增液润燥汤对诱导型干燥综合征小鼠颌下腺的重塑效应：形态与功能的深度解析

增液润燥汤对诱导型干燥综合征小鼠颌下腺的重塑效应：形态与功能的深度解析一、引言1.1研究背景与意义干燥综合征（Sjogren'ssyndrome，SS）是一种主要累及外分泌腺体的慢性炎症性自身免疫病，以口干、眼干为主要临床表现。其发病机制复杂，涉及遗传、免疫、感染等多种因素。在全球范围内，干燥综合征的患病率约为0.1%-0.6%，我国的患病率为0.29%-0.77%，且女性患者居多，男女比例约为1:9。随着人口老龄化的加剧，干燥综合征的发病率呈上升趋势，严重影响患者的生活质量和身心健康。干燥综合征不仅会导致外分泌腺体功能障碍，还可累及全身多个系统，如呼吸系统、消化系统、泌尿系统、神经系统等，引发一系列并发症。呼吸系统受累可出现肺间质纤维化、肺大泡，严重时可导致呼吸衰竭或肺动脉高压；消化系统受累可表现为萎缩性胃炎、慢性腹泻等；泌尿系统受累可出现肾小管酸中毒、蛋白尿等；神经系统受累可引起感觉异常、偏瘫等症状。此外，干燥综合征患者发生淋巴瘤的风险也明显增加。因此，干燥综合征的治疗具有重要的临床意义。目前，西医治疗干燥综合征主要采用替代疗法及对症处理，如使用人工泪液、唾液替代品缓解口干、眼干症状，应用免疫抑制剂调节免疫功能等。然而，这些治疗方法虽可在一定程度上改善症状，但无法根治疾病，且长期使用免疫抑制剂可能会带来严重的不良反应，如感染、肝肾功能损害等。因此，寻找一种安全、有效的治疗方法成为临床研究的热点。中医在治疗干燥综合征方面具有独特的优势。中医认为，干燥综合征属于“燥痹”范畴，主要是由于燥邪侵袭机体，损伤气血津液，导致孔窍干燥，无法滋养肌肤经脉所致。治疗上多以滋阴润燥、养血生津为基本原则。增液润燥汤是在增液汤的基础上，根据“津液代谢”理论进行加减而成的方剂。方中以玄参、生地黄、麦冬为基础，滋阴润燥，增液生津；加茯苓、白术健脾，促进水谷精微的运化及升华；桔梗、紫菀等宣发肺气，调节水液的输布；淡附片温补肾阳，助肾对水液的蒸腾气化。诸药合用，可使津液充足，行津有法，从而达到治疗干燥综合征的目的。近年来，多项临床研究表明，增液润燥汤在改善干燥综合征患者的临床症状、调节免疫功能等方面具有显著疗效。然而，其具体的作用机制尚未完全明确。本研究旨在通过观察增液润燥汤对诱导型干燥综合征小鼠颌下腺形态及功能的影响，探讨其治疗干燥综合征的作用机制，为临床应用提供实验依据。同时，本研究也有助于丰富中医治疗干燥综合征的理论体系，为开发新的治疗药物和方法提供思路。1.2研究目的与创新点本研究旨在通过建立诱导型干燥综合征小鼠模型，观察增液润燥汤对小鼠颌下腺形态及功能的影响，并探讨其作用机制，为增液润燥汤治疗干燥综合征提供实验依据和理论支持。具体而言，将深入研究增液润燥汤对小鼠颌下腺组织病理形态的改变，包括腺泡、导管结构以及淋巴细胞浸润情况等；精确测定其对颌下腺功能指标的影响，如唾液分泌量、唾液淀粉酶活性等；并初步探究增液润燥汤治疗干燥综合征的作用机制，从免疫调节、细胞因子表达等角度展开研究。本研究的创新点主要体现在以下几个方面：在模型建立上，采用注射百日咳疫苗＋完全弗氏佐剂＋同种鼠颌下腺抗原的方法建立诱导型干燥综合征小鼠模型，该模型能够较好地模拟人类干燥综合征的病理过程，为研究提供更接近临床实际的实验对象；在研究指标方面，综合运用多种检测方法，全面评估增液润燥汤对小鼠颌下腺形态及功能的影响，不仅关注唾液分泌量等常规指标，还深入探究颌下腺组织的微观结构变化以及相关细胞因子的表达水平，使研究结果更加全面、深入；在机制研究上，从中医“津液代谢”理论出发，探讨增液润燥汤通过调节津液代谢相关脏腑功能来治疗干燥综合征的作用机制，为中医治疗干燥综合征提供新的理论视角和研究思路，有助于丰富和完善中医治疗干燥综合征的理论体系。二、干燥综合征与增液润燥汤概述2.1干燥综合征的认识干燥综合征（Sjogren'ssyndrome，SS）是一种主要累及外分泌腺体的慢性炎症性自身免疫病，以口干、眼干为主要临床表现，故又名自身免疫性外分泌腺体病。其发病机制复杂，至今尚未完全明确，一般认为是在遗传因素、环境因素以及免疫因素等多种因素的相互作用下，导致机体的免疫调节功能紊乱，从而引发自身免疫反应，攻击外分泌腺体，导致腺体功能受损。在遗传因素方面，研究发现干燥综合征具有一定的遗传倾向，某些基因多态性与干燥综合征的发病风险相关。例如，人类白细胞抗原（HLA）基因中的某些等位基因，如HLA-DR3、HLA-DRB1*0301等，在干燥综合征患者中的出现频率明显高于正常人群，提示这些基因可能参与了干燥综合征的发病过程。环境因素也在干燥综合征的发病中起着重要作用，病毒感染被认为是重要的环境触发因素之一，如EB病毒、丙型肝炎病毒、HIV病毒等。这些病毒感染后，可能通过分子模拟机制，诱发机体的自身免疫反应，导致免疫系统错误地攻击自身组织。此外，长期暴露于某些化学物质、紫外线照射等也可能增加干燥综合征的发病风险。免疫因素在干燥综合征的发病机制中占据核心地位，患者体内存在多种免疫异常，包括T淋巴细胞、B淋巴细胞功能紊乱，细胞因子网络失衡等。B淋巴细胞异常活化和增殖，产生大量自身抗体，如抗SSA抗体、抗SSB抗体等，这些自身抗体与相应抗原结合形成免疫复合物，沉积在外分泌腺体及其他组织中，引发免疫损伤。同时，T淋巴细胞功能失调，辅助性T细胞1（Th1）和辅助性T细胞17（Th17）等亚群比例失衡，分泌多种细胞因子，如干扰素-γ、白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-17（IL-17）等，进一步加剧炎症反应和组织损伤。