3种干制食用菌中有机汞含量的检测研究

3种干制食用菌中有机汞含量的检测研究 论文（设计）题目3种干制食用菌中有机汞含量的检测研究子课题题目摘要本方法为了探究液相色谱-原子荧光光谱联用仪（HPLC-AFS）检测三种干制食用菌中有机汞，采用盐酸超声浸提的方式，提取后的溶液调节pH后用HPLC-AFS检测，检测结果为：干香菇中甲基汞含量为0.1746mg/Kg-0.1890mg/Kg,1ug/L加标样品回收率为94.11%,6次平行测试精密度为5.13%，2ug/L加标样品回收率为118.67%，6次平行测试精密度为1.99%，3ug/L加标样品回收率为119.07%，6次平行测试精密度为3.79%；乙基汞含量为0.2523mg/Kg-0.2786mg/Kg，1ug/L加标样品回收率为104.49%,6次平行测试精密度为3.38%，2ug/L加标样品回收率为100.47%，6次平行测试精密度为1.95%，3ug/L加标样品回收率为108.50%，6次平行测试精密度为1.89%；竹荪中甲基汞含量未检出,1ug/L加标样品回收率为110.52%,6次平行测试精密度为4.59%，2ug/L加标样品回收率为105.61%，6次平行测试精密度为2.97%，3ug/L加标样品回收率为102.19%，6次平行测试精密度为2.38%；乙基汞含量未检出，1ug/L加标样品回收率为110.38%,6次平行测试精密度为5.37%，2ug/L加标样品回收率为104.29%，6次平行测试精密度为2.35%，3ug/L加标样品回收率为100.75%，6次平行测试精密度为3.19%；牛肝菌中甲基汞含量未检出,1ug/L加标样品回收率为118.25%,6次平行测试精密度为2.37%，2ug/L加标样品回收率为104.36%，6次平行测试精密度为4.74%，3ug/L加标样品回收率为116.67%，6次平行测试精密度为1.41%；乙基汞含量未检出，1ug/L加标样品回收率为103.16%,6次平行测试精密度为3.91%，2ug/L加标样品回收率为101.00%，6次平行测试精密度为5.00%，3ug/L加标样品回收率为101.62%，6次平行测试精密度2.42%。关键词：干制食用菌；甲基汞；液相色谱-原子荧光联用仪；HPLC-AFSAbstractInordertoinvestigatethedeterminationoforganicmercuryinthreekindsofdriedediblefungibyhighperformanceliquidChromatography-Atomicfluorescencespectrometry(HPLC-AFS),themethodofultrasonicextractionwithhydrochloricacidwasused.AfteradjustingthepHoftheextractedsolution,thedetectionwascarriedoutbyhighperformanceliquidchromatography-AFS.(1)ThecontentofmethylmercuryindriedLentinusedodeswas0.1746mg/Kg-0.1890mg/Kg,therecoveryof1ug/Lstandard-addedsampleswas94.11%,theprecisionofsixparalleltestswas5.13%,therecoveryof2ug/Lstandard-addedsampleswas118.67%,theprecisionofsixparalleltestswas1.99%,therecoveryof3ug/Lstandard-addedsampleswas119.07%,andtheprecisionofsixparalleltestswas3.79%.0.2523mg/Kg-0.2786mg/Kg,therecoveryrateof1ug/Lstandard-addedsampleis104.49%,theprecisionofsixparalleltestsis3.38%,therecoveryrateof2ug/Lstandard-addedsampleis100.47%,theprecisionofsixparalleltestsis1.95%,therecoveryrateof3ug/Lstandard-addedsampleis108.50%,andtheprecisionofsixparalleltestsis1.89%.