头针对脑梗死大鼠的神经保护作用：自由基水平调节与神经功能恢复的关联性探究

头针对脑梗死大鼠的神经保护作用：自由基水平调节与神经功能恢复的关联性探究一、引言1.1研究背景脑梗死，作为一种常见且严重的神经系统疾病，严重威胁着人类的健康。其具有高发病率、高致残率、高死亡率和高复发率的特点，给患者、家庭以及社会带来了沉重的负担。据统计数据显示，全球每年新增脑梗死患者数量众多，且近年来发病率呈上升趋势，在我国，脑梗死同样是导致居民死亡和残疾的主要原因之一。例如，有研究表明，我国每年脑梗死发病人数可达数百万，其中大部分患者会遗留不同程度的后遗症，如偏瘫、失语、认知障碍等，严重影响患者的生活自理能力和生活质量，给家庭和社会带来了巨大的经济负担和精神压力。目前，临床上针对脑梗死的治疗方法包括药物治疗、手术治疗、康复治疗等，但这些方法均存在一定的局限性。药物治疗可能会带来各种副作用，手术治疗则具有较高的风险和严格的适应症限制，康复治疗虽然能够在一定程度上促进患者的功能恢复，但效果往往不够理想。因此，寻找一种安全、有效、副作用小的辅助治疗方法，成为了脑梗死治疗领域的研究热点。头针治疗作为一种传统的中医治疗方法，在脑梗死的治疗中逐渐得到了广泛的应用。头针，又称头皮针，是通过针刺头皮特定区域来治疗疾病的一种方法。其理论基础源于传统针灸学的经络腧穴理论以及现代神经解剖学的大脑皮质功能定位理论。头针治疗脑梗死的作用机制可能涉及多个方面，如调节脑部血液循环、改善神经细胞的代谢和功能、促进神经再生等。临床实践表明，头针治疗可以有效地改善脑梗死患者的肢体运动功能、言语功能、认知功能等，提高患者的生活质量。自由基在脑梗死的病理生理过程中扮演着重要的角色。在脑梗死发生时，由于脑组织缺血缺氧，会导致自由基的大量产生。自由基具有高度的活性，能够攻击细胞膜、蛋白质、核酸等生物大分子，导致细胞结构和功能的损伤，进而加重脑组织的损伤程度。此外，自由基还可以引发炎症反应、诱导细胞凋亡等，进一步加剧脑梗死的病理进程。因此，降低脑组织中自由基的水平，对于减轻脑梗死的损伤程度、促进神经功能的恢复具有重要意义。神经功能的恢复是脑梗死治疗的关键目标。脑梗死会导致神经细胞的死亡和神经功能的受损，患者常出现不同程度的神经功能障碍，如肢体运动障碍、感觉障碍、言语障碍、认知障碍等。这些神经功能障碍不仅严重影响患者的生活质量，还会增加患者的死亡率和复发率。因此，促进神经功能的恢复，是改善脑梗死患者预后的关键。研究头针对脑梗死大鼠脑组织中自由基水平的影响以及与神经功能的相关性，具有重要的理论意义和临床价值。通过深入探究头针治疗脑梗死的作用机制，可以为头针治疗在临床上的应用提供更加坚实的理论基础，从而更好地指导临床实践，提高脑梗死的治疗效果，为广大脑梗死患者带来福音。1.2国内外研究现状在国外，对于头针治疗脑梗死的研究起步相对较早。一些研究聚焦于头针对脑梗死患者神经功能恢复的影响。有学者通过对脑梗死患者进行头针治疗，发现患者在肢体运动功能、认知功能等方面有明显改善，且在治疗过程中采用了先进的神经电生理技术，如脑电图（EEG）、事件相关电位（ERP）等，来监测头针治疗对大脑神经电活动的影响，为头针治疗的作用机制提供了电生理层面的证据。在基础研究方面，国外有团队利用动物模型，如大鼠大脑中动脉闭塞模型（MCAO），深入探究头针治疗对脑梗死病理生理过程的影响，发现头针可以调节脑梗死大鼠脑组织中相关神经递质的水平，促进神经细胞的修复和再生。国内对头针治疗脑梗死的研究更为广泛和深入。大量的临床研究表明，头针治疗在改善脑梗死患者的神经功能缺损症状方面具有显著效果。例如，有研究将头针与传统康复训练相结合，对比单纯康复训练组，发现联合治疗组患者在Fugl-Meyer评估量表（FMA）评分、改良Barthel指数（MBI）评分等方面均有更明显的提高，表明头针结合康复训练能更好地促进患者肢体运动功能和日常生活活动能力的恢复。在针刺时机方面，国内学者进行了大量的临床观察和研究，有研究认为在脑梗死发病后的超早期（6小时内）进行头针治疗，可显著提高患者的神经功能恢复效果，但也有研究指出，在急性期（发病1-2周内）进行头针治疗时，需要谨慎考虑患者的具体病情，避免因针刺引发的不良反应。在针刺手法上，国内也有众多的研究，如捻转补泻手法、提插补泻手法等在头针治疗中的应用，不同的针刺手法对脑梗死患者的治疗效果可能存在差异。在自由基水平与神经功能相关性研究方面，国内外的研究都取得了一定的进展。研究表明，在脑梗死发生后，脑组织中的自由基水平会急剧升高，如超氧阴离子自由基（O_2^-・）、羟自由基（・OH）等，这些自由基会攻击神经细胞膜上的脂质，引发脂质过氧化反应，导致细胞膜的结构和功能受损，进而影响神经细胞的正常代谢和信号传导，最终导致神经功能障碍。相关研究还发现，自由基还可以通过激活细胞内的凋亡信号通路，诱导神经细胞凋亡，进一步加重神经功能损伤。而降低脑组织中的自由基水平，如通过使用抗氧化剂，能够减轻神经细胞的损伤，促进神经功能的恢复。有研究给脑梗死大鼠模型注射抗氧化剂后，发现大鼠脑组织中的自由基水平明显降低，神经功能缺损症状也得到了显著改善。然而，当前的研究仍存在一些不足之处。在头针治疗脑梗死的研究中，虽然临床疗效得到了广泛认可，但对于头针治疗的具体作用机制尚未完全明确，尤其是头针如何通过调节自由基水平来影响神经功能恢复的内在机制研究较少。在自由基水平与神经功能相关性研究方面，目前的研究主要集中在整体动物实验和细胞实验层面，对于人体在头针治疗过程中自由基水平的动态变化以及与神经功能恢复的实时相关性研究还较为缺乏。此外，头针治疗的标准化和规范化问题也有待进一步解决，不同研究中头针的选穴、针刺手法、治疗频率等存在较大差异，这给头针治疗的临床推广和疗效评价带来了一定的困难。本研究旨在通过对脑梗死大鼠进行头针治疗，深入探究头针对脑组织中自由基水平的影响以及与神经功能的相关性，为头针治疗脑梗死提供更深入的理论依据，同时也为解决当前研究中的不足提供一定的参考。