水生物检疫检验员年度评审考核试卷及答案

水生物检疫检验员年度评审考核试卷及答案一、单项选择题（每题1分，共30分。每题只有一个正确答案，请将正确选项字母填在括号内）1.根据《进境水生动物检疫管理办法》，下列哪类水生动物在入境时必须随附输出国官方签发的动物健康证书？A.观赏用锦鲤B.冷冻带鱼段C.盐渍鱿鱼筒D.干制海带答案：A2.某口岸现场查验发现一批进口活龙虾体表出现白斑、甲壳溃疡，镜检见大量丝状细菌，初步判定最可能的病原是：A.白斑综合征病毒（WSSV）B.哈维氏弧菌（V.harveyi）C.螯虾瘟真菌（Aphanomycesastaci）D.坏死性肝胰腺炎细菌（NHPB）答案：B3.依据OIE《水生动物卫生法典》，对“无特定病原（SPF）种群”进行认证时，必须连续监测的最短周期为：A.6个月B.12个月C.18个月D.24个月答案：D4.在PCR检测中，若阳性对照未出现预期条带，而阴性对照出现非特异条带，最可能的原因是：A.模板DNA降解B.引物二聚体污染C.Taq酶失活D.电泳缓冲液污染答案：B5.对进境活鲍实施隔离检疫时，官方要求的最低隔离期是：A.7天B.14天C.21天D.30天答案：C6.下列哪项不是进口冷冻水生动物产品必须标注的强制性内容：A.捕捞区域B.生产批次C.保质期D.捕捞船长姓名答案：D7.采用TCBS平板分离副溶血性弧菌时，最适培养温度为：A.15℃B.25℃C.37℃D.42℃答案：C8.某批进口冷冻南美白对虾检出硝基呋喃代谢物AOZ3.2μg/kg，根据我国限量标准，判定为：A.合格B.复检C.不合格D.监管放行答案：C9.在鱼类传染性造血器官坏死病（IHN）病毒分离试验中，最敏感的细胞系是：A.EPCB.CHSE214C.FHMD.RTG2答案：B10.对进境活水生动物实施临床检查时，若发现鱼体旋转游泳、急游后突然静止，应首先排查：A.病毒性神经坏死病（VNN）B.细菌性败血症C.寄生虫鳃病D.水体氨氮中毒答案：A11.依据《进出境动植物检疫法实施条例》，对擅自调离检疫隔离场所的行为，可处以：A.1000元以下罚款B.3000元以上3万元以下罚款C.5万元以上10万元以下罚款D.吊销许可证答案：B12.对一批出口锦鲤实施疱疹病毒（CyHV2）荧光PCR检测，若Ct值≤32且扩增曲线呈典型S型，则判定为：A.阴性B.可疑C.阳性D.需重复采样答案：C13.在采样统计中，若要求检出率≥95%，预期感染率2%，则最小采样量（95%置信水平）约为：A.30尾B.60尾C.90尾D.150尾答案：D14.下列关于“水生动物疫病区域化”描述正确的是：A.仅适用于出口国B.无需OIE认可C.可降低贸易壁垒D.以省为单位即可答案：C15.对进境活牡蛎实施麻痹性贝类毒素（PSP）检测，采用小鼠生物法，若一只20g小鼠在5min内死亡，则PSP含量约为：A.200MU/100gB.400MU/100gC.600MU/100gD.800MU/100g答案：B16.在鱼类链球菌病爆发调查中，最可靠的溯源分子标记是：A.16SrRNAB.sodA基因C.cps基因簇D.recA基因答案：C17.对进口冷冻三文鱼实施冷链查验时，若现场记录显示货舱温度12℃持续2h，应：A.直接放行B.限期整改C.退货或销毁D.降低等级销售答案：C18.依据《动物检疫管理办法》，进境水生动物隔离检疫期间，官方兽医巡查频率不得低于：A.每日1次B.每2日1次C.每周2次D.每周1次答案：A19.对虾白斑综合征病毒（WSSV）实时荧光PCR检测中，常用的内参基因是：A.βactinB.18SrRNAC.EF1αD.RPL8答案：A20.在进境水生动物检疫证书中，必须注明的“运输途中死亡率”上限为：A.1%B.2%C.5%D.10%答案：B21.下列哪项不是OIE规定必须通报的水生动物疫病：A.鲤春病毒血症（SVC）B.传染性皮下及造血器官坏死病（IHHNV）C.对虾黄头病（YHD）D.鱼虱病答案：D22.对出口金鱼实施检疫时，发现鱼体体表有白点、镜检见圆形虫体，具4核，应判定为：A.多子小瓜虫（Ichthyophthiriusmultifiliis）B.车轮虫（Trichodinaspp.）C.斜管虫（Chilodonellaspp.）D.指环虫（Dactylogyrusspp.）答案：A23.