CN109627148B 一种大麻二酚的制备方法、制得的大麻二酚及其用途 （中国农业科学院麻类研究所）

(12)发明专利(10)授权公告号CN109627148B(65)同一申请的已公布的文献号(73)专利权人中国农业科学院麻类研究所地址410205湖南省长沙市岳麓区咸嘉湖西路348号(72)发明人谭志坚王朝云易永健周晚来汪洪鹰余旺杨媛茹(74)专利代理机构北京旭路知识产权代理有限公司11567代理人莫舒颖审查员高千淼(54)发明名称一种大麻二酚的制备方法、制得的大麻二酚及其用途(57)摘要本发明涉及一种大麻二酚的制备方法、制得的大麻二酚及其用途，所述大麻二酚的制备方法包括：将大麻叶粉末与萃取剂混合后进行萃取、剂为低共熔溶剂。与现有技术相比，本发明具有具有价格低廉、可生物降解和无毒无害；(2)合成21.一种大麻二酚的制备方法，其特征在于，将大麻叶粉末与萃取剂混合后进行萃取、离心处理，获得大麻二酚粗提物，接着通过树脂对大麻二酚粗提物进行分离和回收；其中，所述萃取剂为低共熔溶剂，所述低共熔溶剂选自氯化胆碱-L-(+)-酒石酸二乙酯、氯化胆碱-乳酸或甜菜碱-尿素；所述低共熔溶剂的浓度为60-90wt%;固液比为1:10-30;萃取温度为40-80℃;萃取时间为30-150min;混合后的溶液的pH为1-7。2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述低共熔溶剂为氯化胆碱-L-(+)-酒石酸二乙酯。3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，在萃取处理中，所述低共熔溶剂的浓度为70wt%;固液比为1:25;萃取温度为50℃;萃取时间为60min;混合后的溶液的pH为4。4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，在萃取处理中，通过B-R缓冲试剂调节溶液的pH。5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，大麻叶粉末的前处理步骤包括：将大麻叶置于50℃的干燥箱中烘干至恒重粉碎，用60目的筛子过筛，获得大麻叶粉末。6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，在萃取处理中，所述低共熔溶剂的浓度为68wt%,固液比为1:24,萃取温度为48℃,萃取时间为55min。7.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述树脂选自DM-130、AB-8、D101、3一种大麻二酚的制备方法、制得的大麻二酚及其用途技术领域[0001]本发明涉及药物成分提取技术领域，更具体地，涉及一种大麻二酚的制备方法、制得的打麻二酚及其用途。背景技术[0002]大麻二酚(简称CBD)是药用植物大麻中的主要化学成分，提取自雌性大麻植株，是大麻中的非成瘾性成分，具有抗痉挛、抗焦虑、抗炎等药理作用。然而有机溶剂(甲醇、乙醇、正己烷等)使用量过大以及提取的时间过长都会增加生产的成本同时带来一系列的问题。二、超临界二氧化碳萃取方法，但是该方法需要高端的仪器，并且成本也很高，限制了大规模应用。发明内容[0004]基于此，本发明针对上述方法存在的技术问题，提供一种大麻二酚的制备方法、制得的打麻二酚及其用途。[0006]一种大麻二酚的制备方法，将大麻叶粉末与萃取剂混合后进行萃取、离心处理，获得大麻二酚粗提物，其中，所述萃取剂为低共熔溶剂。