(2)ThecontentofmethylmercuryinDictyophorajaponicawasnotdetected,therecoveryof1ug/Lstandard-addedsamplewas110.52%,theprecisionofsixparalleltestswas4.59%,therecoveryof2ug/Lstandard-addedsamplewas105.61%,theprecisionofsixparalleltestswas2.97%,therecoveryof3ug/Lstandard-addedsamplewas102.19%,andtheprecisionofsixparalleltestswas2.38%;thecontentofethylmercurywasnotdetected,andtherecoveryof1ug/Lstandard-addedsamplewas105.61%.Therecoveryofstandardsamplesis110.38%,theprecisionofsixparalleltestsis5.37%,therecoveryof2ug/Lstandard-addedsamplesis104.29%,theprecisionofsixparalleltestsis2.35%,therecoveryof3ug/Lstandard-addedsamplesis100.75%,andtheprecisionofsixparalleltestsis3.19%.(3)ThecontentofmethylmercuryinBoletuswasnotdetected,therecoveryof1ug/Lstandard-addedsamplewas118.25%,theprecisionofsixparalleltestswas2.37%,therecoveryof2ug/Lstandard-addedsamplewas104.36%,theprecisionofsixparalleltestswas4.74%,therecoveryof3ug/Lstandard-addedsamplewas116.67%,andtheprecisionofsixparalleltestswas1.41%;thecontentofethylmercurywasnotdetected,andtherecoveryof2ug/Lstandard-addedsamplewas104.36%.Therecoveriesofstandard-addedsampleswere103.16%,3.91%forsixparalleltests,101.00%for2ug/Lstandard-addedsamples,5.00%forsixparalleltests,101.62%for3ug/Lstandard-addedsamplesand2.42%forsixparalleltests.Keywords:driedediblefungi;methylmercury;liquidChromatography-Atomicfluorescencespectrometry;highperformanceliquidchromatography-AFS 目录 第一章前言 41.1云南野生菌的简介 41.1.1云南野生菌的种属 41.1.2云南野生食用菌的应用 