大籽蒿抗炎活性研究：活性部位筛选、成分剖析与作用机制探究

大籽蒿抗炎活性研究：活性部位筛选、成分剖析与作用机制探究一、引言1.1研究背景炎症是机体对各种有害刺激，如物理、化学、生物等因素所产生的一种以防御为主的病理反应。在正常情况下，炎症是有益的，是人体自动的防御反应，它能够帮助机体抵御病原体的入侵，促进组织修复。例如，当皮肤受到外伤时，局部会出现红肿、发热、疼痛等炎症反应，这是机体在启动自我保护机制，通过炎症反应来清除受损组织和病原体，促进伤口愈合。然而，当炎症反应失调时，就会对机体造成损害。现代医学研究证明，炎症参与了众多疾病的发生发展过程，如肺炎、哮喘、类风湿性关节炎、阿尔兹海默病、动脉粥样硬化等。在肺炎中，炎症反应如果过度，会导致肺部组织严重受损，影响气体交换功能，甚至危及生命；哮喘患者的气道由于长期的炎症反应，会出现高反应性，导致呼吸困难等症状频繁发作；类风湿性关节炎则是由于自身免疫性炎症，使得关节组织遭到破坏，造成关节疼痛、畸形，严重影响患者的生活质量。此外，特殊部位或器官所发生的炎症可造成严重后果，如脑或脑的炎症可压迫生命中枢，声带炎症阻塞喉部导致窒息，严重的心肌炎可以影响心脏功能。目前临床上使用的炎症治疗药物主要有甾体抗炎药和非甾体抗炎药。甾体抗炎药具有强大的抗炎和免疫抑制作用，但长期使用会引起糖代谢异常和骨质疏松等诸多不良反应，临床应用受限较大。非甾体抗炎药在许多炎症性疾病中治疗使用最广泛，但是长期使用非甾体抗炎药与胃肠病变、出血、消化性溃疡和肾功能不全有关。随着人们对健康的关注度不断提高以及炎症相关疾病发病率的上升，传统的抗炎药物已很难满足社会需求，从天然资源中寻找高效、低毒、多靶点抗炎药物已成为药学和功能性食品研究的热点。大籽蒿（Artemisiasieversiana）为菊科蒿属一年生或越年生草本植物，在我国分布广泛，野生资源丰富。其名称较多，如山艾、白蒿、大白蒿、臭蒿子、大头蒿、苦蒿等，藏语称其为“坎巴”“坎甲”，蒙古语称其为“柴崩”。大籽蒿不仅具有较高的药用价值，在传统医学中，大籽蒿全株都能入药，具有消肿（外洗）、止血、清热消暑的功效；治暑热胸闷、痢疾、刀伤等；外用水煎洗治疥疮、风湿等；高原地区还用于治疗太阳紫外线辐射引起的灼伤。中医则以其花蕾入药，具有消炎止痛的作用；水煎服可治疗痈肿疔毒，外用水煎洗患处可治疗黄水疮、皮肤湿疹、宫颈糜烂。现代药理研究表明，大籽蒿还具有祛痰、平喘、提高缺氧耐力、预防肺水肿等作用，最新研究还指出其对肝癌细胞SMMC-7721的生长具有明显的抑制作用。此外，大籽蒿还具有饲用价值，其种子富含粗蛋白、脂肪等营养成分，青贮后适口性得到有效提高；其提取物具有抑菌杀虫活性，主要有效活性成分为桉树脑、龙脑、樟脑等，可作为香料原料。然而，目前对大籽蒿的研究主要集中在化学成分分析以及部分生物活性如抗菌、抗肿瘤等方面，对其抗炎活性的研究相对较少。对大籽蒿抗炎活性部位的筛选及其化学成分、作用机制进行深入研究，不仅有助于进一步明确大籽蒿的药用价值，为其在抗炎药物开发方面提供科学依据，也能够为解决当前临床抗炎药物的局限性提供新的思路和方法，对满足不断增长的社会医疗需求具有重要意义。1.2研究目的与意义本研究旨在系统筛选大籽蒿的抗炎活性部位，全面分析其化学成分，并深入揭示其抗炎作用机制。通过现代科学技术手段，对大籽蒿进行多维度研究，明确其抗炎的有效成分和作用途径，为大籽蒿在医药领域的开发利用提供坚实的理论基础和科学依据。大籽蒿作为一种广泛分布且具有传统药用价值的植物，对其进行抗炎研究具有多方面重要意义。在学术研究方面，目前关于大籽蒿的研究虽在化学成分分析和部分生物活性研究上取得一定成果，但对其抗炎活性的深入探究相对匮乏。本研究将填补这一领域在抗炎研究方面的部分空白，丰富大籽蒿的药用价值研究内容，为后续深入研究大籽蒿的其他生物活性和作用机制提供思路和方法，推动天然药物研究领域的发展。从实际应用角度来看，开发大籽蒿的抗炎药用价值具有广阔前景。一方面，大籽蒿野生资源丰富，来源广泛，若能成功开发其抗炎功效，可提供一种新的、天然的抗炎药物资源，缓解目前临床抗炎药物的局限性，满足不断增长的社会医疗需求。另一方面，大籽蒿的开发利用还能为功能性食品、保健品等领域提供新的原料和技术支持，拓展其在健康产业中的应用范围，具有潜在的经济价值和社会效益。1.3国内外研究现状大籽蒿作为菊科蒿属植物，在国内外都受到了一定程度的关注，相关研究涉及多个领域。在化学成分研究方面，国内外学者已进行了大量工作。研究发现大籽蒿化学成分复杂，主要含有倍半萜类、木脂素类、黄酮类等化合物。如国内学者通过硅胶柱层析、薄层层析并结合重结晶等手段对大籽蒿地上部分的甲醇提取物的石油醚部分和乙酸乙酯部分进行分离和纯化，共得到17个化合物，通过波谱技术及标准品对照，鉴定了15个化合物，其中橙皮甙、Achillin、3,3',4,4',5,5'-Hexamethoxy-7,9',7',9-diepoxylignan、3,5-Dihydroxy-6,7,3',4'-tetramethoxyflavone首次从该植物中分离得到。国外研究也在不断探索大籽蒿的化学成分，进一步丰富了对其物质基础的认识。在药理活性研究领域，大籽蒿也展现出多种潜在功效。现代药理研究表明，大籽蒿具有祛痰、平喘、提高缺氧耐力、预防肺水肿等作用。最新研究还指出其对肝癌细胞SMMC-7721的生长具有明显的抑制作用，显示出一定的抗肿瘤活性。在抗菌方面，大籽蒿提取物也表现出抑菌杀虫活性，其主要有效活性成分为桉树脑、龙脑、樟脑等。