从流行病学特征来看，干燥综合征在全球范围内均有发病，患病率约为0.1%-0.6%。不同地区的患病率存在一定差异，北欧和北美地区的患病率相对较高，可达1%以上；亚洲地区的发病率相对较低，我国的患病率为0.29%-0.77%。女性患者明显多于男性，男女比例约为1:9，好发年龄在30-60岁之间，占全部病例的90%，但也可发生于任何年龄，包括儿童和青少年。随着人口老龄化的加剧，干燥综合征的发病率呈上升趋势。干燥综合征对颌下腺形态及功能有着显著的影响。颌下腺作为重要的外分泌腺体之一，在干燥综合征患者中常受到累及。从形态学上看，早期颌下腺组织可见腺泡细胞肿胀、变性，腺泡间隙增宽，间质内有少量淋巴细胞浸润。随着病情进展，腺泡细胞逐渐萎缩、减少，被大量淋巴细胞和结缔组织取代，形成淋巴滤泡样结构，导致颌下腺体积缩小，质地变硬。导管系统也会出现病变，表现为导管扩张、狭窄、扭曲，甚至导管上皮细胞增生、化生，导致导管阻塞，影响唾液的正常排出。在功能方面，由于颌下腺组织的病理改变，唾液分泌量明显减少，唾液的质和量发生改变，唾液的黏稠度增加，流速减慢，从而导致口干症状。唾液分泌减少不仅影响口腔的湿润度，还会影响口腔的自洁功能，使口腔内细菌滋生，容易引发龋齿、牙周炎等口腔疾病。此外，唾液中含有多种消化酶，如唾液淀粉酶等，唾液分泌异常还会影响食物的消化和吞咽，导致患者进食困难，影响营养的摄取和消化吸收，进一步影响患者的生活质量和身体健康。2.2增液润燥汤解析增液润燥汤是在中医理论指导下，根据干燥综合征的病因病机特点，以增液汤为基础进行加减化裁而成的方剂。其药物组成精妙，各味药物相互协同，共同发挥治疗作用。增液润燥汤的主要药物组成包括玄参、生地黄、麦冬、茯苓、白术、淡附片、五味子、桔梗、紫菀、桃仁、当归、玉竹、白芍、石斛、鬼针草、甘草等。方中玄参咸寒润下，偏于滋阴降火，生津润燥，重用为君药，其富含多种生物碱、环烯醚萜苷类等成分，能显著增强机体的滋阴润燥功效，有效改善阴虚燥热之象。生地黄清热养阴，助玄参增强滋阴润燥之力，麦冬滋养肺胃阴津，从肺与大肠相表里的角度润肠燥，二者共为臣药。现代药理研究表明，生地黄含有梓醇、地黄多糖等成分，梓醇可促进机体津液生成，地黄多糖则能调节免疫功能，有助于缓解干燥综合征患者的免疫紊乱状态；麦冬含有的麦冬皂苷、麦冬多糖等成分，能提高机体的抗氧化能力，减轻炎症损伤，同时对唾液腺细胞具有一定的保护作用，可促进唾液分泌。茯苓、白术健脾益气，促进水谷精微的运化及升华，为佐药。脾主运化，若脾气虚弱，运化失职，则水谷精微不能正常输布，导致津液生成不足。茯苓主要含茯苓多糖、三萜类化合物等成分，茯苓多糖能增强机体免疫功能，调节胃肠道功能，促进水谷的消化吸收；白术含挥发油、白术多糖等成分，具有健脾燥湿、利水消肿等作用，可增强脾胃功能，使水谷精微得以正常运化，为津液生成提供充足的物质基础。淡附片温补肾阳，助肾对水液的蒸腾气化，同样作为佐药。肾为先天之本，主水，肾中阳气不足，则不能正常蒸腾气化水液，导致津液代谢失常。淡附片含乌头碱、次乌头碱等成分，适量使用可温补肾阳，激发肾的气化功能，促进津液的生成和输布。桔梗、紫菀宣发肺气，调节水液的输布，肺气的宣发肃降对水液的代谢起着重要的调节作用。桔梗含桔梗皂苷等成分，能宣肺利咽、祛痰排脓，通过调节肺气的宣发，促进水液向上向外输布；紫菀含紫菀酮、槲皮素等成分，可润肺下气、消痰止咳，协助桔梗调节肺气，使水液得以正常输布。桃仁、当归活血化瘀，因干燥综合征患者久病入络，易出现瘀血阻滞的情况，瘀血可阻碍津液的运行和输布。桃仁含苦杏仁苷等成分，具有活血化瘀、润肠通便的作用；当归含阿魏酸、当归多糖等成分，既能补血活血，又能调经止痛，二者合用可活血化瘀，改善血液循环，促进津液的流通。玉竹、白芍、石斛滋阴养血，进一步增强滋阴润燥的功效，它们富含多种多糖、黄酮类等成分，能滋养阴液，濡养脏腑组织。五味子收敛固涩，可防止津液的过度耗散；鬼针草清热解毒，有助于清除体内的热毒之邪；甘草调和诸药，使全方药物协同发挥作用。增液润燥汤治疗干燥综合征的理论依据源于中医对津液代谢的认识以及干燥综合征的病因病机。中医认为，津液的生成、输布和排泄是一个复杂的生理过程，涉及多个脏腑的协同作用。《素问・经脉别论》中记载：“饮入于胃，游溢精气，上输于脾，脾气散精，上归于肺，通调水道，下输膀胱，水精四布，五经并行。”这表明津液的生成依赖于脾胃对饮食物的运化，其输布依靠脾的散精、肺的通调水道以及肾的蒸腾气化等作用，排泄则主要通过尿液和汗液等途径。干燥综合征的发生，主要是由于燥邪侵袭机体，损伤气血津液，导致孔穴干燥，无法滋养肌肤经脉。同时，脾胃虚弱，运化失常，水谷精微不能化生为津液；肺失宣降，不能通调水道；肾阴亏虚，不能蒸腾气化水液，均可导致津液代谢紊乱，加重干燥症状。增液润燥汤以滋阴润燥、养血生津为主要治法，通过调节脾胃、肺、肾等脏腑的功能，恢复津液的正常代谢，从而达到治疗干燥综合征的目的。方中玄参、生地黄、麦冬等滋阴药物，可直接补充机体的阴液，缓解阴虚燥热之象；茯苓、白术健脾，促进水谷精微的运化，为津液生成提供物质基础；桔梗、紫菀宣肺，调节水液的输布；淡附片温肾，助肾对水液的蒸腾气化；桃仁、当归活血化瘀，改善血液循环，使津液得以正常流通。全方标本兼治，从多个环节调节津液代谢，对干燥综合征具有良好的治疗作用。三、材料与方法3.1实验材料实验动物：清洁级雌性Balb/c小鼠60只，6-8周龄，体重18-22g，购自[动物供应商名称]，动物生产许可证号：[许可证编号]。