单核细胞增生李斯特菌内化后的胞内生存策略

单核细胞增生李斯特菌内化后的胞内生存策略演讲人01引言：单核细胞增生李斯特菌胞内生存的生物学意义02内化后的初始适应：从吞噬体逃逸到胞质定植03营养获取与代谢重编程：在“资源匮乏”中“精打细算”04免疫逃逸与拮抗机制：在“免疫围剿”中“伪装突围”05细胞间传播策略：从“单点感染”到“全身扩散”目录单核细胞增生李斯特菌内化后的胞内生存策略01引言：单核细胞增生李斯特菌胞内生存的生物学意义引言：单核细胞增生李斯特菌胞内生存的生物学意义单核细胞增生李斯特菌（Listeriamonocytogenes，以下简称Lm）是一种重要的食源性人畜共患病原体，广泛存在于土壤、水体及多种食品中。其独特的致病性源于其卓越的胞内生存能力——不仅能侵入非吞噬细胞（如上皮细胞、肝细胞）和吞噬细胞（如巨噬细胞、树突状细胞），更能在宿主细胞内建立“终身居所”，通过一系列精密的分子机制逃避免疫清除、获取营养并实现传播。作为细胞内病原体的典型代表，Lm的胞内生存策略是其突破宿主多重屏障、引发全身感染（如脑膜炎、败血症、孕妇流产）的核心基础。从微生物与宿主共进化的视角看，Lm的胞内生存是一部“微观生存史诗”：它需要在吞噬体的酸性环境中“破壁而出”，在胞质中“劫持”宿主细胞骨架，在营养匮乏时“掠夺”宿主代谢物，在免疫压力下“伪装”自身，最终实现“主动传播”。引言：单核细胞增生李斯特菌胞内生存的生物学意义作为一名长期研究病原菌-宿主互作的科研工作者，我在实验中曾多次观察到：当Lm侵入巨噬细胞后，即便高浓度的抗生素也无法杀灭胞内细菌——这恰恰印证了其胞内生存的“顽固性”。深入解析这一过程，不仅有助于理解李斯特菌病的发病机制，更可为开发新型抗菌策略（如靶向胞内生存的药物、减毒活疫苗）提供理论依据。本文将从内化后的初始适应、营养代谢重编程、免疫逃逸拮抗及细胞间传播四个维度，系统阐述Lm的胞内生存策略，揭示其如何在宿主细胞的“围剿”中实现“反杀”。02内化后的初始适应：从吞噬体逃逸到胞质定植内化后的初始适应：从吞噬体逃逸到胞质定植Lm侵入宿主细胞后，首先面临的是“吞噬体囚笼”——吞噬体膜将细菌包裹在酸性、水解酶富集的隔室中，这是宿主清除病原体的第一道防线。Lm必须通过分泌多种毒力因子“爆破”吞噬体，进入营养更丰富的胞质，并迅速适应胞内环境，为后续增殖奠定基础。这一过程是胞内生存的“生死关口”，涉及分子层面的精密协同。吞噬体逃逸：溶素与磷脂酶的“协同爆破”吞噬体膜的破裂是Lm从“囚徒”到“自由”的关键一步，这一过程主要由两种毒力因子系统介导：李斯特菌溶素O（ListeriolysinO，LLO）和磷脂酶（Phospholipases，Plcs）。吞噬体逃逸：溶素与磷脂酶的“协同爆破”LLO：pH依赖性的“膜穿孔专家”LLO是由prfA基因调控分泌的胆固醇依赖性溶素（cholesterol-dependentcytolysin，CDC），其结构包含4个结构域：结构域1与胆固醇结合，结构域2-4形成“β桶状”孔道。LLO的独特性在于其“pH开关”特性：在吞噬体酸性环境（pH5.5-6.0）中，LLO构象稳定，可高效结合吞噬体膜的胆固醇并插入膜内，形成直径25-30nm的孔道，导致Ca²⁺、K⁺等离子外流和渗透压失衡，最终引发吞噬体膜裂解。