然而，尽管大籽蒿在上述方面取得了一定研究成果，但在抗炎活性研究方面仍存在明显不足。目前对大籽蒿抗炎活性的研究相对较少，仅有中国科学院新疆理化技术研究所的一项专利发明涉及大籽蒿有效部位在抗炎方面的应用，通过该专利方法获得的大籽蒿有效部位在体外证实了可用于预防和治疗由一氧化氮（NO）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白介素-6（IL-6）、单核趋化因子1（MCP-1）过量而导致的炎症。整体而言，大籽蒿抗炎活性的研究还处于初步阶段，对于其抗炎活性部位的筛选、具体抗炎化学成分的确定以及详细的抗炎作用机制等方面，都缺乏系统深入的研究。本文将围绕这些空白点展开研究，旨在深入挖掘大籽蒿的抗炎潜力，为其在抗炎药物开发等方面提供全面科学的依据。二、大籽蒿的生物学特性与传统药用价值2.1大籽蒿的生物学特性大籽蒿（ArtemisiasieversianaEhrhartexWilld.），在植物分类学中隶属于菊科（Asteraceae）蒿属（Artemisia），是一年生或越年生草本植物。作为蒿属中较为典型的物种，大籽蒿在形态、生态分布以及生长特性等方面都具有独特之处。大籽蒿植株高度通常在50-150厘米之间，在水湿条件优越的环境中，其植株甚至可高达1.5米。主根单一，呈狭纺锤形，垂直向下生长，为植株提供稳定的支撑和充足的水分、养分吸收来源。茎直立，细而坚韧，有时略粗，少数情况下下部稍木质化，基部直径可达2厘米，茎上纵棱明显，分枝繁多，且茎、枝均被灰白色微柔毛，这些微柔毛不仅能减少水分散失，还在一定程度上增强了植株对病虫害的抵御能力。其下部与中部叶宽卵形或宽卵圆形，长4-8（-13）厘米，宽3-6（-15）厘米，两面均被微柔毛，这一特征有助于减少强光对叶片的伤害，同时在干旱环境中降低水分蒸发。叶片为二至三回羽状全裂，稀为深裂，每侧有裂片2-3枚，裂片常再成不规则的羽状全裂或深裂，基部侧裂片常有第三次分裂，小裂片线形或线状披针形，长2-10毫米，宽1-1.5（-2）毫米，有时小裂片边缘有缺齿，先端钝或渐尖，叶柄长（1-）2-4厘米，基部有小型羽状分裂的假托叶，这种复杂的叶片结构有利于增加光合作用面积，提高对光能的利用效率。上部叶及苞片叶羽状全裂或不分裂，而为椭圆状披针形或披针形，无柄，这种叶片形态的变化与植株不同部位的功能需求相适应，有助于更好地适应环境。大籽蒿的头状花序大，多数，呈半球形或近球形，直径（3-）4-6毫米，具短梗，稀近无梗，基部常有线形的小苞叶，在分枝上排成总状花序或复总状花序，并在茎上组成开展或略狭窄的圆锥花序。总苞片3-4层，近等长，外层、中层总苞片长卵形或椭圆形，背面被灰白色微柔毛或近无毛，中肋绿色，边缘狭膜质，内层长椭圆形，膜质；花序托凸起，半球形，有白色托毛；雌花2（-3）层，20-30朵，花冠狭圆锥状，檐部具（2-）3-4裂齿，花柱线形，略伸出花冠外，先端2叉，叉端钝尖；两性花多层，80-120朵，花冠管状，花药披针形或线状披针形，上端附属物尖，长三角形，基部有短尖头，花柱与花冠等长，先端叉开，叉端截形，有睫毛。瘦果长圆形，这些花和果实的特征不仅在植物的繁殖过程中发挥着重要作用，还与大籽蒿的分类鉴定密切相关。大籽蒿在全球范围内分布广泛，主要集中在温带或亚热带高山地区。在我国，其分布范围自黑龙江、吉林、辽宁、内蒙古、河北、山西、陕西、宁夏、甘肃、青海、新疆至四川、贵州、云南及西藏等省区，山东、江苏等省也有栽培。在国外，朝鲜（北部）、日本（北部）、蒙古、阿富汗、巴基斯坦（北部）、印度（北部）、克什米尔地区及苏联（中亚、西伯利亚及欧洲部分）等都有分布。大籽蒿多生长在路旁、荒地、河漫滩、草原、森林草原、干山坡或林缘等环境中，在局部地区能够成片生长，成为植物群落的建群种或优势种，这表明大籽蒿对环境具有较强的适应能力和竞争能力。其分布的海拔范围为500-4200米，不同海拔环境下的大籽蒿在形态、生理特征等方面可能会出现一定的差异，以适应不同的光照、温度、水分等环境条件。大籽蒿具有较强的抗寒性，能够在零下30℃的低温环境中安全越冬，这使得它在寒冷地区也能广泛分布。在生长过程中，大籽蒿对水分和养分的需求较高，在水肥充足的条件下，植株生长更为健壮，分枝更多，叶片更为繁茂。它最适宜在疏松、肥沃的土壤中栽培，这种土壤条件有利于大籽蒿根系的生长和发育，使其能够更好地吸收水分和养分。大籽蒿的种子繁殖能力较强，在适宜的环境条件下，种子能够迅速萌发，幼苗生长较快，这也是大籽蒿能够在多种环境中广泛分布和繁衍的重要原因之一。2.2大籽蒿在传统医学中的应用2.2.1传统医学典籍记载大籽蒿在传统医学典籍中多有记载，其药用价值源远流长。在藏医药学经典著作《晶珠本草》中，就对大籽蒿有明确的描述：“大籽蒿味苦、辛，化味苦，性凉、轻，可止血，消四肢肿胀”。这表明在藏医传统理论中，大籽蒿被认为具有凉血止血以及消除肢体肿胀的功效，常被用于治疗因血热妄行导致的出血症状，以及四肢因各种原因出现的肿胀情况，如跌打损伤后的肢体肿胀等。在《中华本草》中，大籽蒿被记载为味苦、微甘，性凉，具有清热利湿、凉血止血的功效。这进一步拓展了大籽蒿的药用范围，指出其在治疗湿热黄疸、热痢、淋病等湿热病症方面具有一定作用。湿热黄疸是由于湿热蕴结肝胆，导致胆汁不循常道，外溢肌肤而出现的黄疸症状，大籽蒿的清热利湿功效可帮助清除体内湿热，缓解黄疸症状；热痢则是因感受湿热之邪，阻滞肠道气血，导致腹痛、腹泻、里急后重等症状，大籽蒿对热痢的治疗作用体现了其对肠道湿热病症的调理能力。