51.1.3总汞、甲基汞对人体的危害 51.2干制食用菌中甲基汞测定方法的介绍 71.2.1干制食用菌中甲基汞测定方法介绍 71.2.2样品前处理方式的介绍 81.3本研究的目的、意义及研究路线 91.3.1本研究的目的及意义 91.3.2技术路线 9第二章材料与方法 102.1试验材料 102.2试验设备、试剂、耗材 102.2.1试验设备 102.2.2试验试剂 102.2.3试验耗材 112.3标准溶液的配制 112.3.1甲基汞、乙基汞标准溶液的配制 112.3.2标准曲线溶液的配制 112.3.3前处理溶液配制 122.4试验方法 122.4.1样品处理 122.4.2甲基汞测定前处理 122.4.3准确度及精密度实验 132.4.4分析步骤 132.4.5检测条件 132.4.6标准曲线的绘制 132.5数据分析 15第三章试验结果 163.1三种干制食用菌有机汞测定结果 163.2准确度及精密度实验结果 173.3结果分析 18第四章讨论 19参考文献 22谢辞 23第一章前言1.1云南野生菌的简介1.1.1云南野生菌的种属野生食用菌是指在自然状态下生长的、可食用的野生大型真菌，其中担子菌较多，子囊菌较少。野生食用菌不仅味道鲜美、营养丰富，并且一些种类的提取物还具有抗氧化、抗肿瘤，降胆固醇、降血脂，提高人体免疫力，美白等功效[1]。据调查，野生食用菌既是云南各族人民重要食物来源，也是当地广大山区农户增收致富的重要经济来源[2]，对改善当地居民膳食结构和促进当地经济发展，起着不可忽视的作用。云南位于我国西南部，海拔76.4m-6740m，海拔自西向东呈明显阶梯状变化，山区半山区占全省面积94%。从南到北由于特殊的地势，形成7个气候类型，为当地的生物多样性提供了得天独厚的条件，加之印度洋和太平洋两股暖湿气流为当地带来充沛的降水量，为各类生物繁衍生息提供了良好的生存环境，促进真菌的大量发生。已知云南分布野生食用菌882种[3]，占世界2000种食用菌的44.1%[4]，占中国966分类单元的91.3%[5]。云南全省120多个县市均有野生食用菌分布，且野生食用菌发生较早，年生产周期长达8个月，集中发生在6月-9月，产量高质量优[6]。DBCADBCA图1.1常见的食用野生菌品种（注：A：松茸、B：鸡枞菌、C:牛肝菌、D：白葱菌）1.1.2云南野生食用菌的应用野生食用菌肉质结实，口感各异，香气浓郁，经科学研究其营养价值是人工菇无法比拟的[7]，所以野生菌也稀有而弥足贵，其主要生长于山林，是天然绿色食品，它富含多种维生素、优质蛋白及其他有益于人体的成分，营养丰富，风味独特，有的食用菌还有治疗癌症和多种疾病的药理作用[8]。野生食用菌是群众喜爱的美味佳肴，但误食有毒野生菌会发生中毒，甚至会危及食用者生命。1.1.3总汞、甲基汞对人体的危害汞属于一类金属，一种全球性污染物。由于汞特殊的物理化学性质，成为了在全球环境污染中毒性最强的重金属元素之一。汞的亲疏性强，易形成络合离子，熔点低，以硫化物等形式在岩石中广泛存在。土壤中最基本的汞的来源是由于地表岩石风化，形成土壤母质，将部分残留汞带入到土壤母质中[9]。全球分布着3个大型Hg矿化带，云南位于环太平洋汞矿化带[10]。调查显示，云南东南部、贵州等地区以岩溶区为中心的低温成矿域内，土壤Hg含量背景值为全球最高[11]。2010年的数据表明，云南Hg人为排放量为58.81t，占全国总排放量7%[12]。因此研究云南环境Hg污染研究具有重要意义。1.1.3.1无机汞暴露对人体健康危害无机汞暴露主要涉及到牙科制剂、中药、高汞含量的日化用品等，尤其是特定职业群体生产或使用汞及其化合物，如汞矿开采冶炼、金矿混汞法炼金、氯碱车间、温度计厂等。无机汞主要是通过呼吸、食物摄取及皮肤吸收等途径进入人体。其中，呼吸是无机汞暴露的最重要途径，吸人的汞蒸气80%左右可以通过肺泡进入血液运至全身。食物中的无机汞约有7%是通过口腔摄取而被吸收。通过皮肤吸收的汞蒸气尽管很少，占呼吸吸收的1%左右，但是日常使用一些的美白护肤品中含有的高汞成分也会造成汞的吸收与积累。