湖南省永州市宁远县一中2026届生物高三上期末质量跟踪监视模拟试题含解析

湖南省永州市宁远县一中2026届生物高三上期末质量跟踪监视模拟试题注意事项1．考生要认真填写考场号和座位序号。2．试题所有答案必须填涂或书写在答题卡上，在试卷上作答无效。第一部分必须用2B铅笔作答；第二部分必须用黑色字迹的签字笔作答。3．考试结束后，考生须将试卷和答题卡放在桌面上，待监考员收回。一、选择题：（共6小题，每小题6分，共36分。每小题只有一个选项符合题目要求）1．下列与叶绿体相关的叙述，错误的是（）A．用高倍显微镜观察叶绿体时不需要对叶绿体进行染色B．胡萝卜素在层析液中溶解度最小，随层析液扩散的速度最快C．恩格尔曼用实验证明了叶绿体主要吸收红光和蓝紫光D．可用差速离心法将叶肉细胞中的叶绿体分离出来2．我国西部沙漠地区生长着一种叶退化的药用植物锁阳，该植物依附在另一种植物小果白刺的根部生长，从其根部获取营养物质，下列相关叙述正确的是（）A．该生态系统的自我调节能力强，恢复力稳定性高B．药用植物锁阳与小果白刺的种间关系是捕食关系C．种植小果白刺以固沙体现了生物多样性的间接价值D．长期高温干旱的生存环境使得锁阳产生了定向突变3．对斐林试剂和双缩脲试剂的配方，叙述不正确的是（）A．双缩脲试剂和斐林试剂都含有NaOH溶液和CuSO4溶液B．斐林试剂是由质量浓度为1．15g/mL的CuSO4溶液中和等量的质量浓度为1．1/gmL的NaOH溶液配制而成，用时两种溶液等量混匀，现用现配C．双缩脲试剂是将质量为1．lg/mL的NaOH溶液滴入质量浓度为1．11/mL的CuSO4溶液中混合而成的D．双缩脲试剂由质量浓度为1．1g/mL氢氧化钠溶液和质量浓度为1．11g/mL硫酸铜溶液组成4．下列关于细胞中元素和化合物的说法正确的是（）A．酶都是以碳链为骨架的生物大分子 B．盐析过程中蛋白质的结构发生了变化C．细胞中的元素大多以离子形式存在 D．叶绿素含C、O、N、Fe等大量元素5．如图是某森林在遭受火灾完全烧毁前后植被的分布及变化情况，下列叙述正确的是（）A．a～b段，三类植物呈斑块镶嵌分布体现水平结构B．b～d段，由于森林完全烧毁发生的演替属于初生演替C．群落演替过程中，雪松等乔木常形成均匀分布型D．b～d段群落演替的过程中，该群落的主要物种没有发生变化6．生态系统的一个重要特点是它常常趋向于稳态。图甲表示载畜量对草原中生产者的净生产量的影响（净生产量即生产者光合作用制造的有机物总量与自身呼吸消耗量的差值）。图乙表示生殖数量或死亡数量与种群大小的关系。下列说法错误的是（）A．由图甲可知，C点以后生态系统的稳态将受到破坏B．由图甲可知，适量的放牧有利于维持草原生态系统的稳态C．由图乙可知，F点时种群的年龄组成为衰退型D．从图乙可知，F点表示该环境所能维持的种群最大数量二、综合题：本大题共4小题7．（9分）如图甲表示某豆科植物种子萌发过程中CO2释放和O2吸收速率的变化趋势；图乙表示该豆科植物叶肉细胞中C3的相对含量在夏季某天24h内（有一段时间乌云遮蔽）的变化趋势；请据图回答：（1）图甲中，在12-24h期间，萌发种子的呼吸方式主要是_________________，判断的依据是___________________；第48h后，萌发种子O2吸收速率超过CO2释放速率，其原因是细胞呼吸的底物中可能还有___________等物质。（2）图乙中，叶肉细胞进行光合作用的区间是曲线_________段对应的时间，乌云消失的时间可能是曲线上_______点对应的时刻。与F点相比，G点叶绿体中NADPH的含量较____（填“高”或“低”）。8．（10分）阅读下列有关病毒的材料并回答题目。Ⅰ．2019新型冠状病毒，即“2019-nCoV”，为有包膜病毒。颗粒呈圆形或椭圆形，直径50～200nm。颗粒表面有棒状突起，使病毒表面看起来形如花冠，故而得名。2019-nCoV基因组长度为1．8Kb，为单股正链RNA，其5’端为甲基化帽子，3’端有多聚腺苷酸（PolyA）结构，可直接作为翻译模板。截至2020年3月25日上午10时，世界范围确诊感染此病毒的人数已累计达到412461人。（1）下列选项错误的是_____A．细胞膜能控制物质进出，故该病毒只能侵染受损细胞，使人患病B．由于没有核糖体，这种病毒无法合成蛋白质，其包膜组成一定不含蛋白质C．病毒的遗传物质水解后可产生一分子核苷，一分子含氮碱基与一分子磷酸D．此病毒的单股正链RNA，只有转录形成对应的负链RNA才能附着在细胞的核糖体上（2）这种病毒的遗传物质为_____，研究人员紧急研发了核酸检测试剂盒，以此来检测病毒，检测此病毒的核酸可使用_______法。