在采样过程中，若需检测病毒性病原，组织样品保存液最佳pH为：A.4.5B.6.0C.7.4D.9.0答案：C24.对进口冷冻墨鱼进行感官检验，若发现体表严重褐变、氨味强烈，挥发性盐基氮（TVBN）检测值应：A.≤15mg/100gB.≤25mg/100gC.≤35mg/100gD.＞35mg/100g答案：D25.依据《食品安全国家标准鲜、冻动物性水产品》（GB2733），组胺限量值为：A.10mg/100gB.20mg/100gC.30mg/100gD.50mg/100g答案：B26.对进境活海参实施检疫时，若发现体壁溃烂、排脏，应首先采样检测：A.灿烂弧菌（V.splendidus）B.假单胞菌（Pseudomonasspp.）C.霉菌（Lagenidiumspp.）D.寄生虫（Paravortexspp.）答案：A27.在PCR实验室分区管理中，扩增产物分析区相对样品制备区的压差应为：A.正压B.负压C.等压D.交替压答案：B28.对出口罗非鱼实施链球菌病监测，若采用ELISA检测血清抗体，判定阳性阈值为：A.P/N≥1.5B.P/N≥2.0C.P/N≥2.5D.P/N≥3.0答案：B29.在进境水生动物检疫风险分析中，最常用的定量评估模型是：A.决策树B.蒙特卡洛模拟C.德尔菲法D.故障树答案：B30.对一批进口冷冻鳕鱼进行标签审核，若标注“捕捞日期20231345”，应判定为：A.合格B.需整改C.不合格D.技术整改后放行答案：C二、多项选择题（每题2分，共20分。每题有两个或两个以上正确答案，多选、少选、错选均不得分）31.下列哪些属于OIE规定需通报的甲壳类疫病：A.白斑综合征（WSD）B.黄头病（YHD）C.桃拉综合征（TS）D.传染性皮下及造血器官坏死病（IHHNV）答案：ABCD32.对进境活鲍鱼实施检疫时，需重点关注的致病微生物包括：A.灿烂弧菌B.鲍疱疹病毒（HaHV1）C.马尔太虫（Marteliaspp.）D.派琴虫（Perkinsusspp.）答案：ABCD33.下列哪些情况会导致实时荧光PCR出现假阴性：A.引物探针降解B.模板DNA含抑制剂C.扩增仪光源老化D.阴性对照污染答案：ABC34.对出口鳗鱼实施检疫时，需检测的药物残留包括：A.孔雀石绿B.硝基呋喃C.氯霉素D.恩诺沙星答案：ABCD35.下列哪些属于水生动物检疫现场快速检测技术：A.胶体金免疫层析B.环介导等温扩增（LAMP）C.便携式荧光PCRD.酶联免疫斑点（ELISPOT）答案：ABC36.在采样方案设计中，影响样品代表性的因素有：A.群体大小B.预期感染率C.检测方法灵敏度D.运输温度答案：ABC37.对进口冷冻金枪鱼进行组胺检测，需采用的前处理方法包括：A.三氯乙酸提取B.正己烷脱脂C.丹磺酰氯衍生D.固相萃取净化答案：ACD38.下列哪些属于水生动物疫病区域化认证的核心要素：A.生物安全隔离B.官方监管体系C.监测与surveillancD.公共财政补偿答案：ABC39.对进境活水生动物实施临床检查时，需记录的环境参数有：A.水温B.溶解氧C.盐度D.氨氮答案：ABCD40.在PCR检测实验室质量控制中，属于外部质量评价（EQA）活动的是：A.能力验证B.实验室间比对C.盲样考核D.标准物质核查答案：ABC三、判断题（每题1分，共10分。正确打“√”，错误打“×”）41.白斑综合征病毒（WSSV）可感染所有十足目甲壳类动物。答案：√42.对进口冷冻水产品进行感官检验时，若发现轻微干耗，可直接判定不合格。答案：×43.实时荧光PCR的Ct值与初始模板量呈线性负相关。答案：√44.OIE规定，水生动物疫病监测可完全依赖被动监测数据。答案：×45.对进境活海参实施检疫时，必须检测麻痹性贝类毒素（PSP）。答案：×46.在PCR检测中，使用UNG酶可有效防止扩增产物污染。答案：√47.对出口金鱼实施检疫时，发现指环虫感染可直接放行，无需治疗。答案：×48.冷冻水产品中心温度必须≤18℃，任何时段均不允许波动。答案：×49.依据我国法规，进境水生动物隔离检疫期间，企业可擅自投喂药物。答案：×50.采用环介导等温扩增（LAMP）技术可在60min内完成病原检测。答案：√四、简答题（每题8分，共40分）51.简述进境活龙虾现场查验的关键步骤及注意事项。