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脐带干细胞培养流程汇报人:XX目录01脐带干细胞概述02脐带干细胞的采集03脐带干细胞的分离04脐带干细胞的培养05脐带干细胞的扩增06脐带干细胞的储存与运输脐带干细胞概述01干细胞定义细胞类型包括间充质、造血干细胞,可用于多种疾病治疗。脐带干细胞存在于新生儿脐带血中,具高度分化潜能。0102脐带干细胞特性能分化为多种细胞,治疗多种疾病。多能性移植引起免疫反应风险低,减少排斥反应。低免疫原性应用领域用于修复受损组织器官,如心脏、神经、肝脏等。再生医学治疗治疗自身免疫病,抑制炎症反应,减少免疫攻击。免疫调节治疗脐带干细胞的采集02采集过程分娩后分离脐带,确保无菌操作。分离脐带胎盘使用专业器械采集,进行组织处理及纯化。采集间充质细胞采集条件医疗机构要求二级以上医院,具备执业许可。母婴健康状态确保母婴健康,无感染性疾病。采集后的处理加入DMSO等,保护细胞冷冻完整性。加入冷冻保护剂采用离心法分离,去除多余血浆红细胞。细胞分离纯化脐带干细胞的分离03分离技术利用贴壁生长特性分离,适用于脐带组织。组织贴壁法基于抗原抗体结合,操作简便,适用于多种细胞分离。磁珠分选法分离过程无菌采集并处理,去除杂质。采集处理脐带血采用差速离心等方法分离干细胞。分离干细胞分离后的纯化利用干细胞贴壁特性,筛选纯化间充质干细胞。贴壁筛选法根据表面抗原标志,用流式细胞仪分离纯化干细胞。流式细胞仪法脐带干细胞的培养04培养基选择α-MEM培养基常用基础培养基FBS、生长因子等添加成分培养条件37°C,5%CO2,95%湿度DMEM/F12,FBS,青霉素/链霉素等温度与气体培养基与添加物培养过程监控监控细胞活率、纯度,确保培养质量质量指标评估强调无菌操作,定期检测无菌状态无菌操作监控脐带干细胞的扩增05扩增方法采用贴壁法,6天达85%~90%融合,传8代内活性不减。贴壁传代培养01模拟体内环境,自动化生产,细胞密度高,减少污染。生物反应器培养02扩增效率01扩增倍数提升采用SR-1等方式,CD34+细胞扩增倍数可达28至330倍。02培养时间优化扩增培养时间多为14至21天,实现高效扩增。扩增后的质量控制确保扩增后细胞活率达标,纯度满足临床应用要求。活率与纯度检测01进行无菌检测,避免污染;进行成瘤性检测,确保细胞安全性。无菌与成瘤性检测02脐带干细胞的储存与运输06储存条件采用液氮深低温罐(-196℃)保存,确保细胞长期存活。深低温冷冻选择国家批准的脐带血库,确保设施、技术及管理监控可靠。专业机构储存运输要求专业容器使用专用运输箱,配备温度监控。温度控制运输全程2\~8℃,确保细胞活性。0102长期保存策略采集、处理、存储均在无菌环境下
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