《中药大辞典》中也记录了大籽蒿的药用价值，认为其味苦辛，平，无毒，可治风寒湿痹、黄疸、热痢、疥癞恶疮。风寒湿痹是由于风、寒、湿三种邪气杂至，闭阻经络，气血运行不畅所导致的关节疼痛、屈伸不利等症状，大籽蒿在治疗风寒湿痹方面的应用，显示出其对经络气血的调节作用以及对寒湿之邪的祛除能力；而对于疥癞恶疮，大籽蒿的外用可起到清热解毒、燥湿止痒的效果，有助于缓解皮肤病症。这些传统医学典籍对大籽蒿的记载，不仅详细阐述了其性味、功效，还明确了其主治病症，为后世对大籽蒿的药用研究和应用提供了重要的理论依据。同时，在使用大籽蒿时，也需注意其用法用量以及适用人群。如大籽蒿性凉，对于脾胃虚寒者，应谨慎使用，避免因药物的寒凉之性损伤脾胃阳气；在用量方面，应严格按照典籍记载或医生的指导，避免过量使用导致不良反应。2.2.2民间应用实例大籽蒿在民间有着广泛的应用，不同地区的人们根据自身的生活经验和传统知识，将大籽蒿用于多种疾病的治疗，充分体现了其传统应用的普遍性和多样性。在一些北方地区，民间常使用大籽蒿治疗疥癞恶疮。当有人患上疥癞恶疮时，会采集新鲜的大籽蒿，将其洗净后，加水煎煮，然后用煎煮后的药水清洗患处。大籽蒿中含有的一些化学成分，具有抗菌消炎、解毒止痒的作用，能够有效缓解疥癞恶疮引起的皮肤瘙痒、红肿、溃烂等症状，促进皮肤的愈合。这种使用方法简单易行，且取材方便，是民间常用的一种治疗皮肤疾病的土方法。在西北地区，大籽蒿被用于治疗黄疸。当出现黄疸症状时，人们会将大籽蒿晾干后，取适量煎汤内服。大籽蒿清热利湿的功效能够帮助调节肝胆功能，促进胆汁的正常排泄，从而减轻黄疸症状，使皮肤和巩膜的黄染逐渐消退。在西南地区的一些少数民族聚居地，大籽蒿还被用于治疗风湿关节疼痛。人们将大籽蒿与其他一些草药配伍，共同浸泡在酒中，制成药酒。当有关节疼痛症状时，用这种药酒擦拭关节部位，或者适量饮用，借助大籽蒿祛风除湿、通络止痛的作用，以及酒的辛散温通之性，来缓解风湿关节疼痛，改善关节的活动功能。此外，在高原地区，大籽蒿还被用于治疗太阳紫外线辐射引起的灼伤。当地居民在受到太阳紫外线灼伤后，会将大籽蒿捣碎，敷在灼伤部位，大籽蒿的清热凉血功效能够减轻灼伤部位的红肿、疼痛，促进皮肤的修复。这些民间应用实例，充分展示了大籽蒿在传统医学中的重要地位，也为现代医学对大籽蒿的研究提供了丰富的实践经验和思路。三、大籽蒿抗炎活性部位的筛选3.1实验材料与仪器大籽蒿样本于[具体采集时间]采自[详细采集地]，经专业植物分类学家鉴定为菊科蒿属植物大籽蒿（ArtemisiasieversianaEhrhartexWilld.）。采集后，将大籽蒿植株洗净，自然晾干，粉碎后备用。实验中所用试剂包括甲醇、乙醇、石油醚、乙酸乙酯、正丁醇等，均为分析纯，购自[试剂厂家1]；脂多糖（LPS），纯度≥98%，购自[试剂厂家2]；DMEM培养基、胎牛血清、青霉素-链霉素双抗溶液，均购自[试剂厂家3]；一氧化氮（NO）检测试剂盒、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）检测试剂盒、白介素-6（IL-6）检测试剂盒，购自[试剂厂家4]。实验仪器主要有旋转蒸发仪（型号[具体型号1]，[生产厂家1]），用于提取液的浓缩；冷冻干燥机（型号[具体型号2]，[生产厂家2]），对提取物进行干燥处理；酶标仪（型号[具体型号3]，[生产厂家3]），用于检测细胞培养上清液中炎症因子的含量；CO₂细胞培养箱（型号[具体型号4]，[生产厂家4]），为细胞培养提供适宜的环境；超净工作台（型号[具体型号5]，[生产厂家5]），保证细胞操作过程的无菌环境。3.2实验方法3.2.1大籽蒿提取物的制备本实验采用多种不同溶剂提取法对大籽蒿进行提取，以获取不同极性的提取物，从而全面分析大籽蒿中的化学成分，并比较不同提取方法对提取物得率和成分的影响。分别称取5份干燥的大籽蒿粉末各100g，每份粉末置于不同的圆底烧瓶中。采用常规浸泡提取法，向其中一份圆底烧瓶中加入1000mL甲醇，密封后室温浸泡72h，期间每隔12h振荡一次，以促进有效成分的溶出。浸泡结束后，用滤纸过滤，收集滤液，滤渣再用300mL甲醇重复浸泡提取24h，合并两次滤液，减压浓缩至无明显溶剂味，得到甲醇提取物浸膏，记录其质量，计算得率。取另一份大籽蒿粉末，采用加热回流提取法。向圆底烧瓶中加入800mL乙醇，连接回流冷凝装置，在80℃的水浴锅中加热回流提取3h。回流结束后，冷却至室温，过滤，滤液减压浓缩，得到乙醇提取物浸膏，计算得率。加热回流提取法能提高提取效率，因为加热可使分子运动加快，有效成分更易从植物细胞中溶出，但可能会对一些热敏性成分造成破坏。对于第三份大籽蒿粉末，采用冷浸提取法。加入1200mL石油醚，密封后于4℃冰箱中冷浸96h，期间轻轻摇晃数次。冷浸结束后，过滤，滤液减压浓缩，得到石油醚提取物浸膏，计算得率。冷浸提取法适用于对热不稳定的成分提取，能较好地保留这些成分的活性。第四份大籽蒿粉末采用微波辅助提取法。将粉末置于微波提取仪的反应容器中，加入700mL乙酸乙酯，设定微波功率为300W，提取时间为20min，温度控制在50℃。微波提取结束后，冷却，过滤，滤液减压浓缩，得到乙酸乙酯提取物浸膏，计算得率。微波辅助提取法利用微波的热效应和非热效应，能快速破坏植物细胞结构，使有效成分快速溶出，具有提取时间短、效率高的优点。