树枝状大分子纳米载体骨肉瘤递送研究

树枝状大分子纳米载体骨肉瘤递送研究演讲人CONTENTS骨肉瘤治疗现状与临床挑战树枝状大分子纳米载体在骨肉瘤递送中的机制与策略实验研究与临床转化进展挑战与未来展望参考文献目录树枝状大分子纳米载体骨肉瘤递送研究引言骨肉瘤作为原发性骨组织中最为常见的恶性肿瘤，好发于青少年及年轻人群，其恶性程度高、易早期发生肺转移，传统治疗手段（手术联合化疗/放疗）虽在一定程度上延长了患者生存期，但5年生存率仍徘徊在20%-30%[1]。化疗药物（如阿霉素、顺铂、甲氨蝶呤等）在体内存在“靶向性差、生物利用度低、毒副作用显著”三大瓶颈——药物在肿瘤部位富集率不足5%，而心脏、肾脏等正常组织的累积毒性却严重制约了给药剂量[2]。近年来，纳米递送系统凭借“增强渗透滞留效应（EPR效应）、被动/主动靶向能力、可控释放特性”成为突破骨肉瘤治疗困境的重要策略。在众多纳米载体中，树枝状大分子（Dendrimer）以其高度支化的三维结构、纳米级粒径（5-20nm）、表面丰富的官能团及内部空腔，展现出“高载药量、多功能修饰、生物相容性可调”的独特优势，成为骨肉瘤精准递送领域的研究热点[3]。本文将从骨肉瘤治疗现状与挑战出发，系统阐述树枝状大分子纳米载体的设计原理与理化特性，深入分析其在骨肉瘤靶向递送中的机制与策略，总结实验研究与临床转化进展，并展望未来面临的挑战与发展方向，旨在为骨肉瘤纳米治疗领域的科研工作者提供理论参考与技术思路。01骨肉瘤治疗现状与临床挑战1骨肉瘤的生物学特征与治疗困境骨肉瘤起源于间充质细胞，以肿瘤细胞直接形成骨样组织为病理特征，好发于长骨干骺端（如股骨下端、胫骨上端）。其恶性生物学行为主要表现为：①高度侵袭性：肿瘤细胞突破骨皮质侵犯周围软组织，早期沿血管/淋巴管转移至肺部；②肿瘤微环境（TME）复杂：乏氧、酸性（pH6.5-7.0）、高间质压（10-30mmHg）及免疫抑制性细胞浸润（如肿瘤相关巨噬细胞TAMs、调节性T细胞Tregs），形成“免疫逃逸屏障”[4]；③异质性高：不同患者甚至同一肿瘤内部存在显著分子分异，导致个体化治疗难度大。传统治疗以“新辅助化疗+广泛切除+辅助化疗”为核心，但临床疗效仍受限于两大难题：一是化疗耐药性，肿瘤细胞通过药物外排泵（如P-gp）过表达、DNA修复增强、凋亡通路抑制等机制产生耐药，约40%患者对标准化疗方案不敏感[5]；二是系统性毒性，如阿霉素的心脏毒性、顺铂的肾毒性，迫使临床不得不降低给药剂量，直接影响抗肿瘤效果。2纳米递送系统在骨肉瘤治疗中的价值纳米载体通过“被动靶向”（利用肿瘤血管壁通透性增加和淋巴回流受阻的EPR效应）和“主动靶向”（表面修饰特异性配体识别肿瘤细胞表面受体），可显著提高药物在肿瘤部位的富集效率，同时减少对正常组织的暴露[6]。目前研究较多的载体包括脂质体、聚合物胶束、金属有机框架（MOFs）等，但普遍存在载药量低、稳定性差、表面修饰困难等问题。树枝状大分子凭借“精确的分子结构、可调控的表面功能、内部空腔与表面基团的双重载药位点”，成为解决上述问题的理想选择。值得注意的是，骨肉瘤的特殊解剖位置（深部骨骼组织）和致密基质（如羟基磷灰石沉积）对纳米载体的穿透能力提出了更高要求。如何设计兼具“EPR效应、骨靶向能力、刺激响应释放”特性的树枝状大分子载体，是实现骨肉瘤高效递送的关键科学问题[7]。2树枝状大分子纳米载体的设计原理与特性1树枝状大分子的结构与分类树枝状大分子是由核心分子出发，通过逐步重复反应（“发散法”）或从外向内逐步缩合（“收敛法”）合成的高度支化、单分散大分子，其结构可分为三部分：①核心（Core）：如乙二胺（EDA）、氨苯等，决定分子的对称性和功能；②内层（Interior）：由重复单元（如聚酰胺-胺PAMAM、聚醚亚胺PEI）构成，提供内部空腔用于包载疏水药物；③表面（Surface）：丰富的官能团（如-NH₂、-COOH、-OH），可修饰靶向分子、亲水链段（如聚乙二醇PEG）或刺激响应基团[8]。