2025年实验室生物安全培训考试试题（附答案）

2025年实验室生物安全培训考试试题（附答案）一、单项选择题（每题2分，共30分）1.根据《实验室生物安全通用要求》（GB19489-2022），BSL-3实验室的核心工作间应保持（）。A.正压（相对于相邻区域）B.常压C.负压（相对于相邻区域）D.微正压2.以下哪种操作不属于可能产生生物气溶胶的高风险操作？（）A.离心未密封的样本管B.用吸管吹打液体样本C.戴手套直接转移固体培养物D.开启冻干菌种安瓿3.实验室感染性废弃物的处理原则是（）。A.先收集后消毒B.分类收集→消毒/灭菌→专用包装→集中处理C.直接投入普通垃圾桶D.焚烧前无需消毒4.二级生物安全实验室（BSL-2）必须配备的基本防护设备是（）。A.Ⅱ级生物安全柜B.Ⅲ级生物安全柜C.正压防护服D.通风橱5.进行病原体分离培养时，若操作中意外打翻培养平板，正确的应急处理流程是（）。A.立即用纸巾擦拭，再喷洒75%酒精B.先覆盖含有效氯1000mg/L的消毒巾，静置30分钟后清理C.直接用清水冲洗台面D.报告主管后等待专业人员处理6.实验室菌（毒）种管理中，高致病性病原微生物的运输必须符合（）。A.《危险化学品管理条例》B.《病原微生物实验室生物安全管理条例》C.《医疗废物管理条例》D.《实验室资质认定评审准则》7.关于个人防护装备（PPE）的使用，错误的是（）。A.接触感染性物质后，应先脱手套再摘口罩B.实验服应长袖、束口，避免与便服接触C.一次性手套破损后，需立即更换并消毒手部D.防护眼镜可替代生物安全柜的防护作用8.实验室生物安全风险评估的首要依据是（）。A.实验人员的操作熟练程度B.病原体的危害等级（如WHO分类）C.实验室的空间大小D.实验设备的先进程度9.高压蒸汽灭菌效果的生物监测应使用（）。A.嗜热脂肪芽孢杆菌B.金黄色葡萄球菌C.大肠杆菌D.白色念珠菌10.实验室发生疑似气溶胶暴露（如生物安全柜故障）后，人员应（）。A.立即离开实验室并关闭门，30分钟后再进入B.继续操作至实验结束C.佩戴更高防护等级的口罩后继续工作D.用紫外线照射10分钟后继续操作11.以下哪类微生物属于第一类病原微生物？（）A.埃博拉病毒（非洲型）B.结核分枝杆菌C.乙肝病毒D.流感病毒（季节性）12.实验室废弃物标签应标注的关键信息不包括（）。A.废弃物类型（感染性/化学性）B.产生日期C.实验人员姓名D.消毒处理状态（已/未灭菌）13.进行动物实验时，感染性动物尸体的处理应（）。A.直接冷冻保存B.高压蒸汽灭菌后按医疗废物处理C.深埋于实验室附近D.焚烧前无需消毒14.实验室生物安全手册中，“双门互锁”主要用于（）。A.BSL-1实验室的普通走廊B.BSL-3实验室的核心工作区与缓冲间C.试剂储存室D.办公室与实验室的通道15.关于实验室准入制度，错误的是（）。A.新员工需通过生物安全培训并考核合格后方可进入B.外部参观人员需经实验室负责人批准并全程陪同C.实习学生可独立操作高风险实验D.怀孕或免疫功能低下人员需评估风险后决定是否准入二、多项选择题（每题3分，共15分，多选、错选不得分，少选得1分）1.BSL-3实验室的核心要求包括（）。A.独立的空气净化系统，气流从清洁区流向污染区B.实验人员需穿戴正压防护服C.配备双扉高压灭菌器（传递窗）D.每日监测并记录压差、温度、湿度2.生物安全风险评估的主要内容包括（）。A.病原体的传播途径、致病性、耐药性B.实验操作的复杂性（如离心、匀浆）C.实验室现有防护措施的有效性D.实验人员的健康状况（如免疫接种史）3.发生锐器伤（如被接种环刺伤）后，正确的处理步骤是（）。A.立即在流动水下挤压伤口，由近心端向远心端挤出血液B.用0.5%碘伏或75%酒精消毒伤口C.立即包扎伤口并继续实验D.24小时内报告实验室负责人并填写暴露记录4.实验室应急预案应包含（）。A.生物安全柜故障导致气溶胶暴露的处理流程B.火灾或断电时的人员疏散与样本保护措施C.实验动物逃逸的捕捉与消毒方法D.外来人员突发疾病的急救措施5.关于实验室消毒灭菌，正确的做法是（）。A.台面消毒使用有效氯500mg/L的含氯消毒液B.塑料离心管可采用环氧乙烷气体灭菌C.玻璃器皿可使用干热灭菌（160℃，2小时）D.细胞培养液需先高压灭菌再废弃三、判断题（每题1分，共10分，正确打“√”，错误打“×”）1.BSL-2实验室必须设置独立的缓冲间。（）2.实验结束后，生物安全柜的紫外线灯需照射30分钟以上方可关闭。（）3.感染性废弃物的专用包装袋应采用黄色、带生物危害标识的防渗漏材料。