研究人员发现，病毒的中间宿主为蝙蝠，某些情况下，病毒可在不同动物身体内翻译出基本相同的多肽链，这是因为_____。（3）病毒入侵人体后，引起相关细胞分泌抗体，该抗体并不会与其他病症的抗原结合，这体现了________，此原理也可应用于该病的检测。若要用细胞工程的方法生产针对2019-nCoV上抗原的单克隆抗体，用到的技术有_________和_________。（4）将2019-nCoV不稳定的RNA转换成DNA后，技术人员常采用荧光定量PCR技术定量检测样本中病毒的核酸含量。其原理如图：在PCR反应体系中每加入一对引物的同时，加入一个与某条模板链互补的荧光探针，当_________催化子链延伸至探针处，会水解探针，使荧光监测系统接受到荧光信号，即每扩增一次，就有一个荧光分子生成。反应最终的荧光强度与PCR起始状态_________含量呈正相关。Ⅱ．朊病毒是一种只含蛋白质而不含核酸的病原微生物。按图示1→2→3→4进行实验，验证朊病毒侵染因子是蛋白质，题中所用牛脑组织细胞为无任何标记的活体细胞。（1）本实验采用的研究方法是______。（2）从理论上讲，经1→2→3→4实验离心后上清液中______（填“能大量”或“几乎不能”）检测到32P，沉淀物中___________（填“能大量”或“几乎不能”）检测到32P，出现上述结果的原因是：_________。（3）如果添加试管5，从试管2中提取朊病毒后先加入试管5同时添加35S标记的（NH4）235SO4，连续培养一段时间后，再提取朊病毒加入试管3，培养适宜时间后离心，检测放射性应主要位于_______中，少量位于_______中，原因是：_____________。（4）一般病毒的增殖同朊病毒之间的最主要区别是：一般的病毒侵染细胞是向宿主细胞提供________（物质），利用宿主细胞的_______________等物质进行增殖。9．（10分）利用基因编辑技术将病毒外壳蛋白基因导入猪细胞中，然后通过核移植技术培育基因编辑猪，可用于生产基因工程疫苗。下图为基因编辑猪培育流程，请回答下列问题：（1）对1号猪使用_________处理，使其超数排卵，收集并选取处在__________时期的卵母细胞用于核移植。（2）采集2号猪的组织块，用__________处理获得分散的成纤维细胞，放置于37℃的CO2培养箱中培养，其中CO2的作用是________。（3）为获得更多基因编辑猪，可在胚胎移植前对胚胎进行__________。产出的基因编辑猪的性染色体来自于_________号猪。（4）为检测病毒外壳蛋白基因是否被导入4号猪并正常表达，可采用的方法有__________（填序号）。①DNA测序②染色体倍性分析③体细胞结构分析④抗原—抗体杂交10．（10分）猪感染猪博卡病毒会导致严重腹泻。猪博卡病毒DNA是单链，长度仅为1．2kb，但能编码4种蛋白质（NSl、NPl、VP2、VP1），该病毒DNA与编码的蛋白质对应关系如下图。（1）猪博卡病毒DNA虽短，但可以编码4种蛋白质，据图分析原因是___________。（2）基因工程制备疫苗，获取NS1基因片段采用PCR技术的目的是___________，以便于与载体DNA连接。（3）基因工程的核心步骤是___________，可用___________将目的基因导入动物细胞。若在分子水平上检测基因是否表达，可采用___________方法。（4）该基因工程制备的疫苗是否有效，个体生物学水平上的鉴定过程是：___________。11．（15分）某昆虫翅的颜色由常染色体上的两对基因（E和e、R和r）控制，当两种显性基因（E、R）同时存在时翅膀才表现出颜色，其余情况下均表现为无色。现有甲组（基因型eeRR）、乙组（基因型为EErr）和丙组（基因型为eerr）三组昆虫。请回答下列问题：（1）以上所述说明生物的性状与基因在数量上的对应关系是_______________________________。（2）以上述三组昆虫为材料，请设计杂交实验来判断控制昆虫翅色的基因是否遵循自由组合定律。请写出实验思路，_______________________________。（3）若控制昆虫翅色的基因遵循自由组合定律，已知昆虫翅色有黑色、灰色、无色三种类型，有色翅昆虫中存在黑翅和灰翅两种，两个显性基因（E、R）中有一个存在剂量效应，即有一个显性基因时为灰翅，有两个显性基因时为黑翅。为判断剂量效应的基因是E还是R，某小组用甲组与乙组昆虫杂交得F1，再将F1与甲组昆虫杂交，观察并统计子代的表现型及比例。请预期该实验的结果及结论：①若_______________________，则R为剂量效应基因；②若_______________________，则E为剂量效应基因。