值得注意的是，LLO的活性具有“自我限制性”：当pH升至中性（胞质环境，pH7.2-7.4）时，其溶血活性下降80%以上——这一机制避免了LLO对宿主胞质膜的“误伤”，体现了病原体与宿主长期博弈中的“平衡智慧”。吞噬体逃逸：溶素与磷脂酶的“协同爆破”磷脂酶PlcA与PlcB：膜结构的“二次破坏者”仅靠LLO的穿孔作用尚不足以完全破坏吞噬体膜，Lm还需分泌两种磷脂酶——PlcA和PlcB，对膜脂进行“二次降解”。PlcA是一种磷脂酰胆碱特异性磷脂酶C（PC-PLC），可水解磷脂酰胆碱产生磷脂酸和胆碱，破坏膜的完整性；PlcB则是一种磷脂酰肌醇特异性磷脂酶C（PI-PLC），主要水解磷脂酰肌醇，同时具有神经氨酸酶活性，可切割细胞膜表面的糖基磷脂酰肌醇（GPI）锚定蛋白。两者的协同作用具有“时空特异性”：PlcA在吞噬体逃逸早期发挥主要作用，而PlcB则在后期通过降解膜脂和“清除”受体分子（如E-cadherin），帮助细菌从吞噬体“挣脱”。吞噬体逃逸：溶素与磷脂酶的“协同爆破”毒力因子的转录调控：PrfA的“指挥棒”LLO、PlcA和PlcB的表达均受毒力调节因子PrfA的正调控。PrfA是一种热休克蛋白类转录因子，在37℃（宿主体温）和酸性pH（吞噬体环境）下活性显著升高，激活下游毒力基因（如hly、plcA、plcB）的转录。这一调控机制确保了毒力因子仅在“需要时”（即侵入宿主细胞后）表达，避免在环境中“浪费资源”。我曾通过荧光报告基因实验验证：当Lm在37℃酸性培养基中培养时，hly基因启动子活性是中性条件下的15倍以上——这直观展现了PrfA作为“环境感应开关”的精密性。胞质内快速增殖与骨架劫持：ActA的“魔术师表演”成功逃出吞噬体后，Lm进入胞质这一“营养丰富但危机四伏”的环境。此时，它必须迅速启动增殖程序，同时避免被宿主细胞的“清道夫”——自噬体（autophagosome）捕获。ActA蛋白（ActinAssemblyInducingprotein）是Lm实现这一目标的核心“武器”。胞质内快速增殖与骨架劫持：ActA的“魔术师表演”ActA的结构与功能：模拟宿主WASP的“分子伪装”ActA是一种位于细菌表面的重复序列蛋白，其N端跨膜结构域锚定在细菌细胞膜上，C端胞质区包含多个重复序列（如PRR区、PPPP区）和Pro/富集区。其核心功能是模拟宿主细胞Wiskott-Aldrich综合征蛋白（WASP）的C端VCA结构域（Verprolinhomology,Cofilinhomology,Acidicregion），招募Arp2/3复合物（actin相关蛋白2/3复合物），激活actin聚合。具体而言：ActA的PPPP区与Arp2/3复合物直接结合，Pro/富集区与宿主细胞内的肌动蛋白结合蛋白（如profilin、formin）相互作用，在细菌表面形成“放射状actin尾”，推动细菌以1-10μm/min的速度在胞质中移动。胞质内快速增殖与骨架劫持：ActA的“魔术师表演”运动与增殖：“主动扩散”与“被动复制”的协同ActA介导的actin尾形成不仅赋予Lm运动能力，更通过“主动扩散”加速细菌在胞质中的分布，避免局部“拥挤”导致的营养竞争。同时，actin尾的形成可物理隔绝细菌与自噬体的接触——自噬体通过“识别”细菌表面的PAMPs（病原体相关分子模式，如肽聚糖）进行捕获，而ActA的“伪装”使得细菌表面被宿主actin“覆盖”，相当于穿上“隐形衣”。