（正式版）DB44∕T 2778-2025 《水稻品种（系）白叶枯病抗性鉴定与评价技术规程》

ICS65.020CCSB15Technicalregulationforidentificationandevaluationofricecultivars(lines)resistancetobacterialblight（本草案完成时间：2024-11-20）在提交反馈意见时，请将您知道的相关专利连同支持性文件一并附上。IDBXX/TXXXX—XXXX 2规范性引用文件 3术语和定义 4材料和设备 24.1试剂和材料 24.2仪器用具及设施 25育苗及稻苗管理 25.1育苗方法 35.2品种移栽 35.3接种圃管理 35.4鉴别品种选择 36接种 36.1接种体准备 36.2接种时期及方法 47病情调查 47.1调查时间、部位 47.2调查方法 47.3水稻白叶枯病发病记载分级标准 48水稻品种（系）对水稻白叶枯病的抗性评价 48.1抗性评价依据 48.2抗性评价标准 58.3抗性鉴定数据有效性判别 59接种后与鉴定后材料的处理 510汇总报告格式 510.1试验基本信息 510.2试验材料与方法 510.3鉴定结果 5附录A（规范性） 7附录B（资料性） 8 9表1水稻白叶枯病人工接种抗性评价病情分级标准 4表2水稻白叶枯抗性评价标准 5表A.1水稻品种（系）白叶枯病抗性鉴定与评价结果表 7DBXX/TXXXX—XXXX表B.1白叶枯病人工接种圃水稻农事操作基本情况记载表 8表B.2水稻品种白叶枯病抗性鉴定病情调查记载表 8DBXX/TXXXX—XXXX本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。本文件由广东省种植业标准化技术委员会（TC48）归口。本文件起草单位：广东省农业科学院植物保护研究所。本文件主要起草人：陈深、冯爱卿、汪聪颖、朱小源、杨健源、苏菁、汪文娟、封金奇、陈凯玲、DBXX/TXXXX—XXXX1水稻品种（系）白叶枯病抗性鉴定与评价技术规程本标准规定了广东省水稻品种（系）白叶枯病抗性鉴定与评价方法的术语和定义、水稻品种和材料的栽培与管理、病原接种体准备、接种技术、病情调查方法、抗性评价标准和汇总报告格式。本标准适用于广东省范围内的水稻品种、稻种资源及新品种（系）等的白叶枯病抗性鉴定及其评价技术工作。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T17980.104农药，田间药效试验准则（二）第104部分:杀菌剂防治水稻恶苗病DB34/T2810水稻白叶枯病抗病性鉴定技术规程DB32/T1122水稻品种(系)抗白叶枯病鉴定方法与抗性评价技术规程3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1水稻白叶枯病ricebacterialblight指由稻黄单胞菌稻致病变种（Xanthomonasoryzaepv.oryzae）引起的水稻病害。3.2接种体inoculum接种体指用于人工接种鉴定用的水稻白叶枯病菌悬浮液。3.3试验品种（系）testingvariety（line）抗病性鉴定参试的水稻品种（系）。3.4鉴别品种differentialvariety指用于鉴别与监测水稻白叶枯病菌致病型（小种）种群及其变化的一组水稻品种。3.5抗性鉴定resistanceevaluation在水稻生长发育阶段的孕穗期，通过田间病圃剪叶接种方法接种白叶枯病菌，以确定水稻试验品种（系）对白叶枯病菌的抗感反应类型的一系列操作过程。它是水稻育种的基础环节，其鉴定结果是筛选、审定、推广水稻新品种的重要依据，也是水稻主栽品种合理布局的理论根据。3.6剪叶接种法leaf-cuttinginoculationDBXX/TXXXX—XXXX2在水稻孕穗期，用手术剪刀蘸取白叶枯病菌菌液，带菌液的剪刀口剪去接种叶片距离叶尖2cm～3cm的小段叶尖，蘸一次菌液剪2片～3片叶，病原细菌即从剪口处侵入叶片。