医学检验专业毕业实习操作手册

医学检验专业毕业实习操作手册引言医学检验专业毕业实习是衔接理论学习与临床实践的关键环节，旨在通过系统性实践，提升检验操作技能、临床思维能力与职业素养。本手册围绕实习全流程，从前期准备、科室实践、质量控制到职业发展，提供专业、实用的操作指引，助力实习生完成角色转变，为职业发展奠定基础。一、实习前准备（一）知识与技能储备复习《临床检验基础》《临床生物化学检验》《临床免疫学检验》《临床微生物学检验》等核心课程，重点梳理检验项目的原理、操作流程及临床意义。建议整理常见检验项目的参考区间与干扰因素（如血糖检测受饮食、药物影响，血常规结果需结合患者生理状态分析），为实践操作建立理论支撑。（二）物资与证件准备证件类：携带实习证明、健康体检报告（含传染病筛查）、个人证件复印件。工具类：准备实验记录本（记录操作要点、典型案例）、中性笔（避免实验记录晕染）、便携专业书籍（如《临床检验操作规程》）。防护类：提前熟悉生物安全要求，准备符合科室规范的工作服、手套、口罩（必要时备护目镜）。（三）心态与角色转变从“学生”转变为“准检验师”，树立责任意识（检验结果直接影响临床诊断）。主动向带教老师请教，保持谦逊态度；同时培养独立思考能力，遇疑问先查阅科室SOP文件或专业资料，再与老师沟通验证。二、各科室实习核心要点（一）临床检验基础（临检）科室1.血液检验核心操作：血常规（血细胞分析仪操作）、血涂片制备与染色（瑞氏-姬姆萨染色）、凝血功能检测（凝血仪操作）。注意事项：静脉采血后立即颠倒混匀（抗凝管需混匀8~10次，避免凝块）；血涂片制备时控制推片角度（30°~45°）与速度，保证细胞分布均匀；凝血标本采集后30分钟内离心，避免纤维蛋白析出。2.体液检验核心操作：尿液干化学分析、尿沉渣镜检、粪便常规及隐血试验、脑脊液/胸腹水常规检测。注意事项：尿液标本采集前指导患者清洁尿道口（女性避免阴道分泌物污染），采集中段尿；粪便标本挑取异常部分（如脓血、黏液）送检；脑脊液标本采集后立即送检，避免细胞溶解影响计数。（二）生物化学检验科室1.仪器操作与维护熟悉全自动生化仪操作流程：标本加载、试剂添加、参数设置（反应温度、时间）。每日开机后进行光路校准、试剂空白检测，每周清洁仪器管路、比色杯。校准与质控：使用配套校准品每月校准，每日开展室内质控（至少2个水平），绘制Levey-Jennings质控图；失控时分析原因（如试剂失效、仪器故障），采取纠正措施（重新校准、更换试剂）。2.项目检测要点肝功能检测（ALT、AST、胆红素）：标本溶血会导致ALT、AST假性升高，需询问患者溶血史或重新采集；血糖检测需空腹标本，采集后1小时内分离血清，避免糖酵解导致结果偏低。（三）免疫学检验科室1.血清学检测核心操作：酶联免疫吸附试验（ELISA，如乙肝五项、HIV抗体检测）、化学发光免疫分析（如甲功、肿瘤标志物检测）。注意事项：ELISA操作严格控制孵育时间（如37℃30分钟），洗板时保证孔内无残留液体；化学发光试剂需2~8℃保存，复溶后避免反复冻融；结果判读时结合灰区（cut-off值附近）标本复检（换试剂或方法学验证）。2.自身抗体检测熟悉间接免疫荧光法（如抗核抗体检测）：标本稀释、加样、孵育、洗涤、封片后，显微镜下观察荧光模型（均质型、斑点型等）。注意底物片-20℃避光保存，加样时避免交叉污染。（四）微生物学检验科室1.标本处理与接种痰标本接种前革兰染色，判断是否为合格标本（鳞状上皮细胞＜10个/低倍镜，白细胞＞25个/低倍镜）；尿液标本用定量接种环（如1μl）接种，计算菌落形成单位（CFU）。培养基选择：血培养标本接种于需氧/厌氧血培养瓶，脑脊液接种于巧克力琼脂和血琼脂；粪便标本接种SS琼脂、MAC琼脂等选择性培养基。2.鉴定与药敏细菌鉴定：通过形态学（菌落特征、革兰染色）、生化试验（如API鉴定系统）、质谱分析（MALDI-TOF）明确菌种；真菌鉴定需观察菌丝、孢子形态，结合生化试验（如糖发酵试验）。药敏试验：采用纸片扩散法（K-B法）或自动化药敏仪，严格遵循CLSI标准；药敏纸片-20℃保存，使用前平衡至室温，结果判读结合折点（敏感、中介、耐药）。（五）输血科（血库）核心操作：血型鉴定（ABO、RhD）、交叉配血（盐水法、抗人球蛋白法）、不规则抗体筛查。注意事项：标本采集时双人核对患者信息（姓名、住院号、血型史）；交叉配血前确认患者血型无误，配血标本与输血申请单信息一致；发血时检查血袋有无破损、溶血，双人核对血型、血量、有效期。三、操作规范与质量控制（一）标本采集与管理1.患者准备告知患者检验项目注意事项：如血脂检测需空腹12小时，激素类检测避免经期（女性），细菌培养标本采集前停用抗生素（至少24小时）。2.标本采集容器选择：血常规用EDTA-K₂抗凝管，凝血功能用枸橼酸钠管（9:1比例），生化用无抗凝血清管；尿液采集用无菌带盖容器，粪便采集用专用纸盒。