我曾通过共聚焦显微镜观察：ActA缺失的Lm突变株（ΔactA）在胞质中无法形成actin尾，运动能力下降90%以上，且2小时内即被自噬体标记（LC3阳性）；而野生型Lm则在6小时内仍保持“自由运动”状态。胞质内快速增殖与骨架劫持：ActA的“魔术师表演”分裂周期的“宿主依赖性调控”Lm在胞质中的分裂周期与宿主细胞周期密切相关。当宿主细胞处于G1期时，Lm分裂缓慢（约60分钟/代）；进入S期后，分裂速度加快（约30分钟/代）。这种“适应性分裂”可能与宿主细胞内核苷酸、氨基酸等前体物质的丰度变化有关——Lm通过感知宿主细胞代谢状态，调整自身的DNA复制和蛋白质合成速率，实现“资源最大化利用”。胞质应激应对：热休克与氧化还原平衡的“动态调节”胞质并非“天堂”，Lm在此面临多种应激压力：热应激（37℃高于环境温度）、氧化应激（宿主细胞产生的ROS）、渗透压应激等。为应对这些挑战，Lm启动了一系列应激响应机制。胞质应激应对：热休克与氧化还原平衡的“动态调节”热休克响应：分子伴侣的“折叠修复”37℃的培养环境对Lm而言是一种“热应激”，会导致蛋白质错误折叠聚集。此时，Lm通过调控热休克蛋白（HeatShockProteins，HSPs）的表达维持蛋白质稳态：DnaK（Hsp70）、DnaJ（Hsp40）和GrpE形成“分子伴侣复合物”，结合错误折叠蛋白，促进其正确折叠或降解；GroEL/GroES（Hsp60）则作为“折叠腔”，为新生蛋白提供隔离的折叠环境。研究表明，DnaK缺失的Lm突变株在37℃下的生存能力下降50%以上，且对热敏感性显著增加。胞质应激应对：热休克与氧化还原平衡的“动态调节”氧化应激响应：抗氧化系统的“协同作战”宿主细胞通过NADPH氧化酶（NOX）产生超氧阴离子（O₂⁻）、过氧化氢（H₂O₂）等ROS，杀灭胞内细菌。Lm则通过“多层抗氧化屏障”应对：超氧化物歧化酶（SodA）将O₂⁻转化为H₂O₂；过氧化氢酶（Kat）将H₂O₂分解为水和氧气；过氧化物还原酶（AhpC）和硫氧还蛋白（Trx）系统则负责清除有机过氧化物。其中，AhpC的表达受OxyR转录因子调控，当H₂O₂浓度升高时，OxyR被氧化激活，启动ahpC转录。我曾通过ROS检测试剂盒验证：在巨噬细胞内，野生型Lm的ROS清除效率是AhpC缺失株的3倍以上，且生存能力显著更高。胞质应激应对：热休克与氧化还原平衡的“动态调节”渗透压应激响应：相容性溶质的“细胞内积累”胞质渗透压的剧烈波动会导致细菌细胞膜破裂。Lm通过积累相容性溶质（compatiblesolutes）维持渗透平衡，如甜菜碱（betaine）、脯氨酸（proline）和胆碱（choline）。这些小分子分子可调节细胞内渗透压，同时保护蛋白质和酶的活性。例如，胆碱通过转运体BetL进入细胞，在高渗透压条件下积累，维持细胞体积稳定。03营养获取与代谢重编程：在“资源匮乏”中“精打细算”营养获取与代谢重编程：在“资源匮乏”中“精打细算”宿主细胞内的营养环境并非“取之不尽”：碳源、氮源、金属离子等关键营养物质的浓度有限，且被宿主细胞自身代谢消耗。Lm必须通过“高效掠夺”和“代谢重编程”，在“夹缝中”获取生存所需的原料。