3.7优势致病型predominantpathotype在一定时间和区域对水稻白叶枯病发生发展起主要作用的病原菌类群。3.8水稻抗白叶枯病单基因系ricebacterialblightresistancemonogeniclines以某一水稻材料为背景，创建的含有一个已知的特定抗白叶枯病基因的水稻品种。3.9鉴定年限periodidentification根据试验目的应达到的最低生产周期。3.9.1省级品种（系）试验年限testingperiodofcultivars(lines)atprovinciallevel与省级品种区域试验同步进行的两个正季生产周期。3.9.2其它品种（系）试验年限testingperiodofothercultivars(lines)根据抗性鉴定目的参照省级品种（系）试验年限进行，不做具体要求。4材料和设备4.1试剂和材料4.1.1胁本哲氏培养基[来源：DB34/T2810水稻白叶枯病抗病性鉴定技术规程]4.1.2细菌数量测定：麦法伦（McFarland）比浊计[来源：DB34/T2810水稻白叶枯病抗病性鉴定技术规程]4.1.3无菌水用121℃高压灭菌20min后的蒸馏水。4.2仪器用具及设施4.2.1常用仪器及用具超净工作台，湿热灭菌锅，电热鼓风干燥箱，生化培养箱，冰箱，超低温冰柜（-70℃),试管，离心管，培养皿，接种针，手术剪刀。4.2.2设施专用抗性鉴定圃（田），配防鸟网设施。5育苗及稻苗管理DBXX/TXXXX—XXXX35.1育苗方法5.1.1育苗时间及育苗前处理。早季在3月上旬前或晚季在7月上旬前将试验品种（系）种子浸种前晒种或40℃~50℃烘种1天～2天。育苗时间可根据当地农情适当调整；生育期相差太远的品种实行分批播种。5.1.2种子消毒及播种。浸种时先用清水将种子浸24小时，再用消毒药剂浸12小时，浸种药液面要高于种子面3cm～5cm，然后捞出种子反复用清水冲洗干净后催芽、播种[来源：GB/T17980.104《农药，田间药效试验准则（二）第104部分:杀菌剂防治水稻恶苗病》]。每品种播50粒～60粒种子，品种间间隔10cm左右，按事先编排的品种序号插标签区分。5.1.3育秧注意事项。早造3月播种后须覆盖农膜，晚造7月播种后覆盖40目～80目的纱网或遮光率75%的遮光网，以防试验品种（系）混乱，防雨水冲刷、防鼠、防鸟。晴天高温时须揭膜防高温灼伤秧苗，太阳下山后再盖，待2叶1心停止盖膜（纱），让秧苗暴露在自然环境中。5.2品种移栽5.2.1接种圃应选在发病环境适宜、土壤肥力中等且均衡、排灌方便的试验田中。5.2.2待禾苗长至6叶～7叶期，拔秧苗连同标签一起捆绑好移栽至接种圃。5.2.3本田每个试验品种（系）栽1行，每行10穴，单苗插植，设置两个重复，株行距18cm×24cm。每隔20个试验品种（系）间空出2行，行距与试验品种(系)间行距相同，试验区周围栽植5行保护行，并设置空白对照。5.3接种圃管理5.3.1接种圃田间灌溉及施肥管理等依照水稻生产上的日常管理进行。接种圃管理基本情况数据记载参见附录B表B.1。5.3.2试验品种（系）在全生育期内禁止使用杀菌剂，尽量避免使用苗后除草剂和杀虫剂。接种前20天和接种后21天内禁止施用任何农药。5.4鉴别品种选择采用中国白叶枯病鉴别品种和抗白叶枯病单基因系：金刚30、特特普、南粳15、爪哇14、IR26、IRBB1、IRBB2、IRBB3、IRBB4、IRBB5、IRBB7、IRBB8、IRBB10、IRBB11、IRBB13、IRBB21、CBB23。抗白叶枯病单基因系品种的选择可随当地流行的优势致病型菌株变动而设置。6接种6.1接种体准备6.1.1接种前1个月先将准备用于接种试验品种（系）的白叶枯病菌系进行预接种。选用上一年经过监测鉴定的广东省水稻白叶枯病菌优势致病型代表菌株提前进行复壮扩繁，接种中国白叶枯病鉴别品种和抗白叶枯病单基因系。