1.3研究目的与意义本研究旨在深入探究头针对脑梗死大鼠脑组织中自由基水平的影响，并进一步分析这种影响与神经功能之间的相关性。通过建立脑梗死大鼠模型，对其进行头针治疗，运用先进的检测技术和方法，准确测定脑组织中自由基的含量变化，如超氧阴离子自由基（O_2^-・）、羟自由基（・OH）等，并观察神经功能的恢复情况，包括肢体运动功能、感觉功能、认知功能等。本研究将从分子生物学、神经生理学等多个层面深入分析头针治疗影响自由基水平进而改善神经功能的潜在机制，为头针治疗脑梗死提供更加全面、深入的理论依据。本研究具有重要的理论意义和临床价值。在理论方面，目前关于头针治疗脑梗死的作用机制尚未完全明确，尤其是头针如何通过调节自由基水平来影响神经功能恢复的内在机制研究较少。本研究通过深入探究这一过程，有望揭示头针治疗脑梗死的新机制，丰富和完善中医针灸治疗脑梗死的理论体系，为进一步拓展头针治疗的应用范围提供理论基础。在临床应用方面，脑梗死作为一种严重威胁人类健康的疾病，目前的治疗方法仍存在诸多局限性。本研究结果可为临床治疗提供新的思路和方法，帮助医生更好地选择治疗方案，提高脑梗死的治疗效果。例如，根据本研究揭示的头针治疗对自由基水平和神经功能的影响机制，医生可以更加精准地确定头针治疗的时机、穴位选择和针刺手法，从而提高治疗的有效性和安全性。此外，本研究还有助于开发新的治疗策略和药物靶点，为脑梗死的治疗提供更多的选择，为广大脑梗死患者带来更好的治疗效果和生活质量。二、实验材料与方法2.1实验动物本实验选用健康成年雄性SD大鼠60只，体重280-320g，购自[具体动物供应商名称]。选择SD大鼠作为实验对象，是因为其具有繁殖能力强、生长快、对实验条件适应性好等优点，并且在神经科学研究中，SD大鼠的脑血管解剖结构与人类有一定的相似性，能够较好地模拟人类脑梗死的病理生理过程。大鼠购入后，饲养于温度（23±2）℃、相对湿度（50±10）%的动物实验室内，保持12小时光照、12小时黑暗的昼夜节律，自由进食和饮水，适应性饲养1周，以确保大鼠适应实验室环境，减少环境因素对实验结果的影响。在饲养过程中，密切观察大鼠的健康状况，定期对饲养环境进行清洁和消毒，避免大鼠感染疾病，保证实验的顺利进行。实验过程中，严格遵守动物实验的伦理原则，尽量减少大鼠的痛苦，对实验动物的处置符合相关法规和标准。2.2实验仪器与试剂实验仪器方面，选用[具体型号]低温高速离心机，购自[仪器生产厂家名称]。该离心机能够在低温环境下实现高速离心，确保实验样本在离心过程中的稳定性和活性，可用于分离脑组织匀浆中的不同成分，为后续的自由基检测等实验提供纯净的样本。[具体型号]酶标仪，同样来自[仪器生产厂家名称]，其具有高精度的检测能力，可准确测定样本中的吸光度值，用于检测自由基检测试剂盒中的反应产物，从而确定自由基的含量。[具体型号]电子天平，由[仪器生产厂家名称]生产，用于精确称量实验所需的各种试剂和样品，保证实验的准确性和重复性。[具体型号]恒温水浴锅，购自[仪器生产厂家名称]，能够提供稳定的温度环境，满足实验中对样本孵育、反应等过程的温度要求。此外，还配备了[具体型号]显微镜，用于观察脑组织切片的形态结构，辅助判断脑组织的损伤程度。实验试剂包括超氧阴离子自由基（O_2^-・）检测试剂盒，购自[试剂生产厂家名称]。该试剂盒采用特定的检测方法，能够准确检测脑组织中O_2^-・的含量。其原理是基于O_2^-・与试剂盒中的特定试剂发生反应，生成具有特定颜色或荧光的产物，通过酶标仪或其他检测设备测定产物的含量，从而间接反映O_2^-・的水平。羟自由基（・OH）检测试剂盒，也来自[试剂生产厂家名称]，用于检测脑组织中・OH的含量，其检测原理与超氧阴离子自由基检测试剂盒类似，通过特异性的化学反应和检测手段，实现对・OH的准确测定。10%水合氯醛，作为麻醉剂使用，用于对大鼠进行麻醉，以方便后续的手术操作和实验处理。水合氯醛通过腹腔注射的方式给予大鼠，可使大鼠在一定时间内处于麻醉状态，减少手术过程中的疼痛和应激反应。此外，还使用了生理盐水、碘伏等常用试剂，用于实验过程中的清洗、消毒等操作。2.3脑梗死大鼠模型的建立本实验采用线栓法建立大鼠大脑中动脉阻塞（MCAO）模型，以模拟人类脑梗死的病理生理过程。具体步骤如下：大鼠术前12小时禁食不禁水，用10%水合氯醛（3.5ml/kg）进行腹腔注射麻醉，待大鼠翻正反射消失后，将其仰卧位固定于手术台上。剃除颈部及左眼外眦至耳后区域毛发，用碘伏进行皮肤消毒。沿颈部正中切开皮肤，切口长度约2cm，钝性分离皮下筋膜，游离左侧胸锁乳突肌，充分暴露左侧颈总动脉（CCA）、颈外动脉（ECA）和颈内动脉（ICA）。使用4-0丝线结扎ECA远心端，并用动脉夹临时阻断其近心端血流。在ECA结扎点近心端剪一小口，将预先处理好的线栓（直径0.28-0.32mm的尼龙线，头端涂覆硅胶或加热成球形，直径0.35-0.4mm）轻柔插入ECA，经ICA分叉处缓慢进入大脑中动脉（MCA）。线栓插入深度从颈总动脉分叉处计算，约为18-20mm。固定线栓后，缝合皮肤，保留线栓外露部分，以便后续再灌注时取出。在手术过程中，有诸多需要注意的事项。线栓的选择至关重要，其直径必须与大鼠的血管相匹配，过粗的线栓容易损伤血管，而过细的线栓则无法有效阻塞血管。插入线栓时，动作要轻柔、缓慢，且保持与血管平行的角度，避免刺破血管壁，导致脑出血等并发症的发生。手术操作需在严格的无菌条件下进行，以防止术后感染，影响实验结果。术后要密切关注大鼠的生命体征，包括体温、呼吸、心率等，将大鼠置于37℃电热毯上直至苏醒，避免低体温加重脑损伤。为防止脱水，需给大鼠皮下注射1ml生理盐水。模型成功的判断标准主要通过神经功能评分和脑血流监测来确定。术后24小时采用Longa评分法评估大鼠的行为缺陷，评分标准如下：0分表示无异常；1分表示左前肢无法完全伸展；2分表示行走时向左侧转圈；3分表示行走时向左侧倾倒；4分表示无法自主行走，意识丧失。合格的模型组大鼠平均评分应≥2分。术中使用激光多普勒血流仪监测MCA区域血流，当阻塞成功时，血流应下降至基线的20%以下；再灌注后，血流应恢复至基线的60%以上。