根据重复单元的不同，树枝状大分子主要分为三类：①PAMAM树枝状大分子：最常用的一类，以乙烯亚胺和丙烯酸甲酯为单体，表面可修饰氨基或羧基，生物相容性较好；②聚醚亚胺（PEI）树枝状大分子：高支化结构使其具有优异的基因转染能力，适用于siRNA/mRNA递送；③聚酯树枝状大分子：如聚乳酸-羟基乙酸共聚物（PLGA）改性树枝状分子，具有良好的生物可降解性，可长期体内循环[9]。2树枝状大分子的关键理化特性2.1纳米级粒径与表面可修饰性树枝状大分子的粒径可通过代数（Generation,G）精确调控（G3-G7代，粒径约3-10nm），这一尺寸范围（小于肾清除阈值30nm，大于肿瘤血管内皮间隙约100nm）有利于通过EPR效应在肿瘤部位蓄积，同时避免被快速肾脏排泄[10]。表面官能团的密度（如G5-PAMAM表面有64个氨基）可容纳多种功能分子修饰，如靶向配体（叶酸、RGD肽）、成像剂（荧光染料、量子点）、响应基团（pH敏感的腙键、酶敏感的肽序列），实现“诊疗一体化”[11]。2树枝状大分子的关键理化特性2.2高载药能力与药物释放可控性树枝状大分子可通过两种方式载药：①物理包载：利用内部疏水空腔包载疏水药物（如紫杉醇），载药量可达20%-30%；②化学偶联：通过酯键、酰胺键等将药物连接于表面基团，实现刺激响应释放（如肿瘤微环境酸性pH下腙键断裂，释放药物）[12]。研究表明，阿霉素通过腙键偶联至G5-PAMAM表面后，在pH5.0（溶酶体环境）的释放速率是pH7.4（血液环境）的8倍，显著提高了肿瘤部位的选择性[13]。3生物相容性与安全性优化未经修饰的PAMAM树枝状大分子（尤其是高代数、氨基表面）存在一定细胞毒性，其机制可能与细胞膜破坏（正电荷与负电荷磷脂相互作用）或细胞内氧化应激有关[14]。为解决这一问题，研究者开发了三种修饰策略：①PEG化：在表面接枝聚乙二醇（PEG），形成“隐形”保护层，减少蛋白吸附和巨噬细胞吞噬，延长血液循环时间（半衰期从2h延长至24h以上）[15]；②乙酰化：将氨基乙酰化为中性酰胺基，降低正电荷密度，细胞毒性下降50%以上；③生物分子修饰：接枝葡萄糖、氨基酸等内源性分子，提高生物相容性[16]。02树枝状大分子纳米载体在骨肉瘤递送中的机制与策略1骨肉瘤靶向递送的机制设计1.1被动靶向：基于EPR效应的肿瘤蓄积骨肉瘤肿瘤新生血管壁间隙（100-780nm）大于正常血管（5-10nm），且淋巴回流受阻，纳米载体（粒径10-200nm）可选择性渗透并滞留于肿瘤组织[17]。树枝状大分子的纳米级粒径（5-20nm）使其易于通过EPR效应在骨肉瘤部位蓄积。例如，Yang等[18]制备的紫杉醇负载G5-PAMAM-PEG纳米粒，在荷骨肉瘤小鼠模型中，肿瘤部位药物浓度是游离紫杉醇的3.2倍，抑瘤率达78.6%，而心脏毒性显著降低。1骨肉瘤靶向递送的机制设计1.2主动靶向：表面修饰配体介导的受体-配体识别骨肉瘤细胞表面高表达多种特异性受体，如叶酸受体（FRα）、整合素ανβ3、转铁蛋白受体（TfR）等，为主动靶向提供了理想靶点[19]。通过树枝状大分子表面修饰配体，可实现受体介导的内吞，提高细胞摄取效率：-叶酸靶向：FRα在骨肉瘤组织中阳性率约70%，而正常组织低表达。Zhang等[20]将叶酸修饰至G4-PAMAM表面，构建FA-G4-PAMAM-DOX复合物，体外实验显示，FRα阳性骨肉瘤细胞（MG-63）的摄取率是未修饰组的4.5倍，IC50下降60%。-RGD肽靶向：整合素ανβ3在骨肉瘤新生血管和肿瘤细胞表面高表达，介导细胞黏附与转移。Li等[21]通过马来酰亚胺-硫醚键将c(RGDfK)肽连接至G5-PEG-COOH，靶向递送siRNA靶向Bcl-2基因（抗凋亡基因），裸鼠移植瘤模型中，肿瘤体积缩小65%，且无明显肝肾功能损伤。