2025生物制药试卷及答案详解

2025生物制药试卷及答案详解一、单项选择题（每题2分，共40分）1.下列哪种技术不属于基因工程制药技术的常用工具酶（）A.限制性核酸内切酶B.DNA连接酶C.逆转录酶D.淀粉酶答案：D详解：基因工程制药常用的工具酶有限制性核酸内切酶（用于切割目的基因和载体）、DNA连接酶（用于连接目的基因和载体）、逆转录酶（用于以mRNA为模板合成cDNA）。而淀粉酶是水解淀粉的酶，不属于基因工程制药的常用工具酶。2.单克隆抗体技术中，用于筛选杂交瘤细胞的培养基是（）A.完全培养基B.HAT培养基C.无血清培养基D.高糖培养基答案：B详解：在单克隆抗体技术中，HAT培养基用于筛选杂交瘤细胞。因为未融合的骨髓瘤细胞不能在HAT培养基中存活，未融合的淋巴细胞不能在体外长期存活，只有杂交瘤细胞既能在体外长期存活又能产生特异性抗体，可在HAT培养基中生长。完全培养基用于细胞的一般培养；无血清培养基是为了减少血清带来的影响；高糖培养基一般用于特定细胞的培养，但不是用于筛选杂交瘤细胞。3.下列哪种细胞系可用于疫苗生产（）A.原代细胞系B.二倍体细胞系C.连续细胞系D.以上都是答案：D详解：原代细胞系是直接从机体取出组织经分散后培养的细胞，如鸡胚成纤维细胞可用于生产鸡痘疫苗等；二倍体细胞系染色体数目保持二倍体状态，具有有限的传代能力，如人胚肺二倍体细胞可用于生产多种病毒疫苗；连续细胞系具有无限增殖能力，如Vero细胞可用于生产狂犬病疫苗等。所以以上三种细胞系都可用于疫苗生产。4.蛋白质药物的冷冻干燥过程中，预冻的主要目的是（）A.除去水分B.使蛋白质固定在冰的网络结构中C.降低生产成本D.提高药物的纯度答案：B详解：在蛋白质药物的冷冻干燥过程中，预冻是将药液降温冻结，使蛋白质固定在冰的网络结构中，防止在后续的升华干燥过程中蛋白质发生聚集、变性等。除去水分主要是在升华干燥和解析干燥阶段；预冻并不能降低生产成本；提高药物纯度主要通过前期的分离纯化步骤，而不是预冻。5.下列哪种生物反应器适合培养贴壁依赖性细胞（）A.搅拌式生物反应器B.气升式生物反应器C.固定床生物反应器D.流化床生物反应器答案：C详解：固定床生物反应器内部填充有载体，贴壁依赖性细胞可以附着在载体表面生长，适合培养贴壁依赖性细胞。搅拌式生物反应器主要通过搅拌使细胞和培养液充分混合，对贴壁细胞有一定的剪切力，不太适合贴壁依赖性细胞；气升式生物反应器利用气体的上升带动培养液循环，也存在一定的流体剪切力；流化床生物反应器中载体处于流化状态，也会对贴壁细胞造成较大的冲击，不利于贴壁细胞生长。6.基因治疗中，下列哪种载体属于非病毒载体（）A.腺病毒载体B.逆转录病毒载体C.脂质体载体D.慢病毒载体答案：C详解：腺病毒载体、逆转录病毒载体、慢病毒载体都属于病毒载体，它们是经过改造的病毒，利用病毒的感染特性将外源基因导入细胞。而脂质体载体是由磷脂等脂质材料形成的人工膜泡，属于非病毒载体，可包裹基因并将其导入细胞。7.发酵过程中，通过控制溶氧水平来调节微生物的代谢，一般好气性微生物发酵时溶氧应控制在（）A.10%以下B.10%20%C.20%30%D.30%以上答案：D详解：好气性微生物在生长和代谢过程中需要充足的氧气，一般发酵时溶氧应控制在30%以上，以满足微生物的呼吸需求，保证其正常的生长和代谢。如果溶氧过低，会影响微生物的生长和产物合成。8.下列哪种方法可用于蛋白质药物的纯度检测（）A.高效液相色谱法（HPLC）B.酶联免疫吸附测定（ELISA）C.聚合酶链反应（PCR）D.荧光定量PCR答案：A详解：高效液相色谱法（HPLC）可根据蛋白质的物理化学性质对其进行分离和检测，能够准确测定蛋白质药物的纯度。酶联免疫吸附测定（ELISA）主要用于检测抗原或抗体的含量；聚合酶链反应（PCR）和荧光定量PCR主要用于扩增和检测核酸序列，不能用于蛋白质药物纯度检测。