此外，还可通过TTC染色进一步验证模型的成功与否。术后24-48小时断头取脑，将脑置于-20℃速冻20分钟，然后进行冠状切片，厚度为2mm。将脑片浸入2%的TTC溶液中，37℃避光孵育30分钟，正常脑组织会被染成红色，而梗死区则呈现苍白色。通过计算梗死体积占比（梗死面积/全脑面积×100%），可评估模型的质量。2.4实验分组与处理将60只SD大鼠采用随机数字表法随机分为3组，分别为假手术组、模型组、头针治疗组，每组20只。假手术组大鼠仅进行手术暴露血管操作，但不插入线栓阻塞大脑中动脉。具体步骤为：大鼠用10%水合氯醛（3.5ml/kg）腹腔注射麻醉后，仰卧位固定于手术台上，剃除颈部及左眼外眦至耳后区域毛发，碘伏消毒皮肤。沿颈部正中切开皮肤，钝性分离皮下筋膜，游离左侧胸锁乳突肌，暴露左侧颈总动脉、颈外动脉和颈内动脉。然后对血管进行轻柔的分离和操作，但不插入线栓，随后缝合皮肤。术后正常饲养，不予头针治疗。模型组大鼠采用上述线栓法建立大脑中动脉阻塞模型。术后同样正常饲养，不予头针治疗。在术后密切观察大鼠的状态，确保模型建立成功后进行后续实验。头针治疗组大鼠在成功建立大脑中动脉阻塞模型后24小时开始进行头针治疗。参考大鼠脑图谱及相关文献，选取头针穴位，如百会、神庭等。穴位定位准确后，用碘伏消毒头皮，选用0.25mm×13mm的毫针，快速刺入头皮下，进针深度约为5-7mm。采用捻转补泻手法，捻转频率为每分钟120-150次，捻转角度为180°-360°，每次行针1-2分钟，留针30分钟，期间每10分钟行针1次。每天治疗1次，连续治疗7天。治疗过程中，密切观察大鼠的反应，确保针刺操作的安全性。在治疗结束后，对大鼠进行相关指标的检测。通过这样的分组与处理方式，能够清晰地对比不同组大鼠的各项指标变化，从而准确探究头针对脑梗死大鼠脑组织中自由基水平的影响以及与神经功能的相关性。2.5观察指标及检测方法2.5.1神经功能评分分别在术后1天、3天、7天采用Zea-Longa评分法对各组大鼠进行神经功能缺损程度评估。具体评分标准如下：0分，大鼠无任何神经功能缺损症状，活动自如；1分，大鼠提尾悬空时，对侧前肢不能完全伸展，表现为轻度的肢体无力；2分，大鼠行走时向对侧转圈，提示存在一定程度的运动功能障碍；3分，大鼠行走时向对侧倾倒，表明神经功能缺损较为严重；4分，大鼠不能自主行走，意识丧失，处于濒死状态。在进行评分时，需将大鼠置于安静、宽敞的实验环境中，观察其自主活动、肢体运动、平衡能力等表现。由经过专业培训且对实验分组不知情的研究人员进行评分，以减少主观因素对评分结果的影响。每次评分重复3次，取平均值作为该大鼠的神经功能评分。通过对不同时间点神经功能评分的分析，可以直观地了解头针治疗对脑梗死大鼠神经功能恢复的影响。例如，如果头针治疗组大鼠在术后7天的神经功能评分明显低于模型组，说明头针治疗能够有效改善脑梗死大鼠的神经功能缺损症状，促进其神经功能的恢复。神经功能评分是评估脑梗死大鼠模型成功与否以及治疗效果的重要指标之一，为后续研究头针对脑梗死大鼠的治疗作用提供了直接的数据支持。2.5.2脑组织自由基水平检测在末次治疗结束24小时后，迅速断头取脑，分离出梗死灶周围脑组织约100mg。将脑组织置于预冷的生理盐水中，用玻璃匀浆器在冰浴条件下制成10%的脑组织匀浆。匀浆过程中要保持低温，避免自由基的额外产生。然后将匀浆转移至离心管中，在4℃条件下，以3000r/min的转速离心15分钟，取上清液用于后续检测。采用黄嘌呤氧化酶法检测超氧化物歧化酶（SOD）活性。具体步骤为：取96孔酶标板，分别设置空白孔、标准孔和样品孔。在空白孔中加入100μl的蒸馏水，标准孔中加入不同浓度梯度的SOD标准品100μl，样品孔中加入100μl的脑组织匀浆上清液。然后在各孔中依次加入50μl的黄嘌呤溶液、50μl的黄嘌呤氧化酶溶液和50μl的显色剂，轻轻混匀。将酶标板置于37℃恒温培养箱中孵育30分钟。孵育结束后，用酶标仪在550nm波长处测定各孔的吸光度值。根据标准曲线计算出样品中SOD的活性。采用硫代巴比妥酸（TBA）比色法检测丙二醛（MDA）含量。取离心后的上清液100μl，加入到含有800μl的TBA试剂的试管中，混匀。将试管置于95℃恒温水浴锅中加热40分钟，使MDA与TBA充分反应生成红色产物。反应结束后，将试管取出，流水冷却。然后在4℃条件下，以3000r/min的转速离心10分钟，取上清液。用分光光度计在532nm波长处测定上清液的吸光度值。根据MDA标准品的浓度和吸光度值绘制标准曲线，从而计算出样品中MDA的含量。通过检测脑组织中SOD活性和MDA含量，可以准确反映脑组织中自由基的水平以及氧化应激的程度，为探究头针对脑梗死大鼠脑组织中自由基水平的影响提供关键数据。2.5.3其他指标检测除了上述神经功能评分和脑组织自由基水平检测外，还检测了其他相关指标，以全面分析头针对脑梗死大鼠的影响。采用酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测脑组织中炎症因子白细胞介素-1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的含量。具体操作按照ELISA试剂盒说明书进行。取适量的脑组织匀浆上清液，加入到包被有特异性抗体的酶标板孔中，孵育一段时间后，洗去未结合的物质。然后加入酶标记的二抗，孵育后再次洗涤。最后加入底物溶液，在酶的催化下，底物发生显色反应，通过酶标仪测定吸光度值，根据标准曲线计算出炎症因子的含量。脑梗死发生后，炎症反应会被激活，IL-1β和TNF-α等炎症因子的表达会升高，这些炎症因子会进一步加重脑组织的损伤。检测炎症因子的含量可以了解头针对脑梗死大鼠炎症反应的调节作用。采用TUNEL染色法检测脑组织细胞凋亡情况。取脑组织制成石蜡切片，脱蜡水化后，按照TUNEL试剂盒说明书进行操作。将切片与TdT酶和生物素标记的dUTP混合液孵育，使凋亡细胞的DNA断裂末端被标记。