测试白叶枯病菌各致病型代表菌株的鉴别力和稳定性，选择致病力差异明显的再后续选择用于试验品种（系）白叶枯病抗性鉴定。6.1.2在经过预接种的广东优势致病型菌株中选择致病力稳定的2个代表菌株进行接种。接种前，将上述两个代表菌株分别移植在胁本哲氏培养基斜面上，活化后在28℃下培养48小时～72小时后，分别用无菌水洗下菌苔，配制成6×108cfu/ml细菌悬浮液，用麦法伦（McFarland）比浊计或分光光度计DBXX/TXXXX—XXXX4对比浓度，尽量在菌液配制后2小时内完成接种。6.2接种时期及方法6.2.1采用剪叶接种法接种，主要接种剑叶或倒二叶，以剑叶为主。6.2.2在水稻孕穗期，尽量选择在阴天或傍晚时分接种，避免在下雨时接种。6.2.3用每个致病型代表菌株对每个品种（系）接种一行5株水稻，每株至少接种6片～8片叶，每品种（系）2个重复。即1个品种（系）用1个代表菌株接种10株稻苗，接种稻叶60片～80片叶。7病情调查7.1调查时间、部位7.1.1调查时间。一般剪叶接种后21天调查试验结果。试验的有效性以同时期种植和接种的中国白叶枯病鉴别品种和抗白叶枯病单基因系发病程度为依据，各鉴别品种的发病程度达到广东优势致病型的相应表型病级方可认为试验有效。7.1.2调查部位。试验品种（系）用白叶枯病菌剪叶接种过的水稻叶片。7.2调查方法7.2.1病情调查时从被接种的不低于60片水稻叶片中选取外观完整的叶片测量病斑长度和接种叶片的平均长度，或观测病斑占接种叶片面积的百分率。病情调查时应观察群体整齐度和一致性，去除异形单株。7.2.2依据7.3分级标准记载每株水稻白叶枯病发病表型病级，最后根据该品种的多株整体发病情况来评定该品种的抗病性。7.3水稻白叶枯病发病记载分级标准白叶枯病情调查分级标准见表1。调查数据记载参见附录B表B.2。[来源：DB32/T1122水稻品种(系)抗白叶枯病鉴定方法与抗性评价技术规程；《中国水稻品种试验与审定》，2005]表1水稻白叶枯病人工接种抗性评价病情分级标准0剪口下无明显病斑，或者仅有褐斑反应。病斑长度纵向扩展小于等于1.0cm，或病斑面积1病斑长度纵向扩展1.1cm～3.0cm，或病斑面积占叶面积5.1%～3病斑长度纵向扩展3.1cm～6.0cm，或病斑面积占叶面积12.15病斑长度纵向扩展6.1cm～12.0cm，或病斑面积占叶面积25.1%～7病斑长度纵向扩展12.1cm～20.0cm，或病斑面积占叶面积50.19病斑长度纵向扩展大于20cm，或病斑面积大8水稻品种（系）对水稻白叶枯病的抗性评价8.1抗性评价依据58.1.1抗性评价以试验品种（系）对水稻白叶枯病的抗性鉴定病情调查结果为依据。8.1.2以试验品种（系）发病最重的1/3发病级别作为该品种的平均抗性级别。8.2抗性评价标准白叶枯病抗性评价标准见表2。将水稻品种（系）划分为高抗、抗、中抗、中感、感和高感共6个抗性级别。表2水稻白叶枯抗性评价标准01抗R357感S98.3抗性鉴定数据有效性判别8.3.1若同时期种植和接种的各个中国白叶枯病鉴别品种和抗白叶枯病单基因系的发病程度达到广东优势致病型的对应表型病级，则用该菌株鉴定的试验品种（系）结果视为有效。利用有效菌株获得的试验品种（系）的鉴定数据可作为评价依据，否则其结果（因菌株活力或气候异常造成）仅能用作分析水稻白叶枯病抗性鉴定趋势时参考。8.3.2当感病对照品种金刚30的发病表型达到7级以上，其余试验品种（系）为不同程度的病情反应时，该组抗性鉴定数据有效。9接种后与鉴定后材料的处理9.1为避免白叶枯病菌的扩散，剩余接种体带回实验室灭菌处理。9.2为避免白叶枯病菌随接种病株在试验田定殖，试验结束后将鉴定后的田间病株无害化处理。10汇总报告格式10.1试验基本信息包括鉴定品种名称、鉴定内容、委托单位、鉴定单位与主要鉴定技术人员、鉴定日期、报告日期等基本信息情况。10.2试验材料与方法分述试验的鉴定材料数量、供种单位、鉴定方法、病害调查方法和抗性评价标准。10.3