采集量：成人静脉采血一般2~5ml（依项目调整），儿童减量；脑脊液采集3管（常规、生化、培养），每管1~2ml。3.标本运输与保存常温运输：血常规、生化标本（2小时内送检）；冷藏运输：胰岛素、甲状腺激素等标本（2~8℃）；冷冻运输：病毒核酸检测标本（-20℃或-80℃）。保存期限：血清标本4℃可存3天，-20℃可存1个月；微生物标本需立即接种，否则4℃保存不超过2小时。（二）仪器操作与维护每日操作前：检查仪器状态（电源、试剂余量、废液桶容量），进行开机自检（如血细胞分析仪堵孔检测）。操作中：严格按SOP设置参数（反应体积、波长），标本加载时避免气泡进入；出现报警（如“试剂不足”“标本凝固”）时，暂停操作并排查原因。维护与校准：每周清洁仪器外表面、擦拭光学部件；每月校准（如生化仪线性校准），每年参与厂家维护（更换泵管等关键部件）。（三）实验记录与报告原始记录：手写记录实验关键信息（标本编号、采集时间、操作人、仪器参数、质控结果），字迹清晰，不得涂改（如需修改，划双线并签名）。电子记录：录入LIS系统时核对标本信息与申请单一致，结果异常时标注“复查”或“联系临床”，并记录复查结果。（四）质量控制体系室内质控：每批实验带质控品（如生化项目高、中、低浓度质控），绘制质控图，分析失控原因（试剂批号更换、仪器校准失效等），采取纠正措施（重新检测、更换试剂）。室间质评：按时参加国家/省级室间质评，对回报结果分析，总结本实验室与其他实验室的差异（如方法学不同导致的结果偏差），优化操作流程。四、报告处理与临床沟通（一）报告生成与审核结果录入：将仪器检测结果准确录入LIS系统，注意单位转换（如尿素氮mg/dl与mmol/L换算），异常结果用“↑”“↓”标注。审核要点：结合患者信息（年龄、性别、诊断）判断结果合理性（如儿童ALT参考范围低于成人，妊娠女性白细胞生理性升高）；临界值结果（如肿瘤标志物略升高）建议临床动态观察或复查。（二）临床沟通与咨询主动沟通：发现危急值（如血钾＞6.5mmol/L、血小板＜20×10⁹/L）时，立即电话通知临床科室，记录通知时间、接收人。咨询答疑：临床医护询问检验项目干扰因素（如“患者服用维生素C对尿糖检测的影响”）时，查阅资料或请教带教老师，给出专业答复（如维生素C可导致尿糖假阴性）。五、职业素养与安全防护（一）职业素养培养沟通能力：与患者沟通时语气温和，解释检验目的（如“留取晨尿是为了更准确检测尿蛋白”）；与医护沟通时简洁清晰，汇报检验异常结果的临床意义（如“患者肌钙蛋白升高，提示急性心梗可能”）。团队协作：参与科室值班（如急诊检验），与同事分工协作（如一人操作仪器，一人审核报告），遇问题共同解决（如标本量大时协助分拣）。（二）生物安全防护个人防护：进入实验室穿实验服、戴手套、口罩，必要时戴护目镜（处理强腐蚀性试剂时）；接触血液、体液标本后立即洗手，避免揉眼、摸口鼻。废弃物处理：锐器（针头、玻片）放入专用锐器盒，满3/4时封闭处理；感染性标本（血培养瓶、痰标本）高压灭菌后丢弃；化学废液（染色液、试剂废液）分类收集，交由专业机构处理。（三）职业暴露处理锐器伤：立即挤出伤口血液，肥皂水冲洗，碘伏消毒，报告带教老师，填写职业暴露登记表，必要时行乙肝、HIV等检测（依暴露源情况）。化学灼伤：皮肤接触强酸/碱时，立即大量清水冲洗（至少15分钟），再用中和剂（酸灼伤用碳酸氢钠溶液，碱灼伤用硼酸溶液）处理；眼睛灼伤时，用洗眼器冲洗，尽快就医。六、常见问题与应对策略（一）标本不合格原因：标本溶血（采血操作不当）、凝固（未及时混匀）、量不足（儿童采血困难）、污染（尿液标本混入白带）。应对：与临床沟通重新采集，说明不合格原因（如“标本溶血会导致钾离子结果偏高，需重新采血”），指导患者正确留取标本（如“留尿前清洁尿道口，留取中段尿”）。（二）仪器故障现象：仪器报警（如“吸样针堵塞”“试剂空白过高”）、结果异常（如所有标本ALT结果为0）。应对：立即停止操作，查看仪器手册排查故障（如吸样针堵塞可拆洗针具）；无法解决时联系工程师，同时用备用仪器检测标本（如急诊标本用便携式分析仪），记录故障时间、处理过程。（三）结果异常与临床不符原因：标本错误（张冠李戴）、干扰因素（患者服用抗生素导致细菌培养阴性）、仪器误差（生化仪光路偏移）。应对：复查标本（重新检测或换仪器检测），核对标本信息（姓名、住院号），联系临床了解患者情况（用药史、症状），必要时建议重新采集标本或更换检验方法（如ELISA检测HIV抗体阳性后用WB确证）。七、实习总结与职业规划（一）实习总结方法操作日志：每日记录操作项目、问题及解决方法（如“今日处理凝血标本凝固，原因是未及时混匀，改进方法：采血后立即颠倒8次”）。案例分析：整理典型案例（如“患者血培养检出金黄色葡萄球菌，结合药敏建议用万古霉素，临床反馈治疗有效”），分析检验结果对诊断、治疗的指导价值。（二）职业规划建议就业方向：医院检验科（侧重临床检验）、第三方检验机构（侧重批量检测）、IV