CN110734360B 大麻二酚的萃取方法和分离方法 （中国农业科学院麻类研究所）

(10)授权公告号CN110734360B(65)同一申请的已公布的文献号(43)申请公布日2020.01.31(73)专利权人中国农业科学院麻类研究所地址410000湖南省长沙市岳麓区咸嘉湖西路348号审查员张亚红(72)发明人谭志坚王朝云易永健余旺周晚来李懋曾粮斌杨媛茹汪洪鹰(74)专利代理机构长沙智路知识产权代理事务所(普通合伙)43244(54)发明名称大麻二酚的萃取方法和分离方法(57)摘要本发明涉及一种大麻二酚的萃取方法和分离方法，所述萃取方法包括如下步骤：将粉碎的大麻叶与疏水性离子液体混合，超声萃取，离得到大麻二酚粗提物；其中，疏水性离子液体选自：1-己基-3-甲基咪唑双三氟甲磺酰亚胺盐、1-辛基-3-甲基咪唑双三氟甲磺酰亚胺盐、1-癸基-3-甲基咪唑双三氟甲磺酰亚胺盐、1-己基-3-甲基咪唑六氟磷酸盐、1-辛基-3-甲基咪唑六氟磷酸盐或1-癸基-3-甲基咪唑六氟磷酸盐及其组合。与有机溶剂作为萃取剂相比，疏水性离子液体作为一种新型的绿色溶剂，可以避免有机溶剂在萃取中带来的一系列问题。同时，与超临界二21.一种疏水性离子液体萃取大麻二酚的方法，其特征在于，包括如下步骤：将粉碎的大麻叶与作为萃取剂的疏水性离子液体混合，超声萃取，离心，得到大麻二酚粗提物；所述大麻叶与萃取剂的质量比为1:10～30;所述萃取的温度为40～80℃;其中，所述疏水性离子液体选自：1-己基-3-甲基咪唑双三氟甲磺酰亚胺盐、1-辛基-3-甲基咪唑双三氟甲磺酰亚胺盐、1-癸基-3-甲基咪唑双三氟甲磺酰亚胺盐、1-己基-3-甲基咪唑六氟磷酸盐、1-辛基-3-甲基咪唑六氟磷酸盐或1-癸基-3-甲基咪唑六氟磷酸盐及其组2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述大麻叶与萃取剂的质量比为1:25。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述萃取的温度为60℃。4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述萃取的时间为30～70min。5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述萃取的时间为60min。6.一种离子液体和大麻二酚的分离方法，其特征在于，包括如下步骤：将权利要求1～5任一项所述的大麻粗提物通过反萃取剂反萃取得到上相和下相，分离上相和下相；7.根据权利要求6所述的分离方法，其特征在于，所述反萃取剂包括正己烷、乙酸乙酯、甲醇和水。8.根据权利要求7所述的分离方法，其特征在于，所述正己烷、乙酸乙酯、甲醇和水的体积比为3:5:3:5。3大麻二酚的萃取方法和分离方法技术领域[0001]本发明涉及药物萃取技术领域，更具体地，涉及一种采用疏水性离子液体萃取大麻二酚的方法及大麻二酚和离子液体的分离方法。背景技术[0002]目前，从大麻中萃取大麻二酚的方法主要分为两种。第一种是采用有机溶剂作为萃取剂，比如使用甲醇、乙醇、正己烷等，然而有机溶剂使用量过大以及提取的时间过长都会增加生产的成本，同时带来一系列的问题，比如安全性和环保性。第二种是采用超临界二氧化碳萃取的方法，但是该方法需要高端的仪器，并且成本也很高，限制了大规模应用。发明内容[0003]基于此，针对现有技术中萃取大麻二酚的两种方法的缺陷，提供一种大麻二酚的萃取方法。[0004]一种疏水性离子液体萃取大麻二酚的方法，包括如下步骤：[0005]将粉碎的大麻叶与作为萃取剂的疏水性离子液体混合，超声萃取，离心，得到大麻二酚粗提物；[0006]其中，所述疏水性离子液体选自：1-己基-3-甲基咪唑双三氟甲磺酰亚胺盐、1-辛基-3-甲基咪唑双三氟甲磺酰亚胺盐、1-癸基-3-甲基咪唑双三氟甲磺酰亚胺盐、1-己基-3-甲基咪唑六氟磷酸盐、1-辛基-3-甲基咪唑六氟磷酸盐或1-癸基-3-甲基咪唑六氟磷酸盐及其组合。[0007]在一些优选实施方式中，所述大麻叶与萃取剂的质量比为1:10～30。[0008]在一些优选实施方式中，所述大麻叶与萃取剂的质量比为1:25。[0009]在一些优选实施方式中，所述萃取的温度为40～80℃。[0010]在一些优选实施方式中，所述萃取的温度为60℃。[0011]在一些优选实施方式中，所述萃取的时间为30～70min。[0012]在一些优选实施方式中，所述萃取的时间为60min。[0013]本发明还提供了一种离子液体和大麻二酚的分离方法，包括如下步骤：[0014]将上任一项实施方式所述的大麻粗提物通过反萃取剂反萃取得到上相和下相，分离上相和下相；[0015]其中，所述上相为疏水性离子液体，所述下相为大麻二酚。