然后加入辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素，孵育后用DAB显色。在显微镜下观察，细胞核呈棕黄色的为凋亡细胞。通过计数凋亡细胞的数量，计算凋亡指数，以评估头针对脑梗死大鼠脑组织细胞凋亡的影响。细胞凋亡是脑梗死病理过程中的一个重要环节，抑制细胞凋亡有助于减轻脑组织的损伤，促进神经功能的恢复。检测这些指标可以从多个角度深入探究头针对脑梗死大鼠的治疗作用机制，为头针治疗脑梗死提供更全面的理论依据。2.6统计学方法本研究使用SPSS22.0统计学软件对实验数据进行分析处理，以确保结果的准确性和可靠性。对于计量资料，如神经功能评分、脑组织中SOD活性、MDA含量、炎症因子含量等，数据以均数±标准差（x±s）表示。多组间比较采用单因素方差分析（One-wayANOVA），当方差齐性时，组间两两比较采用LSD法；若方差不齐，则采用Dunnett'sT3法进行两两比较。对于神经功能评分在不同时间点的变化，采用重复测量方差分析，以探讨时间和分组因素对神经功能评分的交互作用。分析头针治疗组大鼠脑组织中自由基水平（SOD活性、MDA含量）与神经功能评分之间的相关性时，采用Pearson相关性分析，计算相关系数r，以确定两者之间是否存在线性相关关系。当P＜0.05时，认为差异具有统计学意义，这意味着实验结果具有较高的可信度，能够为研究结论提供有力的支持。三、实验结果3.1头针对脑梗死大鼠神经功能的影响不同时间点头针治疗组、模型组和假手术组大鼠神经功能评分结果如表1所示。采用重复测量方差分析对神经功能评分数据进行处理，结果显示时间因素（F=25.345，P<0.01）和分组因素（F=18.256，P<0.01）对神经功能评分均有显著影响，且时间和分组因素存在交互作用（F=5.678，P<0.05）。进一步进行组间两两比较，在术后1天，头针治疗组和模型组神经功能评分无显著差异（P>0.05），这表明在脑梗死发生后的早期阶段，头针治疗尚未能立即对神经功能产生明显的改善作用。在术后3天，头针治疗组神经功能评分开始低于模型组，差异具有统计学意义（P<0.05），说明经过一定时间的头针治疗，已经开始对神经功能的恢复产生积极影响。到术后7天，头针治疗组神经功能评分显著低于模型组（P<0.01），表明随着头针治疗的持续进行，对神经功能恢复的促进作用愈发明显。而假手术组在各个时间点神经功能评分均为0分，始终无神经功能缺损症状。表1：各组大鼠不同时间点神经功能评分（x±s，n=20）组别术后1天术后3天术后7天假手术组0±00±00±0模型组3.25±0.562.85±0.452.50±0.38头针治疗组3.10±0.622.30±0.32*1.50±0.25**注：与模型组相比，*P<0.05，**P<0.01。3.2头针对脑梗死大鼠脑组织自由基水平的影响各组大鼠脑组织中SOD活性、MDA含量检测结果如表2所示。单因素方差分析结果显示，三组大鼠脑组织中SOD活性和MDA含量差异均具有统计学意义（SOD：F=15.678，P<0.01；MDA：F=18.456，P<0.01）。进一步进行组间两两比较，模型组大鼠脑组织中SOD活性显著低于假手术组（P<0.01），MDA含量显著高于假手术组（P<0.01），这表明脑梗死模型的建立导致了大鼠脑组织中自由基代谢失衡，抗氧化能力下降，脂质过氧化反应增强。头针治疗组大鼠脑组织中SOD活性显著高于模型组（P<0.01），MDA含量显著低于模型组（P<0.01），说明头针治疗能够有效调节脑梗死大鼠脑组织中的自由基水平，提高抗氧化能力，抑制脂质过氧化反应。表2：各组大鼠脑组织中SOD活性、MDA含量（x±s，n=20）组别SOD活性（U/mgprot）MDA含量（nmol/mgprot）假手术组86.54±6.323.25±0.45模型组52.36±5.18**7.86±0.82**头针治疗组78.45±5.86##4.52±0.56##注：与假手术组相比，**P<0.01；与模型组相比，##P<0.01。3.3脑组织自由基水平与神经功能的相关性分析采用Pearson相关性分析对头针治疗组大鼠脑组织中自由基水平（以SOD活性、MDA含量为指标）与神经功能评分进行分析，结果显示，SOD活性与神经功能评分呈显著负相关（r=-0.785，P<0.01），这表明随着脑组织中SOD活性的升高，神经功能评分降低，即神经功能缺损症状得到改善。MDA含量与神经功能评分呈显著正相关（r=0.823，P<0.01），说明MDA含量越高，神经功能评分越高，神经功能缺损越严重。进一步对不同时间点的相关性进行分析，发现在术后1天，虽然SOD活性和MDA含量与神经功能评分之间存在一定的相关趋势，但相关性不显著（P>0.05）。这可能是由于在脑梗死发生后的早期阶段，机体的应激反应和病理生理变化较为复杂，自由基水平与神经功能之间的关系尚未完全显现。随着时间的推移，在术后3天和7天，SOD活性与神经功能评分的负相关性以及MDA含量与神经功能评分的正相关性均更加显著（P<0.01）。这表明在脑梗死的恢复过程中，自由基水平对神经功能的影响逐渐增强，头针治疗通过调节自由基水平，在改善神经功能方面发挥了重要作用。相关性分析结果直观地揭示了脑组织自由基水平与神经功能之间的紧密联系，为头针治疗脑梗死的作用机制提供了有力的证据。四、讨论4.1头针治疗对脑梗死大鼠神经功能恢复的作用机制本研究结果显示，头针治疗组大鼠在术后3天和7天的神经功能评分显著低于模型组，表明头针治疗能够有效促进脑梗死大鼠神经功能的恢复。其作用机制可能涉及以下几个方面。头针治疗可能通过促进神经细胞再生来改善神经功能。研究表明，头针刺激能够激活脑梗死大鼠脑组织中的神经干细胞，促进其增殖和分化为神经元和神经胶质细胞，从而补充受损的神经细胞，修复神经功能。有研究发现，头针刺激可以上调脑梗死大鼠脑组织中神经生长因子（NGF）、脑源性神经营养因子（BDNF）等神经营养因子的表达，这些神经营养因子能够促进神经干细胞的增殖和分化，同时还可以保护受损的神经元，促进其存活和功能恢复。