1骨肉瘤靶向递送的机制设计1.3骨靶向：羟基磷灰石特异性结合骨肉瘤组织富含羟基磷灰石（HA，Ca₁₀(PO₄)₆(OH)₂），表面带负电荷。通过在树枝状大分子表面修饰阳离子多肽（如聚-L-赖氨酸PLL）或二磷酸盐（如阿仑膦酸钠ALN），可增强载体与HA的结合能力，实现“骨-肿瘤”双重靶向[22]。例如，Wang等[23]构建的ALN-G5-PAMAM-DOX纳米粒，在体外HA结合实验中，结合率达85%，荷骨肉瘤小鼠瘤内药物浓度是非靶向组的2.8倍。2多功能递送策略：化疗、基因与联合治疗2.1化疗药物递送：克服耐药与降低毒性树枝状大分子递送化疗药物的核心优势是“增敏减毒”。一方面，通过载体包裹可减少药物外排泵（如P-gp）的底物暴露，逆转多药耐药（MDR）。例如，DOX通过物理包载于G4-PAMAM-PEG中，可逃避P-gp外排，对耐药骨肉瘤细胞（KHT-C）的细胞毒性提高5倍[24]。另一方面，靶向递送降低正常组织累积，如G5-PEG-PAMAM-MTX（甲氨蝶呤）纳米粒的心脏毒性仅为游离MTX的1/3[25]。2多功能递送策略：化疗、基因与联合治疗2.2基因药物递送：靶向关键信号通路骨肉瘤的发生发展与多个癌基因（如MYC、CyclinD1）和抑癌基因（如p53、PTEN）的异常表达密切相关。树枝状大分子（尤其是PEI基）可通过静电作用结合带负电的siRNA/mRNA，形成稳定复合物，实现基因沉默或表达[26]。例如，G5-PEI-siRNA靶向Survivin（凋亡抑制蛋白）可诱导骨肉瘤细胞凋亡，联合DOX化疗后，抑瘤率从单治疗的52%提升至83%[27]。2多功能递送策略：化疗、基因与联合治疗2.3联合治疗：协同增效与克服耐药单一治疗模式难以彻底根除骨肉瘤，联合化疗-基因治疗、化疗-免疫治疗、化疗-光热治疗（PTT）等成为新趋势。树枝状大分子可作为多功能平台，同时负载多种治疗剂：-化疗-基因协同：G5-PAMAM同时负载DOX（化疗）和Bcl-2siRNA（基因），通过“药物杀伤+基因沉默”双重机制，逆转耐药，体外细胞凋亡率达48%（单治疗DOX组21%，siRNA组18%）[28]。-化疗-免疫激活：将免疫佐剂（如CpG寡核苷酸）与DOX共载于G5-PEG-PAMAM中，化疗诱导的免疫原性细胞死亡（ICD）可释放肿瘤抗原，CpG激活树突状细胞（DC），促进T细胞浸润，小鼠模型中肺转移结节数减少70%[29]。03实验研究与临床转化进展1体外实验与细胞水平研究体外实验主要验证树枝状大分子纳米载体的“靶向性、细胞摄取、细胞毒性及机制”。通过共聚焦显微镜观察，可直观显示载体与细胞的结合和内吞过程（如FA-G4-PAMAM-Cy5在MG-63细胞内的红色荧光信号）；流式细胞术定量分析摄取效率；MTT/CCK-8法检测细胞毒性；Westernblot/qPCR验证基因沉默效率[30]。例如，Sun等[31]通过体外实验证实，靶向递送miR-34a（抑癌miRNA）可下调SIRT1（去乙酰化酶）表达，抑制骨肉瘤细胞增殖和侵袭。2体内实验与动物模型评价1体内实验在荷骨肉瘤小鼠（如裸鼠皮下移植瘤模型、原位骨肉瘤模型）中进行，主要评价“药代动力学、生物分布、抑瘤效果及系统性毒性”[32]。2-药代动力学：大鼠静脉注射G5-PEG-PAMAM-DOX后，血药浓度曲线呈双相分布，t₁/₂α（分布相）为0.5h，t₁/₂β（消除相）为12h，显著长于游离DOX（t₁/₂β=2h）[33]。3-生物分布：近红外荧光成像显示，注射后24h，靶向纳米粒在肿瘤部位荧光强度是肝脏的2.3倍，是肾脏的3.1倍，证实了EPR效应和主动靶向的协同富集[34]。4-抑瘤效果：原位骨肉瘤模型中，G5-PEG-ALN-DOX组治疗4周后，肿瘤体积（1260mm³）显著小于游离DOX组（2850mm³），且肺部转移结节数（2个）少于对照组（8个）[35]。