2025年临床免疫学检验技术试题及答案(五)

2025年临床免疫学检验技术试题及答案(五)一、单项选择题（每题2分，共30分）1.采用双抗体夹心法检测血清中某抗原时，若待测样本中抗原浓度过高，可能出现的现象是（）A.钩状效应（HOOK效应）B.前带现象C.后带现象D.等价带现象答案：A解析：双抗体夹心法中，当抗原浓度过高时，过量抗原会与固相抗体和酶标抗体分别结合，形成抗原-固相抗体和抗原-酶标抗体的复合物，无法形成固相抗体-抗原-酶标抗体的三明治结构，导致检测结果低于实际值，即钩状效应。前带现象指抗体过量时的假阴性，后带现象指抗原过量但未达到钩状效应阈值时的弱反应，等价带为抗原抗体比例合适时的强反应。2.流式细胞术检测T细胞亚群时，常用的荧光标记组合是（）A.CD3-FITC/CD4-PE/CD8-APCB.CD3-PE/CD19-FITC/CD56-APCC.CD4-FITC/CD20-PE/CD16-APCD.CD8-FITC/CD25-PE/CD127-APC答案：A解析：T细胞亚群检测的核心标记为CD3（总T细胞）、CD4（辅助/诱导T细胞）、CD8（细胞毒性/抑制T细胞）。FITC（绿色荧光）、PE（橙色荧光）、APC（红色荧光）为流式细胞术常用荧光素组合，三者激发光和发射光互不干扰，适合多色检测。3.间接免疫荧光法（IIF）检测抗核抗体（ANA）时，常用的细胞基质是（）A.人喉癌上皮细胞（Hep-2细胞）B.绵羊红细胞（SRBC）C.鸡红细胞（CRBC）D.小鼠骨髓瘤细胞（SP2/0）答案：A解析：Hep-2细胞因含有人源细胞核抗原、胞浆抗原和核仁抗原，且核大、结构清晰，是目前IIF法检测ANA的标准基质。SRBC和CRBC主要用于溶血试验，SP2/0为杂交瘤细胞，不用于ANA检测。4.以下哪种免疫检测技术属于均相免疫分析？（）A.化学发光免疫分析（CLIA）B.酶联免疫吸附试验（ELISA）C.荧光偏振免疫分析（FPIA）D.时间分辨荧光免疫分析（TRFIA）答案：C解析：均相免疫分析无需分离结合与游离标记物，反应体系中的信号变化直接反映待测物浓度。FPIA利用荧光分子在结合抗原抗体后旋转速度改变导致偏振光强度变化，属于均相法。CLIA、ELISA、TRFIA均需分离步骤，属于非均相法。5.检测血清中IgE水平时，最常用的方法是（）A.单向免疫扩散法（RID）B.速率散射免疫比浊法C.放射免疫分析（RIA）D.化学发光免疫分析（CLIA）答案：D解析：IgE在血清中浓度极低（正常参考值0.1-0.9mg/L），需高灵敏度方法检测。CLIA灵敏度可达pg/mL级别，且自动化程度高，是目前临床检测IgE的主流方法。RID和速率散射比浊法灵敏度较低，适用于IgG、IgA等中高浓度抗体；RIA因放射性污染已逐渐被淘汰。二、多项选择题（每题3分，共15分）1.影响免疫浊度法检测结果的因素包括（）A.抗原抗体比例B.反应溶液的离子强度C.温度D.待测样本的脂血程度答案：ABCD解析：免疫浊度法基于抗原抗体结合形成免疫复合物，其浊度与复合物量相关。抗原抗体比例失衡（前带或后带）会导致浊度降低；离子强度过低会抑制复合物形成，过高可能导致非特异性沉淀；温度影响反应速率和复合物稳定性；脂血样本中的脂质颗粒会干扰浊度检测，需预处理。2.肿瘤标志物联合检测的原则包括（）A.选择器官特异性高的标志物组合B.选择不同病理机制的标志物C.优先选择灵敏度高的单一标志物D.