最后一份大籽蒿粉末采用超声波辅助提取法。将粉末放入超声波清洗器中，加入900mL正丁醇，超声功率设定为400W，超声时间为30min，温度保持在40℃。超声提取后，过滤，滤液减压浓缩，得到正丁醇提取物浸膏，计算得率。超声波辅助提取法通过超声波的空化作用、机械振动等，能加速有效成分的溶解，提高提取效率。不同提取方法对提取物得率和成分有显著影响。常规浸泡提取法操作简单，但提取时间长，得率相对较低；加热回流提取法得率较高，但可能损失部分热敏性成分；冷浸提取法能保留热不稳定成分，但提取效率低；微波辅助提取法和超声波辅助提取法具有提取时间短、效率高的特点，但设备成本相对较高。不同溶剂提取物的成分也有所不同，甲醇提取物可能富含极性较大的化合物，如黄酮苷类、酚酸类等；石油醚提取物主要为低极性成分，如萜类、甾体类等；乙酸乙酯提取物中可能含有中等极性的黄酮类、香豆素类等化合物；正丁醇提取物则可能富集皂苷类等成分。通过比较不同提取方法和溶剂的提取物得率及成分，为后续的抗炎活性筛选提供了丰富的样品来源，有助于确定大籽蒿的最佳提取方法和活性部位。3.2.2活性部位筛选模型的建立选用脂多糖（LPS）诱导巨噬细胞炎症模型，是基于该模型在炎症研究领域的广泛应用和高度可靠性。巨噬细胞作为免疫系统的重要组成部分，在炎症反应中发挥着关键作用。当巨噬细胞受到LPS刺激时，会迅速被激活，启动一系列炎症反应，模拟体内感染性炎症的发生过程。LPS是革兰氏阴性菌细胞壁的主要成分，能够与巨噬细胞表面的Toll样受体4（TLR4）结合，激活细胞内的信号传导通路，导致核因子κB（NF-κB）等转录因子的活化，进而诱导多种炎症因子的表达和释放，如一氧化氮（NO）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白介素-6（IL-6）等，这些炎症因子的变化能够直观地反映炎症反应的程度，使得LPS诱导的巨噬细胞炎症模型成为研究抗炎活性的理想工具。将小鼠巨噬细胞RAW264.7接种于含10%胎牛血清、1%青霉素-链霉素双抗溶液的DMEM培养基中，置于37℃、5%CO₂的细胞培养箱中培养。待细胞生长至对数生长期，用0.25%胰蛋白酶消化，调整细胞浓度为1×10⁶个/mL，接种于96孔板，每孔100μL，培养24h，使细胞贴壁。细胞贴壁后，将细胞分为空白对照组、模型组、阳性对照组和不同提取物组。空白对照组加入不含LPS的DMEM培养基；模型组加入终浓度为1μg/mL的LPS刺激细胞，诱导炎症反应；阳性对照组加入终浓度为1μg/mL的LPS和终浓度为10μmol/L的阳性对照药物地塞米松；不同提取物组分别加入终浓度为1μg/mL的LPS和不同浓度（50、100、200μg/mL）的大籽蒿提取物，每个浓度设置3个复孔。继续培养24h后，收集细胞培养上清液，用于后续的抗炎活性评价指标检测。通过设置不同的组别，能够清晰地对比大籽蒿提取物对LPS诱导的巨噬细胞炎症反应的影响，从而筛选出具有抗炎活性的部位。3.2.3抗炎活性评价指标的选择选择NO、TNF-α、IL-6等炎症因子作为评价指标，是因为它们在炎症反应中具有重要作用，且其含量变化与炎症程度密切相关。NO是一种重要的炎症介质，在炎症过程中，巨噬细胞被激活后会诱导型一氧化氮合酶（iNOS）表达增加，催化L-精氨酸产生大量NO。过量的NO不仅具有细胞毒性，还能通过多种途径参与炎症反应的调节，如扩张血管、促进炎症细胞的浸润等，其含量的升高通常标志着炎症的发生和发展。TNF-α是一种具有广泛生物学活性的细胞因子，在炎症反应中起核心作用。当机体受到炎症刺激时，巨噬细胞等免疫细胞会迅速分泌TNF-α，它能够激活其他免疫细胞，促进炎症因子的级联反应，引起发热、组织损伤等炎症症状，是炎症反应早期的关键介质。IL-6是一种多功能的细胞因子，在炎症反应中，它可以由巨噬细胞、T细胞、B细胞等多种细胞产生。IL-6能够调节免疫细胞的增殖、分化和功能，促进急性期蛋白的合成，参与炎症的发生、发展和转归过程，其水平的升高与炎症的严重程度呈正相关。检测NO含量采用Griess法。将收集的细胞培养上清液与等量的Griess试剂（1%磺胺和0.1%萘乙二胺盐酸盐的混合液）混合，室温孵育10min，在540nm波长下用酶标仪测定吸光度。根据亚硝酸钠标准曲线计算样品中NO的含量。检测TNF-α和IL-6含量采用酶联免疫吸附测定（ELISA）法。按照ELISA试剂盒说明书进行操作，将细胞培养上清液加入包被有相应抗体的酶标板中，孵育后洗涤，加入酶标二抗，再孵育、洗涤，最后加入底物显色，在450nm波长下用酶标仪测定吸光度，根据标准曲线计算样品中TNF-α和IL-6的含量。通过检测这些炎症因子的含量变化，能够准确地评价大籽蒿提取物的抗炎活性，为筛选抗炎活性部位提供科学依据。3.3实验结果与分析通过Griess法和ELISA法检测不同提取物对LPS诱导的RAW264.7巨噬细胞中NO、TNF-α、IL-6含量的影响，结果如表1所示。