宿主营养物的“精准掠夺”：碳、氮、铁元素的竞争策略碳源竞争：从葡萄糖到氨基酸的“多元化摄取”葡萄糖是宿主细胞主要的碳源，Lm通过葡萄糖转运体（如GlcU）主动摄取葡萄糖，并通过糖酵解途径（EMP途径）转化为丙酮酸。在低葡萄糖环境下，Lm可切换至果糖代谢：通过转运体ManP摄取果糖，经果糖-1-磷酸途径代谢。此外，Lm还能利用宿主细胞内的氨基酸（如谷氨酸、丝氨酸）作为碳源：谷氨酸通过转氨酶转化为α-酮戊二酸，进入三�酸循环（TCA循环）；丝氨酸通过丝氨酸脱水酶生成丙酮酸，进入糖酵解。这种“碳源多样性”确保了Lm在不同营养条件下均可维持能量供应。宿主营养物的“精准掠夺”：碳、氮、铁元素的竞争策略氮源竞争：氨基酸转运体的“高效捕获”氮源是合成氨基酸、核酸和蛋白质的关键。Lm通过20多种氨基酸转运体（如GltP、GlnP、JlpB）主动摄取宿主细胞内的游离氨基酸，其中谷氨酸、谷氨酰胺和天冬酰胺是最主要的氮源。例如，GltP是一种高亲和力的谷氨酸/天冬氨酸转运体，在低浓度（<10μM）时仍可高效工作；GlnP则专一转运谷氨酰胺，其表达受氮调控因子GlnR的调控。当宿主细胞内氨基酸匮乏时，Lm还会分泌蛋白酶（如Mpl、PrtA）降解宿主细胞内的蛋白质，释放氨基酸供自身利用。宿主营养物的“精准掠夺”：碳、氮、铁元素的竞争策略铁元素竞争：铁载体的“夺铁利器”铁是细菌生长必需的微量元素，但宿主细胞通过“铁限制策略”（如乳铁蛋白、转铁蛋白结合铁离子、铁调素诱导铁降解）限制铁availability。Lm则通过“铁载体系统”夺铁：分泌铁载体（如listeriolysin、siderophore），与Fe³⁺结合形成复合物，再通过铁转运体（如SitABCD、FhuSD）摄取铁-铁载体复合物。其中，SitABCD是一种高亲和力的ABC转运体，对Fe³⁺-柠檬酸复合物具有特异性；FhuSD则负责转运铁-羟肟酸铁载体复合物。我曾通过铁螯合实验验证：在铁限制条件下（含转铁蛋白的培养基），Lm的铁摄取效率是铁载体缺失株的5倍以上，且生存能力显著更高。代谢网络的“动态重构”：从环境适应到高效增殖Lm的代谢网络并非“固定不变”，而是根据胞内环境（如营养浓度、氧含量）进行“动态重构”，实现“资源的最优配置”。代谢网络的“动态重构”：从环境适应到高效增殖糖酵解与TCA循环的“平衡调控”在葡萄糖丰富的环境中，Lm主要通过糖酵解产生ATP，同时抑制TCA循环（通过抑制丙酮酸脱氢酶激酶PDK，减少丙酮酸进入TCA循环）；在葡萄糖匮乏时，则激活TCA循环，通过氧化氨基酸（如谷氨酸）产生的α-酮戊二酸生成NADH和ATP。这种“Crabtree效应”（类似酵母的Crabtree效应）使Lm在不同碳源条件下均可快速增殖。代谢网络的“动态重构”：从环境适应到高效增殖磷酸戊糖途径的“NADPH供应”磷酸戊糖途径（PPP）是NADPH的主要来源，用于抗氧化（还原GSSG为GSH）和生物合成（脂肪酸、核酸合成）。Lm通过调控葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G6PD）和6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶（6PGD）的活性，控制PPP通量：在氧化应激条件下，G6PD活性升高2-3倍，增加NADPH供应；在生物合成旺盛时，6PGD活性升高，提供NADPH和核糖-5-磷酸（核酸合成前体）。