艾滋病标本采集及保存流程标准

艾滋病标本采集及保存流程标准艾滋病的实验室检测依赖高质量的标本，标本采集与保存流程的规范性直接影响检测结果的准确性、可靠性，同时关系到生物安全防护的有效性。本文结合临床实践、行业标准（如WS293《艾滋病和艾滋病病毒感染诊断》、GB____《实验室生物安全通用要求》），系统梳理标本采集、保存的关键环节，为医疗机构、疾控中心及第三方检测机构提供实操指引。一、标本采集前准备（一）人员资质与培训采集人员需具备医学检验或相关执业资格，岗前需接受生物安全操作、艾滋病检测技术、应急处理流程等培训，考核合格后方可上岗。定期参与复训，确保操作规范性与风险防控能力。（二）设备与材料准备采集器材：一次性无菌注射器（1-5ml）、抗凝管（EDTA-K₂、肝素锂等，依检测目的选择）、血清分离管（促凝管）、唾液采集器、尿液采集管、采样拭子等，需在有效期内且无破损。防护用品：医用防护服、一次性手套（双层）、护目镜、医用口罩（N95或同级），防止职业暴露。辅助设备：生物安全柜（Ⅱ级及以上）、离心机（转速适配标本处理）、低温冰箱（-20℃、-80℃，校准合格）、温度计（实时监控温度）。（三）环境要求采集区域需清洁、通风，划分“清洁区-操作区-污染区”，操作台面用75%乙醇或含氯消毒剂（500mg/L）消毒，医疗废物按“感染性废物”规范处置（双层包装、专用容器）。（四）受试者准备告知检测目的、流程及注意事项，必要时签署知情同意书（如科研或特殊检测）。采血前避免剧烈运动、饮酒，建议空腹或餐后2小时采集；唾液采集前30分钟避免进食、饮水、吸烟；尿液采集取中段尿，女性需擦拭外阴、男性清洁龟头，避免污染。二、标本采集流程（一）血清/血浆标本采集（静脉血）1.消毒：75%乙醇消毒穿刺部位（直径≥5cm），待干后穿刺（避免碘伏残留影响核酸检测）。2.采血：用一次性注射器采集3-5ml静脉血，缓慢注入血清分离管（促凝管，用于抗体检测）或抗凝管（如EDTA-K₂管，用于核酸检测）。3.处理：血清管：室温（20-25℃）静置30-60分钟，待血液凝固后，以3000rpm离心10分钟分离血清。抗凝管：采集后轻柔颠倒混匀（避免溶血），4小时内以3000rpm离心10分钟分离血浆。4.注意事项：避免溶血（采血时勿过度挤压、注射器勿回推），离心后及时分离血清/血浆，标记“姓名缩写+编号+采集时间+标本类型”。（二）全血标本采集（适用于快速检测、核酸检测）1.末梢血（胶体金法等快速检测）消毒：75%乙醇消毒指尖，待干后穿刺（深度适中，避免挤压过度导致溶血）。采血：用毛细吸管或微量采血管采集20-50μl全血，直接滴入检测卡或抗凝管（如用于核酸检测，需立即加入RNA稳定剂）。2.静脉全血（核酸检测、长期保存）同“血清/血浆采集”流程，使用抗凝管，采集后轻柔混匀，4小时内送检或处理。（三）唾液标本采集（专用采集器）1.采集前30分钟用清水漱口（无需牙膏），避免进食、吸烟。2.自然分泌或轻咬采集器棉垫，使唾液浸润棉垫（约5分钟），或通过舌面搅动促进分泌，采集量以覆盖棉垫为宜。3.将棉垫放入保存液中，旋紧盖子，轻柔挤压棉垫使唾液充分混合，标记标本信息。（四）尿液标本采集（中段尿）1.清洁尿道口（女性擦拭外阴，男性清洁龟头），留取中段尿5-10ml于无菌采集管。2.注意事项：采集后2小时内送检；若无法及时处理，可4℃保存24小时，或-20℃冻存（长期保存）。三、标本保存流程（一）短期保存（≤24小时）血清/血浆：2-8℃保存，避免反复冻融；全血（抗凝）2-8℃保存，4小时内检测或处理。唾液/尿液：2-8℃保存，唾液标本需确保保存液与标本充分混合，尿液避免污染。（二）长期保存（＞24小时或需存档）血清/血浆：分装后-20℃保存（可稳定数月）；如需长期（数年）保存，转移至-80℃冰箱（建议分装成单次检测量，避免反复冻融）。全血（核酸检测）：加入RNA稳定剂后，可-20℃或-80℃保存，避免RNA降解。唾液/尿液：-20℃冻存，唾液标本冻存前确保保存液作用充分，尿液冻存前离心去除沉淀。（三）运输要求冷链运输：标本置于带冰袋的保温箱，血清/血浆、全血（抗凝）保持2-8℃（运输时间≤24小时）或-20℃（长期运输）；唾液/尿液同保存温度。包装规范：标本管密封，外裹吸水纸，放入生物安全运输箱，贴“生物危害”标识，随附送检单（含标本信息、采集时间、检测目的）。四、质量控制要点（一）标本标识采用唯一编号（如“HIV-____”），与送检单信息一致，注明采集时间、类型、受试者信息（脱敏处理，如“张××”）。（二）污染防控操作全程在生物安全柜内进行，避免标本间交叉污染；医疗废物按《医疗废物管理条例》处理（双层包装、专用容器、及时转运）。（三）记录管理详细记录采集时间、人员、标本状态（如是否溶血、量是否充足）、保存温度、运输信息，便于溯源。建议使用电子台账，实时更新标本流向。（四）质控品使用每批次标本采集时，同步采集质控品（如已知阳性、阴性对照），监控采集、保存流程的稳定性（如阳性对照检测阳性率、阴性对照无假阳性）。五、注意事项（一）生物安全防护采集过程中若发生职业暴露（如针刺伤、黏膜接触），立即按《艾滋病职业暴露处理程序》处理：针刺伤：挤出伤口血液，用肥皂水+流动水冲洗，75%乙醇消毒，报告上级并评估预防性用药。黏膜接触：用大量生理盐水冲洗，报告上级并监测。（二）标本状态监控采集后检查标本是否合格（如血清无溶血、量≥2ml，唾液无杂质，尿液无浑浊），不合格标本重新采集（需告知受试者原因，获得配合）。（三）人员培训与考核定期开展操作培训（每半年至少1次），考核合格后方可上岗，确保流程执行一致性（如采血手法、离心参数、保存温度监控）。结语艾滋病标本的采集与保存是检测准确性的“第一道防线”，规范的流程不仅保障检测质量，更降低生物安全风险。各机构应结合自身条件，严格执行标准操作流程（SOP），定期优化管理（如引入信息化溯