通常血汞、尿汞可作为无机汞暴露的评价依据。其中，血汞检测适合急性汞中毒时吸收剂量及病情判断;尿汞含量可作为慢性汞中毒体内剂量的检测手段。针对有特殊职业性汞暴露的群体，世界卫生组织公布的特殊职业人体尿汞含量上限为50μg.g-1Cr,一般人群尿汞含量应低于5μg.g-1Cr。无机汞的毒性主要表现为神经毒性和肾脏毒性。中枢神经系统可能是汞蒸气暴露的最敏感的靶器官，比较典型的症状包括:肌肉震颤、情绪失常、视力模糊、注意力分散、记忆衰退、失眠、头痛以及综合性神经异常等。肾脏也是汞蒸气暴露的要害器官。其他毒性包括呼吸消化系统毒性、心血管系统毒性、皮肤毒性、生殖毒性、免疫系统影响严重致癌性等[13]。1.1.3.2甲基汞暴露对人体健康危害甲基汞的人体暴露主要与食用海鲜鱼类及其他水产品有关，其他来源亦有少量报道。如贵州省汞矿地区居民食用水稻是其甲基汞暴露的主要根源。人类关于甲基汞的生物吸收研究指出，鱼体内甲基汞吸收率高达100%，与肌肉蛋白结合后日常烹饪无法根除。但最近研究表明，这一结果并不严谨。毒物动力学与生理-药物动力学模型常常被用来评估生物体内的汞负荷，在已知摄入剂量的情况下，通过检测不同组织内甲基汞的浓度来预测甲基汞摄入的变化以及生理变化如怀孕、发育[14]。通常发汞可作为甲基汞暴露的有效生物标记，反映整个生长期的平均暴露水平。据世界卫生组织数据显示，甲基汞中毒的临界血汞浓度约为200μg.L-1,发汞浓度约为50μg.g-1。一般而言，普通人群发汞正常含量在1μg.g-1以下。对头发样品进行分段分析，可提供时间序列的暴露水平。甲基汞对人体大脑和神经系统等靶器官具有毒性，中毒症状为末梢感觉神经错乱、视野收缩、构音障碍、运动性失调、以及震颤。对心血管影响的症状包括心血管疾病、高血压的影响以及心律异常。但是甲基汞对心脑血管、生殖免疫系统影响的研究总体上还很少，有待进一步研究[15]。1.2干制食用菌中甲基汞测定方法的介绍1.2.1干制食用菌中甲基汞测定方法介绍测定方法主要有:液相色谱-电感耦合等离子体质谱（HPLC-ICPMS）法、液相色谱-原子荧光光谱（HPLC-AFS）法、气相色谱（GC）法。各方法的优缺点比较详见表1。表1.1甲基汞含量测定方法比较方法原理优点缺点液相色谱-电感耦合等离子体质谱（HPLC-ICP-MS）法食品中甲基汞经超声波辅助5mol/L盐酸溶液提取后，使用C18反相色谱柱分离，色谱流出液进入在线紫外消解系统，在紫外光照射下与强氧化剂过硫酸钾反应，甲基汞转变为无机汞。由电感耦合等离子体质谱仪测定,以元素特定质量数(质荷比,m/z)定性,采用外标法,以待测元素质谱信号与内标元素质谱信号的强度比与待测元素的浓度成正比进行定量分析。分析速度快，效率高，可多元素同时分析；分析灵敏度高，分析范围广。受设备所限，难以推广。液相色谱-原子荧光光谱（HPLC-AFS）法食品中甲基汞经超声波辅助5mol/L盐酸溶液提取后，使用C18反相色谱柱分离，色谱流出液进入在线紫外消解系统，在紫外光照射下与强氧化剂过硫酸钾反应，甲基汞转变为无机汞。酸性环境下，无机汞与硼氢化钾在线反应生成汞蒸气，由原子荧光光谱仪测定。由保留时间定性，外标法峰面积定量。选择性强，抗干扰能力强，灵敏度高，价格相对合适。荧光波动大，精密度待改进。气相色谱法（GC）法试样中甲基汞，用氯化钠研磨后加入含有Cu2+的盐酸（1+11），(Cu2+与组织中结合的CH3Hg交换）完全萃取后，经离心或过滤，将上清液调试至一定的酸度，用巯基棉吸附，再用盐酸（1+5）洗脱，最后以苯萃取甲基汞，用带电子捕获鉴定器的气相色谱仪分析。/前处理试剂危害性大，精密度及灵敏度不够。1.2.2样品前处理方式的介绍称取样品0.25g-0.50g(精确至0.001g),置于50mL离心管中，加入10mL的盐酸溶液（5mol/L），放置过夜。室温下超声水浴提取60min，期间振摇数次。4℃下以10000r/min转速离心15min。准确吸取2.0mL上清液至10mL刻度试管中，逐滴加入氢氧化钠溶液（6mol/L），使样品液pH位2-7.