参考答案一、选择题：（共6小题，每小题6分，共36分。每小题只有一个选项符合题目要求）1、B【解析】

叶绿体是光合作用的场所，存在于能进行光合作用的植物细胞中，叶绿体是具有双膜结构的细胞器，叶绿体的类囊体膜上含有能吸收光能的光合色素，光合色素包括叶绿素a、叶绿素b、叶黄素、胡萝卜素，不同色素在层析液中的溶解度不同，随层析液在滤纸条上扩散速率不同，因此可以用纸层析法将不同的光合色素分离；叶绿素主要吸收红光和蓝紫光，叶黄素和胡萝卜素主要吸收蓝紫光。【详解】A、叶绿体本身呈现绿色，观察叶绿体时不需要对其染色，A正确；B、胡萝卜素在层析液中溶解度最大，随层析液扩散速度最快，B错误；C、恩格尔曼用透过三棱镜的光照射水绵临时装片，好氧性细菌聚集在红光和蓝紫光区，说明叶绿体主要吸收红光和蓝紫光，C正确；D、分离各种细胞器的方法是差速离心法，D正确。故选B。2、C【解析】

一般情况下，生态系统的动植物种类越多，营养结构越复杂，抵抗力稳定性越高，而恢复力稳定性越低；种间关系包括：捕食、竞争、寄生、互利共生等；生物多样性的价值包括直接价值、间接价值、潜在价值。【详解】A、我国西部沙漠地区的动植物种类较少，营养结构较简单，因此其自我调节能力较弱，由于环境恶劣，恢复力稳定性也较低，A错误；B、锁阳叶退化，不能进行光合作用合成有机物，而是从小果白刺的根部获取营养物质，故二者为寄生关系，B错误；C、小果白刺可以防风固沙，维持生态平衡，属于生态功能，体现了生物多样性的间接价值，C正确；D、生物的变异是不定向的，D错误。故选C。3、C【解析】

斐林试剂是由甲液（质量浓度为1.1g/mL氢氧化钠溶液）和乙液（质量浓度为1.15g/mL硫酸铜溶液）组成，用于鉴定还原糖，使用时要将甲液和乙液混合均匀后再加入含样品的试管中，且需水浴加热；

双缩脲试剂由A液（质量浓度为1.1g/mL氢氧化钠溶液）和B液（质量浓度为1.11g/mL硫酸铜溶液）组成，用于鉴定蛋白质，使用时要先加A液混匀后再加入B液。【详解】A、双缩脲试剂和斐林试剂都含有NaOH溶液和CuSO4溶液，A正确；

B、由上述分析可知，斐林试剂是由质量浓度为1.15g/mL的CuSO4溶液和等量的质量浓度为1.1g/mL的NaOH溶液配制而成，用时两种溶液等量混匀，现用现配，B正确；

