2025年高级卫生专业技术资格考试病理学技术(正高级)试卷及答案

2025年高级卫生专业技术资格考试病理学技术(正高级)试卷及答案一、单项选择题（每题1分，共30分。每题只有一个最佳答案，请将正确选项字母涂黑）1.关于全自动免疫组化染色机“烤片”步骤的温度时间曲线，下列哪一条最符合VENTANABenchmarkUltra对4μm厚乳腺组织切片的质控要求A.60℃20min→75℃10minB.65℃30min→80℃5minC.70℃45min→85℃2minD.75℃60min→90℃1min答案：B2.在NGS建库过程中，使用AgencourtAMPureXP磁珠进行片段筛选，若目标插入片段为300bp，则磁珠与样本体积比应设为A.0.6×B.0.8×C.1.0×D.1.2×答案：B3.冰冻切片脂肪染色时，苏丹Ⅲ染液的最佳溶剂体系为A.70%乙醇B.丙二醇C.异丙醇+丙酮（1:1）D.无水乙醇+乙醚（1:1）答案：D4.电镜标本后固定使用四氧化锇（OsO₄）时，若实验室海拔从海平面升至2500m，则固定时间应A.缩短10%B.缩短20%C.延长10%D.延长20%答案：C5.免疫组化双染采用HRP+AP系统，若第一抗体为兔抗人CK7，第二抗体为小鼠抗人p63，则正确的酶标记顺序是A.HRP聚合物抗兔→AP聚合物抗小鼠B.AP聚合物抗兔→HRP聚合物抗小鼠C.HRP聚合物抗小鼠→AP聚合物抗兔D.AP聚合物抗小鼠→HRP聚合物抗兔答案：A6.关于PAS染色中Schiff试剂质量监控，下列哪项标准可判定试剂失效A.吸收峰移至520nmB.与甲醛反应30min不显红色C.冷藏保存30天后变为淡黄D.加入1mol/LHCl后产生沉淀答案：B7.全自动组织脱水机夜间延时运行程序中，若实验室温度降至18℃，则对二甲苯透明步骤时间应A.缩短15minB.不变C.延长15minD.延长30min答案：C8.在FISH检测ALK重排时，使用断裂探针，若观察到单个融合信号占全部信号比例≥15%，应判读为A.阴性B.可疑，需计数额外50个细胞C.阳性D.无法判读答案：B9.石蜡切片常规HE染色出现“灰蓝”核，最可能的原因是A.苏木素氧化过度B.分化不足C.蓝化液pH<7D.伊红染液含0.5%冰醋酸答案：B10.关于CRISPRCas9基因敲除小鼠模型，下列哪项组织固定方案最适合后续IHC检测A.4%多聚甲醛灌注固定4h→20%蔗糖4℃过夜B.10%中性甲醛浸泡固定24hC.2%戊二醛+2%多聚甲醛灌注2hD.95%乙醇浸泡固定6h答案：A11.在数字切片扫描中，若物镜NA=0.75，相机像素尺寸6.5μm，则理论横向分辨率为A.0.22μmB.0.33μmC.0.44μmD.0.55μm答案：C12.用于RNAscope的蛋白酶预处理，若组织为扁桃体，推荐消化时间为A.10minB.20minC.30minD.40min答案：C13.电镜铅染液出现沉淀，最有效的再生方法是A.0.22μm过滤B.加入1mol/LNaOHC.加入新鲜柠檬酸铅晶体D.通入CO₂气泡答案：C14.在流式细胞术检测细胞周期时，若使用PI/RNase法，RNase终浓度应为A.10μg/mLB.50μg/mLC.100μg/mLD.500μg/mL答案：C15.关于Masson三色染色，下列哪项改良方案可提高胶原纤维/肌肉对比度A.丽春红酸性品红中加入0.2%磷钨酸B.苯胺蓝后增加1%磷钼酸分化C.天狼星红替代苯胺蓝D.冰醋酸预染5min答案：B16.在全自动染色封片一体机中，若中性树胶折射率为1.52，盖玻片厚度为0.17mm，则最佳滴胶量设为A.30μLB.50μLC.70μLD.90μL答案：B17.用于PDL122C3pharmDx检测的对照细胞系为A.HeLaB.MDAMB231C.NCIH226D.A431答案：C18.在冰冻切片快速免疫荧光中，若抗体为FITC标记，防止淬灭的最佳封片剂是A.甘油PBS（1:1）B.含DAPI的FluoromountGC.含1%PVA的Tris缓冲液D.含0.1%对苯二胺的甘油答案：D19.