加入0.1mL的L-半胱氨酸溶液（10g/L），最后用UP水定容至5mL刻度。0.45um有机滤膜过滤，待测。同时做空白试验。1.3本研究的目的、意义及研究路线1.3.1本研究的目的及意义近些年来，食品安全事件频频发生，云南成为全国最大的野生菌产地，野生菌越来越受人们喜爱，这些山中珍品开始走上人们的餐桌，成为大家争相品尝的美味佳肴。野生菌的安全问题也成为人们关注的焦点。野生菌中除了含有维生素等对人体有益的成分外，还有一些对人体健康有害的重金属元素，比如汞元素，汞元素的过量摄入对人体的危害显而易见，其中有机危害最大，但是对于野生菌中的有机汞含量的研究还鲜有报道。通过本实验准确测定出几种野生菌中有机的含量，对于野生菌市场发展有重要的意义，从而为进一步深入研究野生菌质量安全提供一个可靠的参考，为完善野生菌质量安全体系提供理论依据，为野生菌市场的开拓提供一个数据支持。1.3.2技术路线采购干制食用菌采购干制食用菌将样品打碎、磨细、过筛将样品打碎、磨细、过筛称样后进行前处理——盐酸超声浸提称样后进行前处理——盐酸超声浸提液相色谱-原子荧光联用仪液相色谱-原子荧光联用仪数据处理、结果分析数据处理、结果分析得出结论得出结论第二章材料与方法2.1试验材料超市购买的干制食用菌，分别为：竹荪、香菇、牛肝菌。各材料详见表2.1。表2.1试验材料材料规格厂商竹荪400g市售散装香菇400g市售散装牛肝菌400g市售散装2.2试验设备、试剂、耗材2.2.1试验设备各试验仪器详见表2.2。表2.2试验仪器名称厂家型号/规格电子天平奥豪斯CP51/千分之一液相色谱-原子荧光联用仪北京吉天AFS-933超声波提取仪昆山舒美KQ-600VDE移液枪艾本德10-100μL移液枪大龙20-200μL移液枪大龙100-1000μL移液枪艾本德10mL纯水机优普UPT-II-20T真空抽滤机津腾GM-0.5B超高速冷冻离心机SigmaSigma4-16ks2.2.2试验试剂各试验试剂详见表2.3。表2.3试验试剂材料规格厂商盐酸GR500mL四川西陇化工L-半胱氨酸生化试剂BR25g国药氢氧化钠AR500g国药氢氧化钾GR500g天津科密欧硼氢化钾GR100g成都科隆甲基汞标准物质0.250gDr.Ehrenstorfer乙基汞标准物质0.250gDr.Ehrenstorfer甲醇4L上海星可高乙腈4L上海星可高乙酸铵AR500g汕头西陇化工2.2.3试验耗材50mL离心管、10mL离心管、3mL一次性塑料滴管、进样瓶、PH精密试纸（0.5-5）、50mL烧杯等。2.3标准溶液的配制2.3.1甲基汞、乙基汞标准溶液的配制甲基汞、乙基汞标准储备溶液配制：分别称取甲基汞0.01250mg、乙基汞0.01330mg于50.00mL容量瓶中,加甲醇-水（1:1）溶液定容至刻度线，此时甲基汞、乙基汞标准溶液的浓度均为200.0mg/L,作为甲基汞、乙基汞标准储备液备用。甲基汞、乙基汞混合标准使用溶液配制：精密吸取0.500mL甲基汞标准液（200.0mg/L）和乙基汞标准液（200.0mg/L）于100.00mL容量瓶中，用纯水定容至刻度，定容后浓度为1.0mg/L，作为甲、乙基汞混合标准使用液备用。2.3.2标准曲线溶液的配制甲基汞、乙基汞混合溶液标准曲线工作液的配制：分别准确吸取甲基汞及乙基汞标准使用液0.000mL、0.025mL、0.050mL、0.1000mL、0.2000mL、0.250mL于50.00mL容量瓶中，用超纯水定容至刻度，配制成0.000μg/L、2.5μg/L、5.0μg/L、10.0μg/L、20.0μg/L、25.0μg/L的标准系列溶液。2.3.3前处理溶液配制流动相配制：精确称量乙腈50mL，乙酸铵4.62g（60mmol/L）,L-半胱氨酸1.21g(10mmol/L)，用纯水定容至1000mL，经溶剂过滤器过膜抽滤，并超声30分钟以上。载流配制：量取70mL盐酸，溶于水并稀释至1000mL。还原剂配制：称取20g硼氢化钾，3.5g氢氧化钾，用水溶解并稀释至1000mL。