药物含量仪器分析技术

第四章药物含量测定技术12滴定分析技术仪器分析技术药物含量测定技术酸碱滴定法碘量法亚硝酸钠法非水溶液滴定法紫外-可见分光光度法高效液相色谱法气相色谱法第二节仪器分析技术仪器分析技术一、紫外-可见分光光度法二、高效液相色谱法三、气相色谱法仪器分析技术仪器分析法是利用精密仪器对待测物质的理化性质进行测定，根据测定产生的信号进行定性、定量分析的一类分析方法在药品检验中，仪器分析方法广泛运用于药物的物理常数测定、鉴别、杂质限量检查及含量测定等各方面，是药物质量检验的重要方法根据分析原理的不同，仪器分析法可分为电化学分析法、光谱法、色谱法及质谱法四类有什么特点？1.2.3.一、紫外-可见分光光度法分光光度法是利用待测物质在特定波长处或一定波长范围内对光的选择性吸收特征而建立的一种分析方法，属于光谱分析技术根据测定波长不同，可分为：紫外分光光度法可见分光光度法红外分光光度法所用的仪器有紫外-可见分光光度计、红外分光光度计。其中紫外-可见分光光度法应用最广泛（二）吸收光谱吸收光谱或称吸收曲线，是以波长（λ，nm）为横坐标、吸光度（A）为纵坐标所绘制的曲线请指出图中的吸收峰和最大吸收波长λmax。？（三）紫外-可见分光光度计紫外-可见分光光度计，是在紫外-可见光区可任意选择不同波长的光测定吸光度的仪器主要部件包括：光源、单色器、比色皿、检测器、讯号处理与显示器

几部分组成？比色皿：是用于盛放待测溶液的部件，要求配对使用，匹配的比色皿厚度和透光性应相同。光学玻璃制成的比色皿只能用于可见光区；熔融石英制成的比色皿适用于紫外光区，也可用于可见光区

有两个相互平行的透光面和两个不透光面（三）紫外-可见分光光度计根据朗伯-比尔定律，供试溶液的吸光度A与浓度C之间成正比关系，即

。若已知吸收系数

，通过测定吸光度A即可计算供试溶液的浓度C，根据浓度求出药物的含量

（四）含量测定二、高效液相色谱法高效液相色谱法（highperformanceliquidchromatography，

HPLC），又称高效液相层析，其基本方法是用高压输液泵将流动相泵入到装有填充剂的色谱柱，注入的供试品被流动相带入柱内进行分离后，各成分先后进入检测器，数据处理系统记录色谱图并进行数据处理，得到测定结果由于应用了各种特性的微粒填料和加压的液体流动相，本法具有分离性能高、分析速度快的特点（一）色谱法术语1.相相是指一个均匀体系，相与相之间有界面分开。如：固体与液体形成的固-液两相；互不相溶的两种液体，比如水和乙醚，形成液-液两相2.固定相固定在某一支持物上的相，如固定在薄层板上或玻璃柱中的吸附剂硅胶即为固定相3.流动相与固定相互不相溶的液体或气体，又称洗脱剂或展开剂4.液相色谱流动相为液体的色谱为液相色谱

（二）基本原理（二）基本原理实现不同组分分离主要是依靠色谱柱与流动相待分离的混合物随流动相进入色谱柱后，由于不同组分在固定相与流动相中的吸附力、溶解度、离子交换能力不同而导致流动速度不同，或由于不同组分分子大小不同，流经固定相的途径不同，最终不同组分流出色谱柱的时间各不相同，实现依照一定的顺序流出色谱柱而实现分离由于固定相的不同，高效液相色谱法按分离原理不同可分为吸附色谱法、分配色谱法、离子交换色谱法、分子排阻色谱法（三）技术参数技术1.色谱曲线是以检测器输出的电信号强度为纵坐标，时间为横坐标所绘制的曲线，又称色谱图2.基线是在操作条件下，没有组分流出时的流出曲线。稳定的基线应是平行于横轴的直线3.色谱峰是指色谱曲线上突起的部分