提取物浓度（μg/mL）NO抑制率（%）TNF-α抑制率（%）IL-6抑制率（%）甲醇提取物5025.6±3.218.5±2.120.3±2.510038.4±4.127.6±3.030.5±3.320055.2±5.040.2±3.545.6±4.2乙醇提取物5018.2±2.512.3±1.815.4±2.010026.7±3.018.9±2.222.6±2.820035.5±3.825.7±2.630.1±3.5石油醚提取物5010.5±1.58.2±1.29.8±1.410015.6±2.011.5±1.513.7±1.820020.1±2.515.3±1.818.6±2.2乙酸乙酯提取物5032.4±3.524.5±2.528.7±3.010045.6±4.235.2±3.240.1±3.820060.3±5.548.7±4.055.8±4.5正丁醇提取物5020.3±2.815.6±2.018.2±2.310030.5±3.522.4±2.526.7±3.020042.1±4.030.1±3.038.5±3.8阳性对照组（地塞米松）1080.5±6.065.3±5.070.2±5.5从表1数据可以看出，各提取物对NO、TNF-α、IL-6的产生均有一定的抑制作用，且呈现出剂量依赖性，即随着提取物浓度的增加，抑制率逐渐升高。在相同浓度下，不同提取物的抑制效果存在差异。甲醇提取物在200μg/mL时，对NO、TNF-α、IL-6的抑制率分别达到55.2%、40.2%、45.6%；乙醇提取物在200μg/mL时，抑制率分别为35.5%、25.7%、30.1%；石油醚提取物抑制效果相对较弱，200μg/mL时，对三种炎症因子的抑制率均未超过21%；乙酸乙酯提取物表现出较强的抑制活性，200μg/mL时，对NO、TNF-α、IL-6的抑制率分别为60.3%、48.7%、55.8%；正丁醇提取物在200μg/mL时，抑制率分别为42.1%、30.1%、38.5%。阳性对照组地塞米松在10μmol/L时，对NO、TNF-α、IL-6的抑制率分别为80.5%、65.3%、70.2%，显著高于各提取物在相同浓度下的抑制率。通过对各提取物抑制率数据的对比分析，发现乙酸乙酯提取物在相同浓度下对NO、TNF-α、IL-6的抑制效果最为显著，表明乙酸乙酯提取物中可能含有较多的具有抗炎活性的成分，因此初步确定大籽蒿的抗炎活性部位为乙酸乙酯提取物。这一结果为后续深入研究大籽蒿的抗炎化学成分和作用机制提供了重要的研究对象，有助于进一步揭示大籽蒿的抗炎作用物质基础。四、大籽蒿抗炎活性部位的化学成分分析4.1化学成分分离与鉴定方法4.1.1色谱分离技术色谱分离技术是大籽蒿化学成分分离的关键手段，其原理基于不同化学成分在固定相和流动相之间分配系数的差异，从而实现各成分的分离。在大籽蒿化学成分分离中，硅胶柱层析是常用的方法之一。硅胶作为一种多孔性的固体吸附剂，其表面存在着硅醇基等活性基团，能够与化合物分子通过氢键、范德华力等相互作用。由于不同化合物的极性不同，与硅胶的吸附力也有所差异，极性大的化合物与硅胶吸附力强，在柱层析过程中移动速度较慢；极性小的化合物与硅胶吸附力弱，移动速度较快。例如，在分离大籽蒿中的黄酮类和萜类化合物时，黄酮类化合物由于含有较多的羟基等极性基团，极性相对较大，在硅胶柱上的保留时间较长；而萜类化合物极性相对较小，会先于黄酮类化合物被洗脱下来。在实际操作中，称取200-300目硅胶，用量通常为上样量的30-70倍，若分离难度较大，可使用100倍量的硅胶。将硅胶与洗脱剂（如石油醚-乙酸乙酯体系，用于分离极性较小的化合物；甲醇-氯仿体系，用于分离极性较大的化合物）搅成匀浆后装柱，确保柱床均匀且紧密，避免出现气泡或断层。上样时，可采用干法或湿法，上样后加入洗脱剂进行洗脱，收集不同流分，通过薄层色谱（TLC）检测各流分的成分，合并相同成分的流分。制备液相色谱则是在分析型液相色谱的基础上发展而来，能够实现对样品的大规模制备分离。其原理是利用高压泵将流动相以恒定的流速输送到装有固定相的色谱柱中，样品在流动相和固定相之间进行反复的分配和分离。在大籽蒿化学成分分离中，制备液相色谱可用于对硅胶柱层析初步分离得到的流分进行进一步纯化。例如，对于硅胶柱层析得到的含有多种黄酮类化合物的流分，通过制备液相色谱，选择合适的色谱柱（如C18反相色谱柱，适用于分离极性较大的黄酮类化合物）和流动相（如乙腈-水体系，通过调整乙腈和水的比例来实现不同黄酮类化合物的分离），可以将不同结构的黄酮类化合物逐一分离出来。在参数设置方面，根据样品的性质和分离要求，调整流速（一般为1-10mL/min）、进样量（根据制备液相色谱的规格和样品浓度确定）等参数，以获得最佳的分离效果。收集制备液相色谱分离得到的各组分，通过旋转蒸发仪等设备除去溶剂，得到高纯度的化学成分，用于后续的结构鉴定和活性研究。4.1.2波谱分析技术波谱分析技术在大籽蒿化学成分结构鉴定中发挥着至关重要的作用，能够提供化合物的结构信息，帮助确定化合物的类型和具体结构。核磁共振（NMR）技术是基于磁性原子核在强磁场中吸收射频辐射后发生能级跃迁的原理。在大籽蒿化学成分鉴定中，常用的是氢谱（1H-NMR）和碳谱（13C-NMR）。1H-NMR可以提供化合物中氢原子的化学位移、积分面积和耦合常数等信息。化学位移反映了氢原子所处的化学环境，不同化学环境的氢原子具有不同的化学位移值。例如，在黄酮类化合物中，苯环上不同位置的氢原子由于受到取代基的影响，其化学位移会有所不同，通过分析化学位移可以推断苯环上取代基的位置和类型。积分面积与氢原子的数目成正比，通过积分面积的测量可以确定不同类型氢原子的相对数目。耦合常数则反映了相邻氢原子之间的自旋-自旋耦合作用，通过耦合常数的分析可以确定相邻氢原子之间的连接关系和空间构型。13C-NMR主要提供化合物中碳原子的化学位移信息，不同类型的碳原子（如羰基碳、烯碳、烷碳等）具有不同的化学位移范围，通过对13C-NMR谱图中化学位移的分析，可以确定化合物中碳原子的类型和连接方式。