饮用水安全检测技术操作规范

饮用水安全检测技术操作规范饮用水安全直接关系公众健康，检测技术的规范操作是保障检测结果准确、可靠的核心前提。本文结合实验室检测实践与《生活饮用水卫生标准》（GB5749-2022）、《生活饮用水标准检验方法》（GB/T5750系列）等行业要求，梳理从采样到报告全流程的操作要点，为水质检测工作提供实用技术指引。一、检测前准备（一）人员与资质检测人员需持检验检测机构资质认定证书，定期参加操作技能与标准更新培训（如每年不少于40学时），熟悉生物安全、化学安全防护知识，掌握《生活饮用水卫生标准》中40余项常规指标的检测要求。（二）仪器设备管理1.分析仪器：气相色谱仪、原子吸收分光光度计、浊度仪等需按校准周期（通常1年）进行计量校准，每次使用前核查波长、流量、温度等参数，记录仪器运行状态（如“气相色谱仪柱温箱温度波动≤±0.5℃”）。2.玻璃器皿：容量瓶、移液管等需经酸洗（10%硝酸浸泡24h）、润洗、烘干后使用，使用前核查刻度准确性（如10mL移液管误差≤±0.02mL），具塞容器需检查密封性。（三）试剂与耗材准备1.标准品：选用有证标准物质（如GBW系列），按说明书储存（如重金属标液需4℃避光），配制标准溶液时记录称量、定容过程，标注有效期（如“0.1mol/L硝酸铅标液，有效期3个月”）。2.化学试剂：分类存放（易燃、有毒、腐蚀品单独储存），使用前核查纯度（如分析纯硝酸）、保质期，易变质试剂（如硫代硫酸钠）需现配现用或每周标定。3.微生物耗材：采样瓶、培养基需经121℃高压灭菌20min，培养基冷却至45-50℃时倾注平板，备用培养基需在2-25℃避光保存，有效期内使用（如营养琼脂培养基有效期1个月）。（四）采样操作规范1.采样点选择：涵盖水源水、出厂水、末梢水，水源水采样需在水流较急处（避免表层水），末梢水需放水3-5min（避免管道残留）后采样。2.采样容器：理化检测用聚乙烯/玻璃容器，采样前用待采水样润洗3次；微生物检测用无菌采样瓶，禁止润洗（避免残留洗涤剂抑制微生物生长）。3.采样量与保存：理化指标采样量≥500mL，微生物≥200mL；水样采集后，理化样品加固定剂（如重金属加硝酸酸化至pH<2），微生物样品4℃冷藏（24h内检测）。二、主要检测技术操作规范（一）微生物指标检测（以菌落总数、总大肠菌群为例）1.菌落总数（平皿计数法）样品处理：摇匀水样，用无菌移液管吸取1mL（污染严重时做10倍系列稀释）注入无菌平皿。培养基倾注：将冷却至45℃的营养琼脂培养基倾注平皿，立即旋转混匀（避免菌落粘连），待凝固后倒置，于36±1℃培养48±2h。计数与报告：选取菌落数在30-300之间的平皿（此范围计数误差最小），计算平均菌落数，报告单位为CFU/mL；若所有稀释度菌落数均超300或低于30，按最高/最低稀释度报告并注明倍数。2.总大肠菌群（多管发酵法）初发酵：吸取水样10mL（或稀释液）至乳糖蛋白胨培养液，36±1℃培养24±2h，产酸产气者为初发酵阳性（乳糖提供碳源，溴甲酚紫指示剂显黄色）。复发酵：取初发酵阳性管培养物转种于伊红美蓝琼脂平板，36±1℃培养18-24h，观察紫黑色、带金属光泽菌落（伊红美蓝抑制革兰氏阳性菌，显色鉴别大肠菌群），挑取典型菌落接种乳糖蛋白胨培养液，产气者确认为阳性。结果计算：根据阳性管数查MPN表，报告每100mL水样中总大肠菌群的最大可能数（MPN）。（二）理化指标检测（以pH、浊度、重金属、有机物为例）1.pH值（玻璃电极法）仪器校准：用pH4.00、6.86、9.18标准缓冲液校准pH计，确保电极无气泡、膜表面清洁（可用软纸吸干残留水，避免划伤膜）。