（三）技术参数技术4.保留时间（tR）是指从进样开始到某个组分的色谱峰顶点的时间间隔。是色谱法的基本定性参数5.峰面积（A）是色谱曲线与基线间包围的面积。是色谱法的定量参数（三）技术参数技术6.峰高是色谱峰顶点至基线的距离7.峰宽

峰宽有峰底宽和半高峰宽之分。半高峰宽为峰高一半处的峰宽8.拖尾因子（T）

是衡量色谱峰是否对称的指标。T在0.95~1.05之间的色谱峰为对称峰，小于0.95者为前沿峰，大于1.05者为拖尾峰（三）技术参数技术9.分离度

是相邻两组分色谱峰保留时间之差与两色谱峰峰宽均值之比，又称分辨率，是色谱法的分离效能指标。除另有规定外，分离度应大于1.5（四）高效液相色谱仪高效液相色谱仪高压输液系统（储液瓶、高压泵）、进样器、色谱柱检测器数据处理系统（计算机及色谱工作站）

几部分组成？（四）高效液相色谱仪核心部件：色谱柱

色谱柱是实现分离的核心部件，一般采用直形不锈钢柱管填充固定相组成。在药品检验中常用内径3.9mm或4.6mm，长15~20cm的分析柱色谱柱内填充的固定相最为常用的是化学键合固定相，例如：十八烷基硅烷键合硅胶，简称ODS或C18柱。色谱柱性能的好坏直接关系到分离效能，对色谱柱的性能可用一定试验条件下的柱压、理论板数n等指标来评价

（四）高效液相色谱仪（五）操作流程1.流动相制备2.供试品溶液制备3.色谱条件及系统适应性试验4.进样、测定及计算5.清洗和关机三、气相色谱法气相色谱法（gaschromatography，GC）系采用气体为流动相（载气）流经装有填充剂的色谱柱进行分离测定的色谱方法主要用于维生素E等药物及其制剂的含量测定、溶剂残留量的检查、乙醇量测定以及一些挥发性杂质检查等不同组分在气相色谱上的分离主要依靠与固定相的作用力或溶解能力不同而实现气相色谱的流动相只起到运输样品通过色谱柱的作用，因此称为载气物质或其衍生物气化后，被载气带入色谱柱进行分离，各组分先后进入检测器，用数据处理系统记录色谱信号

（一）基本原理（二）气相色谱仪气相色谱仪气流控制系统进样系统色谱柱检测器信号记录系统温度控制系统点滴积累1.紫外-可见分光光度法测定含量时，含量计算的依据是。含量测定常采用吸收系数法2.紫外-可见分光光度计由五部分组成，石英比色皿应配对使用3.高效液相色谱法分离的核心部件是色谱柱。常用的色谱柱是C18柱，其填充的固定相为十八烷基硅烷键合硅胶，简称ODS。C18柱常用的流动相系统是甲醇-水，甲醇比例不能低于5%一、单项选择题（A型题）1.广泛用于酸、碱、酯类药物含量测定的滴定分析方法是（

）A.酸碱滴定法B.碘量法C.非水溶液滴定法

D.沉淀滴定法E.配位滴定法2.滴定度T的单位是（

）A.mgB.mlC.mg/mlD.mg*mlE.无单位目标检测一、单项选择题（A型题）3.石蕊、酚酞是下列哪种滴定分析中常用的指示剂（）A.酸碱滴定法B.非水碱量法C.亚硝酸钠法D.碘量法E.配位滴定法4.直接碘量法测定的药物应是（