考虑标志物的半衰期和动态变化答案：ABD解析：联合检测需兼顾特异性和灵敏度，避免选择同一病理途径的标志物（如CEA和CA19-9均与胃肠道肿瘤相关，但机制不同）；器官特异性高的组合（如AFP+DCP用于肝癌）可减少假阳性；标志物半衰期（如CYFRA21-1半衰期短，反映近期肿瘤活动）和动态监测（治疗前后变化）对疗效评估更有意义。单一高灵敏度标志物可能因特异性不足导致假阳性，故不选C。3.以下属于原发性B细胞免疫缺陷病的实验室特征是（）A.血清IgG、IgA、IgM显著降低B.外周血CD19+B细胞数量减少C.迟发型超敏反应（DTH）试验阴性D.淋巴结活检缺乏生发中心答案：ABD解析：原发性B细胞缺陷病（如XLA）因B细胞发育障碍，导致血清免疫球蛋白（Ig）水平降低（A正确）、外周血B细胞（CD19+）减少（B正确）；淋巴结生发中心是B细胞增殖分化的场所，缺陷时缺乏（D正确）。DTH试验反映T细胞功能，B细胞缺陷时T细胞功能正常，故C错误。4.自身免疫性甲状腺疾病（AITD）常用的自身抗体检测项目包括（）A.抗甲状腺过氧化物酶抗体（TPOAb）B.抗甲状腺球蛋白抗体（TgAb）C.促甲状腺激素受体抗体（TRAb）D.抗胰岛素抗体（IAA）答案：ABC解析：AITD包括Graves病和桥本甲状腺炎，TPOAb和TgAb是桥本甲状腺炎的标志性抗体，TRAb是Graves病的致病性抗体（刺激或阻断TSH受体）。IAA主要与1型糖尿病相关，故不选D。5.关于流式细胞术检测淋巴细胞亚群的质量控制，正确的做法是（）A.使用同型对照抗体排除非特异性荧光B.样本采集后4小时内完成检测C.采用全血染色法避免分离PBMC时的细胞丢失D.仪器每日进行荧光补偿调节答案：ACD解析：同型对照用于确定非特异性结合的荧光阈值（A正确）；全血染色法直接标记外周血中的淋巴细胞，避免密度梯度离心导致的细胞丢失（C正确）；荧光补偿调节可消除不同荧光素之间的光谱重叠（D正确）。淋巴细胞亚群检测样本可在室温保存24小时（B错误）。三、简答题（每题8分，共40分）1.简述化学发光免疫分析（CLIA）与时间分辨荧光免疫分析（TRFIA）的主要区别。答案：（1）发光原理：CLIA利用化学发光物质（如鲁米诺、吖啶酯）在化学反应中释放光子；TRFIA利用稀土元素（如Eu³+）标记抗体，在激发光下发射长寿命荧光。（2）标记物：CLIA标记物为化学发光分子（稳定性较差）；TRFIA标记物为稀土离子（稳定性高，可长期保存）。（3）检测方式：CLIA直接检测化学发光强度；TRFIA需延迟检测（排除短寿命背景荧光），时间分辨技术提高灵敏度。（4）仪器要求：CLIA仪器需避光反应池；TRFIA需脉冲光源和时间分辨检测模块。（5）应用场景：CLIA适合高通量检测（如激素、肿瘤标志物）；TRFIA因抗干扰能力强，常用于微量物质（如细胞因子）检测。2.自身抗体检测中，为何需同时进行间接免疫荧光法（IIF）和酶联免疫吸附试验（ELISA）？答案：（1）IIF的优势：以Hep-2细胞为基质，可同时检测多种核抗原（如均质型、斑点型、核仁型），提供抗体的荧光模式信息，对自身免疫病（如SLE、SSc）的筛查和分型具有指导意义；灵敏度高，适合初筛。（2）ELISA的优势：以纯化或重组抗原包被，可定量检测单一特异性抗体（如抗dsDNA、抗Sm），特异性强，可用于确诊和疗效监测。（3）互补性：IIF可能出现假阳性（如某些感染导致的低滴度ANA），需ELISA确认特异性抗体；ELISA可能漏检未知抗原（如新型自身抗体），需IIF补充筛查。两者联合可提高诊断的准确性和全面性。3.