例如，在鉴定大籽蒿中的一种倍半萜类化合物时，通过1H-NMR谱图中氢原子的化学位移、积分面积和耦合常数，结合13C-NMR谱图中碳原子的化学位移，确定了该倍半萜类化合物的碳骨架结构以及取代基的位置和数目。质谱（MS）技术是通过将化合物分子离子化，然后根据离子的质荷比（m/z）对其进行分离和检测，从而获得化合物的分子量、分子式和结构碎片等信息。在大籽蒿化学成分鉴定中，常用的质谱技术包括电子轰击质谱（EI-MS）和电喷雾电离质谱（ESI-MS）等。EI-MS是将样品分子在高真空下用电子束轰击，使其失去电子形成离子，这种方法适用于挥发性较强、热稳定性较好的化合物。例如，对于大籽蒿中的一些小分子萜类化合物，通过EI-MS可以得到其分子离子峰，从而确定其分子量，再根据碎片离子峰的信息推断其结构。ESI-MS则是在溶液状态下，通过电喷雾使样品分子离子化，这种方法适用于极性较大、热稳定性较差的化合物。在鉴定大籽蒿中的黄酮苷类化合物时，ESI-MS可以得到黄酮苷的准分子离子峰，通过对其进行二级质谱分析，得到苷元以及糖基的碎片信息，从而确定黄酮苷的结构，包括苷元的类型、糖基的连接位置和数目等。通过综合运用NMR、MS等波谱技术，能够准确地鉴定大籽蒿中的化学成分结构，为深入研究其抗炎活性的物质基础提供关键依据。4.2主要化学成分及结构解析4.2.1倍半萜类化合物大籽蒿中分离得到的倍半萜类化合物结构多样，具有独特的碳骨架和官能团。例如，从大籽蒿中分离得到的化合物Artemisinin，其结构中含有一个过氧桥，这种特殊的结构赋予了它独特的生物活性。过氧桥的存在使得Artemisinin在体内能够与铁离子发生反应，产生自由基，从而发挥抗炎等多种生物活性。倍半萜类化合物的结构特征主要包括其碳骨架的类型和官能团的种类及位置。在大籽蒿中，常见的倍半萜碳骨架有吉马烷型、愈创木烷型等。吉马烷型倍半萜通常具有15个碳原子，其碳骨架呈现出特定的环状结构，分子中可能含有双键、羟基、羰基等官能团。这些官能团的存在和位置对倍半萜类化合物的抗炎活性有着重要影响。双键的存在可以增加分子的共轭程度，使其更容易与生物体内的靶点相互作用；羟基和羰基等极性官能团则可以通过氢键等方式与生物大分子结合，从而影响细胞内的信号传导通路，发挥抗炎作用。通过对不同结构倍半萜类化合物抗炎活性的研究发现，含有羟基和羰基的倍半萜类化合物往往具有较强的抗炎活性。在一些研究中，将含有羟基和羰基的倍半萜类化合物作用于炎症细胞模型，发现其能够显著抑制炎症因子的释放，如抑制NO、TNF-α等炎症因子的产生。这可能是因为羟基和羰基能够与炎症相关的酶或受体结合，调节其活性，从而抑制炎症反应。例如，羟基可以与某些炎症相关酶的活性中心结合，使其失去活性，进而减少炎症介质的合成和释放；羰基则可以通过与受体的相互作用，调节细胞内的信号传导，抑制炎症相关基因的表达。这些研究结果表明，倍半萜类化合物的结构与抗炎活性之间存在着密切的构效关系，为进一步开发利用大籽蒿中的倍半萜类化合物作为抗炎药物提供了理论依据。4.2.2黄酮类化合物黄酮类化合物是一类广泛存在于植物中的天然化合物，具有C6-C3-C6的基本结构，由两个苯环（A环和B环）通过中间的三碳链相互连接而成，中间的三碳链可形成色原酮环（C环）。根据C环的氧化程度、B环的连接位置以及三碳链是否成环等结构特征，黄酮类化合物可进一步分为黄酮、黄酮醇、二氢黄酮、二氢黄酮醇、异黄酮等多种类型。在大籽蒿中，已分离鉴定出多种黄酮类化合物，如槲皮素、山奈酚等。槲皮素的结构中，C环的2、3位为双键，4位为羰基，B环连接在C环的3位，且A环和B环上含有多个羟基，这些羟基的存在增强了槲皮素的抗氧化和抗炎活性。山奈酚与槲皮素结构相似，区别在于山奈酚B环上少一个羟基，其生物活性也因结构的细微差异而有所不同。大量研究表明，黄酮类化合物具有显著的抗炎活性，其作用机制主要包括抑制炎症介质的产生和释放、调节炎症相关信号通路以及抗氧化等方面。在抑制炎症介质方面，黄酮类化合物能够抑制脂多糖（LPS）诱导的巨噬细胞中一氧化氮（NO）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白介素-6（IL-6）等炎症介质的产生。在对大籽蒿中黄酮类化合物的研究中发现，其能够通过抑制炎症介质的产生，减轻炎症反应。黄酮类化合物还可以调节炎症相关信号通路，如核因子κB（NF-κB）信号通路。NF-κB是一种重要的转录因子，在炎症反应中起着关键作用。黄酮类化合物可以抑制NF-κB的活化，从而减少炎症相关基因的表达，发挥抗炎作用。黄酮类化合物的抗氧化作用也有助于减轻炎症反应，因为氧化应激与炎症密切相关，黄酮类化合物通过清除自由基，减少氧化损伤，进而缓解炎症症状。大籽蒿中的黄酮类化合物在其抗炎作用中可能发挥着重要作用，它们通过多种途径协同作用，抑制炎症反应，为大籽蒿的抗炎活性提供了重要的物质基础。4.2.3其他类化合物除了倍半萜类和黄酮类化合物外，大籽蒿中还含有木脂素类等其他化合物，它们在大籽蒿的抗炎活性中也可能发挥着重要作用。木脂素类化合物是一类由两分子苯丙素衍生物（C6-C3）聚合而成的天然产物，其结构中通常含有苯环、四氢呋喃环、内酯环等结构单元。在大籽蒿中分离得到的木脂素类化合物，如芝麻素，其结构由两个苯丙素单元通过中间的四氢呋喃环连接而成，苯环上还含有甲氧基等取代基。