2.4试验方法2.4.1样品处理先将粉碎机用超纯水多次冲洗后晾干，再将所准备的野生菌样品进行四分法取样，取出400g用粉碎机打碎呈粉未状后用40目筛子过筛，再将打碎的菌粉末混匀，在四分法取25g装入干净样品袋中，贴好标签备用。2.4.2甲基汞测定前处理称取样品0.25g-0.50g(精确至0.001g),置于50mL离心管中，加入10mL的盐酸溶液（5mol/L），放置过夜。室温下超声水浴提取60min，期间振摇数次。4℃下以10000r/min转速离心15min。准确吸取2.0mL上清液至10mL刻度试管中，逐滴加入氢氧化钠溶液（6mol/L），使样品液pH位2-7.加入0.1mL的L-半胱氨酸溶液（10g/L），最后用UP水定容至5mL刻度。0.45um有机滤膜过滤，待测。同时做空白试验。2.4.3准确度及精密度实验分别称取24个样品0.25g-0.50g(精确至0.001g),置于50mL离心管中，标记为1-24号，7-12号加入甲、乙基汞混合使用标准溶液（1mg/L）0.025mL，13-18号加入甲、乙基汞混合使用标准溶液（1mg/L）0.050mL，19-24号加入甲、乙基汞混合使用标准溶液（1mg/L）0.075mL。其余步骤按照2.4.3操作。2.4.4分析步骤1、调试最佳条件后制作标准曲线，将配置好的甲基汞曲线信息以及样品信息输入仪器分析目录，仪器自动进样分析。2、分析结束后对色谱图积分，排除杂峰并绘制标准曲线，再用标准曲线计算待测样品浓度。3、待样品分析完毕，将分析数据整理打印，并计算分析数据。2.4.5检测条件负高压为280v、汞灯总电流为25mA、辅电流为13mA、载气流量(ml/min)为400、屏蔽气流量(ml/min)为800。BA2.4.6标准曲线的绘制BA图1竹荪样品中有机汞测定的标准曲线（注：A：甲基汞工作曲线(S=15675.4C-3447.4；R=0.9917）B:乙基汞工作曲线(S=12134.6C-1773.6；R=0.9944））BABA图2牛肝菌样品中有机汞测定的标准曲线（1-12号）（注：A：甲基汞工作曲线(S=11095.8C-730.0；R=0.9978）B:乙基汞工作曲线(S=8354.0C-717.1；R=0.9981））BABA图3牛肝菌样品中有机汞测定的标准曲线（13-24号）（注：A：甲基汞工作曲线(S=12564.9C+380.2；R=0.9978）B:乙基汞工作曲线(S=10470.3C-2052.5；R=0.9948））BABA图4干香菇样品中有机汞测定的标准曲线（注：A：甲基汞工作曲线(S=12766.6C-1981.5；R=0.9977）B:乙基汞工作曲线(S=11136.8C-2536.8；R=0.9947））由上图可知甲基汞标准曲线的相关系数范围由0.9917至0.9978，乙基汞标准曲线的相关系数范围由0.9944至0.9981，曲线相关系数均大于0.99，满足检测要求。2.5数据分析有机汞测定结果计算公式：式中：X——样品中有机汞含量（单位为mg/Kg）c——样品溶液的浓度（单位为μg/L）co——空白溶液溶度（单位为μg/L）V——定容体积（单位为mL)M——称样量(单位为g)F——稀释倍率详细数据原始记录见附录第三章试验结果3.1三种干制食用菌有机汞测定结果根据试验测出的数据进行分析计算得出：表3.1三种干制食用菌甲基汞含量样品 甲基汞含量（mg/Kg）平均值（mg/Kg）竹荪0.0000.0000.0000.0000.0000.0000.000牛肝菌0.0000.0000.0000.0000.0000.0000.000干香菇0.18900.18570.17460.17530.18190.17200.1798表3.2三种干制食用菌乙基汞含量样品 乙基汞含量（mg/Kg）平均值（mg/Kg）竹荪0.0000.0000.0000.0000.0000.0000.000牛肝菌0.0000.0000.0000.0000.0000.0000.000干香菇0.25490.27860.26630.25590.26090.25230.2615根据实验数据按照公式计算可得：竹荪及牛肝菌中的甲、乙基汞的含量均未检出；干香菇中的甲基汞含量为0.1746mg/Kg-0.1890mg/Kg，乙基汞含量为0.2523mg/Kg-0.2786mg/Kg，计算得出甲基汞的平均值为0.1798mg/Kg，乙基汞的平均含量为0.2615mg/Kg。