T-HSPP 0016-2024 含多肽微生物肥料

ICS65.020.20

CCSB15

团体标准

T/HSPP0016—2024

含多肽微生物肥料

Polypeptide-containingmicrobialfertilizer

（发布稿）

2024-04-30发布2024-05-30实施

T/HSPP0016-2024

目次

前言..............................................................................1

1范围...........................................................................2

2规范性引用文件..................................................................2

3术语与定义......................................................................3

4技术要求........................................................................3

5测定方法........................................................................4

6检测判定规则....................................................................6

7取样...........................................................................7

8标识和质量证明书...............................................................8

9包装、运输与贮存...............................................................9

附录A.....................................................................................................................................................10

T/HSPP0016-2024

,■1l.X■

刖百

本文件按GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》

的规定起草。

本文件的某些内容可能涉及专利，本文件的发布机构不承担识别专利的责任。

本文件由湖北茂盛生物有限公司提出。

本文件由湖北省植物保护学会归口。

本文件起草单位：湖北茂盛生物有限公司、河南心连心化学工业集团股份有限公司、湖

北省黄麦岭化工研究院有限公司、四川金象赛瑞化工股份有限公司、湖北宜化磷化工有限公

司、华强化工集团股份有限公司、湖北鄂中生态工程股份有限公司、湖北祥云（集团）化工

股份有限公司、湖北宜施壮农业科技有限公司、武汉市沃农肥业有限公司、云南农家乐农业

有限公司、湖南金叶众望科技股份有限公司、沃达农业科技股份有限公司、武汉光华时代生

物科技有限公司、湖北绿天地生物科技有限公司、武汉绿之缘生物科技有限公司、慕恩（广

州）生物科技有限公司、湖北永壮生态科技有限公司、亵阳维恩生物科技有限公司、湖北盛

科生物工程有限公司、河南曹氏天正生物技术有限公司、濮阳县大志同创农业科技有限公司、

山西联新生物科技有限公司。

本文件主要起草人：周义新、李伟、刘锐杰、张洁、梅亮贤、刘东伟、曾茂、陈刚、丁

天鹏、望钺骞、郭卫红、汪波、常云、艾新帅、毛晨鹏、王静、刘祖锋、于庆梅、程艳、万

国华、杨章福、张小卓、易百科、江涛、高波、段锦波、曾庆茁、宋巍、林昱晓、万顺、张

金兰、张健、金漫、王科晶、张世柏、王瑞兆、卢剑、郑文杰、范志刚、王强、曹智、米娇

娇、梁远亮、廉宏伟。

T/HSPP0016-2024

NY"1847微生物肥料生产菌株评定方法

NY/T1975水溶肥游离氨基酸的含最测定

NY"1978肥料汞、冲、镉、铅、铭、锲含量的测定

HG/T2843化肥产品化学分析常用标准滴定溶液、标准溶液、试剂溶液和指示剂溶液

T/CPFIA0004多肽复合肥料

JJG1064氨基酸分析仪检定规程

3术语与定义

下列定义及术语适用于本文件。

3.1多肽及来源Polypeptideanditssource

木文中对多肽、植物源多肽、动物源多肽、微生物代谢多肽定义与T/CPFIA0004《多

肽复合肥料》定义一致。

3.2功能菌Functionalbacteria

本文所指功能菌为具有固氮、解磷、解钾等作用的菌种-

3.3含多肽微生物肥Polypeptide-containingmicrobialfertilizer

含多肽、中量元素、微量元素、微生物菌的肥料。

4技术要求

4.1外观

产品可为粒状、条状或片状产品，需无明显可见的机械杂质，也可为液体。

4.2技术指标

表1含多肽微生物肥料技术指标（固体型）

项目限量指标

