BA0.5mg/L～1.0mg/L+2,4-D0.1mg/L～0.5mg/L+NAA

0.1mg/L～0.3mg/L。

4.1.1.4增殖与复壮培养基：MS+6-BA0.1mg/L～0.5mg/L+NAA0.1mg/L～0.2mg/L。

4.1.1.5生根培养基：MS+NAA0.1mg/L～0.3mg/L+IBA0.1mg/L～0.3mg/L。

4.1.1.6培养基配制完毕后，按每支组培瓶40mL～50mL容量及时分装并进行高压蒸汽灭菌。在121℃

下灭菌20min～30min，待灭菌锅压力表显示为零后尽快取出冷却备用，宜在30d内使用。

4.1.2无菌水制备

用三角瓶分装不超过1/2体积的蒸馏水，在121℃下灭菌20min～30min，待灭菌锅压力表显示为零

后尽快取出冷却备用，宜在7d内使用。

4.1.3无菌盘准备

将直径20cm的铁盘装入高温消毒灭菌袋内，在121℃下灭菌20min～30min，待灭菌锅压力表显示

为零后取出烘干备用，宜在7d内使用。

4.2接种操作准备

4.2.1接种室消毒

1

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接种前30min用75％酒精擦拭超净工作台，摆上所需培养基、酒精灯、酒精消毒液、镊子、剪刀等

物品；开启超净工作台吹风功能，打开超净工作台和接种室用紫外灯照射20min～30min。此外，接种

室应定期使用高锰酸钾与甲醛溶液进行熏蒸消毒处理。

4.2.2操作人员的消毒

进入接种室前，操作人员应洗净手（夏季露手臂操作还应洗净手臂）、穿戴上经过消毒的工作服、

帽子、口罩和鞋子等，并经由配备风淋系统的缓冲间进入接种室。操作过程中要经常使用75％酒精擦拭

手（夏季露手臂操作还应擦拭手臂）。

4.3愈伤组织诱导

4.3.1外植体选取和处理

4.3.1.1从生长健壮的植株上选择幼嫩的叶柄或叶片作为外植体。外植体在加有适量洗洁精或洗衣粉

的自来水中浸泡15min，然后用自来水冲洗20min～30min，期间用手轻轻搓揉叶柄或叶片。冲洗结

束后，转到75％酒精中浸泡30s～60s，再用无菌水冲洗2次～3次，接着用0.1％升汞溶液消毒

8min～10min，最后无菌水冲洗3次～5次。

4.3.1.2若选取叶柄为外植体，则将叶柄切割成1cm长度的小段；若选取叶片为外植体，则将叶片剔

除叶缘与叶脉后、切割成1cm2的方块。

4.3.2诱导培养

将切割好的外植体接种于愈伤组织诱导培养基。培养条件宜控制在温度25℃、光照强度2000lm/m2、

光照时间12h/d（前15d光照时间0h/d）。

4.4不定芽分化

培养60d后，将愈伤组织切割，转接到不定芽分化培养基中。培养条件宜控制在温度25℃、光照

强度2000lm/m2、光照时间12h/d。

4.5增殖与复壮

将分化的不定芽从愈伤组织上沿基部切下，插入芽增殖与复壮培养基中；宜30d～40d继代1次。

培养条件宜控制在温度25℃、光照强度2000lm/m2、光照时间12h/d。

4.6生根培养

将增殖的芽去除底部愈伤组织与老叶，插入生根培养基中；生根培养30d形成完整的根系。

5穴盘苗的培育

5.1炼苗

移栽前3d，打开组培瓶盖，加注深宜0.5cm～1cm无菌水，置温室中适当遮光炼苗，炼苗光强不

宜超过12000lm/m2。

5.25.2移栽

取出试管苗，洗净培养基，用0.1％高锰酸钾溶液浸泡试管苗10s。选用纤维直径0mm～10mm的红

掌专用基质，将基质经净化水浸泡搅拌湿润后，填装128孔穴盘。宜在光照强度小于12000lm/m2、温

度18℃～28℃的环境中进行移栽。移栽后，宜用50％多菌灵可湿性粉剂1000倍溶液喷施1次。农药使

用应符合GB/T8321的要求。

5.3穴盘苗管理

5.3.1移栽后10d内，宜控制温度18℃～28℃、光照强度5000lm/m2～12000lm/m2、空气相对湿

度60％～80％。

5.3.2移栽10d以后，控制温室温度在15℃～30℃、光照强度不超过20000lm/m2，当温度

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DB4201/T562-2018

15℃～28℃时、控制湿度在65％～70％，当温度在28℃～30℃时、控制湿度在70％～85％。宜每

隔

2d～3d，浇灌1000倍复合肥（20-10-20）溶液。此外，宜每隔15d，喷施一次1000倍磷酸二氢钾

叶面肥。

5.3.3穴盘苗培育期间，密切关注植株生长状况，定期轮换使用土霉素与多菌灵或百菌清预防病害发

生。若发现感病植株，应及时剔除。农药使用应符合GB/T8321的要求。

6出圃规