2025 年大学分子生物学（分子克隆）上学期期末测试卷

2025年大学分子生物学（分子克隆）上学期期末测试卷

（考试时间：90分钟满分100分）班级______姓名______一、选择题（总共10题，每题3分，每题只有一个正确答案，请将正确答案填在括号内）1.在分子克隆中，常用的限制性内切酶作用于（）。A.磷酸二酯键B.氢键C.肽键D.糖苷键2.以下哪种载体常用于构建基因文库（）。A.质粒载体B.噬菌体载体C.人工染色体载体D.以上都是3.cDNA文库构建过程中，首先要提取细胞中的（）。A.DNAB.mRNAC.tRNAD.rRNA4.感受态细胞是指（）。A.处于对数生长期的细胞B.处于静止期的细胞C.能够摄取外源DNA的细胞D.能够表达外源基因的细胞5.蓝白斑筛选中，白色菌落表示（）。A.含有重组质粒B.含有非重组质粒C.质粒未导入细胞D.细胞死亡6.用于PCR反应的酶是（）。A.DNA聚合酶B.RNA聚合酶C.逆转录酶D.限制性内切酶7.分子克隆中，连接反应的最佳温度一般是（）。A.4℃B.16℃C.37℃D.65℃8.以下哪种方法可用于鉴定重组质粒（）。A.酶切分析B.PCR扩增C.测序D.以上都是9.基因表达载体中，启动子的作用是（）。A.启动基因转录B.终止基因转录C.调控基因翻译D.编码蛋白质10.蛋白质表达过程中，密码子与反密码子的配对遵循（）。A.严格的碱基互补配对B.摆动配对原则C.随机配对D.以上都不对二、多项选择题（总共5题，每题5分，每题有多个正确答案，请将正确答案填在括号内，少选、多选、错选均不得分）1.分子克隆中常用的工具酶有（）。A.限制性内切酶B.DNA连接酶C.DNA聚合酶D.逆转录酶2.以下属于真核生物表达载体元件的有（）。A.启动子B.增强子C.终止子D.核糖体结合位点3.构建基因组文库时，需要考虑的因素有（）。A.载体容量B.插入片段大小C.宿主细胞D.筛选方法4.提高PCR反应特异性的方法有（）。A.优化引物设计B.提高退火温度C.增加模板浓度D.减少循环次数5.蛋白质表达系统包括（）。A.原核表达系统B.真核表达系统C.昆虫表达系统D.哺乳动物细胞表达系统三、判断题（总共10题，每题2分，请判断对错，在括号内打“√”或“×”）1.限制性内切酶识别的DNA序列一般具有回文结构。（）2.质粒载体都含有抗生素抗性基因，用于筛选阳性克隆。（）3.cDNA文库包含了细胞中所有的基因。（）4.感受态细胞制备后可长期保存使用。（）5.蓝白斑筛选中，蓝色菌落表示含有重组质粒。（）6.PCR反应中，引物的长度一般为15-30bp。（）7.连接反应中，载体与插入片段的摩尔比一般为1:3-1:10。（）8.重组质粒导入宿主细胞后，都能稳定表达外源基因。（）9.真核生物基因表达载体中不需要SD序列。（）10.蛋白质表达过程中，密码子的第三位碱基与反密码子的第一位碱基配对时存在摆动现象。（）四、简答题（总共3题，每题10分）1.简述构建基因组文库的基本步骤。2.说明PCR反应的原理及主要步骤。3.阐述原核生物表达载体与真核生物表达载体的主要区别。五、论述题（总共1题，20分）请论述分子克隆技术在现代生物学研究中的重要意义及应用领域，并举例说明其在某一领域的具体应用。答案：一、选择题1.A2.D3.B4.C5.A6.A7.B8.D9.A10.B二、多项选择题1.ABCD2.ABC3.ABCD4.ABD5.ABCD三、判断题1.√2.√3.×4.×5.×6.√7.√8.×9.√10.√四、简答题1.构建基因组文库的基本步骤：首先提取基因组DNA并进行片段化处理；然后选择合适的载体，将基因组DNA片段与载体连接；接着将连接产物导入宿主细胞，形成大量含有不同基因组片段的克隆；最后对这些克隆进行筛选和鉴定，获得包含整个基因组的文库。2.PCR反应原理：以拟扩增的DNA分子为模板，以一对分别与模板5'末端和3'末端相互补的寡核苷酸片段为引物，在DNA聚合酶的作用下，按照半保留复制的机制沿着模板链延伸直至完成新DNA的合成。主要步骤：变性，将模板DNA加热至95℃左右使其双链解开；退火，降温至合适温度使引物与模板互补结合；延伸，在DNA聚合酶作用下，以dNTP为原料合成新的DNA链。3.原核生物表达载体与真核生物表达载体主要区别：原核载体一般较小，结构简单，启动子为原核启动子，无内含子等真核基因元件，翻译起始依赖SD序列；真核载体较大，有复杂调控元件，含真核启动子、增强子等，有内含子，需进行转录后加工，翻译起始与原核不同，无SD序列。五、论述题分子克隆技术在现代生物学研究中具有极其重要的意义。它是基因工程的核心技术，为深入研究基因功能、蛋白质表达调控等提供了关键手段。其应用领域广泛，包括基因治疗、药物研发、生物制药、农