[0016]在一些优选实施方式中，所述反萃取剂包括正己烷、乙酸乙酯、甲醇和水。[0017]在一些优选实施方式中，所述正己烷、乙酸乙酯、甲醇和水的体积比为3:5:3:5。[0018]本发明通过实验发现，疏水性离子液体和亲水性离子液体作为萃取剂代替有机溶剂时，只有疏水性离子液体可以很好地从大麻中萃取大麻二酚。与有机溶剂作为萃取剂相比，疏水性离子液体作为一种新型的绿色溶剂，可以避免有机溶剂在萃取中带来的一系列问题，例如安全性和环保。同时，与超临界二氧化碳萃取方法相比，本发明的萃取方法无需4[0019]另外，本发明还提供了一种离子液体和大麻二酚的分离方法，可以回收离子液体实现重复利用，纯化大麻二酚，进一步降低了萃取成本。具体实施方式[0020]在下面的描述中阐述了很多具体细节以便于充分理解本发明。但是本发明能够以很多不同于在此描述的其它方式来实施，本领域技术人员可以在不违背本发明内涵的情况下做类似改进，因此本发明不受下面公开的具体实施的限制。[0021]除非另有定义，本文所使用的所有的技术和科学术语与属于本发明的技术领域的技术人员通常理解的含义相同。本文中在本发明的说明书中所使用的术语只是为了描述具体的实施例的目的，不是旨在于限制本发明。[0023]一种大麻二酚的萃取方法，包括如下步骤：[0024]1)取新鲜大麻叶，将其在干燥箱中(设定温度为50℃)烘干至恒重，然后用粉碎机[0025]2)在离心管中加入0.2g的大麻叶粉末，采用5mL的疏水性离子液体作为萃取剂，在超声辅助条件下进行萃取，得到萃取液；[0026]3)将萃取液进行离心取上清液，得到大麻二酚粗提物。[0027]其中，大麻叶是由中国农业科学院麻类研究所一年生麻类作物育种团队提供；超声清洗仪的功率200W,主频40kHz;其他实验药品没有特殊的限制，为市售即可。[0028]为了获取最佳萃取工艺，本实验考察了离子液液体、离子液体固液比、萃取温度、萃取时间对萃取率的影响。[0029]1、离子液体种类对萃取率的影响[0030]在本实施例中，考察了11种不同离子液体。从表1中可知，1-癸基-3-甲基咪唑双三氟甲磺酰亚胺盐作为萃取剂时，萃取率可达到最高，5.91m离子液体种类萃取率(mg/g)1-己基-3-甲基咪唑双三氟甲磺酰亚胺盐1-辛基-3-甲基咪唑双三氟甲磺酰亚胺盐1-癸基-3-甲基咪唑双三氟甲磺酰亚胺盐1-己基-3-甲基咪唑六氟磷酸盐51-辛基-3-甲基咪唑六氟磷酸盐1-癸基-3-甲基咪唑六氟磷酸盐1-己基-3-甲基咪唑氯化盐1-辛基-3-甲基咪唑氯化盐1-癸基-3-甲基咪唑氯化盐1-癸基-3-甲基咪唑醋酸盐1-十二烷基基-3-甲基咪唑醋酸盐[0034]2、大麻叶粉末与离子液体的质量比对萃取率的影响[0035]在本实施例中，考察的大麻叶粉末与1-癸基-3-甲基咪唑双三氟甲磺酰亚胺盐的质量比分别为1:10,1:15,1:20,1:25和1:30,其他实验条件：萃取温度使60℃,萃取时间为60min,体系pH值未调节。从表2中可知，当大麻叶粉末与1-癸基-3-甲基咪唑双三氟甲磺酰亚胺盐的质量比为1:25时，萃取率达到最高，5.95mg/g。[0036]表2固液比萃取率(mg/g)[0038]3、萃取温度对萃取率的影响[0039]在本实施例中，考察的萃取温度分别为40℃、50℃、60℃、70℃和80℃,其他实验条件为：萃取剂为1-癸基-3-甲基咪唑双三氟甲磺酰亚胺盐，大麻叶粉末与1-癸基-3-甲基咪唑双三氟甲磺酰亚胺盐的质量比为1:25,萃取时间为60min,体系的pH值未调节。从表3中可知，当萃取温度为70℃时，萃取率达到最高，但是在60℃几乎没有差异，考虑到能源成本等原因，优选出60℃最佳，此时萃取率5.88mg/g。[0040]表3萃取温度℃萃取率(mg/g)6实验条件为：萃取剂为1-癸基-3-甲基咪唑双三氟甲磺酰亚胺盐，大麻叶粉末与1-癸基-3-甲基咪唑双三氟甲磺酰亚胺盐的质量比为1:25,萃取温度为60℃,体系的pH值未调节。从表萃取率(mg/g)[0047]与实施例1相比，萃取剂采用甲醇，其他条件与实施例1相同，大麻叶粉末与萃取剂的质量比为1:25,萃取时间为60min,萃取温度为60℃。[0048]从实验结果中发现，对比例1的萃取率为4.26mg/g,远远低于萃取剂为1-癸基-3-甲基咪唑双三氟甲磺酰亚胺盐时的萃取率。[0049]实施例2[0050]一种大麻二酚和离子液体的分离方法，包括如下步骤：[0051]1)将实施例1得到的大麻粗提物通过反萃取剂反萃取得到上相和下相，分离上相和下相；[0052]其中，所述上相为疏水性离子液体，所述下相为大麻二酚；所述反萃取剂包括正己获得的大麻二酚的纯度达到31.53%。[