关于组织芯片制作，若受体块直径2mm，供体组织为前列腺癌，穿刺深度应控制在A.1mmB.2mmC.3mmD.4mm答案：C20.在实时荧光定量PCR中，若使用SYBRGreenI，熔解曲线出现双峰，首要处理措施是A.降低退火温度2℃B.提高模板量10倍C.重新设计引物D.增加循环数5个答案：C21.电镜超薄切片出现“颤痕”，最可能的原因是A.刀角过大B.环境温度波动>2℃C.包埋块硬度不均D.切片速度>1mm/s答案：B22.在特殊染色中，Best胭脂红用于显示A.糖原B.黏蛋白C.淀粉样物D.含铁血黄素答案：A23.关于免疫组化抗原修复，若使用pH9.0EDTA缓冲液高压修复，扁桃体组织最佳修复时间为A.1minB.2minC.3minD.5min答案：B24.在数字病理AI辅助诊断中，若模型训练集切片扫描倍率为20×，而临床测试使用40×，则最可能产生的偏差是A.假阴性率升高B.假阳性率升高C.灵敏度下降D.特异度下降答案：B25.用于骨组织脱钙的EDTA溶液，若需保留抗原性，推荐浓度及温度为A.5%EDTA，室温B.10%EDTA，4℃C.15%EDTA，37℃D.20%EDTA，60℃答案：B26.在多重荧光免疫组化（7色）中，若使用TSA技术，每次微波剥离抗体最佳条件是A.柠檬酸钠pH6.0，95℃10minB.TrisEDTApH9.0，95℃15minC.纯水，95℃20minD.PBS，95℃5min答案：B27.关于石蜡切片厚度与HE染色质量的关系，下列哪项描述正确A.2μm切片核染色过深B.6μm切片易出现“空洞”C.4μm切片对核细节显示最佳D.8μm切片利于观察胶原答案：C28.在冷冻电镜样品制备中，若使用Vitrobot，blottime设为3s，blotforce0，则最佳湿度应控制在A.70%B.80%C.90%D.100%答案：C29.用于线粒体标记的TOM20抗体，若做免疫电镜，推荐的金颗粒大小为A.5nmB.10nmC.15nmD.20nm答案：B30.在病理实验室质量认可（ISO15189）中，关于染色批间对照，要求每批次至少A.1张阳性对照B.1张阴性对照C.1张阳性+1张阴性D.2张阳性+1张阴性答案：C二、共用题干单选题（每题2分，共20分。以下每组材料后设若干小题，每小题只有一个最佳答案）【材料一】男性，58岁，右肺上叶结节，术中冰冻切片提示腺癌可能性大。术后标本进行多基因检测，需提取DNA与RNA。31.若实验室仅有一台QiagenQIAcube，为同时提取DNA与RNA，最佳试剂盒组合为A.QIAampDNAFFPE+RNeasyFFPEB.AllPrepDNA/RNAFFPEC.QIAampCirculatingNucleicAcidD.DNeasyBlood&Tissue答案：B32.提取后RNA浓度为8ng/μL，RQN=3.2，为建库最低要求，应优先采取A.乙醇沉淀浓缩B.真空离心浓缩C.磁珠纯化浓缩D.直接建库答案：B33.若后续进行RNAseq，建库起始量最低可至A.100pgB.500pgC.1ngD.10ng答案：C【材料二】女性，45岁，乳腺肿块，穿刺标本行ER、PR、HER2、Ki67检测，实验室使用LeicaBondIII。34.ER抗体1D5稀释度1:200，实验室自建条件，阳性对照为扁桃体，出现弱阳性，应首先A.增加一抗浓度至1:100B.延长一抗孵育时间至60minC.提高修复液pH至10D.更换抗体批次答案：B35.HER2双探针FISH计数，发现HER2/CEP17=3.8，但平均HER2拷贝数<6，应判读为A.阳性B.阴性C.可疑，需计数额外细胞D.无法判读答案：B【材料三】男性，32岁，肝移植术后，肝穿标本行HBVRNAscope检测。36.若阳性信号呈簇状分布，计数20个汇管区，平均信号数>20/汇管区，应判读为A.0级B.1级C.2级D.3级答案：D37.若阴性对照出现点状信号，最可能原因是A.蛋白酶过度B.探针浓度过高C.切片过厚D.PBS缓冲液污染答案：A【材料四】男性，68岁，前列腺穿刺，行ERG基因重排FISH检测。38.使用断裂探针，若观察到5%细胞出现分离信号，应判读为A.阴性B.可疑C.阳性D.无法判读答案：A39.