合成生物反应器运维技师（高级）考试试卷及答案

合成生物反应器运维技师（高级）考试试卷及答案合成生物反应器运维技师（高级）考试试卷一、填空题（共10题，每题1分）1.合成生物反应器常用主体材质是______不锈钢。2.培养基湿热灭菌典型温度为______℃，时间15-30min。3.搅拌轴常用密封方式是______密封。4.在线DO检测常用极谱法和______法。5.培养基过滤除菌用______μm滤膜。6.灭菌验证关键参数是______值。7.补料速率依据细胞______速率控制。8.尾气分析核心指标含CO₂和______浓度。9.清洁验证关键指标是总有机碳（______）。10.非接触式液位检测常用______传感器。二、单项选择题（共10题，每题2分）1.热敏培养基适合的灭菌方式是？A.湿热灭菌B.过滤除菌C.干热灭菌D.辐射灭菌2.DO饱和度低于多少需补氧？A.10%B.20%C.30%D.40%3.pH调节常用碱液是？A.NaOHB.KOHC.Ca(OH)₂D.NH₄OH4.搅拌桨不具备的作用是？A.混合B.传质C.传热D.灭菌5.在线温度检测常用传感器是？A.Pt100B.热电偶C.光电传感器D.压力传感器6.TOC合格标准通常为？A.≤10ppbB.≤50ppbC.≤100ppbD.≤500ppb7.高风险样本适合的生物安全柜级别是？A.A1B.A2C.B1D.B28.补料系统不包含？A.补料罐B.蠕动泵C.蒸汽发生器D.除菌过滤器9.反应器死角定义是？A.直径≤3mm且长度≤10mmB.直径≤5mm且长度≤15mmC.直径≤6mm且长度≤20mmD.直径≤8mm且长度≤25mm10.压力异常升高常见原因是？A.通气量小B.排气阀堵塞C.搅拌速率低D.培养基浓度低三、多项选择题（共10题，每题2分，多选/少选/错选不得分）1.搅拌系统组成包括？A.搅拌桨B.搅拌轴C.机械密封D.变频电机2.湿热灭菌验证检测参数有？A.温度B.压力C.时间D.F0值3.影响DO检测准确性的因素有？A.搅拌速率B.温度C.培养基粘度D.传感器老化4.清洁验证取样点包括？A.罐体表面B.阀门内部C.管路死角D.搅拌桨表面5.培养基灭菌方式有？A.湿热灭菌B.过滤除菌C.干热灭菌D.环氧乙烷灭菌6.在线检测参数包括？A.温度B.pHC.DOD.细胞浓度（OD）7.补料策略类型有？A.恒速补料B.变速补料C.反馈补料D.随机补料8.每日记录参数有？A.温度B.pHC.DOD.通气量9.安全防护措施包括？A.压力安全阀B.泄漏报警C.生物安全柜D.灭菌验证10.影响细胞生长的环境因素有？A.温度B.pHC.DOD.渗透压四、判断题（共10题，每题2分，√/×）1.湿热灭菌F0值需≥8。（）2.机械密封泄漏率比填料密封低。（）3.DO荧光法响应比极谱法慢。（）4.过滤除菌滤膜孔径0.22μm。（）5.补料速率越高，细胞生长越快。（）6.清洁验证仅需检测可见残留。（）7.尾气CO₂升高反映细胞呼吸增强。（）8.316L不锈钢耐生物腐蚀。（）9.pH调节用盐酸替代磷酸更优。（）10.报警系统需声光双重功能。（）五、简答题（共4题，每题5分）1.简述生物反应器湿热灭菌操作步骤。2.说明搅拌轴密封泄漏的常见原因及处理方法。3.简述在线DO检测原理及校准方法。4.说明培养基灭菌后需检测的关键指标及意义。六、讨论题（共2题，每题5分）1.讨论影响细胞生长的关键环境因素及调控策略。2.讨论如何通过清洁验证确保无交叉污染。---答案一、填空题答案1.316L2.1213.机械4.荧光5.0.226.F07.比生长8.O₂9.TOC10.超声波二、单项选择题答案1.B2.B3.A4.D5.A6.C7.D8.C9.A10.B三、多项选择题答案1.ABCD2.ABCD3.ABCD4.ABCD5.ABC6.ABCD7.ABC8.ABCD9.ABD10.ABCD四、判断题答案1.√2.√3.×4.√5.×6.×7.√8.√9.×10.√五、简答题答案1.操作步骤：①检查密封性，关闭排气阀（留缝隙）；②通蒸汽预热至80-90℃排冷空气；③升温至121℃维持15-30min；④缓慢降温（防负压），开排气阀；⑤做无菌试验验证。关键是排冷空气和控制升降温速率。2.原因及处理：①密封件磨损→更换O型圈；②密封面结垢→清洁；③轴跳动大→校准同轴度；④密封液压力不足→调整压力。泄漏严重需停机检修。3.原理及校准：极谱法（电极电流与DO正相关）；荧光法（荧光淬灭与DO负相关）。校准：①零点（亚硫酸钠溶液）；②满量程（空气饱和水，100%饱和度）；③每1-2周校准一次。4.关键指标及意义：①无菌性（无菌试验）→防杂菌污染；②pH→符合细胞生长；③TOC→检测灭菌对培养基的破坏；④渗透压→维持细胞平衡。异常需重新灭菌或调整配方。六、讨论题答案1.关键因素及调控：①温度→夹套加热/冷却（±0.1℃），过高/低影响酶活性；②pH→NaOH/H₃PO₄调节（±0.05pH）；③DO→搅拌/通气控制（20%-60%饱和度）；④渗透压→培养基成分调节。结合在线数据闭