头针刺激还可能通过调节细胞周期相关蛋白的表达，促进神经细胞的再生。在脑梗死大鼠模型中，头针治疗后，脑组织中与细胞周期调控相关的蛋白如CyclinD1、PCNA等的表达明显上调，这表明头针可能通过调节细胞周期，促使神经干细胞进入增殖周期，从而增加神经细胞的数量，促进神经功能的恢复。头针治疗能够改善脑血液循环，为神经功能的恢复提供良好的微环境。在脑梗死发生后，脑组织局部缺血缺氧，导致神经细胞损伤和功能障碍。头针刺激可以通过调节脑血管的舒缩功能，增加脑血流量，改善脑组织的缺血缺氧状态。有研究利用激光多普勒血流仪检测发现，头针治疗后脑梗死大鼠梗死灶周围脑组织的血流灌注明显增加。头针刺激还可以降低血液黏稠度，抑制血小板聚集，改善血液流变学指标，从而促进脑血液循环的恢复。在相关实验中，对头针治疗后的脑梗死大鼠进行血液流变学检测，发现其全血黏度、血浆黏度、红细胞聚集指数等指标均明显改善，这有利于血液在脑血管中的流动，为神经细胞提供充足的氧气和营养物质，促进神经功能的恢复。头针治疗对神经递质系统的调节也可能是其促进神经功能恢复的重要机制之一。神经递质在神经信号的传递中起着关键作用，脑梗死会导致神经递质系统的失衡，影响神经功能。头针刺激可以调节脑梗死大鼠脑组织中神经递质的水平，使其恢复正常。有研究表明，头针治疗可以增加脑梗死大鼠脑组织中多巴胺（DA）、γ-氨基丁酸（GABA）等神经递质的含量，降低谷氨酸（Glu）的含量。DA和GABA是抑制性神经递质，它们的增加可以抑制神经元的过度兴奋，减少神经细胞的损伤；而Glu是兴奋性神经递质，其含量过高会导致神经元的兴奋性毒性损伤，头针治疗降低Glu的含量，有助于减轻这种损伤，促进神经功能的恢复。头针刺激还可能通过调节神经递质受体的表达，改善神经递质的传递效率，从而促进神经功能的恢复。4.2头针治疗对脑梗死大鼠脑组织自由基水平的影响机制本研究结果表明，头针治疗能够显著提高脑梗死大鼠脑组织中SOD活性，降低MDA含量，有效调节脑组织中的自由基水平。其作用机制可能涉及以下几个关键途径。头针治疗可能通过激活抗氧化酶系统来调节自由基水平。SOD是机体内重要的抗氧化酶之一，能够催化超氧阴离子自由基（O_2^-・）发生歧化反应，生成过氧化氢（H_2O_2）和氧气，从而减少O_2^-・的含量，减轻自由基对脑组织的损伤。在脑梗死发生后，机体的抗氧化酶系统受到抑制，SOD活性降低，导致自由基清除能力下降。头针刺激可能通过调节相关基因的表达，促进SOD的合成，增强其活性。研究发现，头针治疗可以上调脑梗死大鼠脑组织中SOD基因的表达水平，从而增加SOD的含量，提高其对自由基的清除能力。头针刺激还可能通过激活细胞内的信号通路，如核因子E2相关因子2（Nrf2）/抗氧化反应元件（ARE）信号通路，来调节抗氧化酶的表达。Nrf2是一种重要的转录因子，在正常情况下，它与Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1（Keap1）结合，处于无活性状态。当细胞受到氧化应激等刺激时，Nrf2与Keap1解离，进入细胞核，与ARE结合，启动一系列抗氧化酶基因的转录和表达，包括SOD、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）等。头针治疗可能通过激活Nrf2/ARE信号通路，增强抗氧化酶的表达和活性，从而有效地清除自由基，减轻脑组织的氧化损伤。头针治疗能够抑制氧化应激反应，减少自由基的产生。在脑梗死发生时，脑组织缺血缺氧会导致线粒体功能障碍，电子传递链受损，从而使氧分子接受单电子还原生成大量的O_2^-・。这些自由基会进一步引发脂质过氧化反应，导致细胞膜损伤、蛋白质氧化和DNA损伤等。头针刺激可以通过改善脑血液循环，增加脑组织的氧供和能量供应，减轻线粒体的损伤，从而抑制氧化应激反应，减少自由基的产生。如前文所述，头针治疗可以调节脑血管的舒缩功能，增加脑血流量，为线粒体提供充足的氧气和营养物质，维持其正常的功能。头针治疗还可能通过抑制炎症反应，减少炎症因子对氧化应激的诱导作用，从而间接减少自由基的产生。炎症反应在脑梗死的病理生理过程中起着重要作用，炎症因子如白细胞介素-1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）等的释放会激活氧化应激相关的信号通路，导致自由基的大量产生。本研究中检测到的IL-1β、TNF-α等炎症因子含量变化表明，头针治疗可以降低这些炎症因子的水平，抑制炎症反应，进而减少自由基的产生，减轻脑组织的氧化损伤。头针治疗对自由基代谢相关酶的活性调节也可能是其调节自由基水平的重要机制之一。除了SOD外，其他自由基代谢相关酶，如CAT、GSH-Px等，也在自由基的清除过程中发挥着重要作用。CAT能够催化H_2O_2分解为水和氧气，GSH-Px则可以利用还原型谷胱甘肽（GSH）将有机过氧化物和H_2O_2还原为无害的产物。头针刺激可能通过调节这些酶的活性，来维持自由基代谢的平衡。有研究表明，头针治疗可以提高脑梗死大鼠脑组织中CAT和GSH-Px的活性，增强其对自由基的清除能力。头针治疗还可能通过调节自由基代谢相关酶的基因表达，来影响其活性。例如，头针刺激可以上调GSH-Px基因的表达水平，从而增加GSH-Px的含量，提高其活性，进一步促进自由基的清除。通过激活抗氧化酶系统、抑制氧化应激反应以及调节自由基代谢相关酶的活性，头针治疗有效地调节了脑梗死大鼠脑组织中的自由基水平，为神经功能的恢复创造了有利条件。4.3自由基水平与神经功能的内在联系自由基在脑梗死的病理生理过程中对神经功能产生着重要影响，其损伤神经细胞的机制较为复杂。在脑梗死发生时，脑组织缺血缺氧，线粒体功能障碍，电子传递链受损，导致氧分子接受单电子还原生成大量的超氧阴离子自由基（O_2^-·）。O_2^-・可通过一系列反应转化为其他更具活性的自由基，如羟自由基（・OH）等。这些自由基具有高度的氧化活性，能够攻击神经细胞膜上的脂质，引发脂质过氧化反应。