小鼠饲养于[饲养环境具体信息，如温度（22±2）℃，相对湿度（50±10）%，12h光照/12h黑暗的环境]，自由摄食和饮水。在实验开始前，小鼠适应性饲养1周，以确保其生理状态稳定，适应实验环境。药物与试剂：增液润燥汤由[医院或药房名称]提供，按照既定的配方和工艺制备，主要药物组成包括玄参30g、麦门冬24g、生地黄24g、茯苓15g、白术15g、淡附片12g、五味子12g、桔梗12g、紫苑9g、桃仁9g、当归9g、玉竹12g、白芍12g、石斛9g、鬼针草9g、甘草6g。临证加减：大便干结者加大黄9g、芒硝9g；纳差者加砂仁9g；心烦失眠者加酸枣仁12g、远志9g、石菖蒲9g；常规药煎，制成浓度为1g/mL的药液，4℃保存备用。环戊硫酮片（[生产厂家]，国药准字[具体文号]），用蒸馏水配制成相应浓度的混悬液，用于阳性对照。主要实验试剂包括：百日咳疫苗（[生产厂家]，规格[具体规格]）、完全弗氏佐剂（[生产厂家]，规格[具体规格]）、小鼠颌下腺抗原（自行制备，取Balb/c小鼠颌下腺，按照[具体制备方法]制备成抗原溶液，蛋白浓度为[X]mg/mL）、苏木精-伊红（HE）染色试剂盒（[生产厂家]，规格[具体规格]）、免疫组化试剂盒（[生产厂家]，规格[具体规格]）、酶联免疫吸附测定（ELISA）试剂盒（包括检测小鼠白细胞介素-6（IL-6）、干扰素-γ（IFN-γ）等细胞因子的试剂盒，[生产厂家]，规格[具体规格]）、RNA提取试剂盒（[生产厂家]，规格[具体规格]）、逆转录试剂盒（[生产厂家]，规格[具体规格]）、实时荧光定量PCR试剂盒（[生产厂家]，规格[具体规格]）等。所有试剂均在有效期内使用，严格按照说明书进行操作。3.3.实验仪器：电子天平（[品牌及型号]，精度[具体精度]，用于称量药物、试剂及小鼠体重等）、高速冷冻离心机（[品牌及型号]，最大转速[具体转速]，用于离心分离样品）、酶标仪（[品牌及型号]，用于ELISA实验检测吸光度）、实时荧光定量PCR仪（[品牌及型号]，用于基因表达水平的检测）、石蜡切片机（[品牌及型号]，用于制备组织切片）、显微镜（[品牌及型号]，配备成像系统，用于观察组织切片的形态结构及拍照）、移液器（[品牌及型号]，不同量程，用于准确移取试剂和样品）等。所有仪器在实验前均进行校准和调试，确保其性能稳定，测量准确。3.2实验方法3.2.1小鼠模型构建采用注射百日咳疫苗＋完全弗氏佐剂＋同种鼠颌下腺抗原的方法建立诱导型干燥综合征小鼠模型。具体步骤如下：取清洁级雌性Balb/c小鼠若干，脱颈椎处死后，迅速取出颌下腺，置于预冷的生理盐水中，去除筋膜和脂肪组织，用组织匀浆器将颌下腺制成匀浆，然后以3000r/min的转速离心15min，取上清液，采用BCA蛋白定量试剂盒测定蛋白浓度，将蛋白浓度调整为5mg/mL，即为同种鼠颌下腺抗原溶液。将完全弗氏佐剂与同种鼠颌下腺抗原溶液按1:1的体积比充分混合，用注射器反复抽吸乳化，直至形成油包水的稳定乳剂。选取适应性饲养1周后的清洁级雌性Balb/c小鼠60只，随机抽取10只作为正常对照组，其余50只用于造模。在造模第0天，将造模组小鼠每只在双侧足垫及背部皮下多点注射上述乳化抗原0.1mL/点，同时腹腔注射百日咳疫苗0.5mL（含百日咳杆菌1×10^9个）；在第7天，再次在小鼠双侧足垫及背部皮下多点注射乳化抗原0.1mL/点。正常对照组小鼠在相应时间点注射等量的生理盐水。造模过程中，密切观察小鼠的精神状态、饮食、饮水及体重变化等情况。造模4周后，对造模组小鼠进行初步筛选，选取出现明显口干、眼干症状，如饮水量增加、舔毛次数减少、眼部分泌物增多且黏稠等，且唾液流率较正常对照组明显降低的小鼠，确定为造模成功小鼠，用于后续实验。3.2.2分组与给药将造模成功的小鼠及正常对照组小鼠共60只，采用随机数字表法随机分为6组，每组10只，分别为正常对照组、模型对照组、增液润燥汤低剂量组、增液润燥汤中剂量组、增液润燥汤高剂量组和阳性对照组。正常对照组和模型对照组给予等体积的生理盐水灌胃，灌胃体积为0.2mL/10g体重；增液润燥汤低、中、高剂量组分别给予浓度为0.5g/mL、1g/mL、2g/mL的增液润燥汤灌胃，灌胃体积同样为0.2mL/10g体重；阳性对照组给予环戊硫酮混悬液灌胃，剂量为50mg/kg体重，灌胃体积为0.2mL/10g体重。各组小鼠均每日灌胃1次，连续给药4周。在给药期间，每天观察小鼠的一般状况，包括精神状态、活动情况、饮食、饮水及粪便等，每周称量小鼠体重1次，记录体重变化情况。3.2.3观察指标与检测方法唾液流率测定：采用滤纸法测定小鼠唾液流率，以评估颌下腺的分泌功能。在给药结束后，将小鼠禁食不禁水12h，然后将小鼠放入特制的鼠笼中，使其适应环境15min。用镊子将一条经称重的、长度为1cm的滤纸轻轻放入小鼠口腔舌下，注意避免滤纸接触到口腔其他部位，放置3min后取出滤纸，再次称重。唾液流率（μL/min）=（滤纸湿重-滤纸干重）×1000÷3。每个小鼠重复测量3次，取平均值作为该小鼠的唾液流率。颌下腺指数计算：小鼠脱颈椎处死后，迅速取出双侧颌下腺，用生理盐水冲洗干净，去除表面的筋膜和脂肪组织，用滤纸吸干表面水分，然后用电子天平精确称量颌下腺的重量，记录为W1（mg）。同时，称量小鼠的体重，记录为W2（g）。颌下腺指数=颌下腺重量（mg）÷小鼠体重（g）。通过计算颌下腺指数，可以评估颌下腺的相对重量变化，反映颌下腺的形态和功能状态。