答案：（1）核查证书：核对输出国官方健康证书真伪、有效期、品种数量一致性；（2）包装标识：检查包装标签是否含学名、数量、养殖场编号、运输水温记录；（3）临床检查：观察群体活力、体表溃疡、断肢率、死亡率，统计运输死亡率；（4）环境参数：现场测定水温、盐度、溶解氧、氨氮，记录异常；（5）采样：按2%比例随机采样，优先选病态个体，分别取血淋巴、鳃、肝胰腺；（6）快速检测：现场使用胶体金试纸条检测哈维氏弧菌；（7）封存：发现异常立即封存，通知实验室优先检测，24h内出具初筛结果；（8）生物安全：采样工具一用一消毒，废弃物121℃高压灭菌20min。52.简述对虾白斑综合征病毒（WSSV）实时荧光PCR检测出现假阳性的常见原因及纠正措施。答案：原因：①扩增产物气溶胶污染；②试剂交叉污染；③阳性对照溢出；④采样工具污染。纠正：①实验室严格三区划分，扩增区负压；②使用UNGdUTP防污染体系；③阳性对照独立通风橱加样，低拷贝；④采样剪刀75%酒精擦拭后火焰灼烧；⑤定期紫外线照射+10%次氯酸擦拭；⑥设置空白对照、提取阴性对照，Ct＞35方可接受。53.简述冷冻水产品组胺形成机理及控制措施。答案：机理：捕获后细菌（摩根氏菌、肠杆菌等）分泌组氨酸脱羧酶，将游离组氨酸转化为组胺，温度＞7℃时迅速升高。控制：①船上立即18℃速冻，中心温度≤18℃；②冷链不间断，舱温记录仪每30min记录；③捕捞后4h内入冻；④添加冰衣隔绝氧；⑤运输船配备备用制冷机；⑥到岸后优先查验，TVBN、组胺快速检测，超标即退运。54.简述水生动物疫病区域化认证的技术流程。答案：①区域界定：GIS绘制地理屏障、水系、养殖场分布；②风险评估：识别病原、宿主、传播途径，蒙特卡洛模型量化；③生物安全：设置隔离缓冲带、消毒通道、野生宿主控制；④监测体系：主动+被动监测，每年至少两次随机采样，覆盖率100%；⑤官方监管：官方兽医签字，建立追溯数据库；⑥应急计划：阳性场扑杀消毒封锁，48h内上报；⑦OIE申请：提交dossier，专家现场评审；⑧维护：年度复审，一旦失控取消资格。55.简述进境活水生动物隔离检疫期间死亡动物的无害化处理程序。答案：①立即死亡2h内通知官方兽医；②拍照取证：记录体表病变、死亡时间、池号；③采样：无菌取肝、肾、脾，50%甘油PBS保存，4℃送检；④封存：尸体双层生物袋密封，贴警示标识；⑤运输：专用密封桶，车辆不渗漏，路线固定；⑥处理：121℃高压灭菌90min后送垃圾焚烧厂，或深坑石灰消毒掩埋，深度≥2m；⑦记录：填写《检疫死亡处理记录表》，保存3年；⑧溯源：结合实验室结果，调整检疫措施。五、案例分析题（每题20分，共40分）56.【案例】2024年3月，某口岸入境一批加拿大活象拔蚌（Panopeaabrupta），共4800只，总重9600kg，分8箱，运输水温4℃，运输时间18h。现场查验发现：（1）箱内泡沫冰袋破损，实测水温8℃；（2）死亡个体360只，死亡率7.5%；（3）随机抽样30只，其中15只外套膜边缘出现褐色溃疡，镜检见大量杆状细菌，革兰氏阴性；（4）荧光PCR检测，副溶血性弧菌阳性率60%，WSSV阴性；（5）输出国证书未标注运输温度要求。问题：①依据法规，对该批货物提出处理意见并说明理由；②撰写现场查验记录要点；③设计下一步实验室检测与风险管控方案。答案：①处理意见：不合格，整批退运或销毁。理由：死亡率7.5%＞2%，运输温控失控导致品质下降；副溶血性弧菌60%阳性，存在食品安全风险；证书未标注温度，不符合《进境水生动物检疫管理办法》第16条。②查验记录：a.基本情况：时间、地点、运输工具、货主；b.感官：群体活力低、褐色溃疡、死亡360只；c.环境：水温8℃、盐度32‰、溶解氧6mg/L；d.采样：30只，编号LB20240301~30，分装无菌袋；e.初筛：副溶血性弧菌阳性18/30；f.照片：死亡个体、溃疡灶、温度记录屏；g.签字：官方兽医、货主、运输代理三方确认。③方案：a.扩大采样：再抽60只，测副溶血性弧菌毒力基因（tdh/trh）；b.药敏试验：选择14种抗生素，指导必要时用药；c.毒素检测：ELISA测TDH溶血素；d.风险沟通：通报加拿大官方，暂停该养殖场出口注册；e.追溯：核查同一航班前3批货物，启动回溯检测；f.消毒：车辆、暂养池用200ppm次氯酸，作用30min；g.评估：召开专家会，决定是否暂停加拿大活贝进口。57.【案例】2024年5月，某省出口养殖场拟向欧盟出口SPF级南美白对虾苗（PL15），数量200万尾。官方抽样检测：