C、双缩脲试剂是质量浓度为1.1g/mL的NaOH溶液和质量浓度为1.11g/mL的CuSO4溶液构成的，但是两种溶液需要分开使用，C错误；

D、双缩脲试剂由质量浓度为1.1g/mL氢氧化钠溶液和质量浓度为1.11g/mL硫酸铜溶液组成，D正确。

故选C。4、A【解析】

生物大分子以碳链为骨架。盐析是指在蛋白质水溶液中加入某些无机盐溶液，随着盐浓度增大而使蛋白质沉淀出来的现象，蛋白质可复原，只是蛋白质的溶解度降低。细胞中的元素大多以化合物的形式存在。叶绿素含C、H、O、N、Mg，属于大量元素。【详解】A、酶大多是是蛋白质，少数为RNA。蛋白质和RNA均为生物大分子，以碳链为骨架构成，A正确；B、盐析改变了蛋白质溶解度，不改变蛋白质空间结构，B错误；C、细胞中的元素大多以化合物的形式存在，无机盐大多以离子形式存在，C错误；D、叶绿素含C、H、O、N、Mg，不含Fe，并且Fe是微量元素，D错误。故选A。【点睛】答题关键在于掌握生物大分子骨架、蛋白质变性、细胞中元素的存在形式、细胞中的无机盐等有关知识，建立细胞元素和化合物相关内容的内在联系，形成知识网络。5、A【解析】

1、三类植物在群落中呈斑块状镶嵌分布应为群落水平结构的特点。2、根据题图，b～d段，植物群落的演替情况是草本植物被灌木优势取代，灌木又被乔木优势取代。3、群落演替的原因：生物群落的演替是群落内部因素（包括种内关系、种间关系等）与外界环境因素综合作用的结果。【详解】A、由于环境和人为因素影响，同一地段种群密度有差别，常呈镶嵌分布，为群落的水平结构，A正确；B、b～d段，由于森林完全烧毁发生的演替属于次生演替，B错误；C、均匀分布型属于种群的空间特征而乔木不属于一个种群，C错误；D、b～d段群落演替的过程中优势种不断的变化，D错误。故选A。6、C【解析】

据图甲分析，随着载畜量的增加，生产者的净生产量先增加后减少，合理的载畜量为A-C点。据图乙分析，出生率和死亡率的差值为种群的增长率，随着种群数量的增加，种群增长率先增加后减少为0，因此种群数量呈现S型曲线。【详解】A、从图甲可知，C点以后生产者的净生产量低于不放牧的草原，生态系统的稳态将受到破坏，A正确；B、由图甲可知，适度放牧有利于提高并维持草原生态系统的稳态，B正确；C、从图乙可知，F点时出生率等于死亡率，种群数量基本不变，年龄结构为稳定性，C错误；D、从图乙可知，F点之前出生率大于死亡率，种群数量持续增加，F点时种群数量达到最大，即该环境所能维持的种群最大值（K值），D正确。故选C。二、综合题：本大题共4小题7、无氧呼吸CO2释放速率很大，而O2吸收速率很低（只答CO2释放速率大于O2吸收速率不准确）脂肪BID高【解析】

分析图甲：种子萌发过程中，当胚根未长出时，种子不能进行光合作用，进行细胞呼吸作用，消耗细胞中的有机物，为种子萌发提供能量和营养，有机物的总量下降；当胚根长出后，种子可以从土壤中获取营养物质；细胞呼吸包括有氧呼吸和无氧呼吸，有氧呼吸吸收的氧气量等于呼出二氧化碳的量，可释放出大量的能量；根据图中的二氧化碳和氧气量的变化，可以判断12h～24h，种子主要进行无氧呼吸，胚根长出后，种子的有氧呼吸呼吸速率明显增大。

分析图乙：影响光合作用的环境因素包括光照强度、二氧化碳浓度、温度等，由于该图表示夏季的某天，因此影响该植物光合作用的环境因素主要为光照强度和二氧化碳；由于题干中提出“有一段时间乌云遮蔽”，这会导致光照强度减弱，光反应减弱，这将抑制暗反应过程中三碳化合物的还原，而二氧化碳固定仍在进行，因此三碳化合物的含量将上升，对应曲线中的CD段。【详解】（1）据图可知，在12～24h期间，CO2释放速率很大，而O2吸收速率很低，表明此时的呼吸作用主要是无氧呼吸；48h后，消耗的氧气大于释放的二氧化碳，所以细胞呼吸底物不只是糖类，还有脂肪等。