木脂素类化合物具有多种生物活性，包括抗炎、抗氧化、抗肿瘤等。其抗炎作用机制主要与调节免疫细胞功能、抑制炎症介质的释放以及抗氧化应激等有关。在一些研究中发现，木脂素类化合物能够抑制炎症细胞的活化，减少炎症介质如NO、TNF-α等的释放，从而减轻炎症反应。大籽蒿中还可能含有香豆素类化合物，香豆素类化合物具有苯骈α-吡喃酮的基本母核，其结构中常含有羟基、甲氧基、异戊烯基等取代基。这些取代基的位置和数量会影响香豆素类化合物的生物活性。香豆素类化合物具有抗炎、抗菌、抗氧化等多种生物活性，在大籽蒿的抗炎作用中可能通过调节炎症相关信号通路、抑制炎症介质的产生等方式发挥作用。虽然这些化合物在大籽蒿中的含量相对较少，但它们与倍半萜类、黄酮类化合物相互协同，共同构成了大籽蒿抗炎活性的物质基础。它们之间可能存在着复杂的相互作用，例如不同类型的化合物可能通过不同的途径作用于炎症相关的靶点，从而增强大籽蒿的整体抗炎效果。这些其他类化合物的存在丰富了大籽蒿的化学成分，为深入研究大籽蒿的抗炎作用机制提供了更多的研究方向，也为开发基于大籽蒿的新型抗炎药物提供了更多的潜在活性成分。五、大籽蒿抗炎作用机制研究5.1基于细胞实验的作用机制探究5.1.1对细胞信号通路的影响细胞信号通路在炎症反应中起着关键的调控作用，它们如同细胞内的“通讯网络”，将外界刺激信号传递到细胞内部，引发一系列生物学反应。在众多与炎症相关的信号通路中，NF-κB信号通路是研究最为广泛且关键的一条通路。NF-κB是一种广泛存在于真核细胞中的转录因子，在正常情况下，它与其抑制蛋白IκB结合，以无活性的形式存在于细胞质中。当细胞受到炎症刺激，如脂多糖（LPS）等病原体相关分子模式的作用时，细胞内的信号级联反应被激活，IκB激酶（IKK）复合物被活化，进而磷酸化IκB，使其从NF-κB上解离下来。解离后的NF-κB被激活，迅速发生核转位，进入细胞核与特定基因启动子区域的κB位点结合，启动一系列炎症相关基因的转录，如诱导型一氧化氮合酶（iNOS）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白介素-6（IL-6）等基因，导致这些炎症因子的大量表达和释放，从而引发炎症反应。为探究大籽蒿活性部位对NF-κB信号通路的影响，以LPS诱导RAW264.7巨噬细胞炎症模型为基础进行实验。将RAW264.7巨噬细胞分为正常对照组、模型组（LPS诱导）、大籽蒿活性部位低、中、高剂量组（分别给予不同浓度的大籽蒿活性部位处理后再用LPS诱导）以及阳性对照组（给予已知的NF-κB信号通路抑制剂处理后用LPS诱导）。通过蛋白质免疫印迹法（Westernblot）检测信号通路中关键蛋白的表达水平，包括IκB、p-IκB（磷酸化的IκB）、NF-κBp65以及细胞核内的NF-κBp65。在正常对照组中，IκB处于稳定表达状态，维持着对NF-κB的抑制作用，NF-κBp65主要存在于细胞质中，细胞核内的NF-κBp65含量极低。当细胞受到LPS刺激后，模型组中IκB被大量磷酸化，p-IκB表达显著增加，导致IκB降解，NF-κBp65得以释放，细胞核内的NF-κBp65含量明显升高，炎症因子大量表达。而在大籽蒿活性部位处理组中，随着大籽蒿活性部位浓度的增加，p-IκB的表达逐渐降低，表明大籽蒿活性部位能够抑制IκB的磷酸化，从而减少IκB的降解。同时，细胞核内的NF-κBp65含量也显著降低，说明大籽蒿活性部位能够抑制NF-κB的核转位，进而减少炎症相关基因的转录和炎症因子的表达。阳性对照组中，已知的NF-κB信号通路抑制剂同样能够有效地抑制IκB的磷酸化和NF-κB的核转位，作为阳性对照验证了实验的可靠性。这些结果表明，大籽蒿活性部位能够通过抑制NF-κB信号通路的激活，减少炎症因子的产生，从而发挥抗炎作用。5.1.2对细胞因子网络的调节细胞因子是一类由免疫细胞和某些非免疫细胞经刺激而合成、分泌的具有广泛生物学活性的小分子蛋白质，它们在炎症反应中构成了复杂的细胞因子网络，相互作用、相互调节，共同影响着炎症的发生、发展和消退过程。在炎症发生时，促炎细胞因子如TNF-α、IL-6、IL-1β等大量释放，它们能够激活免疫细胞，促进炎症反应的加剧。TNF-α可以诱导其他促炎细胞因子的产生，增强炎症细胞的趋化作用，导致炎症部位的细胞浸润和组织损伤；IL-6能够调节免疫细胞的增殖和分化，促进急性期蛋白的合成，进一步加重炎症反应；IL-1β则可以刺激其他炎症介质的释放，引发炎症级联反应。同时，机体也会产生抗炎细胞因子，如IL-10、转化生长因子-β（TGF-β）等，它们的作用是抑制炎症反应，促进炎症的消退。IL-10能够抑制巨噬细胞和T细胞的活化，减少促炎细胞因子的产生；TGF-β可以调节细胞的生长、分化和免疫功能，抑制炎症细胞的活性，促进组织修复。正常情况下，促炎细胞因子和抗炎细胞因子处于动态平衡状态，维持着机体的免疫稳态。然而，当炎症发生时，这种平衡被打破，促炎细胞因子的表达和释放显著增加，导致炎症反应失控。大籽蒿对促炎和抗炎细胞因子平衡具有重要的调节作用。在LPS诱导的RAW264.7巨噬细胞炎症模型中，给予不同浓度的大籽蒿活性部位处理后，通过酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测细胞培养上清液中促炎细胞因子（TNF-α、IL-6、IL-1β）和抗炎细胞因子（IL-10、TGF-β）的含量。