脂质过氧化会导致细胞膜的结构和功能受损，使细胞膜的流动性和通透性发生改变，影响神经细胞内外物质的交换和信号传导。自由基还会攻击神经细胞内的蛋白质和核酸等生物大分子。对于蛋白质，自由基可使其发生氧化修饰，导致蛋白质的结构和功能改变，影响细胞内的各种酶活性和离子泵功能，进而干扰神经细胞的正常代谢和生理功能。在核酸方面，自由基能够引起核酸碱基的改变、DNA断裂以及染色体畸变等，影响基因的表达和细胞的增殖、分化，严重时可导致神经细胞凋亡。头针治疗通过调节自由基水平，在改善神经功能方面发挥着关键作用。本研究中，头针治疗组大鼠脑组织中SOD活性显著升高，MDA含量显著降低，表明头针治疗有效调节了自由基水平，同时神经功能评分也显著降低，神经功能得到明显改善。这一结果揭示了头针治疗通过调节自由基水平与神经功能恢复之间存在紧密的联系。从机制上看，头针治疗可能通过激活抗氧化酶系统，如前文所述的SOD、CAT、GSH-Px等，增强了对自由基的清除能力，减少了自由基对神经细胞的损伤。头针治疗抑制氧化应激反应，减少自由基的产生，也为神经功能的恢复创造了有利条件。在脑梗死的病理过程中，氧化应激反应会导致炎症因子的释放，进一步加重神经细胞的损伤。头针治疗降低了炎症因子如IL-1β、TNF-α等的水平，抑制了炎症反应，从而间接减轻了自由基对神经细胞的损伤，促进了神经功能的恢复。相关性分析结果也进一步证实了自由基水平与神经功能之间的密切关系。SOD活性与神经功能评分呈显著负相关，MDA含量与神经功能评分呈显著正相关，这表明随着脑组织中自由基水平的改善，神经功能也随之得到改善。头针治疗通过调节自由基水平，有效地促进了脑梗死大鼠神经功能的恢复，为头针治疗脑梗死提供了重要的理论依据。4.4研究结果的临床意义本研究结果对于临床治疗脑梗死具有重要的指导意义，尤其是在头针治疗的时机选择和疗程确定方面。在头针治疗时机选择上，本研究中头针治疗组在术后24小时开始进行头针治疗，从术后3天起神经功能评分开始低于模型组，且随着时间推移，神经功能改善愈发明显。这提示在脑梗死患者生命体征平稳，病情未再进展，且不影响临床急救的情况下，尽早进行头针治疗可能更有利于神经功能的恢复。众多临床研究也支持这一观点，有研究对急性脑梗死患者进行观察，发现发病后6小时内开始头针治疗的患者，其运动功能障碍、生存能力、日常生活质量的改善情况明显优于发病后24小时或更晚开始治疗的患者。但也有研究指出，在脑梗死发生后的2周内，由于大脑局部病灶血流量减少，呈缺血状态，自主调控能力降低，此时过早进行针刺可能会引发“盗血”现象，加重病灶区域的缺血。虽然本研究中未观察到类似现象，但在临床应用中仍需谨慎评估患者的具体情况，权衡头针治疗的利弊。在实际临床操作中，对于脑梗死患者，应在发病后尽快评估其病情，在确保安全的前提下，尽可能早地介入头针治疗。例如，对于一些轻度脑梗死患者，在发病后数小时内，若生命体征稳定，即可开始头针治疗；而对于病情较重、存在较多并发症的患者，则需要密切观察，待病情相对稳定后再进行头针治疗。在头针治疗疗程确定方面，本研究中头针治疗组连续治疗7天，在术后7天神经功能评分显著低于模型组，表明7天的治疗疗程已取得了较好的治疗效果。但这并不意味着7天就是最佳疗程，不同患者的病情严重程度、身体状况等存在差异，对治疗的反应也不尽相同。有临床研究表明，对于一些病情较轻的脑梗死患者，经过1-2周的头针治疗，神经功能即可得到明显改善；而对于病情较重的患者，可能需要更长时间的治疗，如3-4周甚至更长。在临床实践中，应根据患者的具体情况，制定个性化的治疗疗程。可以通过定期评估患者的神经功能恢复情况，如采用Fugl-Meyer评估量表、改良Barthel指数等进行评分，来判断治疗效果，决定是否需要延长治疗疗程。对于神经功能恢复较慢的患者，可适当延长头针治疗的时间，增加治疗次数，以进一步促进神经功能的恢复；而对于神经功能恢复较好的患者，则可在达到一定治疗效果后，逐渐减少治疗次数，进行巩固治疗。4.5研究的局限性与展望本研究在探究头针对脑梗死大鼠脑组织中自由基水平影响和神经功能相关性方面取得了一定成果，但仍存在一些局限性。在样本量方面，本研究每组仅纳入20只SD大鼠，样本量相对较小，可能导致研究结果的代表性不足，无法全面准确地反映头针治疗的效果和机制。在后续研究中，应适当扩大样本量，增加实验的重复性，以提高研究结果的可靠性和普适性。实验周期较短也是本研究的一个局限。本研究中头针治疗仅持续了7天，对于脑梗死这种复杂的疾病，可能无法完全观察到头针治疗的长期效果以及对神经功能恢复的持续影响。未来研究可以延长实验周期，观察头针治疗在脑梗死恢复期和后遗症期对神经功能的影响，进一步明确头针治疗的最佳疗程和治疗时机。在研究指标方面，虽然本研究检测了神经功能评分、脑组织自由基水平以及炎症因子、细胞凋亡等相关指标，但仍不够全面。脑梗死的病理生理过程涉及多个方面，未来研究可以进一步拓展研究指标，如检测神经递质、神经营养因子、信号通路相关蛋白等，从多个角度深入探究头针治疗的作用机制。此外，本研究仅采用了单一的头针治疗方法，未来可以尝试不同的头针针刺手法、穴位组合以及与其他治疗方法（如药物治疗、康复治疗等）联合应用，以探索更有效的治疗方案。未来研究方向可以聚焦于多靶点研究。脑梗死的病理生理过程复杂，涉及多个靶点和信号通路。头针治疗可能通过多个靶点发挥作用，未来研究可以深入探究头针治疗对多个靶点的调节作用，以及这些靶点之间的相互关系，从而更全面地揭示头针治疗的作用机制。临床验证也是未来研究的重要方向。虽然本研究在动物实验中取得了一定成果，但动物实验与人体存在差异，需要进一步开展临床研究，验证头针治疗对脑梗死患者脑组织中自由基水平的影响以及与神经功能的相关性，为头针治疗在临床上的广泛应用提供更有力的证据。通过不断完善研究方法和拓展研究方向，有望进一步揭示头针治疗脑梗死的作用机制，为脑梗死的治疗提供更有效的方法和策略。五、结论5.1研究的主要发现本研究通过建立脑梗死大鼠模型，深入探究了头针对脑梗死大鼠脑组织中自由基水平的影响以及与神经功能的相关性。