（2）图乙中，AB段时间为0点到6点，此时无光照且C3的含量不变，只有呼吸作用，从B到I，C3的含量在降低，说明叶肉细胞在利用C3，且这段时间有光照，因此植物在进行光合作用。有乌云时，光照强度降低，C3的还原减慢，二氧化碳固定生成C3的速率不变，故C3含量一直升高，当乌云消散，光照强度增加，C3的还原加快，C3含量开始下降，故为D点；G点相对F点，中午气温较高，气孔关闭，吸收的二氧化碳减少，二氧化碳的固定速度减慢，C3的含量减少，还原所需要的NADPH减少，故NADPH含量高。【点睛】本题结合曲线图，考查细胞呼吸的过程及意义以及影响光合作用的环境因素等，要求考生识记植物细胞有氧呼吸和无氧呼吸的总反应式，能根据曲线图中信息准确判断各选项，属于考纲识记和理解层层次的考查。8、ABCDRNA分子杂交（几乎）所有生物共用一套密码子抗体具有特异性动物细胞培养动物细胞融合Taq酶模板DNA同位素标记法几乎不能几乎不能朊病毒不含核酸只含蛋白质，蛋白质中磷含量极低，故试管2中提取的朊病毒几乎不含32P沉淀物上清液被35S标记的朊病毒（蛋白质），大部分进入牛脑组织细胞中，只有少量的朊病毒可能没侵入牛脑组织细胞核酸核苷酸和氨基酸【解析】

1、病毒不具有独立代谢能力，只能寄生在活细胞中。据遗传物质不同，可分为DNA病毒和RNA病毒。2019-nCoV的核酸为单股正链RNA，其5’端为甲基化帽子，3’端有多聚腺苷酸（PolyA）结构，可直接作为翻译模板。2、朊病毒不能独立生活，在活细胞内才能增殖，所以要标记朊病毒需先培养带标记的宿主细胞—牛脑组织细胞，再让朊病毒侵染带标记的牛脑组织细胞，完成对朊病毒的标记。因为朊病毒没有核酸，只有蛋白质，蛋白质中磷含量极低，故离心后上清液和沉淀物中都几乎不含32P；用35S标记的朊病毒侵入牛脑组织细胞，由于少量朊病毒不能侵染成功，所以放射性物质主要位于沉淀物中，上清液中含少量放射性物质。朊病毒是一类非正常的病毒，它不含有通常病毒所含有的核酸。【详解】Ⅰ（1）A、细胞膜控制物质进出细胞的作用是相对的，2019-nCoV表面的刺突糖蛋白能与人体细胞表面ACE2受体蛋白特异性结合，从而侵染细胞，2019-nCoV并不是只能侵染受损细胞，A错误；B、病毒没有核糖体，利用宿主细胞的核糖体合成蛋白质，2019-nCoV的包膜成分中含有蛋白质，其刺突糖蛋白能识别人体细胞膜上的受体，B错误；C、2019-nCoV的核酸为单股正链RNA，即遗传物质为RNA，初步水解可形成四种核糖核苷酸，彻底水解可形成核糖、磷酸和四种含氮碱基，C错误；D、由题意可知，此病毒的单股正链RNA，可直接作为翻译模板，所以可直接附着在宿主细胞的核糖体上进行翻译，不需要转录形成对应的负链RNA，D错误。故选ABCD。（2）这种病毒只含RNA，故遗传物质为RNA。利用试剂盒检测病毒所利用的是分子杂交技术，其原理为碱基互补配对原则；因为（几乎）所有生物共用一套密码子，所以病毒可在不同动物身体内翻译出基本相同的多肽链。（3）抗体具有特异性，一种抗体只能和一种抗原发生特异性结合。单克隆抗体的制备过程中，需要将经过免疫的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞，经过动物细胞培养并筛选后获得能产生特异性抗体的杂交瘤细胞，并将该杂交瘤细胞进行体内或体外培养获得单克隆抗体，所以该过程用到的技术有动物细胞培养和动物细胞融合。（4）PCR技术中延伸DNA子链的酶为Taq酶。题干中提出“加入一个与某条模板链互补的荧光探针”，并且“每扩增一次，就有一个荧光分子生成”，因此反应最终的荧光强度与起始状态模板DNA含量呈正相关。Ⅱ（1）由图可知，本实验采用了同位素标记法。