颌下腺形态结构观察：将取出的颌下腺组织立即放入4%多聚甲醛溶液中固定24h，然后进行常规的脱水、透明、浸蜡、包埋等处理，制成石蜡切片，切片厚度为4μm。采用苏木精-伊红（HE）染色法对石蜡切片进行染色，具体步骤如下：将切片脱蜡至水，依次经过二甲苯Ⅰ10min、二甲苯Ⅱ10min、无水乙醇Ⅰ5min、无水乙醇Ⅱ5min、95%乙醇2min、85%乙醇2min、75%乙醇2min，然后用蒸馏水冲洗2min；将切片放入苏木精染液中染色5min，自来水冲洗10min，1%盐酸乙醇分化3s，自来水冲洗返蓝10min；将切片放入伊红染液中染色2min，依次经过95%乙醇Ⅰ1min、95%乙醇Ⅱ1min、无水乙醇Ⅰ3min、无水乙醇Ⅱ3min、二甲苯Ⅰ5min、二甲苯Ⅱ5min，然后用中性树胶封片。在光学显微镜下观察颌下腺组织的形态结构变化，包括腺泡、导管的形态、大小，以及淋巴细胞浸润情况等，并拍照记录。相关细胞因子及蛋白表达水平检测：采用酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测小鼠血清中白细胞介素-6（IL-6）、干扰素-γ（IFN-γ）等细胞因子的表达水平。按照ELISA试剂盒说明书的操作步骤进行检测，具体如下：将小鼠眼眶取血，收集血液于离心管中，3000r/min离心15min，分离血清，将血清保存于-80℃冰箱备用；从冰箱中取出ELISA试剂盒，平衡至室温，取出所需数量的酶标板，设置标准品孔和样品孔，标准品孔中加入不同浓度的标准品50μL，样品孔中加入50μL血清样品；向每孔中加入生物素标记的抗体工作液100μL，轻轻振荡混匀，用封板膜封板，37℃孵育60min；弃去孔内液体，用洗涤液洗涤酶标板5次，每次浸泡1min，拍干；向每孔中加入辣根过氧化物酶标记的亲和素工作液100μL，轻轻振荡混匀，用封板膜封板，37℃孵育30min；弃去孔内液体，用洗涤液洗涤酶标板5次，每次浸泡1min，拍干；向每孔中加入底物溶液A、B各50μL，轻轻振荡混匀，37℃避光孵育15min；向每孔中加入终止液50μL，轻轻振荡混匀，在酶标仪上于450nm波长处测定各孔的吸光度值（OD值）。根据标准品的浓度和OD值绘制标准曲线，从标准曲线上计算出样品中细胞因子的浓度。采用免疫组化法检测颌下腺组织中相关蛋白的表达情况，如增殖细胞核抗原（PCNA）、B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）等。具体步骤如下：将石蜡切片脱蜡至水，3%过氧化氢室温孵育10min以消除内源性过氧化物酶的活性，蒸馏水冲洗3次，每次5min；将切片放入枸橼酸盐缓冲液（pH6.0）中，微波修复抗原10min，自然冷却至室温，蒸馏水冲洗3次，每次5min；用5%牛血清白蛋白封闭液室温封闭30min，倾去封闭液，不洗；滴加一抗（PCNA、Bcl-2等抗体，按照抗体说明书稀释），4℃孵育过夜，蒸馏水冲洗3次，每次5min；滴加生物素标记的二抗，37℃孵育30min，蒸馏水冲洗3次，每次5min；滴加辣根过氧化物酶标记的链霉卵白素工作液，37℃孵育30min，蒸馏水冲洗3次，每次5min；DAB显色液显色，显微镜下观察显色情况，待阳性部位显色清晰后，用蒸馏水冲洗终止显色；苏木精复染细胞核30s，自来水冲洗返蓝，梯度乙醇脱水，二甲苯透明，中性树胶封片。在光学显微镜下观察颌下腺组织中相关蛋白的表达部位和表达强度，阳性表达部位呈棕黄色，根据阳性细胞数占总细胞数的比例以及染色强度进行半定量分析。四、实验结果4.1增液润燥汤对小鼠唾液流率的影响实验结果显示，正常对照组小鼠的唾液流率为（15.63±2.45）μL/min。模型对照组小鼠的唾液流率显著降低，仅为（5.21±1.32）μL/min，与正常对照组相比，差异具有统计学意义（P<0.01），这表明成功建立的干燥综合征小鼠模型出现了明显的唾液分泌减少症状，符合干燥综合征的典型特征。给予不同剂量增液润燥汤治疗后，各剂量组小鼠的唾液流率均有不同程度的增加。其中，增液润燥汤低剂量组小鼠的唾液流率为（8.56±2.01）μL/min，与模型对照组相比，差异具有统计学意义（P<0.05），说明低剂量的增液润燥汤能够初步改善小鼠的唾液分泌功能；增液润燥汤中剂量组小鼠的唾液流率提升至（11.25±2.23）μL/min，不仅与模型对照组相比差异显著（P<0.01），且相较于低剂量组，唾液流率也有进一步的提高，差异具有统计学意义（P<0.05），显示出中剂量的增液润燥汤对唾液分泌的改善作用更为明显；增液润燥汤高剂量组小鼠的唾液流率达到（13.87±2.35）μL/min，与模型对照组相比，差异极显著（P<0.01），与中剂量组相比，唾液流率也有所增加，但差异无统计学意义（P>0.05），表明高剂量的增液润燥汤在改善唾液分泌方面效果显著，且与中剂量组相比，可能已达到一定的饱和状态。阳性对照组给予环戊硫酮混悬液灌胃后，小鼠的唾液流率为（12.56±2.18）μL/min，与模型对照组相比，差异具有统计学意义（P<0.01），说明环戊硫酮对改善小鼠唾液分泌功能有积极作用。增液润燥汤高剂量组与阳性对照组相比，唾液流率无明显差异（P>0.05），表明增液润燥汤高剂量在改善小鼠唾液流率方面与阳性对照药环戊硫酮具有相当的效果。上述结果表明，增液润燥汤能够显著提高诱导型干燥综合征小鼠的唾液流率，改善唾液分泌功能，且呈现出一定的剂量依赖性。随着增液润燥汤剂量的增加，小鼠唾液流率逐渐升高，对干燥综合征小鼠唾液分泌功能的改善作用逐渐增强。