（）4.进行PCR扩增时，由于样本已灭活，可在普通实验室操作。（）5.实验室冰箱内可同时存放样本、试剂和个人食品。（）6.高压蒸汽灭菌时，物品应松散放置，确保蒸汽穿透。（）7.接触过感染性物质的手套，应直接丢入普通垃圾桶。（）8.实验室生物安全委员会应至少每年对实验室安全状况进行一次全面评估。（）9.运输高致病性病原微生物时，只需填写运输申请表，无需其他证明文件。（）10.实验人员出现发热、咳嗽等症状时，应立即停止实验并报告。（）四、简答题（每题6分，共30分）1.简述生物安全实验室分级的主要依据（BSL-1至BSL-4）。2.列举BSL-2实验室的5项基本要求（设施、操作或管理层面）。3.锐器伤的正确处理流程包括哪些关键步骤？4.实验室生物安全风险评估应重点分析哪些内容？5.高压蒸汽灭菌效果的监测方法有哪些？各自的特点是什么？五、案例分析题（15分）某高校分子生物学实验室中，实验员张某在使用移液器转移大肠杆菌（具有氨苄青霉素抗性）菌液时，移液器头意外刺破手套并划伤手指。现场未立即处理，3小时后张某感觉伤口轻微疼痛，遂报告实验室负责人。问题：（1）张某的操作存在哪些错误？（5分）（2）正确的应急处理流程应包括哪些步骤？（5分）（3）为避免类似事件再次发生，实验室应采取哪些改进措施？（5分）参考答案一、单项选择题1.C2.C3.B4.A5.B6.B7.D8.B9.A10.A11.A12.C13.B14.B15.C二、多项选择题1.ACD2.ABCD3.ABD4.ABC5.ABC三、判断题1.×（BSL-2可不设独立缓冲间，但BSL-3及以上必须设置）2.√3.√4.×（PCR样本需确认灭活效果，即使灭活也需在符合要求的实验室操作）5.×（禁止存放个人食品）6.√7.×（需投入感染性废弃物专用袋）8.√9.×（需提供准运证明等文件）10.√四、简答题1.分级依据包括：①病原微生物的危害程度（感染后对个体或群体的危害）；②实验操作的风险（如是否产生气溶胶、操作量大小）；③实验室的防护措施（设施、设备、管理要求）。BSL-1针对无或极低危害微生物，BSL-2针对中等危害，BSL-3针对高危害（但不通过空气传播），BSL-4针对极高危害（通过空气传播且无有效治疗）。2.BSL-2实验室基本要求：①入口处设生物危害标识和准入制度；②配备Ⅱ级生物安全柜；③操作区与办公区分离；④有可靠的消毒设施（如高压灭菌器、台面消毒液）；⑤实验人员需接受培训并穿戴合适PPE（实验服、手套、护目镜）。3.锐器伤处理流程：①立即停止操作，在流动水下由近心端向远心端轻轻挤压伤口，排出部分血液；②用肥皂水或生理盐水冲洗伤口10分钟；③用0.5%碘伏或75%酒精消毒伤口，覆盖无菌敷料；④2小时内报告实验室负责人并填写暴露记录；⑤评估暴露风险（如病原体类型、伤口深度），必要时进行暴露后预防（如接种疫苗、服用药物）；⑥跟踪观察至少3个月（如监测感染指标）。4.风险评估重点内容：①病原体特性（致病性、传播途径、耐药性、是否需要特殊防护）；②实验操作（如离心、匀浆、接种等是否易产生气溶胶或飞溅）；③人员能力（培训记录、操作熟练度、健康状况）；④设施设备（生物安全柜性能、高压灭菌器有效性、通风系统稳定性）；⑤应急措施（是否有暴露处理预案、急救药品是否齐全）。5.监测方法及特点：①物理监测：通过灭菌器自带的温度、压力、时间记录仪，实时监控参数是否达标（快速但无法验证微生物灭活效果）；②化学监测：使用化学指示卡/胶带（如121℃压力蒸汽指示卡），通过颜色变化判断是否达到灭菌条件（简便但不能完全代表生物灭活）；③生物监测：使用嗜热脂肪芽孢杆菌（抗力强于多数病原微生物）作为指示菌，灭菌后培养48-72小时，若无菌生长则灭菌合格（最可靠，但耗时较长）。五、案例分析题（1）错误：①未正确佩戴手套（或手套选择不当，未使用防刺手套）；②操作中未注意移液器头的安全性（如未使用无气溶胶移液器）；③暴露后未立即处理伤口（延迟3小时）；④未在生物安全柜内进行菌液转移（若大肠杆菌为BSL-2级，需在安全柜内操作）。（2）正确流程：①立即停止操作，脱除污染手套，在流动水下挤压伤口（近心端向远心端），排出部分血液；②用肥皂水冲洗伤口10分钟，再用0.5%碘伏消毒，覆盖无菌敷料；③2小时内向实验室负责人报告，填写《实验室生物安全暴露记录表》；④评估暴露风险（大肠杆菌为条件致病菌，氨苄青霉素抗性不增加致病性），但仍需进行医学观察（如监测体温、伤口感染情况）；⑤对操作台面及移液器进行消毒（用100