9.细胞培养过程中，添加血清的主要作用不包括（）A.提供营养物质B.提供生长因子C.调节渗透压D.防止微生物污染答案：D详解：血清中含有丰富的营养物质（如氨基酸、维生素、矿物质等）、生长因子（如表皮生长因子、成纤维细胞生长因子等），还可以调节培养液的渗透压，有利于细胞的生长和增殖。但血清本身并不能防止微生物污染，防止微生物污染需要通过严格的无菌操作和添加抗生素等措施。10.下列哪种生物技术可用于大规模生产重组蛋白（）A.基因工程技术B.细胞工程技术C.发酵工程技术D.以上都是答案：D详解：基因工程技术可将编码重组蛋白的基因导入合适的宿主细胞；细胞工程技术可对宿主细胞进行培养和优化；发酵工程技术则利用生物反应器等设备，为细胞的生长和重组蛋白的表达提供适宜的条件，实现大规模培养和重组蛋白的大规模生产。所以以上三种生物技术都可用于大规模生产重组蛋白。11.生物制药中，用于去除内毒素的方法是（）A.过滤法B.离子交换色谱法C.亲和色谱法D.以上都是答案：D详解：过滤法可通过特定孔径的滤膜去除内毒素；离子交换色谱法利用内毒素与离子交换介质的电荷相互作用进行分离去除；亲和色谱法可利用对内毒素具有特异性亲和力的配体进行分离。所以以上三种方法都可用于去除内毒素。12.蛋白质药物的储存条件一般要求（）A.高温高湿B.低温干燥C.常温常压D.光照充足答案：B详解：蛋白质药物在高温高湿、光照充足的条件下容易发生变性、降解等，常温常压下也不利于其长期保存。低温干燥的条件可以降低蛋白质的活性，减少其降解和变性的速度，有利于蛋白质药物的储存。13.下列关于疫苗的说法，错误的是（）A.疫苗可以分为预防性疫苗和治疗性疫苗B.灭活疫苗是将病原微生物灭活后制成的疫苗C.减毒活疫苗的安全性高于灭活疫苗D.亚单位疫苗是提取病原微生物的有效抗原成分制成的疫苗答案：C详解：疫苗分为预防性疫苗和治疗性疫苗；灭活疫苗是通过物理或化学方法将病原微生物灭活后制成；亚单位疫苗是提取病原微生物的有效抗原成分制成。而减毒活疫苗是用减毒的病原微生物制成，虽然免疫效果较好，但由于是活的微生物，存在一定的毒力返祖等风险，安全性不一定高于灭活疫苗。14.基因工程药物生产中，目的基因的获取方法不包括（）A.从基因组文库中筛选B.从cDNA文库中筛选C.人工合成D.从血清中提取答案：D详解：目的基因的获取方法有从基因组文库中筛选、从cDNA文库中筛选、人工合成等。血清中主要含有蛋白质、抗体等物质，一般不用于提取目的基因。15.发酵过程中，通过控制pH来调节微生物的代谢，一般细菌发酵的最适pH范围是（）A.4.05.0B.5.06.0C.6.57.5D.7.58.5答案：C详解：一般细菌发酵的最适pH范围是6.57.5，在此pH范围内细菌的生长和代谢最为旺盛。不同的细菌可能有一定的差异，但总体上这个范围比较适合大多数细菌。pH过高或过低都会影响细菌的酶活性和细胞膜的稳定性，从而影响其生长和代谢。16.单克隆抗体的特点不包括（）A.高度特异性B.高度均一性C.可大量制备D.多克隆性答案：D详解：单克隆抗体是由单个B淋巴细胞克隆产生的，具有高度特异性、高度均一性，并且可以通过细胞培养等技术大量制备。而多克隆性是多克隆抗体的特点，多克隆抗体是由多个B淋巴细胞克隆产生的，针对同一抗原的不同表位。17.细胞培养过程中，细胞的传代是指（）A.细胞的增殖B.细胞的分化C.将细胞从一个培养瓶转移到另一个培养瓶D.细胞的衰老答案：C详解：细胞传代是指将细胞从一个培养瓶转移到另一个培养瓶，并补充新鲜培养液，以维持细胞的生长和增殖。细胞的增殖是细胞数量的增加；细胞的分化是细胞在形态、结构和功能上发生稳定性差异的过程；细胞的衰老是细胞生理功能逐渐衰退的过程。18.