Y染色体微缺失遗传筛查专家建议（2025年）

Y染色体微缺失遗传筛查专家建议(2025年)摘要要。2023年欧洲男科学学会/欧洲分子遗传学质量网络对Y染色体筛行业标准(YY/T1893-2023),Y染色体疗建议。碍最小的染色体，包含6000多万个碱基对，编码约1得益于二代测序(next-generationsequencing,NGS)技术和基因组组装算法的巨大进步，人类首个完整的Y染色体端粒-端粒序列组装，直至2022年终于完成[2-4]。Y染色体主要包括两个部分：男性特异性区域(male-specificregionoftheYchromosome,MSY)和拟常染色体区(pseudoautosomalregions,PARs)。MSY结构极Tiepolo等[6]研究显示无精子症患者存在Yq11缺失，命名为无精子症因子(azoospermiafactor,AZF)区域。一项研究显示，在普通人群中，每2320名男性中就有1名存在Y染色体AZFc完全缺失，而在精子发生障碍人群可以上升到大约6%[7]。《2016年中国男科疾病诊疗指南》发布中国第一版的Y染色体微缺失筛查指南[8]。2017年中国Y染色体微缺失质控联盟(YqAZFmicrodeletionexternalqualityassessment,YEQA)成立。2022进一步推动国内Y染色体微缺失筛查的规范与质控[9]。欧洲男科Andrology/EuropeanMolecularGeneticsQualityNetwork,EAA/EMQN)2023年发布了新指南，在2003年和2014年版本的基础上做出多项更新，为我们提供重要的参考与借鉴[10]。在我国出生疗建议。类序列：X染色体退化序列、X染色体转移序列和扩增序列[3]。扩增序列主要包含9个睾丸特异性或富集表达的蛋白质编码基因家族，基因家族内部存在高度重复序列，其序列一致性超过99.9%,这些重这些扩增子之间可发生基因转换及非等位同源重组(non-allelic失主要原因[3,11]。早期研究将AZF区域分为AZFa、AZFb、AZFc并且发现了一些新的缺失模式[12-13](图1)。AZF缺失分为经典其次是AZFa完全缺失(0.5%~9%)、AZFb完全缺失(1%~7%)和AZFbc完全缺失(1%~20%)。sY134AZFaAZFbP3 AZFb(P5/proximalP1) AZFbc(P5/distalPI AZFbc(P4/distalPI) 注：AZF示无精子症因子图1Y染色体微缺失示意图毒(humanendogenousretrovirus,HERV)的2个亚型HERVyq1和精子症[17]。导致包括32个转录单位在内的6.2Mb区域的完全缺失，也称为P5/仅有个别病例报道，可能与回文序列P5和P3之间的NAHR有关，但并不能解释所有病例，其发生机制仍需要进一步研究[18]。AZFc较为广泛的一种，gr/gr缺失可以造成AZFc区域近一半基因丢失[3,13],但并非是我国精子发生障碍患者的发病原因，其在正常捐针对Y染色体特定区域序列标签位点(sequence-taggedsite,STS) [20]。目前常规检测有多重实时荧光PCR法、多重PCR-电泳法、 (multiplexligation-dependentprobeamplification,MLPA)和NGS等[21-24]。有研究表明NGS可提拓展位点检测用于6个STS位点PCR法筛查发现缺失后，进一步以及AZFc缺失范围是否延伸到Y染色体长臂末端异染色质区域。拓拓展检测明确为AZFa、AZFb、AZFbc部分缺失，则有一定机会获取到断有没有Y染色体长臂末端缺失，末端缺失(sY160拓展位点缺失)可能与(45,X/46,XY)嵌合染色体核型有关，提示睾丸显微取精 sY84和sY86缺失，建议检测拓展位点。AZFa上游sY82(存在),AZFa近端边界sY1064(缺失),AZFa远端边界sY1065或sY1182(缺失),AZFa下游sY88(存在),以上结果方可明确为AZFa全部缺失，如果仅检测到sY84或sY86单个位点缺失(应首先排除扩增失败),细研究[10]。进一步确定缺失范围，以明确对精子发生可能造成的2.AZFb缺失的检测：sY127和sY134分别位于AZFb区域的中间和远端。这两个位点均缺失，提示AZFb完全缺失[18]。但为了更近端边界sY121和sY1224(缺失),远端边界sY1192(缺失),下游位点sY153(存在),则可明确诊断为AZFb完全缺失，否则提示sY1192等效[26]。但最新版共识认为，sY1192(而非sY143)对micro-TESE获取精子成功率更有预测价值[27],故推荐拓展位点选择sY1192。缺失，sY160存在)和末端缺失(sY160缺失)。提示P5/P1远端缺失，该位点检测结果有一定的临床诊断价值[30-31]。建议AZFbc缺失时进行异染色质位点sY160检测，以确定是否存在末端缺失。5.AZFabc缺失的检测：多重实时荧光PCR法发现sY84、sY86、AZFc三个区域均缺失，建议加做染色体核型分析。可能存在Y染色体结构异常(等臂单/双着丝粒Y染色体)或染色体核型为46,XX或45,X/46,XX嵌合。如果内参SRY同时缺失，要排除是否做过骨髓移植，如果是骨髓移植患者，推荐取口腔黏膜细胞行Y染色体微缺失检测。6.AZFd微缺失的检测：不建议常规筛查sY114和sY152位点，因为两者定位于染色体上多个基因组区域中。sY152定位于DAZ基因，类似于sY255和sY254位点。根据sY152定义不存在，不建议进行AZFd区域的微缺失检测[10]。7.gr/gr缺失的检测：检测sY1291和sY1191这两个位点可区分是否存在gr/gr缺失，sY1291缺失而sY1191存在提示gr/gr缺失[32]。基于欧洲人群研究显示gr/gr缺失是生殖障碍的风险因素，近些年有研究认为gr/gr缺失可能是睾丸生殖细胞肿瘤的风险因素[32]。但在我国男性中，gr/gr缺失普遍存在并且对精子发生一般无显著影响，故不推荐gr/gr缺失作为国内Y染色体微缺失的常规检测[33]。类似地，在中国人群中，未发现b2/b3及b1/b3等缺失模型与精子发生障碍的确切关系，因此，同样不推荐将其纳入国内Y染色体微缺失的近些年出现的第三代DNA测序技术(也称为长读长测序),是一失模式对应不同的精液参数表型和睾丸显微取精获精情况(表1)。故Y染色体微缺失筛查对男性不育的病因学诊断和治疗具有指导意因诊断，还可评估获精率[10,33]。不推荐对先天性双侧输精管缺如、梗阻性无精子症(排除卵泡刺激素高于正常限值)和低促性腺激现一定频率的Y染色体微缺失[34]。表1AZF不同缺失类型的精液表型和睾丸显微含2对引物，建议采取多重PCR技术，常规检测时必须设内对照以控制实验质量。设置两个内对照基因，分别是性别决定基因 阴性对照(女性DNA)和空白对照(水)[10,33]。2.外部质量评价：中国YEQA自2017年成立以来，每年会向参与位在规定时间内完成样本检测并上报结果。2017年至2019年参与基因型检测得分逐年递增，从2017年的(26.54±5.04)分，上升到2019年的(28.38±2.91)分[9]。YEQA同时推动了Y染色体微缺计划。临床诊断、检测方法、实验结果和实验室名称等。6个STS位点、阴性对照、阳性对照检测结果应该描述为“存在