简述流式细胞术检测细胞内细胞因子的操作要点。答案：（1）细胞刺激：外周血单个核细胞（PBMC）需用PMA+离子霉素刺激4-6小时，诱导细胞因子表达；加入莫能菌素（Monensin）阻断高尔基体转运，使细胞因子滞留胞内。（2）表面标记：先标记表面抗原（如CD3、CD4），区分细胞亚群（如Th1、Th2）。（3）固定破膜：使用多聚甲醛固定细胞，再用TritonX-100或皂素破坏细胞膜，允许荧光标记的细胞因子抗体进入胞内。（4）胞内染色：加入荧光标记的抗细胞因子抗体（如抗IFN-γ、抗IL-4），孵育30分钟。（5）洗涤检测：洗涤去除未结合抗体，流式细胞仪检测荧光强度，分析不同亚群的细胞因子分泌水平。4.肿瘤标志物检测中，“动态监测”为何比“单次检测”更有临床意义？答案：（1）个体差异：不同患者的肿瘤标志物基线水平可能差异较大（如吸烟者CEA可能轻度升高），单次检测无法区分生理波动与病理升高。（2）疗效评估：治疗后肿瘤标志物水平下降（如术后1-2周CEA降至正常）提示治疗有效；持续升高或下降后反弹可能提示复发或转移。（3）预后判断：治疗前高浓度标志物（如CA125>1000U/mL）常提示肿瘤负荷大、预后差；动态下降速率（如半衰期）可反映肿瘤细胞增殖速度。（4）鉴别诊断：良性疾病（如肝炎导致AFP轻度升高）的标志物通常呈波动性，恶性肿瘤则呈进行性升高。5.简述免疫比浊法中“速率法”与“终点法”的区别及适用场景。答案：（1）检测原理：速率法检测抗原抗体反应的最大速率（即单位时间内浊度变化的峰值）；终点法检测反应平衡时的最终浊度（通常在反应30分钟后）。（2）灵敏度：速率法在抗原抗体反应的快速结合期检测，对低浓度抗原更敏感；终点法需反应完全，适合高浓度抗原（如IgG、C3）。（3）抗干扰能力：速率法受样本中干扰物质（如脂血、溶血）影响较小（因检测时间短）；终点法因反应时间长，易受非特异性沉淀干扰。（4）适用场景：速率法用于检测治疗药物浓度（如地高辛）、微量蛋白（如尿微量白蛋白）；终点法用于检测血清中高浓度蛋白（如IgM、转铁蛋白）。四、案例分析题（共15分）患者男，45岁，因“反复发热3月，关节痛2周”就诊。查体：体温38.5℃，面部红斑，双手近端指间关节肿胀。实验室检查：血常规示WBC3.2×10⁹/L（↓），PLT85×10⁹/L（↓）；尿常规示蛋白（++），红细胞（+）；生化示ALT58U/L（↑），Scr120μmol/L（↑）；免疫学检查：ANA1:1000（均质型），抗dsDNA抗体（+），补体C30.4g/L（↓），C40.1g/L（↓），IgG18g/L（↑）。问题：1.该患者最可能的诊断是什么？依据是什么？（5分）2.需进一步做哪些实验室检查以明确病情活动度？（5分）3.若患者治疗3个月后复查，抗dsDNA抗体转阴，补体C3、C4回升，说明什么？（5分）答案：1.最可能的诊断是系统性红斑狼疮（SLE）。依据：①临床表现：反复发热、面部红斑、关节痛；②实验室异常：白细胞和血小板减少（血液系统受累）、蛋白尿和血肌酐升高（肾脏受累）、ANA高滴度（均质型）、抗dsDNA抗体阳性（SLE特异性抗体）、补体降低（免疫复合物消耗）、IgG升高（多克隆高球蛋白血症）。符合ACR/EULAR2019SLE分类标准中的临床（血液学、肾脏、黏膜皮肤）和免疫学（ANA、抗dsDNA）条目。2.需进一步检查：①24小时尿蛋白定量（评估肾损伤程度）；②抗ENA抗体谱（明确是否合并抗Sm、抗RNP等抗体）；③血沉（ESR）和C反应蛋白（CRP）