）A.氧化性药物B.还原性药物C.中性药物

D.酸性药物E.无机药物目标检测目标检测一、单项选择题（A型题）5.非水滴定法测定碱性药物含量时，常用的滴定液是（

）A.高氯酸B.高碘酸C.三氯醋酸

D.甲醇钠E.冰醋酸6.在非水滴定中，溶解弱碱性药物以增强其碱性，常用的溶剂是（

）A.乙二胺B.二甲基甲酰胺C.冰醋酸

D.甲醇E.乙醚一、单项选择题（A型题）7.配制硫代硫酸钠滴定液时使用新煮沸冷却的蒸馏水，目的是（

）A.除去CO2B.除去O2C.杀灭嗜硫菌D.A+B+CE.获取双蒸水目标检测一、单项选择题（A型题）8.氢化可的松的含量测定是利用其在242nm波长处测定吸光度，在测定时（

）A.应该使用玻璃比色皿和钨灯

B.应该使用石英比色皿和氘灯

C.应该使用玻璃比色皿和氘灯

D.应该使用石英比色皿和钨灯

E.可使用任何材质的比色皿和灯源目标检测一、单项选择题（A型题）9.A=

CL式中的C是（

）A.百分吸收系数B.摩尔吸收系数C.液体的厚度

D.待测溶液的百分浓度(g/100ml)E.被测溶液的浓度(g/ml)10.采用紫外-可见分光光度法测定药物含量时，为了减少测定误差，应调整溶液的浓度使吸光度（

）A.尽量大B.在0.3～0.7之间C.大于0.7D.大于1.0E.在0.7～1.2之间目标检测一、单项选择题（A型题）11.以十八烷基硅烷键合硅胶为固定相的反相色谱系统，流动相中有机溶剂的比例应不低于（

）A.0.5%B.5%C.10%D.15%E.20%目标检测一、单项选择题（A型题）12.下列含量测定方法中，可利用“待测组分与对照品的浓度之比等于其峰面积之比”计算待测组分含量的是（

）A.紫外-可见分光光度法的对照品比较法

B.紫外-可见分光光度法的吸收系数法

C.高效液相色谱法的面积归一化法

D.高效液相色谱法的内标法

E.高效液相色谱法的外标法目标检测目标检测一、单项选择题（A型题）13.高效液相（或气相）色谱仪中实现分离的核心部件是（

）A.输液泵B.进样器C.色谱柱D.检测器

E.色谱工作站14.高效液相色谱法中常使用的C18柱的固定相属于（

）A.化学键合固定相B.吸附剂C.离子交换树脂

D.葡聚糖凝胶E.聚丙烯酰胺凝胶目标检测一、单项选择题（A型题）15.除另有规定外，气相色谱法进行药物分析所用的载气均指（

）A.空气B.氢气C.氦气D.CO2E.氮气目标检测二、配伍选择题（B型题）[16-20]A.酸碱滴定法B.非水碱量法C.碘量法

D.亚硝酸钠滴定法E.紫外分光光度法16.具有还原性的药物如维生素C的含量测定可采用（

）17.有机弱碱的含量测定可采用（

）

18.酸性较强的芳香酸

的含量测定可采用（

）

19.有苯环和共轭结构的有机化合物含量测定可采用（

）

20.芳香第一胺类药物的含量测定可采用（

）

目标检测二、配伍选择题（B型题）[21-25]A.RfB.HPLCC.ODSD.tRE.GC21.比移值的符号（

）22.保留时间的符号（

）23.气相色谱的简称（

）24.十八烷基硅烷键合硅胶的简称（

）25.高效液相色谱法的简称（）目标检测三、多项选择题（X型题）26.用紫外分光光度法测定维生素B12含量的操作过程包括（

）

A.称量样品B.溶解、稀释C.测定吸光度

D.记录峰面积E.计算含量27.比色皿使用时应该注意（

）A.装溶液2～3mlB.配对使用C.润洗2～3遍

D.手拿毛玻璃面E.用擦镜纸擦拭目标检测三、多项选择题（X型题）28.用紫外分光光