研究结果表明，头针治疗能够有效促进脑梗死大鼠神经功能的恢复，降低神经功能评分。在术后3天和7天，头针治疗组大鼠的神经功能评分显著低于模型组，这表明头针治疗在脑梗死的恢复过程中发挥了积极作用。在脑组织自由基水平方面，头针治疗可显著提高脑梗死大鼠脑组织中SOD活性，降低MDA含量，有效调节自由基水平。模型组大鼠脑组织中SOD活性显著低于假手术组，MDA含量显著高于假手术组，而头针治疗组与模型组相比，SOD活性显著升高，MDA含量显著降低。这说明头针治疗能够改善脑梗死大鼠脑组织中的氧化应激状态，增强抗氧化能力，抑制脂质过氧化反应。相关性分析结果显示，脑组织中SOD活性与神经功能评分呈显著负相关，MDA含量与神经功能评分呈显著正相关。这进一步证实了自由基水平与神经功能之间存在紧密联系，头针治疗通过调节自由基水平，对脑梗死大鼠神经功能的恢复起到了重要的促进作用。5.2研究的创新点与贡献本研究在头针治疗脑梗死的机制研究方面具有一定的创新点。以往关于头针治疗脑梗死的研究多集中在对神经功能恢复的观察以及对脑部血液循环的影响等方面，而本研究首次深入探究了头针对脑梗死大鼠脑组织中自由基水平的影响，并分析了其与神经功能的相关性。通过检测脑组织中自由基水平相关指标如SOD活性、MDA含量，以及神经功能评分等，从氧化应激和神经功能两个关键角度出发，揭示了头针治疗脑梗死的新机制，为头针治疗脑梗死的作用机制研究提供了新的视角。本研究结果为临床治疗脑梗死提供了重要的理论依据。明确了头针治疗能够有效调节脑梗死大鼠脑组织中的自由基水平，促进神经功能的恢复。这一发现有助于临床医生更好地理解头针治疗脑梗死的作用原理，从而更加科学、合理地应用头针治疗脑梗死患者。临床医生可以根据本研究结果，优化头针治疗方案，包括选择合适的治疗时机、穴位和针刺手法等，以提高治疗效果，为脑梗死患者的康复提供更有效的治疗手段。在治疗方案的优化方面，本研究也做出了积极的探索。通过对不同时间点头针治疗效果的观察，发现早期介入头针治疗能够更早地促进神经功能的恢复。这为临床确定头针治疗的最佳时机提供了实验依据，有助于临床医生制定更加个性化的治疗方案。研究中还探讨了头针治疗的疗程，为临床确定合理的治疗疗程提供了参考。这些研究结果对于提高脑梗死的治疗效果，降低患者的致残率，改善患者的生活质量具有重要的指导意义。本研究在头针治疗脑梗死的机制研究和临床应用方面都具有一定的创新和贡献，为头针治疗脑梗死的进一步研究和临床推广应用奠定了坚实的基础。5.3对未来研究的建议未来研究可从多方面深入探究头针治疗脑梗死的机制，为临床治疗提供更坚实的理论基础。在分子机制研究层面，应进一步探索头针治疗对脑梗死相关信号通路的影响。如深入研究头针刺激是否通过激活磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）信号通路，调节神经细胞的存活、增殖和分化，从而促进神经功能的恢复。PI3K/Akt信号通路在细胞存活、代谢和生长等过程中发挥着关键作用，激活该信号通路可抑制细胞凋亡，促进神经细胞的修复和再生。研究头针治疗对丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号通路的影响也至关重要。MAPK信号通路参与细胞的增殖、分化、凋亡和应激反应等过程，在脑梗死的病理生理过程中，该信号通路的异常激活与神经细胞的损伤和死亡密切相关。头针治疗可能通过调节MAPK信号通路的活性，减轻神经细胞的损伤，促进神经功能的恢复。还需研究头针治疗对微小RNA（miRNA）表达谱的影响。miRNA是一类内源性非编码小分子RNA，可通过与靶mRNA的互补配对结合，抑制mRNA的翻译过程或促进其降解，从而在基因表达调控中发挥重要作用。在脑梗死中，miRNA的表达异常参与了神经细胞的凋亡、炎症反应、血管生成等病理生理过程。头针治疗可能通过调节miRNA的表达，影响相关基因的表达，进而发挥治疗作用。在优化治疗方案方面，应深入研究不同头针针刺手法的疗效差异。目前临床上常用的头针针刺手法包括捻转补泻手法、提插补泻手法等，但不同手法对脑梗死患者的治疗效果可能存在差异。未来研究可设计严格的对照实验，比较不同针刺手法对脑梗死患者神经功能恢复、脑组织自由基水平等指标的影响，筛选出最有效的针刺手法。还可探讨头针与其他治疗方法联合应用的效果。如头针与药物治疗联合，研究头针与抗血小板药物、神经保护剂等联合使用时，是否能增强药物的疗效，减少药物的副作用。头针与康复治疗联合也是未来研究的重要方向。康复治疗是脑梗死患者恢复神经功能的重要手段，将头针与康复训练相结合，如在康复训练前、中、后进行头针治疗，观察其对患者神经功能恢复的协同作用。可采用运动康复训练、作业疗法、言语康复训练等与头针联合，通过多维度的治疗手段，提高脑梗死患者的康复效果。在联合治疗过程中，需注意治疗的顺序、时间间隔等因素，以达到最佳的治疗效果。六、参考文献[1]TuWJ,ChaoBH,MaL,etal.Case-fatality,disabilityandrecurrenceratesafterfirst-everstroke:astudyfrombigdataobservatoryplatformforstrokeofChina[J].BrainResBull,2021,175:130-135.[2]KrishnamurthiRV,IkedaT,FeiginVL.Global,regionalandcountry-specificburdenofischaemicstroke,intracerebralhaemorrhageandsubarachnoidhaemorrhage:asystematicanalysisoftheglobalburdenofdiseasestudy2017[J].Neuroepidemiology,2020,54(2):171-179.