微生物检测技术综合试题含答案

一、名词解释（每题3分，共15分）无菌技术菌落形成单位选择性培养基MPN法内毒素二、填空题（每空1分，共20分）微生物实验室进行无菌操作的核心设备是________，其工作原理是通过________过滤空气，形成无菌工作区。制备培养基时，通常采用________法进行灭菌，而培养皿（平板）等耐热玻璃器皿通常采用________法进行灭菌。细菌革兰氏染色后，被染成紫色的是________菌，被染成红色的是________菌。染色成败的关键步骤是________。在食品卫生微生物检验中，通常以________作为食品被粪便污染的指示菌；以________作为食品卫生质量的指示菌。测定饮用水、饮料中的菌落总数时，培养温度一般为________℃，培养时间为________小时。微生物限度检查包括________检查、________检查和控制菌检查。在微生物实验室中，丢弃带菌的移液管等污染性废弃物前，必须先在________溶液中浸泡消毒。进行细菌生化鉴定时，IMViC实验通常是指________、________、________和枸橼酸盐利用试验。药品无菌检查法主要包括________和________。三、单项选择题（每题2分，共20分）下列哪种显微镜最适合观察细菌的鞭毛和荚膜？A.普通光学显微镜B.

暗视野显微镜C.

相差显微镜D.电子显微镜倾注平板法通常使用的培养基状态是？A.液体B.半固体C.固体（已凝固）D.固体（熔化后冷却至45℃左右）下列哪种培养基用于鉴别大肠杆菌？A.营养肉汤B.伊红美蓝琼脂培养基C.沙氏葡萄糖琼脂培养基D.硫乙醇酸盐流体培养基关于高压蒸汽灭菌锅的操作，下列说法错误的是？A.灭菌前必须将锅内的冷空气排尽B.灭菌结束后，应自然降压降温至零后再开盖C.物品不应装得太满，要留有空隙D.可用于所有培养基和试剂的灭菌在药品的无菌检查中，用于验证检验方法可靠性的实验是？A.阳性对照试验B.阴性对照试验C.方法适用性试验D.平行试验金黄色葡萄球菌在Baird-Parker平板上典型的菌落形态是？A.粉红色菌落B.黑色菌落、周围有黄色晕圈C.黑色菌落、周围有透明圈和浑浊带D.绿色菌落霉菌和酵母菌计数的适宜培养温度是？A.20-25℃B.30-35℃C.36±1℃D.42℃用于检测样品中是否存在特定细菌毒素的试验是？A.凝集试验B.PCR试验C.动物毒力试验D.药敏试验下列哪项不属于微生物快速检测技术？A.酶联免疫吸附测定B.实时荧光定量PCRC.传统平板计数法D.基因芯片技术实验室生物安全级别中，BSL-2实验室适用于处理哪类微生物？A.对健康成年人无致病作用的微生物B.能引起人类或动物疾病，但一般情况下对人、动物或环境不构成严重危害的病原体C.能引起人类或动物严重疾病的高致病性病原体D.能引起人类或动物非常严重疾病的病原体四、简答题（每题5分，共25分）简述进行样品稀释时，为何通常按1:10进行系列稀释？制备1:10的样品稀释液时，如何操作？简述倾注平板法和涂布平板法的异同点及各自适用场景。什么是“菌落总数”？它在食品卫生学上的意义是什么？简述大肠菌群的定义及其作为食品卫生指示菌的意义。微生物实验室质量控制包括哪些主要内容？五、论述与应用题（每题10分，共20分）案例分析：某品牌瓶装矿泉水被投诉有异味，现需对其进行全面的微生物学检测。（1）请设计一套检测方案，列出需要检测的项目及理由。