下列哪种方法可用于检测生物药物中的微生物污染（）A.无菌检查法B.热源检查法C.内毒素检查法D.蛋白质含量测定法答案：A详解：无菌检查法用于检测生物药物中是否存在微生物污染。热源检查法主要检测药物中是否存在热源物质；内毒素检查法主要检测内毒素的含量；蛋白质含量测定法用于测定生物药物中蛋白质的含量，不能检测微生物污染。19.生物制药中，超滤技术的主要作用是（）A.分离大分子和小分子B.去除内毒素C.浓缩蛋白质D.以上都是答案：D详解：超滤技术是根据分子大小进行分离的技术，可分离大分子和小分子；也可以截留内毒素等大分子杂质，起到去除内毒素的作用；同时还可以通过截留蛋白质等大分子，去除水分等小分子，实现蛋白质的浓缩。所以以上都是超滤技术的主要作用。20.基因治疗的基本步骤不包括（）A.目的基因的获取B.载体的选择和构建C.基因的表达调控D.药物的化学合成答案：D详解：基因治疗的基本步骤包括目的基因的获取、载体的选择和构建、将目的基因导入靶细胞以及基因的表达调控等。而药物的化学合成是传统化学药物的生产方法，不属于基因治疗的基本步骤。二、多项选择题（每题3分，共30分）1.下列属于生物药物的有（）A.疫苗B.单克隆抗体C.基因工程药物D.抗生素答案：ABCD详解：疫苗是通过刺激机体免疫系统产生免疫反应来预防疾病的生物制品；单克隆抗体具有高度特异性，可用于诊断和治疗疾病；基因工程药物是利用基因工程技术生产的药物；抗生素是微生物产生的具有抗菌等活性的物质，它们都属于生物药物的范畴。2.发酵工程中，影响发酵的因素有（）A.温度B.pHC.溶氧D.培养基成分答案：ABCD详解：温度会影响微生物的酶活性和生长速度；pH会影响微生物的细胞膜稳定性和酶活性；溶氧对于好气性微生物的生长和代谢至关重要；培养基成分提供微生物生长和代谢所需的营养物质，不同的培养基成分会影响微生物的生长和产物合成。所以以上因素都会影响发酵过程。3.基因工程制药中，常用的宿主细胞有（）A.大肠杆菌B.酵母菌C.哺乳动物细胞D.昆虫细胞答案：ABCD详解：大肠杆菌是原核生物，生长迅速，易于培养和基因操作，常用于生产一些简单的蛋白质药物；酵母菌是真核生物，具有一定的蛋白质加工和修饰能力，可用于生产一些需要糖基化等修饰的蛋白质；哺乳动物细胞如中国仓鼠卵巢细胞（CHO细胞）能进行复杂的蛋白质加工和修饰，适合生产结构复杂的蛋白质药物；昆虫细胞可用于表达一些重组蛋白，并且具有较高的表达量。所以以上细胞都可作为基因工程制药的宿主细胞。4.细胞培养的基本条件包括（）A.合适的培养基B.适宜的温度C.无菌环境D.合适的气体环境答案：ABCD详解：合适的培养基为细胞提供生长和代谢所需的营养物质；适宜的温度是细胞正常生长的必要条件，一般哺乳动物细胞培养温度为37℃左右；无菌环境可以防止微生物污染，保证细胞的正常生长；合适的气体环境如氧气和二氧化碳的比例，对于维持细胞的生理功能和培养液的pH至关重要。所以以上都是细胞培养的基本条件。5.蛋白质药物的分离纯化方法有（）A.沉淀法B.色谱法C.电泳法D.超滤法答案：ABCD详解：沉淀法可根据蛋白质的溶解度差异，通过加入沉淀剂使蛋白质沉淀下来进行分离；色谱法利用蛋白质的物理化学性质差异进行分离，如离子交换色谱、凝胶过滤色谱等；电泳法根据蛋白质的电荷和分子量差异在电场中进行分离；超滤法根据分子大小进行分离和浓缩。所以以上方法都可用于蛋白质药物的分离纯化。6.生物制药中，常用的质量控制指标有（）A.纯度B.活性C.稳定性D.安全性答案：ABCD详解：纯度是指生物药物中有效成分的含量，纯度越高，药物质量越好；活性是生物药物发挥治疗作用的关键，如酶的催化活性、抗体的结合活性等；稳定性关系到药物在储存和使用过程中的质量变化；安全性是药物使用的首要前提，包括无毒性、无热源、无微生物污染等。所以以上都是生物制药中常用的质量控制指标。