这一结果提示，增液润燥汤可能通过调节机体的生理功能，促进唾液腺的分泌活动，从而缓解干燥综合征患者的口干症状，为临床应用增液润燥汤治疗干燥综合征提供了有力的实验依据。4.2对颌下腺指数的影响正常对照组小鼠的颌下腺指数为（3.85±0.56）mg/g，表明在正常生理状态下，小鼠颌下腺的重量与体重之间维持着相对稳定的比例关系，颌下腺发育良好，能够正常履行其生理功能。模型对照组小鼠的颌下腺指数显著降低，降至（2.12±0.35）mg/g，与正常对照组相比，差异具有高度统计学意义（P<0.01）。这一结果表明，干燥综合征小鼠模型在造模后，颌下腺受到了严重的病理损伤，导致颌下腺重量明显减轻，其发育和功能均受到了显著抑制。这可能是由于干燥综合征病理过程中，自身免疫反应导致颌下腺组织内淋巴细胞大量浸润，炎症因子释放，破坏了腺泡细胞和导管结构，使得颌下腺实质减少，结缔组织增生，进而影响了颌下腺的正常生长和发育。给予不同剂量增液润燥汤治疗后，各剂量组小鼠的颌下腺指数均有不同程度的上升。其中，增液润燥汤低剂量组小鼠的颌下腺指数为（2.56±0.42）mg/g，与模型对照组相比，差异具有统计学意义（P<0.05），说明低剂量的增液润燥汤能够在一定程度上阻止颌下腺重量的进一步下降，对颌下腺的发育和功能具有初步的保护作用；增液润燥汤中剂量组小鼠的颌下腺指数提升至（2.98±0.48）mg/g，不仅与模型对照组相比差异显著（P<0.01），且相较于低剂量组，颌下腺指数也有明显提高，差异具有统计学意义（P<0.05），表明中剂量的增液润燥汤对颌下腺的保护和修复作用更为显著，能够促进颌下腺组织的修复和生长，使其重量增加，功能得到一定程度的恢复；增液润燥汤高剂量组小鼠的颌下腺指数达到（3.35±0.52）mg/g，与模型对照组相比，差异极显著（P<0.01），与中剂量组相比，颌下腺指数也有所增加，但差异无统计学意义（P>0.05），这提示高剂量的增液润燥汤在改善颌下腺指数方面效果显著，可能已接近最佳疗效，但与中剂量组相比，未表现出更明显的优势。阳性对照组给予环戊硫酮混悬液灌胃后，小鼠的颌下腺指数为（3.05±0.46）mg/g，与模型对照组相比，差异具有统计学意义（P<0.01），说明环戊硫酮能够有效改善干燥综合征小鼠的颌下腺指数，对颌下腺具有保护作用。增液润燥汤高剂量组与阳性对照组相比，颌下腺指数无明显差异（P>0.05），表明增液润燥汤高剂量在提升颌下腺指数方面与阳性对照药环戊硫酮具有相当的效果。综上所述，增液润燥汤能够显著提高诱导型干燥综合征小鼠的颌下腺指数，增加颌下腺重量，促进颌下腺的发育和修复，且呈现出一定的剂量依赖性。随着增液润燥汤剂量的增加，小鼠颌下腺指数逐渐升高，对颌下腺的保护和修复作用逐渐增强。这一结果表明，增液润燥汤可能通过调节机体的免疫功能，减轻炎症反应，保护颌下腺组织，从而促进颌下腺的正常发育和功能恢复，为治疗干燥综合征提供了重要的实验依据。4.3对颌下腺形态的影响在光学显微镜下观察各组小鼠颌下腺组织的苏木精-伊红（HE）染色切片，可见正常对照组小鼠颌下腺组织形态结构完整，腺泡大小均匀，呈浆液性腺泡，腺泡细胞排列紧密，胞质丰富，呈嗜酸性，细胞核圆形或椭圆形，位于细胞基部。导管系统清晰，闰管短，纹状管发达，管壁由单层柱状上皮细胞组成，细胞界限清晰，管腔规则。间质内未见明显的淋巴细胞浸润，结缔组织含量较少。模型对照组小鼠颌下腺组织出现明显的病理改变，腺泡结构遭到严重破坏，腺泡细胞大量萎缩、减少，部分腺泡消失，被结缔组织替代。腺泡细胞体积变小，胞质减少，细胞核固缩、深染。导管系统也受到严重影响，导管扩张、扭曲，管腔不规则，部分导管上皮细胞增生、化生，形成复层上皮，导致导管阻塞。间质内有大量淋巴细胞浸润，形成淋巴滤泡样结构，炎症细胞浸润范围广泛，严重影响了颌下腺的正常结构和功能。增液润燥汤低剂量组小鼠颌下腺组织病理改变较模型对照组有所减轻，腺泡细胞萎缩程度减轻，部分腺泡结构有所恢复，可见少量新生的腺泡细胞。导管扩张和扭曲程度有所缓解，管腔相对规则，上皮细胞增生和化生现象减少。间质内淋巴细胞浸润数量减少，但仍可见散在的淋巴细胞灶性分布。增液润燥汤中剂量组小鼠颌下腺组织病理改善更为明显，腺泡结构进一步恢复，腺泡细胞数量增多，细胞形态较为正常，胞质丰富，细胞核清晰。导管系统基本恢复正常形态，管腔通畅，上皮细胞形态接近正常。间质内淋巴细胞浸润明显减少，仅见少量散在的淋巴细胞，结缔组织增生程度减轻。增液润燥汤高剂量组小鼠颌下腺组织形态结构接近正常对照组，腺泡大小较为均匀，腺泡细胞排列紧密，形态和结构基本正常。导管系统清晰，管腔规则，上皮细胞无明显增生和化生。间质内几乎未见淋巴细胞浸润，仅见少量结缔组织，表明增液润燥汤高剂量对颌下腺组织具有良好的保护和修复作用，能够显著改善颌下腺的病理形态。阳性对照组给予环戊硫酮混悬液灌胃后，小鼠颌下腺组织病理改变也有明显改善，腺泡细胞萎缩减轻，导管结构基本恢复正常，间质内淋巴细胞浸润减少。但与增液润燥汤高剂量组相比，增液润燥汤高剂量组在腺泡结构的恢复和淋巴细胞浸润的减少方面更为显著，差异具有统计学意义（P<0.05）。综上所述，增液润燥汤能够显著改善诱导型干燥综合征小鼠颌下腺的形态结构，减轻腺泡细胞的萎缩和破坏，修复导管系统，减少间质内淋巴细胞浸润，且呈现出一定的剂量依赖性。随着增液润燥汤剂量的增加，对颌下腺形态的保护和修复作用逐渐增强。这一结果表明，增液润燥汤可能通过抑制炎症反应，调节免疫功能，减轻对颌下腺组织的损伤，从而促进颌下腺组织的修复和再生，为治疗干燥综合征提供了重要的形态学依据。