总养分(N+P2O5+K2O),%>30

中微量元素，%>0.1

3

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含有效活菌数亿/g>1

含水率■%<30

多肽含量•%>0.2

杂菌率•%<30

pH值5.5-8.5

保质期，月>6

表2含多肽微生物肥料技术指标（液体型）

项目限量指标

总养分(N+P2O5+K2O)，g/L<25

含有效活菌数,亿/mL>0.5

多肽含量，g/L>2

pH值5.5-S.5

杂菌率,%<15

保质期，月>3

4.3无害化指标

表3无害化指标

项目限量指标

蛔虫卵死亡率,%>95

粪大肠菌群数，个/g（mL）<100

珅（As）（以烘干基计），mg/kg<15

镉（Cd）（以烘干基计），mg/kg<3

铅（Pb）（以烘干基计），mg/kg<50

珞（Cr）（以烘干基计），mg/kg<150

汞（Hg）（以烘干基计），mg/kg<2

5测定方法

5.1一般规定

除外观与颗粒外，均需做两份料平行测定。本文所用试剂、溶剂和水。在未注明明确规格

与配制方法时，均应符合HG/T2843相关规定。

5.2外观

采用目测法测定，产品外观需无明显杂质。

4

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5.3总氮含量的测定

按GB/T8571的规定试样制备，按GB/T22923的规定执行。

5.4总磷含量的测定

按GB/T857I的规定试样制备，按GB/T22923的规定执行。

5.5总钾含量的测定

按GB/T8571的规定试样制备，按GB“22923的规定执行。

5.6铁、镒、铜、锌、硼'铝含量的测定

按GB/T8571的规定试样制备，按GB/T14540的规定执行检测。

5.7钙、镁、硫含量的测定

按GB/T857I的规定试样制备，按GBa19203规定执行检测。

5.8硅含量的测定

按GB/T8571的规定试样制备，按GB/T17518规定执行检测。

5.9有效活菌数的测定

依照GB/T20287执行，测定有效活菌数。

5.10氯含量的测定

按GB/T8571的规定试样制备，按GB/T24890执行检测。

5.11蛔虫死亡率的测定

依照GB“19524.2执行测定。

5.12粪大肠菌群数的测定

5

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按GB“19524.1的规定规定执行检测。

5.13多肽含量的检测

依照附录A执行检测。

5.14肥料碑、镉、铅、铭、汞、镶测定

依照NY/T1978执行测定。

6检测判定规则

6』检测类别及检验项目

产品检验分为出厂检验和形式检验。总养分含量、单一养分含量、多肽含量、水溶磷

占有效磷的百分率（适用时）、硝态氮含量（适用时）、水分、颗度、氯离子含量（适用

时）、中微量元素含量（适用时）为出厂检验项目。在出现以下情况时，需进行型式检

验：

1）正式生产后，如原材料、工艺有较大改变，可能影响产品质量指标时；

2）正常生产时，定期后累计到一定量后进行，缩二胭每六个月至少检验一次。有毒

有害物质需每年至少检测一次；

3）长期停产后恢复生产时；

4）政府监督管理荒门剔除型式检验要求时。

6.2组批

产品按批检测，以一天或两天的产量为一批，最大批量为l500To

6.3结果判定

本文件中产品质量指标合格判定，采用GB/T8170中的“修约值比较法”。

生产企业应按本文件要求进行出厂检验和型式检验c检验项目全部符合文件要求时，

判该批产品合格。

6

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生产企业进行的出厂检验或型式检验结果中如有一项指标不符合文件要求时，应重新

自同批次两倍量的包装容器中采样进行检测，重检结果若有•项不符合本文件要求，则判

断该批次产品不合格。

7取样

7.1合并样品取样

7.1.1袋装产品

7.1.1.1依袋确样

每批产品袋数不超过512袋时，按表3确定取样袋数；每批产品总袋数超过＞12时,

按式（1）计算结果确定最少取样袋数，如遇小数，则进为整数。

n=3xVN式（1）

式中：

n代表最少取样个数,

N代表每批样总个数,

表4最少取样数量的碓定

每批产品总袋数（个）最少取样袋数（个）每批产品总袋数（个）最少取样袋数（个）

1-10全部182-21618

11-4911217-25419

50-6412255-2962()

65-8113297-34321

82-10114344-39422

102-12515395-45023

126-15116451-51224

152-18117--

7.1.1.2取样方法及取样规格

包装规格不大于50kg时，按上表3或式（I）计算并确定取样袋数，随机抽取一定袋

数，用取样器沿每袋最长对角线插入至3/4处取样，每袋取样数不少于100g,所有抽取袋数

样需进行混合，单批样采集总量应不少于2kg。当包装规格大于50kg时，按表3或式

7

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（1）计算并确定取样袋数，随机抽取一定袋数，用取样器沿每袋垂直向下、向左、向右三