[0007]在其中一个实施例中，所述低共熔溶剂选自氯化胆碱-D-山梨醇、氯化胆碱-尿素、氯化胆碱-草酸、氯化胆碱-苯甲酸、氯化胆碱-柠檬酸、氯化胆碱-L-(+)-酒石酸二乙酯、氯化胆碱-氯化锌、氯化胆碱-乳酸、氯化胆碱-丙三醇、氯化胆二酸、氯化胆碱-甘露醇、氯化胆碱-乙酰胺、甜菜碱-丙三醇、甜菜碱-柠檬酸或甜菜碱-尿[0008]在其中一个实施例中，所述低共熔溶剂优选为氯化胆碱-L-(+)-酒石酸二乙酯。[0009]在其中一个实施例中，在萃取处理中，所述低共熔溶剂的浓度为50-90wt%,优选为70wt%;[0010]固液比为1:10-30,优选为1:2,;[0011]萃取温度为40-80℃,优选为50℃;[0012]萃取时间为30-150min,优选为60min;[0013]混合后的溶液的pH为1-7,优选为4。[0014]在其中一个实施例中，在萃取处理中，通过B-R缓冲试剂调节溶液的pH。[0015]在其中一个实施例中，大麻叶粉末的前处理步骤包括：将大麻叶置于50℃的干燥箱中烘干至恒重粉碎，用60目的筛子过筛，获得大麻叶粉末。[0016]在其中一个实施例中，在萃取处理中，所述低共熔溶剂的浓度为68wt%,固液比为1:24,萃取温度为48℃,萃取时间为55min。[0017]在其中一个实施例中，获得大麻粗提物后，还包括如下步骤：通过树脂对大麻粗4提物进行分离和回收。[0019]本发明还提供了一种大麻二酚，所述大麻二酚由上述的制备方法制得。[0020]本发明还提供了上述大麻二酚在制备癌症、癫痫、精神分裂症和抑郁症药物中的[0021]低共熔溶剂：低共熔溶剂(Deepeutecticsolvents,DESs)是近年来发展的一类新型绿色溶剂，它们通常是由氢键供体(如酰胺、羧酸和多元醇等化合物)和氢键受体(如季铵盐等)按照一定的化学计量比混合形成，组分通过互相作用的氨键缔合。低共熔溶剂[0023](1)采用了绿色的低共熔溶剂，其具有价格低廉、可生物降解和无毒无害；具体实施方式[0026]在下面的描述中阐述了很多具体细节以便于充分理解本发明。但是本发明能够以很多不同于在此描述的其它方式来实施，本领域技术人员可以在不违背本发明内涵的情况下做类似改进，因此本发明不受下面公开的具体实施的限制。[0027]除非另有定义，本文所使用的所有的技术和科学术语与属于本发明的技术领域的技术人员通常理解的含义相同。本文中在本发明的说明书中所使用的术语只是为了描述具体的实施例的目的，不是旨在于限制本发明。[0028]本发明提供了一种大麻二酚的制备方法，包括如下步骤：[0029]S1、将500g大麻叶置于50℃的干燥箱中烘干至恒重粉碎，用60目的筛子过筛，获得大麻叶粉末；[0030]S2、将0.2g大麻叶粉末与萃取剂混合后进行萃取、离心处理，获得大麻二酚粗提[0032]其中，萃取过程在超声清洗仪中进行，其中超声清洗仪的功率200W、主频40kHz中进行提取。[0033]本发明对所有原料的来源并没有特殊的限制，为市售即可。[0034]在本实施例中，低共熔溶剂选自氯化胆碱-D-山梨醇、氯化胆碱-尿素、氯化胆碱-草酸、氯化胆碱-苯甲酸、氯化胆碱-柠檬酸、氯化胆碱-L-(+)-酒石酸二乙酯、氯化胆碱-氯化锌、氯化胆碱-乳酸、氯化胆碱-丙三醇、氯化胆碱-水杨酸、氯化胆甘露醇、氯化胆碱-乙酰胺、甜菜碱-丙三醇、甜菜碱-柠檬酸或甜菜碱-尿素，优选为氯化胆碱-L-(+)-酒石酸二乙酯。所述低共熔溶剂的浓度为50-90wt%,优选为90wt%。固液比为1:10-30,优选为1:25。萃取温度为40-80℃,优选为，50℃。萃取时间为30-150min,优选为60min。