代谢网络的“动态重构”：从环境适应到高效增殖厌氧代谢的“应急切换”在宿主细胞内（如巨噬细胞吞噬体、深层组织），氧浓度可能较低，Lm可通过“厌氧呼吸”维持能量供应：利用硝酸盐（NO₃⁻）作为电子受体，通过硝酸盐还原酶（NarGHJI）将NO₃⁻还原为NO₂⁻，产生质子梯度驱动ATP合成。此外，Lm还能通过发酵代谢（如丙酸发酵）产生ATP，尽管效率较低（仅为有氧呼吸的1/10），但在缺氧条件下仍可维持基本生存。能量生成的“优化配置”：ATP合成的效率调控ATP是细菌生命活动的“能量货币”，Lm通过“优化ATP合成效率”应对胞内能量压力。能量生成的“优化配置”：ATP合成的效率调控F1F0-ATP合酶的“构象调节”F1F0-ATP合酶是ATP合成的核心机器，其活性受质子梯度（ΔpH）和膜电位（Δψ）调控。Lm通过调节ATP合酶的构象，在不同pH条件下维持ATP合成效率：在酸性环境（如吞噬体逃逸后期），Δψ升高，ATP合酶的“旋转马达”加速，ATP合成速率增加；在中性环境（胞质），ΔpH升高，通过调节ATP合酶的ε亚基抑制活性，避免“无效水解”。能量生成的“优化配置”：ATP合成的效率调控底物水平磷酸化的“补充作用”在氧供应不足时，Lm通过底物水平磷酸化（如糖酵解中1,3-二磷酸甘油酸生成ATP、丙酮酸生成乙酸产生ATP）补充能量。尽管底物水平磷酸化的ATP产量较低，但可快速响应能量需求，为细菌在缺氧环境下的生存提供“缓冲”。04免疫逃逸与拮抗机制：在“免疫围剿”中“伪装突围”免疫逃逸与拮抗机制：在“免疫围剿”中“伪装突围”宿主细胞通过先天免疫和适应性免疫清除胞内病原体，而Lm则通过“多维度免疫逃逸”策略，抑制免疫信号激活、拮抗免疫效应分子，甚至“利用”免疫细胞实现传播。自噬通路的“巧妙规避”：从逃逸到“欺骗”自噬是宿主细胞清除胞内病原体的核心机制，通过“隔离”和“降解”病原体，维持细胞内环境稳态。Lm通过多种机制拮抗自噬。自噬通路的“巧妙规避”：从逃逸到“欺骗”避免自噬体识别：ActA的“分子伪装”自噬体通过识别细菌表面的PAMPs（如肽聚糖、脂蛋白）进行捕获，而ActA的表达可掩盖这些PAMPs，使细菌无法被自噬受体（如p62、NDP52）识别。此外，ActA介导的actin尾形成还可物理阻止自噬体与细菌的接触——自噬体需要“包裹”细菌，而actin尾的“刚性结构”使其无法靠近细菌表面。2.抑制自噬体成熟：InlK与LC3的“分子绑架”Lm分泌的内化素InlK可与宿主细胞的自噬相关蛋白LC3结合，但并非促进自噬，而是“抑制”自噬体成熟。InlK与LC3结合后，可阻断自噬体与溶酶体的融合，使“捕获”的自噬体成为“无效隔室”。研究表明，InlK缺失的Lm突变株在巨噬细胞内的自噬体积累量增加2倍以上，而细菌存活率下降50%。自噬通路的“巧妙规避”：从逃逸到“欺骗”降解自噬相关蛋白：LLO的“靶向破坏”LLO不仅参与吞噬体逃逸，还可通过其溶血活性破坏自噬体膜——自噬体是“双层膜结构”，稳定性低于吞噬体，LLO可在酸性环境下（如自噬体与溶酶体融合前的酸性阶段）插入自噬体膜，形成孔道，导致自噬体内容物泄漏，从而“解救”被包裹的细菌。炎症反应的“精准刹车”：TLR与NF-κB通路的拮抗炎症反应是宿主清除病原体的“双刃剑”：过度炎症会导致组织损伤，而炎症不足则无法控制感染。