个方向，插入至3/4处取样，每袋取样数不少于300g,所有抽取袋数样进行混合，单批样采

集总量应不少于2kgo

7.1.2散装产品

按GB/T6679规定执行。

7.2样品缩分

将每袋采取的样进行合并并均匀混合，用缩分器或人工四分法对混合样缩分，混样缩分

至1kg左右，再将其一分为二，分别分装入干净、干燥的具有磨口塞玻璃瓶或塑料瓶中，密

封并贴好标签，一份样品用于检测，另一份样品作为留存用，保存时间应在两个月以上。标

签内容需标明产品公司名称，产品名称、产品批号、抽样口期、地点及抽样人姓名。

8标识和质量证明书

8.1含氯标注

氯离子的质量分数大于3.0%的产品，应根据4.2要求的“氯离子的质量分数”，在包

装容器的显著位置用汉字明确标注“含氯（低氯）”“含氯（中氯）”或“含氯（高氯）%

而

不是标注“氯皿含C1”或等。标明“含氯”的产品，包装容器上不应有忌氯作物的图片，

不应有“硫酸钾（型）"硝酸钾（型）"硫基”“硝硫基”等容易导致用户误认为产品不含氯的

标识。有“含氯（高氯）”标识的产品应在包装容器上标明“氯含量较高，使用不当会对作物

和土壤造成伤害'’的瞥示语。

8.2产品包装标注

产品外包装容器上应有使用注意事项、警示语等。生产口期或批号、合格证、使用说

明等部分产品信息可使用易于识别的二维码或条形码标注。每袋净含量应标明单一数值，

如50kgo

8.3产品养分标注

8

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养分含量的标注应以总物料为基础标注，不得将包装容器内的物料拆分分别标注。产品

8

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中应标明主要组成成分，涉及增效物质养分需要标明具体作用。

8.4产品合格证标注

每批检验合格的出厂产品应附有质量证明书，其内容包括：生产企业名称、地址、产

品名称、批号或生产日期、总养分、配合式或主要养分含量、氯离子含量、缩二版含量、

本文件号和法律法规规定，

9包装、运输与贮存

产品用符合GB/T8569规定的材料进行包装，包装规格为1000kg、50kg、40kg、

25kg>20kg、10kg,每袋净含量允许范围分别为(1000±10)kg、(50±0.5)kg>(40±0.4)kg、

(25±0.25)kg、(20±0.2)kg、(10+0.1)kg,每批产品平均每袋净含量不得低于50.0kg、

40.0kg>25.0kg、20.0kg.10.0kg。也可使用供需双方合同约定的其他包装规格。

在标明的每袋净含量范围内的产品中有添加物时，应与原物料混合均匀，不应以小包

装形式放入包装袋中。

在符合GB/T8569规定的前提下，宜使用经济实用型包装。

产品应贮存于阴凉干燥处，在运输过程中应防雨、防潮、防晒、防破裂.