混合后的溶液通过B-R缓冲试剂调节溶液的pH,pH为1-7,混合后的溶液的pH为5[0035]根据响应面法优化萃取条件，其中，所述低共熔溶剂为氯化胆碱-二乙酯，所述低共熔溶剂的浓度为68wt%,固液比为1:24,萃取温度为48℃,萃取时间为[0037]本发明还提供了一种大麻二酚，所述大麻二酚由上述的制备方法制得。[0041]取0.2g大麻叶粉末，分别加入18种不同的低共熔溶剂混合研究不同种类的低共20,萃取温度为30℃,萃取时间为40min,体系pH值为调节。6低共熔溶剂种类萃取率(mg/g)氯化胆碱-D-山梨醇氯化胆碱-尿素氯化胆碱-草酸氯化胆碱-苯甲酸氯化胆碱-柠檬酸0氯化胆碱-氯化锌氯化胆碱-乳酸氯化胆碱-丙三醇氯化胆碱-水杨酸氯化胆碱-丁二酸氯化胆碱-甘露醇氯化胆碱-乙酰胺甜菜碱-丙三醇甜菜碱-柠檬酸甜菜碱-尿素从表1可以看出，当低共熔溶剂为氯化胆碱-L-(+)-酒石酸二乙酯时，萃取效率最效果实施例2取0.2g大麻叶粉末，加入50wt%、60wt%、70wt%、80wt%和90wt%的氯化胆碱-L-(+)-酒石酸二乙酯研究浓度对大麻二酚萃取率的影响，具体如表2所示，其中，固液比为1:20,萃取温度使40℃,萃取时间为60min,体系pH值未调节。7萃取率(mg/g)[0050]从表2可以看出，当氯化胆碱-差别不大，本着尽量少采用萃取剂的原则，故采用70wt%的浓度。[0051]效果实施例3表3[0052]取0.2g大麻叶粉末，加入70wt%氯化胆碱-L-(+)-酒石酸二乙酯混合，其中，大麻叶粉末与溶液中液体的固液比为1:10、1:15、1:20、1:25、1:30,萃取温度使40℃,萃取时间为60min,体系pH表3固液比萃取率(mg/g)[0057]取0.2g大麻叶粉末，加入70wt%氯化胆碱-L-(+)-酒石酸二乙酯混合，其中，固液比为1:25,萃取时间为60min,体系pH值未调节，比较不同萃取温度对大麻二酚萃取率的影[0059]萃取温度℃萃取率(mg/g)4010.496011.1997011.2898011.397[0060]从表4可以看出，当萃取温度为50-80℃,萃取效率差异不大，较高的温度不利于操作同时需要更多能源，故选取50℃作为萃取温度。[0062]取0.2g大麻叶粉末，加入70wt%氯化胆碱-L-(+)-酒石酸二乙酯混合，其中，固液比为1:25,萃取温度为50℃,体系pH值未调节，比较不同萃取时间对大麻二酚萃取率的影8表5表5萃取率(mg/g)[0065]从表5中可以看出，当萃取时间为60min-150min时，萃取效率变化不大，故选取60min作为萃取时间。[0066]效果实施例6[0067]取大麻叶粉末，加入70wt%氯化胆碱-L-(+)-酒石酸二乙酯混合，其中，固液比为1:25,萃取时间为60min,萃取温度为50℃,通过采用B-R缓冲试剂(Britton-Robinson缓冲溶液，磷酸、乙酸、硼酸，浓度均为0.04mol/L)来调节pH,比较混合后溶液的不同pH对大麻二酚萃取率的影响，具体如表6所示。[0068]表6[0069]pH萃取率(mg/g)79.378[0070]从表6中可以看出，当pH为4时，萃取[0071]响应面法优化萃取条件。[0072]采用响应面法优化了萃取温度、萃取时间、DES浓度和固液比几个主要影响因素。得出在48℃提取温度，55min提取时间，68wt%氯化胆碱-L-(+)-酒石酸二乙酯浓度和固液比1:24的最佳优化条件下，实际萃取率为12.22mg/g。[0073]回收大麻二酚[0074]萃取完成后，采用大孔树脂发对大麻二酚进行进一步的分离和回收，考察了6种收率最高，得到的大