Lm通过“精准调控”炎症反应，既避免被“过度清除”，又防止“过度激活”导致宿主死亡。炎症反应的“精准刹车”：TLR与NF-κB通路的拮抗TLR信号通路的“拮抗”宿主细胞通过Toll样受体（TLRs）识别Lm的PAMPs（如肽聚糖、脂蛋白），激活NF-κB通路，释放促炎因子（如TNF-α、IL-6、IL-12）。Lm则通过多种机制拮抗TLR信号：12-分泌LntA干扰表观遗传调控：LntA是一种核定位蛋白，可与宿主细胞的BAF复合物（Barrier-to-AutointegrationFactor）结合，抑制组蛋白乙酰转移酶（HAT）的活性，减少NF-κB依赖的促炎基因转录。3-LLO的“pH依赖性降解”：在吞噬体逃逸过程中，LLO可降解TLR信号通路的关键分子，如MyD88（TLR3/7/9的接头蛋白）和TRIF（TLR4的接头蛋白），阻断NF-κB的激活。炎症反应的“精准刹车”：TLR与NF-κB通路的拮抗促炎因子的“清除”与“拮抗”Lm可分泌蛋白酶（如Mpl）降解宿主细胞释放的促炎因子（如IL-8），同时通过表达“炎症抑制因子”（如Lipoteichoicacid，LTA）抑制TNF-α的活性。此外，Lm还可通过“诱导免疫调节性细胞”（如调节性T细胞）抑制炎症反应，形成“免疫耐受”微环境。细胞凋亡的“主动调控”：生存信号与死亡通路的博弈细胞凋亡是宿主细胞清除胞内病原体的“最后防线”，而Lm通过“促进生存”和“抑制凋亡”两种策略，维持宿主细胞存活，为其提供“庇护所”。细胞凋亡的“主动调控”：生存信号与死亡通路的博弈激活PI3K/Akt生存通路Lm分泌的内化素InlB可与宿主细胞的Met受体结合，激活PI3K/Akt通路，激活下游的生存因子（如NF-κB、Bcl-2），抑制caspase-3、caspase-9等凋亡执行分子的活性。研究表明，InlB缺失的Lm突变株在肝细胞中的诱导凋亡率增加3倍以上，而细菌存活率下降60%。细胞凋亡的“主动调控”：生存信号与死亡通路的博弈降解凋亡信号分子Lm分泌的磷脂酶PlcB可降解凋亡信号分子，如Fas配体（FasL）和TNF-α，阻断死亡受体通路的激活；同时，PlcB还可切割caspase-3的前体（procaspase-3），抑制其活化。此外，Lm还可通过“抑制线粒体凋亡通路”：减少细胞色素c的释放，维持线粒体膜电位稳定，避免凋亡诱导因子（AIF）的释放。05细胞间传播策略：从“单点感染”到“全身扩散”细胞间传播策略：从“单点感染”到“全身扩散”Lm的胞内生存并非“终点”，其最终目标是实现细胞间传播，从初始感染细胞扩散至邻近细胞，引发全身感染。这一过程涉及“主动传播”和“侵入诱导”两种机制，由多种毒力因子协同调控。细胞间“穿梭”的机械引擎：Actin尾的“主动推送”ActA介导的actin尾形成不仅是Lm在胞质中运动的“引擎”，更是细胞间传播的“机械助推器”。当Lm在胞质中增殖至一定数量（约10-20个/细胞），其表面的ActA蛋白会激活宿主细胞的actin聚合系统，形成“长尾状actin束”，将细菌“推送”至宿主细胞膜表面，形成“突起”（protrusion）。突起可延伸至10-20μm，其末端被邻近细胞的细胞膜包裹，通过“受体介导的内吞”进入邻近细胞。