7.疫苗的制备过程包括（）A.病原微生物的培养B.病原微生物的灭活或减毒C.疫苗的纯化D.疫苗的佐剂添加答案：ABCD详解：疫苗制备首先要培养病原微生物，然后根据疫苗类型对病原微生物进行灭活或减毒处理，接着对疫苗进行纯化以去除杂质，最后为了增强疫苗的免疫效果，可能会添加佐剂。所以以上都是疫苗制备过程的步骤。8.基因治疗的策略包括（）A.基因置换B.基因修正C.基因增补D.基因失活答案：ABCD详解：基因置换是用正常基因替换病变基因；基因修正是对病变基因进行修复；基因增补是将正常基因导入细胞，以弥补缺陷基因的功能；基因失活是通过抑制或破坏异常基因的表达来达到治疗目的。所以以上都是基因治疗的策略。9.生物反应器的类型有（）A.搅拌式生物反应器B.气升式生物反应器C.固定床生物反应器D.流化床生物反应器答案：ABCD详解：搅拌式生物反应器通过搅拌使细胞和培养液充分混合；气升式生物反应器利用气体的上升带动培养液循环；固定床生物反应器适合培养贴壁依赖性细胞；流化床生物反应器中载体处于流化状态。所以以上都是常见的生物反应器类型。10.生物药物的剂型有（）A.注射剂B.口服制剂C.外用制剂D.吸入制剂答案：ABCD详解：生物药物的剂型多种多样，注射剂可使药物快速进入体内发挥作用；口服制剂方便患者使用，但需要考虑生物药物在胃肠道的稳定性；外用制剂可用于局部治疗；吸入制剂可用于呼吸道疾病的治疗等。所以以上都是生物药物的剂型。三、简答题（每题10分，共30分）1.简述基因工程制药的基本流程。答案：基因工程制药的基本流程主要包括以下几个步骤：（1）目的基因的获取：可以从基因组文库或cDNA文库中筛选目的基因，也可以通过人工合成的方法获得。例如，对于已知序列的基因，可以利用化学合成仪合成。（2）载体的选择和构建：选择合适的载体，如质粒、噬菌体等，将目的基因与载体进行连接，构建重组载体。载体需要具备复制原点、筛选标记等元件，以保证重组载体在宿主细胞中能够稳定存在和复制。（3）将重组载体导入宿主细胞：常用的方法有转化、转染、感染等。对于原核细胞，常用转化的方法；对于真核细胞，可采用转染或感染的方法。例如，将重组质粒导入大肠杆菌可采用氯化钙转化法。（4）筛选和鉴定阳性克隆：通过筛选标记筛选出含有重组载体的宿主细胞，然后通过PCR、酶切鉴定、测序等方法对阳性克隆进行鉴定，确保目的基因正确插入载体。（5）工程菌（细胞）的大规模培养：选择合适的生物反应器，如搅拌式生物反应器、气升式生物反应器等，优化培养条件，如温度、pH、溶氧等，实现工程菌（细胞）的大规模培养。（6）目的蛋白的分离纯化：采用沉淀法、色谱法、超滤法等多种分离纯化方法，从培养物中分离和纯化目的蛋白，提高蛋白的纯度和活性。（7）药物的质量控制和制剂：对纯化后的蛋白药物进行质量控制，检测其纯度、活性、稳定性、安全性等指标，然后根据药物的性质和使用要求，制成合适的剂型，如注射剂、口服制剂等。2.简述单克隆抗体的制备过程。答案：单克隆抗体的制备过程主要包括以下几个步骤：（1）免疫动物：用抗原免疫小鼠等实验动物，使小鼠的B淋巴细胞产生针对该抗原的抗体。一般需要多次免疫，以增强免疫效果。（2）细胞融合：取免疫小鼠的脾细胞（含有已免疫的B淋巴细胞）与骨髓瘤细胞在聚乙二醇（PEG）等融合剂的作用下进行融合，形成杂交瘤细胞。（3）筛选杂交瘤细胞：将融合后的细胞接种到HAT培养基中进行筛选。未融合的骨髓瘤细胞不能在HAT培养基中存活，未融合的淋巴细胞不能在体外长期存活，只有杂交瘤细胞既能在体外长期存活又能产生特异性抗体，可在HAT培养基中生长。（4）克隆化培养和抗体检测：对筛选出的杂交瘤细胞进行克隆化培养，可采用有限稀释法或软琼脂克隆法等。同时，通过酶联免疫吸附测定（ELISA）等方法检测克隆化培养的杂交瘤细胞分泌的抗体，筛选出