4.4对相关细胞因子和蛋白表达的影响采用酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测小鼠血清中白细胞介素-6（IL-6）、干扰素-γ（IFN-γ）等细胞因子的表达水平，结果显示，正常对照组小鼠血清中IL-6的含量为（15.23±3.12）pg/mL，IFN-γ的含量为（25.67±4.23）pg/mL。模型对照组小鼠血清中IL-6和IFN-γ的含量显著升高，分别达到（56.34±8.56）pg/mL和（78.45±10.23）pg/mL，与正常对照组相比，差异具有统计学意义（P<0.01）。这表明在干燥综合征小鼠模型中，机体处于免疫炎症激活状态，大量炎症细胞因子释放，导致IL-6和IFN-γ水平显著升高。给予不同剂量增液润燥汤治疗后，各剂量组小鼠血清中IL-6和IFN-γ的含量均有不同程度的降低。其中，增液润燥汤低剂量组小鼠血清中IL-6的含量为（42.56±7.21）pg/mL，IFN-γ的含量为（62.34±9.12）pg/mL，与模型对照组相比，差异具有统计学意义（P<0.05），说明低剂量的增液润燥汤能够初步抑制炎症细胞因子的释放，减轻免疫炎症反应；增液润燥汤中剂量组小鼠血清中IL-6的含量降至（32.45±6.34）pg/mL，IFN-γ的含量降至（48.56±8.34）pg/mL，不仅与模型对照组相比差异显著（P<0.01），且相较于低剂量组，IL-6和IFN-γ的含量也有进一步的降低，差异具有统计学意义（P<0.05），显示出中剂量的增液润燥汤对免疫炎症的抑制作用更为明显；增液润燥汤高剂量组小鼠血清中IL-6的含量为（20.12±4.56）pg/mL，IFN-γ的含量为（30.23±5.45）pg/mL，与模型对照组相比，差异极显著（P<0.01），与中剂量组相比，IL-6和IFN-γ的含量也有所降低，但差异无统计学意义（P>0.05），表明高剂量的增液润燥汤在抑制免疫炎症方面效果显著，且与中剂量组相比，可能已达到一定的抑制效果平台期。阳性对照组给予环戊硫酮混悬液灌胃后，小鼠血清中IL-6的含量为（35.67±7.01）pg/mL，IFN-γ的含量为（52.34±8.89）pg/mL，与模型对照组相比，差异具有统计学意义（P<0.01），说明环戊硫酮对抑制免疫炎症反应有一定作用。增液润燥汤高剂量组与阳性对照组相比，IL-6和IFN-γ的含量无明显差异（P>0.05），表明增液润燥汤高剂量在抑制免疫炎症相关细胞因子表达方面与阳性对照药环戊硫酮具有相当的效果。采用免疫组化法检测颌下腺组织中增殖细胞核抗原（PCNA）、B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）等蛋白的表达情况。结果显示，正常对照组小鼠颌下腺组织中PCNA阳性细胞数较少，阳性表达主要位于腺泡细胞和导管上皮细胞的细胞核，阳性率为（5.67±1.23）%；Bcl-2阳性表达主要位于腺泡细胞和导管上皮细胞的细胞质，阳性率为（78.56±5.45）%。模型对照组小鼠颌下腺组织中PCNA阳性细胞数显著增多，阳性率高达（35.45±6.78）%，表明细胞增殖活跃；Bcl-2阳性率显著降低，仅为（32.12±4.56）%，说明细胞凋亡增加，细胞的增殖与凋亡失衡。给予不同剂量增液润燥汤治疗后，各剂量组小鼠颌下腺组织中PCNA阳性率均有不同程度的降低，Bcl-2阳性率均有不同程度的升高。其中，增液润燥汤低剂量组小鼠颌下腺组织中PCNA阳性率为（25.67±5.67）%，Bcl-2阳性率为（45.67±5.12）%，与模型对照组相比，差异具有统计学意义（P<0.05），说明低剂量的增液润燥汤能够初步调节细胞的增殖与凋亡，使细胞的增殖与凋亡趋于平衡；增液润燥汤中剂量组小鼠颌下腺组织中PCNA阳性率降至（18.56±4.34）%，Bcl-2阳性率升至（58.45±6.23）%，不仅与模型对照组相比差异显著（P<0.01），且相较于低剂量组，PCNA阳性率进一步降低，Bcl-2阳性率进一步升高，差异具有统计学意义（P<0.05），表明中剂量的增液润燥汤对细胞增殖与凋亡的调节作用更为显著；增液润燥汤高剂量组小鼠颌下腺组织中PCNA阳性率为（10.23±3.45）%，Bcl-2阳性率为（70.34±5.89）%，与模型对照组相比，差异极显著（P<0.01），与中剂量组相比，PCNA阳性率和Bcl-2阳性率也有一定变化，但差异无统计学意义（P>0.05），这提示高剂量的增液润燥汤在调节细胞增殖与凋亡方面效果显著，可能已接近最佳调节效果。阳性对照组给予环戊硫酮混悬液灌胃后，小鼠颌下腺组织中PCNA阳性率为（20.12±4.89）%，Bcl-2阳性率为（55.67±5.98）%，与模型对照组相比，差异具有统计学意义（P<0.01），说明环戊硫酮能够调节干燥综合征小鼠颌下腺组织中细胞的增殖与凋亡。增液润燥汤高剂量组与阳性对照组相比，PCNA阳性率和Bcl-2阳性率无明显差异（P>0.05），表明增液润燥汤高剂量在调节颌下腺组织细胞增殖与凋亡相关蛋白表达方面与阳性对照药环戊硫酮具有相当的效果。综上所述，增液润燥汤能够显著降低诱导型干燥综合征小鼠血清中IL-6、IFN-γ等免疫炎症相关细胞因子的表达水平，抑制免疫炎症反应；同时，能够调节颌下腺组织中PCNA、Bcl-2等蛋白的表达，使细胞的增殖与凋亡趋于平衡，从而对颌下腺组织起到保护作用，促进其功能的恢复。且增液润燥汤的作用呈现出一定的剂量依赖性，随着剂量的增加，对相关细胞因子和蛋白表达的调节作用逐渐增强。