这一过程的“精密性”体现在：-方向性：Actin尾的形成方向与宿主细胞膜极性相关，确保突起朝向邻近细胞延伸；-同步性：多个Lm在同一个宿主细胞内可形成多个突起，实现“多点传播”；-保护性：突起内的细菌被宿主actin和细胞膜包裹，避免被抗体或补体识别。细胞间“穿梭”的机械引擎：Actin尾的“主动推送”我曾通过活细胞成像技术观察到：当Lm感染HeLa细胞后，6小时内即可观察到突形成，12小时内邻近细胞即可检测到细菌——这种“高效传播”是Lm引发全身感染的关键。（二）侵入受体的“靶向识别”：InlA/InlB与E-cadherin/Met的“分子握手”突起形成后，Lm需通过“受体-配体相互作用”进入邻近细胞。这一过程主要由两种内化素介导：InlA和InlB。1.InlA与E-cadherin的“上皮细胞特异性侵入”InlA是位于Lm表面的蛋白，其内部重复序列（Internalinrepeat,IR）可与上皮细胞表面的E-cadherin结合。E-cadherin是上皮细胞间连接的关键分子，正常情况下参与细胞-细胞粘附。细胞间“穿梭”的机械引擎：Actin尾的“主动推送”InlA与E-cadherin结合后，可触发E-cadherin的内吞，使邻近细胞“主动吞噬”突起内的细菌。值得注意的是，InlA与E-cadherin的结合具有“物种特异性”：人源E-cadherin的第16个氨基酸是酪氨酸（T16），而小鼠源E-cadherin是组氨酸（H16），导致InlA无法有效结合小鼠E-cadherin——这也是Lm感染模型中，人源化小鼠（表达人E-cadherin）被广泛应用的原因。细胞间“穿梭”的机械引擎：Actin尾的“主动推送”InlB与Met的“非吞噬细胞特异性侵入”InlB是另一种分泌型内化素，其LRR结构域可与肝细胞、成纤维细胞表面的Met受体（肝细胞生长因子受体）结合。Met受体是酪氨酸激酶受体，激活后可触发内吞信号，促进细菌侵入。InlB与Met结合后，可激活PI3K/Akt和MAPK通路，促进细胞骨架重排，形成“吞噬杯”包裹细菌。与InlA不同，InlB与Met的结合具有“广谱性”，可介导Lm侵入多种非吞噬细胞（如肝细胞、内皮细胞）。传播过程中的“细胞保护”：膜修复与应激耐受细胞间传播过程中，宿主细胞膜（突起膜）可能因机械拉伸或细菌分泌的溶素而损伤，导致细胞死亡。Lm通过“促进膜修复”和“增强应激耐受”维持宿主细胞存活，确保传播的“连续性”。传播过程中的“细胞保护”：膜修复与应激耐受膜修复的“磷脂供应”宿主细胞膜修复需要磷脂（如磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺）的补充，Lm通过分泌磷脂酶（如PlcB）降解宿主细胞膜的磷脂，释放游离磷脂，供宿主细胞用于膜修复。同时，Lm自身的磷脂合成系统（如plsB、plsC）也可为膜修复提供“外援”。传播过程中的“细胞保护”：膜修复与应激耐受应激耐受的“交叉保护”传播过程中的机械应激和氧化应激会导致宿主细胞损伤，Lm通过“交叉保护”机制增强宿主细胞的应激耐受：例如，Lm分泌的HSPs（如DnaK）可被宿主细胞摄取，增强其对热应激的耐受；Lm的抗氧化系统（如SodA、AhpC）可清除宿主细胞内的ROS，减少氧化损伤。六、总结与展望：单核细胞增生李斯特菌胞内生存策略的“演化智慧”单核细胞增生李斯特菌的内化后胞内生存策略，是一部由病原体