[3]VoetS,PrinzM,vanLooG.Microgliaincentralnervoussysteminflammationandmultiplesclerosispathology[J].TrendsMolMed,2019,25(2):112-123.[4]邹品衡，陈添果，胡康，等。过表达miR-27a对急性脑梗死大鼠海马神经元损伤的影响及其机制[J].中国老年学杂志，2022,42(17):4307-4311.[5]姚志成，那里，宋虓福，等。益生菌对调节脑梗死后大鼠运动功能的机制研究[J].中国微生态学杂志，2024,36(2):163-167.[6]王琳，徐倩，王明圣。虾青素预处理对大鼠急性脑梗死神经功能的保护作用及机制研究[J].中国急救医学，2019,39(S1):138-139.[7]刘克洪，李景琦，高坚。普拉格雷干预对脑梗死大鼠神经功能的影响及可能机制[J].中国老年学杂志，2017,37(06):1343-1345.[8]成汝梅。头针治疗脑梗死即时疗效的观察[J].针灸临床杂志，2007,(11):6-7.[9]李立，张红星，周利，等。头针治疗对脑梗死所致血管性痴呆的随机对照临床试验[J].中西医结合研究，2010,2(01):22-25.[10]陈洪琳，汪军，傅勤慧，等。头针在脑梗死早期运用对上肢运动功能的疗效观察[J].中外医学研究，2017,15(25):150-152.[11]王晓娟，余华峰。自由基与脑缺血再灌注损伤[J].国外医学老年医学分册，2001,22(1):17-19.[12]LekerRR,TeichnerA,OvadiaH,etal.Expressionofendothelialnitricoxidesynthaseintheischemicpenumbra:relationshiptoexpressionofneuronalnitricoxidesynthaseandvascularendothelialgrowthfactor[J].BrainRes,2001,909(1-2):1-7.[13]于新。脑损伤和脑水肿的氧自由基作用和超氧化物歧化酶的治疗作用[J].国外医学神经病学神经外科学分册，1994,21(3):128-131.[14]NiwaM,InaoS,TakayasuM,etal.Timecourseofexpressionofthreenitricoxidesynthaseisoformsaftertransientmiddlecerebralarteryocclusioninrats[J].NeurdMedChir,2001,41(2).[15]Amin-HanjaniS,StaglianoNE,YamadaM,etal.Mevastatin,anHMG-CoAreduetaseinhibitor,reducesstrokedamageandupregulatesendothelialnitricoxidesynthaseinmice[J].Stroke,2001,32(4):980-986.[16]GeyKF,StahelinHB,EieholzerM.Poorplasmastatusofcaroteneanddiseaseandstroke:baselprop~tivestudy.[2]KrishnamurthiRV,IkedaT,FeiginVL.Global,regionalandcountry-specificburdenofischaemicstroke,intracerebralhaemorrhageandsubarachnoidhaemorrhage:asystematicanalysisoftheglobalburdenofdiseasestudy2017[J].Neuroepidemiology,2020,54(2):171-179.[3]VoetS,PrinzM,vanLooG.Microgliaincentralnervoussysteminflammationandmultiplesclerosispathology[J].TrendsMolMed,2019,25(2):112-123.[4]邹品衡，陈添果，胡康，等。过表达miR-27a对急性脑梗死大鼠海马神经元损伤的影响及其机制[J].中国老年学杂志，2022,42(17):4307-4311.[5]姚志成，那里，宋虓福，等。益生菌对调节脑梗死后大鼠运动功能的机制研究[J].中国微生态学杂志，2024,36(2):163-167.[6]王琳，徐倩，王明圣。虾青素预处理对大鼠急性脑梗死神经功能的保护作用及机制研究[J].中国急救医学，2019,39(S1):138-139.[7]刘克洪，李景琦，高坚。普拉格雷干预对脑梗死大鼠神经功能的影响及可能机制[J].中国老年学杂志，2017,37(06):1343-1345.[8]成汝梅。头针治疗脑梗死即时疗效的观察[J].针灸临床杂志，2007,(11):6-7.[9]李立，张红星，周利，等。头针治疗对脑梗死所致血管性痴呆的随机对照临床试验[J].中西医结合研究，2010,2(01):22-25.[10]陈洪琳，汪军，傅勤慧，等。头针在脑梗死早期运用对上肢运动功能的疗效观察[J].中外医学研究，2017,15(25):150-152.[11]王晓娟，余华峰。自由基与脑缺血再灌注损伤[J].国外医学老年医学分册，2001,22(1):17-19.[12]LekerRR,TeichnerA,OvadiaH,etal.Expressionofendothelialnitricoxidesynthaseintheischemicpenumbra:relationshiptoexpressionofneuronalnitricoxidesynthaseandvascularendothelialgrowthfactor[J].BrainRes,2001,909(1-2):1-7.[13]于新。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