样品测定：摇匀水样，将电极浸入水样，待读数稳定后记录（如“末梢水pH7.23”），测定前后用超纯水冲洗电极。2.浊度（浊度仪法）仪器预热：开机预热15min，用零浊度水（超纯水）校准零点。样品测定：摇匀水样，倒入比色皿（避免产生气泡），放入仪器检测，读取浊度值（单位：NTU）；浑浊样品需稀释后测定，结果乘以稀释倍数（如稀释10倍后浊度为5.2NTU，原水样为52NTU）。3.重金属（以铅为例，原子吸收分光光度法）样品前处理：取50mL水样，加硝酸5mL，电热板120-150℃消解至近干（避免暴沸、烧干损失），用1%硝酸定容至50mL，同时做空白消解。仪器操作：设置波长283.3nm，调节乙炔（燃气）与空气（助燃气）流量，用铅标准系列溶液（0、5、10、20μg/L）绘制标准曲线，样品溶液注入原子化器，读取吸光度，由标准曲线计算浓度。4.有机物（以挥发性有机物为例，气相色谱法）样品富集：采用顶空进样法，取10mL水样于顶空瓶，加氯化钠（提高挥发性），密封后于60℃平衡30min。色谱条件：色谱柱为DB-624（30m×0.32mm×1.8μm），柱温40℃保持5min，以5℃/min升至150℃；进样口温度200℃，FID检测器温度250℃，载气为氮气。标准曲线与定量：用混合标准溶液（如三氯甲烷、四氯化碳等）配制系列浓度，顶空进样后绘制标准曲线，样品峰面积代入曲线计算浓度。三、质量控制措施（一）空白实验每批样品（≤20个）做1个试剂空白，空白值需低于方法检出限（如铅的检出限为0.01mg/L，空白值需<0.01mg/L），否则检查试剂、器皿或前处理过程。（二）平行样检测每10个样品做1组平行样（或不少于总样品数的10%），平行样相对偏差≤10%（理化指标）或菌落数相对偏差≤20%（微生物），否则重新检测。（三）加标回收率实验每批样品（≤20个）选1个样品做加标回收，加标量为样品含量的0.5-2倍，回收率应在80%-120%（痕量分析可放宽至70%-130%），否则优化前处理或分析方法。（四）质控样使用定期插入有证质控样（如标准水样），检测结果需在质控样不确定度范围内（如质控样铅含量为0.10±0.02mg/L，检测结果需在0.08-0.12mg/L之间），否则核查仪器、试剂或操作。四、数据记录与报告（一）原始记录详细记录采样信息（时间、地点、采样人）、仪器参数（如气相色谱柱温、原子吸收波长）、试剂批号、检测过程（稀释倍数、培养时间、峰面积）、实验现象（菌落形态、产气情况），记录需清晰可追溯，修改时划改并签名（禁止涂改）。（二）检测报告包含样品信息（来源、编号）、检测依据（如GB/T5750.4-2023）、检测项目（如菌落总数、pH、铅）、结果（附单位、参考标准限值）、检测/审核人签名、报告日期；结果超标时需注明并建议复查（如“铅含量0.15mg/L，超出GB5749-2022限值（0.01mg/L），建议重新采样检测”）。五、注意事项（一）安全防护微生物检测需在生物安全柜操作（操作前开风机30min，操作后消毒），佩戴手套、口罩；化学检测避免直接接触强酸强碱，使用通风橱处理挥发性试剂，废液分类收集（如重金属废液加NaOH调pH至8-10，生成氢氧化物沉淀后过滤，滤液排放）。（二）设备维护仪器使用后及时清理（如气相色谱仪老化色谱柱、原子吸收仪放空燃气），定期更换耗材（如色谱柱、过滤膜）；填写设备使用与维护记录（如“2024.05.10，气相色谱仪更换进样垫，压力稳定”）。（三）环境控制实验室温度、湿度需满足仪器要求（如气相色谱仪要求15-35℃，湿度