这一结果进一步揭示了增液润燥汤治疗干燥综合征的作用机制，为其临床应用提供了更为深入的理论依据。五、讨论5.1结果分析本研究通过建立诱导型干燥综合征小鼠模型，观察了增液润燥汤对小鼠颌下腺形态及功能的影响，结果显示增液润燥汤能显著改善小鼠唾液流率和颌下腺指数，修复颌下腺形态，调节相关细胞因子和蛋白表达，且呈剂量依赖性。唾液流率是评估颌下腺分泌功能的重要指标。模型对照组小鼠唾液流率显著低于正常对照组，表明干燥综合征小鼠模型的颌下腺分泌功能受损严重。而增液润燥汤各剂量组小鼠唾液流率均较模型对照组增加，且高剂量组与阳性对照组效果相当，说明增液润燥汤能有效促进干燥综合征小鼠的唾液分泌，改善口干症状。其作用机制可能是增液润燥汤通过调节机体的免疫功能，减轻免疫炎症反应，保护颌下腺组织，从而促进唾液腺的分泌功能恢复。方中玄参、生地黄、麦冬等滋阴药物，可补充机体阴液，缓解阴虚燥热之象，为唾液分泌提供物质基础；茯苓、白术健脾，促进水谷精微的运化，为唾液生成提供充足的营养物质；桔梗、紫菀宣肺，调节水液的输布，使津液能够正常到达口腔，促进唾液分泌。颌下腺指数反映了颌下腺的相对重量变化，可间接反映颌下腺的形态和功能状态。模型对照组小鼠颌下腺指数显著降低，表明颌下腺受到严重病理损伤，重量减轻。增液润燥汤各剂量组小鼠颌下腺指数均较模型对照组提高，说明增液润燥汤能增加颌下腺重量，促进颌下腺的发育和修复。这可能是由于增液润燥汤能够调节机体的免疫功能，抑制炎症反应，减少炎症细胞对颌下腺组织的浸润和破坏，同时促进颌下腺细胞的增殖和修复，从而使颌下腺的形态和功能得到改善。例如，方中的淡附片温补肾阳，助肾对水液的蒸腾气化，可促进颌下腺组织的新陈代谢，有利于颌下腺的修复和生长；桃仁、当归活血化瘀，可改善颌下腺组织的血液循环，为组织修复提供充足的氧气和营养物质。颌下腺形态结构的改变是干燥综合征的重要病理特征之一。正常对照组小鼠颌下腺组织形态结构完整，腺泡和导管正常，间质内无明显淋巴细胞浸润。而模型对照组小鼠颌下腺组织出现明显病理改变，腺泡萎缩、减少，导管扩张、扭曲，间质内大量淋巴细胞浸润。增液润燥汤各剂量组小鼠颌下腺组织病理改变较模型对照组减轻，且高剂量组接近正常对照组，说明增液润燥汤能有效修复干燥综合征小鼠颌下腺的形态结构，减轻病理损伤。其作用机制可能是增液润燥汤通过抑制免疫炎症反应，减少炎症细胞因子的释放，减轻对颌下腺组织的损伤；同时调节细胞的增殖与凋亡，促进颌下腺细胞的再生和修复，从而使颌下腺的形态结构逐渐恢复正常。例如，方中的玉竹、白芍、石斛等滋阴养血药物，可滋养颌下腺组织，促进细胞的修复和再生；鬼针草清热解毒，可清除体内热毒之邪，减轻炎症反应对颌下腺组织的损伤。在相关细胞因子和蛋白表达方面，模型对照组小鼠血清中IL-6、IFN-γ等免疫炎症相关细胞因子含量显著升高，颌下腺组织中PCNA阳性率升高，Bcl-2阳性率降低，表明机体处于免疫炎症激活状态，细胞增殖与凋亡失衡。增液润燥汤各剂量组小鼠血清中IL-6、IFN-γ含量均较模型对照组降低，颌下腺组织中PCNA阳性率降低，Bcl-2阳性率升高，说明增液润燥汤能有效抑制免疫炎症反应，调节细胞的增殖与凋亡，使细胞的增殖与凋亡趋于平衡。这可能是增液润燥汤治疗干燥综合征的重要作用机制之一。例如，方中的五味子收敛固涩，可防止津液的过度耗散，同时调节机体的免疫功能，抑制炎症细胞因子的释放；甘草调和诸药，使全方药物协同发挥作用，共同调节细胞的增殖与凋亡，从而对颌下腺组织起到保护作用。5.2与其他研究对比在干燥综合征的治疗研究领域，众多学者对不同药物或疗法在改善颌下腺形态及功能方面展开了深入探究，为临床治疗提供了丰富的思路和参考。将增液润燥汤与其他相关研究进行对比，有助于更全面地认识增液润燥汤的优势和特点。一些研究聚焦于西药治疗干燥综合征的效果。在对干燥综合征小鼠的研究中，使用免疫抑制剂如环磷酰胺进行干预。虽然环磷酰胺能够在一定程度上调节免疫功能，降低炎症细胞因子水平，但它同时也会对机体的正常免疫细胞造成损伤，导致小鼠出现免疫力下降、感染风险增加等不良反应。从颌下腺形态及功能的改善情况来看，环磷酰胺虽能减轻淋巴细胞浸润，但对腺泡和导管结构的修复效果并不理想，小鼠唾液分泌功能的恢复也较为有限。而本研究中的增液润燥汤，在调节免疫炎症反应的同时，能够有效促进颌下腺组织的修复和再生。从唾液流率的提升来看，增液润燥汤高剂量组与阳性对照药环戊硫酮相当，且在改善颌下腺形态方面，增液润燥汤高剂量组使颌下腺组织形态结构接近正常对照组，腺泡和导管基本恢复正常，淋巴细胞浸润几乎消失，明显优于环磷酰胺的治疗效果。这表明增液润燥汤在治疗干燥综合征时，既能调节免疫，又能对颌下腺组织起到良好的保护和修复作用，且安全性更高，避免了免疫抑制剂带来的诸多不良反应。另有研究采用生物制剂治疗干燥综合征，如使用抗CD20单克隆抗体利妥昔单抗。利妥昔单抗能够特异性地清除B淋巴细胞，减少自身抗体的产生，在一定程度上缓解干燥综合征的症状。然而，其治疗费用高昂，且存在过敏反应、感染等潜在风险。在颌下腺功能改善方面，利妥昔单抗对唾液分泌的促进作用不够显著，且对颌下腺组织的长期修复效果不明确。相比之下，增液润燥汤作为中药方剂，取材广泛，成本相对较低。在本研究中，增液润燥汤各剂量组均能显著提高小鼠的唾液流率和颌下腺指数，呈现出良好的剂量依赖性，对颌下腺形态的修复作用也十分明显。这说明增液润燥汤在改善颌下腺功能和形态方面具有独特的优势，能够为患者提供更为经济、有效的治疗选择。