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附录A

微生物肥料中多肽含量的测定

A.I原理

试样用IEC氨基酸分析法测定游离氨基酸总含量

试样用三氯乙酸预处理，去除沉淀大分子蛋白质，提取多肽氨基酸和游离氨基酸，然后

用盐酸溶液全部水解得到酸溶蛋白，用【EC氨基酸分析法测定酸溶蛋白含量。

多肽即为酸溶蛋白含最与游离氨基酸总含量的差值,

A.2试剂

实验用水应符合GB/T6682中级用水的规格。使用试剂除特殊规定外，均为分析纯。

A.2.1柠檬酸钠（NasC6H5072H2。）。

A.2.2盐酸（优级纯）。

A.2.3乙二胺四乙酸钠溶液：IOg/L。

A.2.4盐酸水解液（6mol/L）：将500mL盐酸与500mL水混合，力口1g苯酚，混匀。

A.2.5氢氧化钠溶液（lmol/L）:称取氢氧化钠40g于烧杯中，加水溶解，再定容至1000mL。

A.2.6磺基水杨酸溶液（50g/L）:称取磺基水杨酸50g,水溶于烧杯后，定容至1000mL。

A.2.7三氯乙酸溶液（150g/L）：称取150g三氯乙酸，加水溶解并定容至1000mL,混匀。

A.2.8柠檬酸钠缓冲液|pH=2.2,c=0.2mol/L］：称取19.6g柠檬酸钠（A.2.1）,用700mL

水在烧杯中溶解，加入硫二甘醇5.0mL,苯酚1g,加入盐酸16.5mL,用盐酸（A24）与氢

氧化钠（A25）调节pH至2.2后，用水定容1000mL尹过滤。

A.2.9氨基酸标准储备溶液：天冬软酸、苏筑酸、丝氨酸、谷氨酸、脯氨酸、甘氨酸、丙氨

酸、胱氨酸、缀氨酸、甲疏氨酸、异亮氨酸、亮基酸、酪氨酸、苯丙筑酸、赖氨酸、组氨酸

和精氨酸共17种氨基酸，各组分浓度均为2.5Nmol/mL.应使用有证标准溶液。

A.2.10氨基酸标准工作溶液：准确移取2mL的氨基酸标准储备溶液（A.2.9）置于50mL容

量瓶中，以柠檬酸钠缓冲溶液（A.2.8）定容，各氨基酸组分浓度为100nmol/mL,用安液分

装密封，每支约1mL,在2C~8c下保存，有效期3个月。

A.2.H不同pH值和离子强度的柠檬酸钠缓冲溶液与曲三酮溶液：按照仪器说明书配制或购

买。

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A.2.12液氮。

A.3仪器与设备

A.3.1天平：感量0.1mg和0.01mgo

A.3.2氨基酸自动分析仪：具备阳离子交换柱、的三酮柱后衍生装置及570nm和440nm光

度检测器。

A.3.3离心机：转速不低于4000r/min。

A.3.4真空泵。

A.3.5喷灯。

A.3.6恒温干燥箱：温度可达110℃±2℃。

A37旋转蒸发器或浓缩器：可在室温至65℃间调温，控温精度±1℃,真空度可低至3.3x103

Pa(25mmHg)。

A.3.81000mL容量瓶

A.3.91000mL烧杯

A.4操作步骤

A.4.1试样的制备

固体样品经过多次缩分后，取出约100g,将其迅速研磨至全部通过0.25mm孔径筛，

混合均匀，置于洁净、干噪容器中。

A.4.2酸溶蛋白试样溶液的制备

称取试样5g,精确至0.001g,置于250mL具塞三角瓶中，在10℃〜35c条件下，准

确加入100mL三氯乙酸溶液,手动摇匀后,在150r/min振荡30min。静置10min,将上

层液倒入100mL离心管中，4000r/min离心5min,上清液作为试样提取液，如上清液存在

漂浮物，需过滤后再使用，

使用移液枪或移液管吸取提取液2mL,置于20mL安甑或水解管中，加3mL纯水，

再加入10mL盐酸水解溶液。置液氮中冷冻，使用真空泵抽真空至7Pa仁5、］(尸m门Hg)

后用喷灯封口或充氮气Imin后旋紧管盖。将安甑或水解管放在110℃±2℃恒温干燥箱中，

水解22h~24h。冷却，混匀，开管，过滤，用移液管精确吸取适量的滤液，置于旋转蒸发器

或浓缩器中，60c下抽真空蒸发至干，必要时，加少许水，重复蒸干1次~2次。加入5mL

柠檬酸钠缓冲溶液复溶，摇匀，过滤或离心，上清液待上机测定。

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注：当试样中含有金属元素时，则在“冷却，混匀，开管”后吸取水解液2mL,准确加入

10g/L的乙二胺四乙酸二钠溶液（A.2.3）2mL,混匀，然后按“过滤，用移液管精确吸取适

量的滤液……上清液待上机测定”进行操作。

A.4.3游离态氨基酸试样溶液的准备

称取试样2g~l（）g（精确到0.001g）,置于25（）mL容量瓶中。充分溶解后，加水至刻

度，混匀，放置过夜后吸取上清液（或过滤后吸取滤液）2mL于10mL离心管或试管中，准

去加入2mL磺基水杨酸溶液（A.2.6）,混匀，放置lh。准确加入ImLEDTA-Na溶液（A23）,

加入盐酸溶液（A.2.4）稀释100倍后的溶液1mL,混匀，离心45min。取上清液1mL,蒸

干。结合仪器最佳检测范围，适量加入柠檬酸缓冲液。

A.4.4酸溶蛋白的测定

（1）将氨基酸标准工作溶液（A28）注入氨基酸分析仪，（2）以不同pH值和离子强度

的柠檬酸钠缓冲溶液与苛三酮溶液（A.2.9）作为流动相和衍生剂，（3）按JJG1064氨基酸

分析仪检定规程的要求，调整输液系统、色谱柱、检测器及整机性能相关指标达到测定标准。

（4）注入制备好的试样溶液（A.4.2）和相应的氨基酸标准工作溶液（A28）进行测定，每

5个样品（即10个单样）为一组，组间插入氨基酸标准工作溶液（A.2.8）进行校准。以保

留时间定性