（2）由于朊病毒不含核酸只含蛋白质，蛋白质中磷含量极低，故试管2中提取的朊病毒几乎不含32P。因此，从理论上讲，离心后上清液中几乎不能检测到32P，沉淀物中几乎不能检测到32P。

（3）经试管5中牛脑组织细胞培养出的朊病毒（蛋白质）被35S标记，提取后加入试管3中，35S随朊病毒侵入到牛脑组织细胞中，因此放射性物质主要位于沉淀物中。同时会有少量的朊病毒不能成功侵入牛脑组织细胞，离心后位于上清液中，因此上清液中含少量放射性物质。

（4）一般病毒同朊病毒之间的最主要区别是：一般病毒侵入细胞是向宿主细胞提供核酸，利用宿主细胞的核苷酸和氨基酸合成自身的核酸和蛋白质。【点睛】本题以“2019-nCoV”为载体，主要考查病毒的特点、基因表达和PCR技术等相关知识以及结合实验图解，考查朊病毒侵染牛脑组织细胞实验，目的是考查学生对基础知识的理解与掌握，能够结合背景材料分析问题，得出结论。9、促性腺激素减数第二次分裂中期胰蛋白酶（胶原蛋白酶）维持培养液的pH分割2①④【解析】

据图分析，图示基因编辑猪培育过程涉及的技术手段有转基因技术、核移植技术、早期胚胎培养技术和胚胎移植技术等，利用转基因技术将病毒外壳蛋白基因（目的基因）导入2号猪的体细胞核中，然后将2号猪的体细胞核移植到1号猪的去核卵母细胞中，再将重组细胞培养到囊胚并移植到3号猪的子宫中去，最后分娩产生了4号转基因克隆猪。【详解】（1）据图分析可知，1号猪提供的是卵母细胞，对其注射促性腺激素可使其超数排卵，获得的卵母细胞需要培养到减数第二次分裂中期才能进行核移植。（2）将2号猪的组织块分散成单个的成纤维细胞需要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理，该细胞的培养应在37℃含5%的CO2的恒温培养箱中进行，其中CO2的主要作用是维持培养液的pH。（3）利用胚胎分割技术对图示早期胚胎进行分割，可以获得更多的基因编辑猪；据图分析可知，核移植的细胞核来自于2号猪，因此产出的基因编辑猪的性染色体来自于2号猪。（4）检测病毒外壳蛋白基因（目的基因）是否导入4号猪，可以采用DNA分子杂交法检测目的基因的序列；目的基因表达的最终产物是蛋白质（病毒外壳蛋白），可以利用抗原-抗体杂交法进行检测，故选①④。【点睛】解答本题的关键是掌握转基因技术、动物细胞培养、胚胎移植等过程，能够弄清楚题图中不同的猪提供的结构和作用，明确核移植时的卵母细胞需要培养到减数第二次分裂中期，并能够选择正确的方法检测目的基因是否表达。10、翻译蛋白质的基因片段存在重叠，保证了翻译蛋白质所需的对应基因长度获取限制性核酸内切酶位点基因表达载体的构建显微注射法抗原-抗体杂交让猪博卡病毒感染猪，观察其是否出现严重腹泻【解析】

基因工程的基本操作步骤主要包括四步：①目的基因的获取；②基因表达载体的构建；③将目的基因导入受体细胞；④目的基因的检测与表达。从分子水平上检测目的基因的方法：（1）分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。【详解】（1）据图分析，编码VP1和VP2蛋白质的基因存在重叠片段，因此虽然猪博卡病毒DNA比较短，但是基因片段存在重叠，保证了翻译蛋白质所需的对应基因长度。（2）PCR技术扩增目的基因时需要设计引物，往往在引物设计上含有限制性核酸内切酶的位点，这样便于目的基因和载体DNA连接。（3）基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建，需要的酶