3.2准确度及精密度实验结果表3.3甲基汞的精密度样品加标称样（g）浓度(ug/L)加标质量（μg）实测质量（μg）回收率（%）精密度（%）竹荪0.5021.1050.02500.0276110.524.59竹荪0.5052.1120.05000.0528105.612.97竹荪0.5033.0660.07500.0756102.192.38牛肝菌0.2511.1820.02500.0296118.252.37牛肝菌0.2522.0870.05000.0522104.364.74牛肝菌0.2513.5000.07500.0875116.671.41干香菇0.5015.0170.03750.125494.115.13干香菇0.5015.9790.05000.1495118.671.99干香菇0.5127.1780.07500.2125119.073.79表3.4乙基汞的精密度样品加标称样（g）浓度(ug/L)加标质量（μg）实测质量（μg）回收率（%）精密度（%）竹荪0.5021.1140.02500.0278110.385.37竹荪0.5052.0860.05000.0521104.292.35竹荪0.5033.0220.07500.0756100.753.19牛肝菌0.2511.0320.02500.0258103.163.91牛肝菌0.2522.0200.05000.0505101.005.00牛肝菌0.2513.0490.07500.0762101.622.42干香菇0.5016.2900.03750.1572104.493.38干香菇0.5017.2540.05000.1814100.471.95干香菇0.5128.5000.07500.2125108.501.89竹荪加标中甲基汞的测定回收率为102.19%-110.52%，精密度为2.35%-5.37%，乙基汞的测定回收率为100.75%-110.38%，精密度为2.38%-4.59%；牛肝菌加标中甲基汞的测定回收率为104.36%-118.25%，精密度为1.41%-4.74%，乙基汞的测定回收率为101.00%-103.16%，精密度为2.42%-5.00%；干香菇加标中甲基汞的测定回收率为94.11%-119.07%，精密度为1.99%-5.13%，乙基汞的测定回收率为100.47%-108.50%，精密度为1.89%-3.38%。GB/T27404-2008《实验室质量控制规范食品理化检测》中含量在0.1mg/kg-1mg/kg之间的样品加标回收率要求60-120%。3.3结果分析从以上数据可得知，检测的干制食用菌中甲基汞含量在0.1746mg/Kg-0.1890mg/Kg，乙基汞含量在0.2523mg/Kg-0.2786mg/Kg，甲基汞回收率均在94.11%-119.07%范围，乙基汞回收率均在100.47%-110.38%范围，甲基汞精密度在2.35%-5.37%范围，乙基汞精密度在1.89%-5.00%范围。本实验建立的方法符合国家标准。试验结果表明，尽管在调查的牛肝菌、干香菇、竹荪这3种干制食用菌中，有部分野生菌总汞含量超标，但是在对人体有害的甲基汞含量方面，3种干制食用菌均未超标，这说明随机挑选的3种干制食用菌在汞含量方面对人体是安全的。试验结果也表明，野生菌中甲基汞含量占总汞含量的比例较低，这说明不能依据总汞含量的超标与否判定野生菌中甲基汞的危害性。由上文中实验数据得知，用本方法检测干制食用菌中的有机汞数据精密度、准确度及线性相关系数均满足检测要求；检测方法较为简易，所用试剂危害性小，所用设备常规检测实验室均已配备；检测三种食用菌只有干香菇中检测到甲基汞和乙基汞，其余食用菌中均未检出。