（6分）（2）如果在检测中发现菌落总数严重超标，请分析可能的生产环节污染原因。（4分）2.综合论述：请比较传统微生物培养法与现代分子生物学快速检测技术（如qPCR）在微生物检测中的优缺点。你认为未来微生物检测技术的发展趋势是什么？一、名词解释无菌技术：指在操作过程中，防止一切微生物进入机体或物体的方法。是所有微生物检测的基础。菌落形成单位：是由一个或几个微生物在固体培养基上生长繁殖而形成的肉眼可见的集落，用以表达活菌的数量。选择性培养基：在培养基中加入某种化学物质，以抑制非目的菌的生长，促进目的菌生长的培养基。MPN法（最可能数法）：一种基于泊松分布的统计方法，用于估算样品中活菌的浓度，特别适用于检测在培养基中不能形成菌落但能引起培养基变化的微生物（如大肠菌群）。内毒素：是革兰氏阴性菌细胞壁外壁层的脂多糖成分，只有在菌体死亡裂解后才释放出来，可引起机体发热等反应。二、填空题超净工作台，高效空气过滤器高压蒸汽灭菌，干热灭菌革兰氏阳性，革兰氏阴性，脱色耐热大肠菌群（或大肠埃希氏菌），菌落总数36±1，48±2需氧菌总数，霉菌和酵母菌总数消毒剂（如含氯消毒液）吲哚试验，甲基红试验，VP试验薄膜过滤法，直接接种法三、单项选择题B2.D3.B4.D5.C6.C7.A8.C9.C10.B四、简答题答：按1:10系列稀释是为了使样品中的微生物浓度呈10倍递减，便于在平板上长出可计数的、分离良好的菌落（30-300CFU）。操作：取10mL样品加入到90mL无菌稀释液中，充分混匀，即为1:10的稀释液。答：相同点：都用于活菌计数。不同点：倾注法是将样品与熔化的琼脂混合，适合兼性厌氧菌和厌氧菌。涂布法是将样品涂布在已凝固的平板表面，适合好氧菌，尤其适合对热敏感的样品。答：菌落总数是指食品检样经过处理，在一定条件下培养后，所得1mL(g)检样中所含菌落的总数。意义：主要作为判定食品被细菌污染程度的标记，反映食品在生产过程中的卫生状况，但不能区分细菌种类。答：大肠菌群是一群在37℃、24-48小时内能发酵乳糖产酸产气的需氧和兼性厌氧革兰氏阴性无芽孢杆菌。意义：它们主要来源于人畜粪便，故作为食品、水体被粪便污染的指示菌，间接表示有肠道致病菌污染的可能性。答：主要包括：人员培训与考核、仪器设备的校准与维护、培养基的质量控制（无菌性、灵敏度检查）、试剂与染色液的质量控制、标准菌株的管理与使用、检测方法的确认与验证、实验室环境的监控等。五、论述与应用题答：（1）检测方案

菌落总数：评价整体卫生状况和细菌污染程度。水源地保护不当，受到污染。生产管道系统清洗消毒不彻底，形成生物膜。灌装车间空气洁净度不达标。瓶盖密封不严或瓶体本身被污染。操作人员卫生管理不善。（2）污染原因分析：大肠菌群/耐热大肠菌群：指示是否受到粪便污染。铜绿假单胞菌：是矿泉水常见的致病菌和腐败菌，是关键的指示菌。霉菌和酵母菌计数：判断是否存在真菌污染，可能与异味有关。产嗅味微生物（如放线菌、某些蓝细菌）的专项检测（如通过显微镜检查）。答：传统培养法：技术融合：将分子技术、免疫学技术与生物传感器、微流控芯片等技术结合。即时检测：开发便携式、傻瓜式的现场快速检测设备。组学技术的应用：宏基因组学可直接分析样品中全部微生物的遗传信息，无需培养。大数据与人工智能：用于结果分析、溯源和风险评估qPCR等分子技术：优点：快速（数小时内出结果），灵敏度高，特异性强，可定量，能检测不可培养的微生物。缺点：无法区分活菌和