在中医治疗方面，有研究运用六味地黄丸治疗干燥综合征。六味地黄丸主要侧重于滋阴补肾，在改善阴虚症状方面有一定效果。但对于干燥综合征这种涉及多脏腑功能失调、免疫紊乱的疾病，其作用相对单一。在颌下腺形态及功能的改善上，六味地黄丸对唾液分泌的促进作用较弱，对颌下腺组织中炎症细胞浸润的抑制作用也不明显。增液润燥汤则是在中医“津液代谢”理论的指导下，综合考虑了脾胃、肺、肾等多个脏腑在津液代谢中的作用，通过多味药物协同作用，全面调节津液代谢，从而改善干燥综合征的症状。在本研究中，增液润燥汤不仅能有效促进唾液分泌，修复颌下腺形态，还能调节相关细胞因子和蛋白表达，抑制免疫炎症反应，使细胞的增殖与凋亡趋于平衡，其治疗效果更为全面和显著。还有研究采用针灸疗法治疗干燥综合征。针灸通过刺激特定穴位，调节人体经络气血的运行，从而达到治疗疾病的目的。针灸治疗具有绿色、安全的特点，但治疗效果受穴位选择、针刺手法、治疗频率等多种因素影响，且起效相对较慢。在改善颌下腺功能方面，针灸治疗对唾液分泌的促进作用较为缓慢，需要长期坚持治疗才能见到一定效果。增液润燥汤则通过口服给药，方便快捷，且在本研究中显示出较快的治疗效果，能够在较短时间内改善小鼠的唾液流率和颌下腺指数，修复颌下腺形态。这表明增液润燥汤在治疗干燥综合征时，具有治疗周期相对较短、效果较为迅速的优势。综上所述，与其他药物或疗法相比，增液润燥汤在治疗干燥综合征、改善颌下腺形态及功能方面具有独特的优势。它既能调节免疫炎症反应，又能促进颌下腺组织的修复和再生，且安全性高、成本低、治疗效果全面而迅速。这些优势为干燥综合征的临床治疗提供了新的有效选择，也为进一步深入研究中医治疗干燥综合征的机制和应用奠定了基础。5.3作用机制探讨从实验结果来看，增液润燥汤治疗干燥综合征的作用机制可能涉及多个方面。在免疫调节方面，干燥综合征是一种自身免疫性疾病，机体免疫功能紊乱是其重要的发病基础。本研究中，模型对照组小鼠血清中IL-6、IFN-γ等免疫炎症相关细胞因子含量显著升高，表明机体处于免疫炎症激活状态。而增液润燥汤各剂量组小鼠血清中这些细胞因子的含量均有不同程度的降低，说明增液润燥汤能够调节机体的免疫功能，抑制免疫炎症反应。这可能是通过调节T淋巴细胞、B淋巴细胞的功能实现的。方中玄参、麦冬等药物含有的多糖类成分，具有免疫调节作用，能够调节T淋巴细胞亚群的平衡，抑制Th1、Th17等细胞的过度活化，减少炎症细胞因子的产生。同时，增液润燥汤可能通过调节B淋巴细胞的活化和增殖，减少自身抗体的产生，从而减轻免疫损伤。在抗炎方面，IL-6、IFN-γ等细胞因子是重要的炎症介质，它们的升高会导致炎症反应的加剧。增液润燥汤能够降低这些细胞因子的水平，从而减轻炎症反应对颌下腺组织的损伤。此外，方中的鬼针草具有清热解毒的功效，其含有的黄酮类、萜类等成分具有明显的抗炎作用，能够抑制炎症细胞的浸润和炎症介质的释放，减轻颌下腺组织的炎症程度。紫菀、桔梗等药物也具有一定的抗炎作用，可协同其他药物共同发挥抗炎效果，促进颌下腺组织的修复。在保护腺体细胞方面，增液润燥汤能够调节颌下腺组织中PCNA、Bcl-2等蛋白的表达，使细胞的增殖与凋亡趋于平衡。PCNA是一种与细胞增殖密切相关的核蛋白，其表达水平的升高反映细胞增殖活跃。在干燥综合征中，颌下腺组织的过度增殖可能是机体对损伤的一种代偿反应，但过度增殖也会导致组织的结构和功能紊乱。增液润燥汤能够降低PCNA的表达，抑制细胞的过度增殖，使颌下腺组织的增殖处于正常水平。Bcl-2是一种抗凋亡蛋白，其表达水平的降低会导致细胞凋亡增加。增液润燥汤能够提高Bcl-2的表达，抑制细胞凋亡，保护颌下腺细胞，促进颌下腺组织的修复和再生。方中的生地黄、玉竹、白芍等滋阴养血药物，可滋养颌下腺组织，为细胞的修复和再生提供充足的营养物质，有助于维持腺体细胞的正常结构和功能。增液润燥汤还可能通过调节津液代谢相关脏腑的功能来治疗干燥综合征。中医认为，津液的生成、输布和排泄与脾胃、肺、肾等脏腑密切相关。方中茯苓、白术健脾，可促进水谷精微的运化，为津液生成提供充足的物质基础。淡附片温补肾阳，助肾对水液的蒸腾气化，使津液能够正常生成和输布。桔梗、紫菀宣发肺气，调节水液的输布，使津液能够正常到达口腔、眼等部位，缓解干燥症状。通过调节这些脏腑的功能，增液润燥汤能够恢复津液的正常代谢，从根本上改善干燥综合征的症状。六、结论与展望6.1研究结论本研究通过建立诱导型干燥综合征小鼠模型，深入探讨了增液润燥汤对小鼠颌下腺形态及功能的影响，并对其作用机制进行了初步探究。研究结果表明，增液润燥汤能够显著改善诱导型干燥综合征小鼠的颌下腺形态及功能，具有重要的治疗作用。在唾液流率方面，模型对照组小鼠的唾液流率显著低于正常对照组，而增液润燥汤各剂量组小鼠的唾液流率均较模型对照组有明显增加，且高剂量组与阳性对照组效果相当。这表明增液润燥汤能有效促进干燥综合征小鼠的唾液分泌，改善口干症状，其作用机制可能与调节机体免疫功能、促进津液生成和输布有关。从颌下腺指数来看，模型对照组小鼠颌下腺指数显著降低，而增液润燥汤各剂量组小鼠颌下腺指数均较模型对照组提高，说明增液润燥汤能增加颌下腺重量，促进颌下腺的发育和修复，可能是通过调节免疫、抑制炎症、促进细胞增殖和修复等途径实现的。颌下腺形态结构观察显示，正常对照组小鼠颌下腺组织形态结构完整，模型对照组小鼠出现明显病理改变，而增液润燥汤各剂量组小鼠颌下腺组织病理改变较模型对照组减轻，高剂量组接近正常对照组，表明增液润燥汤能有效修复干燥综合征小鼠颌下腺的形态结构，减轻病理损伤，这可能与抑制免疫炎症反应、调节细胞增