在牛肝菌检测中，在甲基汞前发现一个显著出峰，从出峰时间上猜测是无机汞出峰，因本实验只涉及有机汞检测，未在标准曲线中加入无机汞标液，故无法验证猜想，只为以后实验提供参考。第四章讨论野生食用菌是群众喜爱的美味佳肴，但误食有毒野生菌会发生中毒甚至会危及食用者生命。导致食用野生菌中毒主要原因有：1）误食有毒菌类，常见的野生菌种类繁多，但能食用的菌子种类极少。比如形状外观极其相似的不同菌混在一起，让采菌人毫无察觉地将其采回来。人如果吃了，悲剧自然就不可避免地发生。2)加工环节出现失误。加工可食用野生菌的过程中，如果菌子未熟透或者这些菌子粘到其它器皿上，一旦吃到这些菌子，就可能发生中毒。3)一些野生菌虽属无毒菌类，但是如果其所生长的地方发生了污染，或者地层下含有磷之类有毒的矿物，通过土壤、地下水等途径富集进入野生菌中，人误食这种地方采来的菌子，也很容易导致中毒。以上三种原因其中前两种通过仔细辨别、谨慎食用，在很大程度上能够避免中毒事件的发生，而重金属等一些有毒有害物质富集在菌体里，通过肉眼及其一些常用的普通方法很难辨别对人体的危害程度。近年有报道指出有部分野生菌汞超标，但是这并不能完全说明，这些野生菌就不能食用。因为目前对食用野生菌中的汞含量的检测多是以国家标准为依据来检测其中的总汞含量，而甲基汞对人体的危害较大，其他成分可通过人体代谢尽快排出人体对人体的危害不大甚至无害。通过试验测出数据野生菌中甲基汞含量占乙基汞含量比例较低。说明在讨论野生菌中的汞危害时，更应该关注甲基汞含量而不是仅关注总汞含量。试验结果也一定程度说明，尽管有部分野生菌总汞含量超标，但是其甲基汞含量并未超标。可认为云南省野生菌在汞含量方面是相对安全的。在实验的前处理过程中，前处理是否彻底、称样过程中的多少、调节pH时的过程的污染程度会直接影响样品试液的上机，在离心后取上清液时不要触碰到沉淀，加试剂一定要定量，前结果这些因数都可能影响实验结果。使用的一些试剂具有很强的腐蚀性或危险性，在实验过程中使用到的强酸，为了避免其他元素的干扰，选用高级纯酸，不仅能防止污染还能提升实验测定的准确性。在加酸时要做好防护措施，操作前要注意戴好手套。此外，本实验中涉及试剂的现配现用，在试剂的配制、添加顺序过程中，要严格按要求进行，这就要求我们在实验过程中，要操作严谨。为使甲基汞充分还原，在实验测定中要慎重选择还原剂，还原剂不能久置，需要现用现配。应注意原子荧光光度计的用后清洁，每次试验后使用还原剂清洁仪器管路。参考文献[1]于富强，王向华，刘培贵.云南食用菌资源应用开发前景与展望[J].中国野生植物资源，2002，21（4）：21-25.[2]杨祝良.浅论云南野生蕈菌资源及其利用[J].自然资源学报，2002，17（4）：463-469.[3]黄兴奇.云南作物种质资源（食用菌篇）[M].昆明：云南科技出版社，2007：1-433.[4]卯晓岚.中国食用菌物种资源回顾与展望[J].中国食用菌，2000，19（增刊）：9-13.[5]戴玉成，周丽伟，杨祝良，等.中国食用菌名录[J].菌物学报，2010，29（1）：1-21.[6]王婷婷，赵春艳，陈旭，等.“十二五”云南食用菌产业发展状况分析及建议[J].中国食用菌，2017，36（3）：70-75.[7]王艳.吹响野生菌养生集结号[J].优品,2015(7):134-134.[8]牟兆兰.2015第六届云南野生菌美食节盛大开幕[J].烹调知识,2015(9):76-76.[9]汞污染的环境效应及人体暴露研究进展_焦君杰.caj[10]杨海，李平，仇广乐，等.世界汞矿地区汞污染研究进展[J].地球与环境,2009,37(1):80-85.[11]文雪琴，迟清华.中国汞的地球化学空间分布特征[J].地球化学,2007,36（6）:633-637.[12]ChengK,WangY,TianH,etal.Atmosphericemissioncharacteristicsandcontrolpoliciesoffiveprecede