探究实践：酵母菌的纯培养知识清单-2024-2025学年高二下学期生物人教版选择性必修3_第1页
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【探究实践：酵母菌的纯培养】1.原理：采用平板划线法和稀释涂布平板法将单个微生物分散在固体培养基上，之后得到的单菌落一般是由单个微生物形成的纯培养物。2.步骤第一步：制备培养基：配制培养基—调节PH—灭菌—倒平板。①配制培养基：称取去皮马铃薯200g，切成小块，加水1000ml，加热煮沸至马铃薯软烂，用纱布过滤。向滤液中加入20g葡萄糖、15-20g琼脂，用蒸馏水定容至1000ml.②灭菌：将配制好的培养基转移到锥形瓶中，加棉塞，包上牛皮纸，并用皮筋勒紧，再放入高压蒸汽灭菌锅中，在压力为100kPa、温度为121℃的条件下，灭菌15-30min.将5-8套培养皿包成一包，用几层牛皮纸包紧，放入干热灭菌箱内，在160-170℃灭菌2h.③倒平板：培养基冷却到50℃左右，在酒精灯火焰旁倒平板倒平板注意事项：ａ．温度：50℃左右（用手触摸，刚刚不烫手）ｂ．操作：在酒精灯火焰附近（防止杂菌污染）c.倒平板时要使锥形瓶瓶口通过火焰的原因：灼烧灭菌，防止瓶口微生物污染培养基d．冷凝后平板倒置（原因：可避免培养基中的水分过快蒸发；可防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。）e.在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，那么这个平板不能用来培养微生物，因为空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生。第二步：接种和分离酵母菌：平板划线法思考：接种划线的操作过程中，接种环应灼烧几次？平板划线法注意事项:a.接种环只蘸一次菌液,但要在培养基不同位置连续划线多次;b.划线首尾不能相接;c.每次划线前接种环进行灼烧灭菌，待冷却后再开始画线;d.划线后,培养皿底部做好标记，培养皿倒置培养。e.为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？为什么？请完善下方的表格。灼烧时期目的取菌种前杀死接种环上原有的微生物每次划线前杀死上次划线时残留的菌种，使下一次划线的菌种直接来源于上次划线的末端，从而使每次划线时菌种数目逐渐减少，直至得到单个细胞接种结束后杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者第三步：培养酵母菌：完成平板划线后，待菌液被培养基吸收，将接种后的平板（一般做三组，重复实验）和一个未接种的平板倒置，放入28℃左右（培养温度因酵母菌种类的不同而稍有差异）的恒温培养箱中培养24—48h。第四步：结果分析与评价1.培养未接种的培养基的目的是检测培养基是否被杂菌污染(或检查培养基制备是否合格)。未接种的培养基表面若有菌落生长，则说明培养基被污染，应该重新制备；若无菌落生长，则说明未被污染。2.在接种酵母菌的培养基上可观察到独立的菌落，这些菌落在颜色、形状和大小上相似，酵母菌菌落一般表面

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