若实验室使用自动化扫描仪，扫描倍率为10×，发现信号模糊，应首先A.切换至20×B.调整焦距C.增加曝光时间D.更换滤光块答案：B40.若临床要求与PTEN缺失联合检测，最佳探针组合为A.PTEN/CEP10B.PTEN/ERGC.PTEN/MYCD.PTEN/TP53答案：A三、多项选择题（每题3分，共30分。每题至少有两个正确答案，多选少选均不得分）41.关于电镜超薄切片刀槽液面高度，下列哪些措施可减少刀痕A.使用双蒸水B.加入0.1%叠氮钠C.液面略高于刀刃D.液面呈凸面答案：A、C、D42.在CRISPRCas9基因敲除小鼠基因型鉴定中，下列哪些引物设计策略可提高野生型条带缺失检出率A.引物跨越敲除区域B.野生型产物>1kbC.突变型产物<300bpD.使用降落PCR答案：A、B、C、D43.关于石蜡切片DNA提取，下列哪些步骤可提高片段长度A.缩短脱蜡时间B.减少蛋白酶K消化温度C.使用QIAamp柱而非磁珠D.避免剧烈涡旋答案：B、D44.在多重荧光免疫组化中，下列哪些措施可降低串扰A.使用光谱拆分算法B.选择非重叠荧光团C.增加TSA放大轮次D.优化抗体顺序答案：A、B、D45.关于RNAscope质量控制，下列哪些属于必须设置A.阳性对照probeB.阴性对照probeC.蛋白酶空白D.DAPI空白答案：A、B、C46.在数字切片扫描中，下列哪些因素可导致扫描条纹A.相机坏点B.光源闪烁C.传输带抖动D.玻片倾斜答案：A、B、C47.关于组织芯片受体块制作，下列哪些措施可提高阵列整齐度A.使用预冷模具B.4℃环境下操作C.使用自动点样仪D.受体块预热至45℃答案：A、B、C48.在流式细胞术检测ROS时，下列哪些探针可同时检测线粒体ROSA.DCFHDAB.MitoSOXC.DHED.CellROXGreen答案：B、D49.关于免疫组化抗原修复高压锅法，下列哪些描述正确A.修复液需预热B.加热至沸腾后计时C.自然冷却至室温D.修复后PBS冲洗3次答案：A、B、C、D50.在电镜免疫金标记中，下列哪些封闭液可降低非特异结合A.1%BSAB.5%山羊血清C.0.1%冷鱼胶D.0.05%Tween20答案：A、B、C四、案例分析题（每题10分，共30分。请结合提供的病例与实验室信息，作出诊断或技术评估，并给出依据）【病例一】患者，女，52岁，左乳肿块，粗针穿刺，直径1.5cm。临床送检ER、PR、HER2、Ki67、PDL1（22C3）。实验室使用VentanaBenchmarkUltra，全自动染色。结果：ER95%强阳，PR90%强阳，HER2IHC1+，Ki6715%，PDL1CPS=8。问题：（1）请给出上述指标的临床意义及后续治疗提示。（4分）（2）若实验室拟开展PDL122C3自检，需完成哪些性能验证参数？（3分）（3）HER2IHC1+，临床要求补充FISH，请列出FISH检测流程关键质控点。（3分）答案：（1）ER/PR高表达提示内分泌治疗敏感；HER21+且FISH未扩增，抗HER2靶向治疗无效；Ki6715%属低增殖，预后较好；PDL1CPS=8<10，免疫单药获益低，可考虑联合化疗。（2）需验证：精密度（批内、批间、日间）、准确度（与参比实验室比对）、分析敏感性（CPS阈值附近样本）、特异性（非小细胞肺癌以外癌种）、报告范围、稳定性（切片室温7天）。（3）关键质控：①阳性/阴性外对照；②探针批号记录；③计数至少20个肿瘤细胞；④HER2/CEP17比值及平均拷贝数双指标；⑤失败率<5%；⑥判读双人双盲。【病例二】患者，男，48岁，右肺下叶结节，术中冰冻提示浸润性黏液腺癌。术后标本行ROS1、ALK、RET、NTRK1/2/3、MET14跳突RNANGS。实验室提取RNA后，DV200=45%，建库使用ArcherFusionPlex，测序平台NextSeq550。问题：（1）DV200=45%是否满足建库要求？若不足，可采取哪些补救措施？（4分）（2）请列出RNANGS检测融合基因的假阴性常见原因。（3分）（3）若检出EML4ALK（E13:A20），VAF=28%，请给出解读及临床提示。（3分）答案：（1）