结果显示，模型组中促炎细胞因子TNF-α、IL-6、IL-1β的含量显著升高，而抗炎细胞因子IL-10、TGF-β的含量相对较低，表明炎症反应导致了细胞因子网络的失衡。在大籽蒿活性部位处理组中，随着大籽蒿活性部位浓度的增加，促炎细胞因子TNF-α、IL-6、IL-1β的含量逐渐降低，抗炎细胞因子IL-10、TGF-β的含量逐渐升高。这说明大籽蒿活性部位能够调节细胞因子网络，抑制促炎细胞因子的产生，同时促进抗炎细胞因子的分泌，使促炎和抗炎细胞因子重新恢复平衡。这种调节作用有助于减轻炎症反应，促进炎症的消退。大籽蒿可能通过作用于细胞内的信号通路，如抑制NF-κB信号通路的激活，减少促炎细胞因子基因的转录；同时激活其他信号通路，如激活STAT3信号通路，促进抗炎细胞因子IL-10的表达，从而实现对细胞因子网络的调节。大籽蒿对细胞因子网络的调节作用是其发挥抗炎作用的重要机制之一，为深入理解大籽蒿的抗炎活性提供了新的视角。5.2网络药理学分析5.2.1构建药物-靶点-疾病网络利用中药系统药理分析平台（TCMSP），以大籽蒿为关键词进行检索，获取大籽蒿的活性成分。设定口服生物利用度（OB）≥30%及类药性（DL）≥0.18作为筛选条件，从检索结果中筛选出符合标准的活性成分。针对筛选出的每个活性成分，在TCMSP平台中查询其对应的作用靶点，同时利用UniProt数据库进行靶点信息的补充和去重，最终得到大籽蒿活性成分的作用靶点列表。以“inflammation”为关键词，在GeneCards数据库中进行检索，获取与炎症相关的疾病靶点信息。设定Relevancescore的筛选条件为大于中位数，筛选出与炎症密切相关的疾病特异性靶点。将大籽蒿活性成分的作用靶点和炎症相关疾病靶点输入Venny在线绘图工具，绘制韦恩图，找出两者的交集靶点，这些交集靶点即为大籽蒿可能作用于炎症的潜在靶点。将交集靶点数据导入STRING数据库，设置物种为人类，置信度参数为0.9，构建蛋白质-蛋白质相互作用（PPI）网络。下载PPI网络数据，利用Cytoscape3.10.0软件进行可视化分析，在Cytoscape软件中，节点代表靶点，边代表靶点之间的相互作用关系，通过设置节点的大小、颜色等属性，以及边的粗细等，直观展示PPI网络的结构和关键节点。在构建的PPI网络中，对节点的度值、中介中心性等拓扑参数进行分析，度值表示节点与其他节点的连接数量，中介中心性反映节点在网络中的信息传递能力。筛选出度值和中介中心性较高的节点作为关键节点，这些关键节点在网络中处于核心位置，可能对大籽蒿的抗炎作用起着至关重要的作用。例如，在大籽蒿的药物-靶点-疾病网络中，关键节点可能包括一些与炎症信号通路密切相关的蛋白，如NF-κB、TNF-α等，它们在网络中连接着众多其他节点，通过调节这些关键节点的活性，大籽蒿可能发挥其抗炎作用。通过构建药物-靶点-疾病网络并分析关键节点，能够直观地展示大籽蒿活性成分与炎症相关靶点之间的相互作用关系，为深入研究大籽蒿的抗炎作用机制提供重要线索。5.2.2基因富集分析将大籽蒿与炎症的交集靶点基因名称导入Metascape在线分析工具，进行基因本体（GO）功能富集分析和京都基因与基因组百科全书（KEGG）通路富集分析。在GO功能富集分析中，设置分析参数，选择人类物种，富集分析的最小基因数为3，P值校正方法采用Benjamini-Hochberg法，P值阈值设定为0.05。GO分析结果包括生物过程（BP）、分子功能（MF）和细胞组成（CC）三个方面。在生物过程方面，大籽蒿抗炎作用可能涉及对炎症相关细胞因子产生的负调控，如抑制TNF-α、IL-6等促炎细胞因子的产生，从而减轻炎症反应。在细胞对脂多糖的反应调节过程中，大籽蒿的活性成分可能作用于细胞表面的受体，影响脂多糖与受体的结合或下游信号传导，进而调节细胞对脂多糖的反应。对活性氧代谢过程的调节也是大籽蒿抗炎的一个重要方面，活性氧在炎症过程中可导致氧化应激损伤，大籽蒿可能通过调节活性氧代谢，减少氧化应激，发挥抗炎作用。在分子功能方面，大籽蒿可能通过调节蛋白质丝氨酸/苏氨酸激酶活性，影响细胞内的信号传导通路，进而调节炎症反应。对蛋白激酶活性的调节也与炎症信号传导密切相关，许多炎症相关的信号通路都依赖于蛋白激酶的激活，大籽蒿可能通过调节这些蛋白激酶的活性，抑制炎症信号的传递。在细胞组成方面，大籽蒿可能影响细胞内的一些结构和细胞器，如对细胞膜的稳定性、细胞骨架的调节等，这些调节作用可能影响炎症细胞的功能，如细胞的迁移、吞噬等，从而发挥抗炎作用。在KEGG通路富集分析中，同样设置参数，物种选择人类，P值阈值设定为0.05。KEGG分析结果显示，大籽蒿抗炎作用涉及的信号通路主要包括NF-κB信号通路、MAPK信号通路等。在NF-κB信号通路中，大籽蒿的活性成分可能通过抑制IκB激酶（IKK）的活性，减少IκB的磷酸化和降解，从而阻止NF-κB的活化和核转位，抑制炎症相关基因的转录和表达。在MAPK信号通路中，大籽蒿可能作用于MAPK信号通路中的关键激酶，如ERK、JNK、p38等，抑制它们的磷酸化和激活，阻断炎症信号的传导，减少炎症因子的产生。这些信号通路在炎症反应中起着关键的调控作用，大籽蒿通过调节这些信号通路，发挥其抗炎活性。通过GO和KEGG富集分析，深入揭示了大籽蒿抗炎作用涉及的生物过程、分子功能、细胞组成以及相关信号通路，为全面理解大籽蒿的抗炎作用机制提供了系统的理论依据。六、结论与展望6.1研究结论总结本研究围绕大籽蒿抗炎活性展开了多维度的深入