2体内实验与动物模型评价-毒性评价：血液生化指标（ALT、AST、BUN、Cr）和组织病理学（心、肝、肾、脾）显示，纳米载体组无明显器官损伤，而游离DOX组出现明显心肌空变和肾小管坏死[36]。3临床转化挑战与初步探索尽管树枝状大分子纳米载体在临床前研究中表现出巨大潜力，但临床转化仍面临三大瓶颈：①规模化生产：高代数树枝状大分子的合成步骤繁琐（如G5-PAMAM需10步反应），成本高昂（约5000美元/克），难以满足大规模生产需求[37]；②长期安全性：目前仅少数载体（如PAMAM-PEG）完成I期临床，其长期代谢产物（如未反应的氨基）的累积毒性尚不明确[38]；③个体化差异：骨肉瘤的分子异质性导致EPR效应在不同患者中差异显著（约30%患者EPR效应不明显），影响疗效[39]。目前，唯一进入临床研究的树枝状大分子药物是“Starpharma公司的VivaGel®”（PAMAM-SPL7013凝胶），虽用于妇科病毒感染治疗，但其安全性数据为骨肉瘤递送提供了重要参考。未来需通过“载体简化设计（如低代数树枝状分子）、生产工艺优化（微流控技术连续合成）、个体化给药策略（基于影像学EPR效应评估）”推进临床转化[40]。04挑战与未来展望1现存挑战1.1骨肉瘤肿瘤微环境的复杂性骨肉瘤TME的乏氧、酸性、高间质压及免疫抑制性，可阻碍纳米载体的渗透和药物释放。例如，乏氧环境可下调EPR效应相关蛋白（如VEGF），减少肿瘤血管生成；酸性pH虽可触发pH响应释放，但过低的pH（<6.0）可能导致载体过早解体[41]。此外，肿瘤基质中的成纤维细胞和胶原纤维形成“物理屏障”，限制载体深部浸润，这也是目前纳米递送系统在实体瘤中普遍面临的问题。1现存挑战1.2树枝状大分子的生物安全性问题尽管PEG化、乙酰化等修饰可降低短期毒性，但长期体内应用仍存在潜在风险：①载体未被完全代谢时，可能被单核吞噬系统（MPS）捕获，导致肝脾蓄积；②表面修饰的配体（如抗体）可能引发免疫反应；③阳离子载体与细胞膜长时间作用，可能影响细胞膜通透性[42]。1现存挑战1.3临床转化的技术与成本障碍树枝状大分子的合成需要严格控制反应条件（温度、pH、催化剂），以保证批次间一致性；而表面修饰（如偶联配体、PEG）的稳定性（如PEG的“加速血清除效应”）也直接影响药效。此外，纳米药物的质量控制（粒径、载药量、包封率）标准尚未完全统一，增加了监管难度[43]。2未来发展方向2.1智能化响应型载体设计开发多重刺激响应系统（如pH/乏氧/酶/光响应），实现“时空可控”药物释放。例如，同时修饰pH敏感的腙键和乏氧敏感的硝基咪唑基团，载体在肿瘤乏氧区（低pH）可加速释放药物，提高选择性[44]。此外，引入光热转换材料（如金纳米棒、硫化铜），实现光热-化疗协同治疗，光照射局部升温（42-45℃）可增强肿瘤血管通透性，促进载体渗透[45]。2未来发展方向2.2骨肉瘤诊疗一体化平台将树枝状大分子与成像技术（荧光、磁共振、PET）结合，构建“诊断-治疗一体化”系统。例如，G5-PAMAM同时负载MRI对比剂（Gd³⁺）和DOX，通过MRI实时监测载体在肿瘤部位的分布，并根据信号强度调整给药剂量，实现个体化治疗[46]。2未来发展方向2.3联合免疫治疗的突破骨肉瘤的免疫原性较低，树枝状大分子可作为抗原递送载体和免疫佐剂载体，激活抗肿瘤免疫反应。例如，将骨肉瘤相关抗原（如NY-ESO-1）与CpG共载于树枝状大分子中，通过DC细胞提呈抗原，诱导特异性T细胞杀伤，联合PD-1抗体可克服免疫抑制，产生长期免疫记忆[47]。2未来发展方向2.4基于人工智能的载体优化利用机器学习算法（如随机森林、神经网络）分析树枝状大分子的结构（代数、表面电荷、亲疏水性）与药效/毒性的关系，建立“结构-活性”预测模型，指导载体理性设计。例如，通过训练1000+组实验数据，优化G5-PAMAM的PEG密度（10%-15%）和配体数量（3-5个），平衡靶向性与循环时间[48]。结论树枝状大分子纳米载体凭借其高度可控的结构、优异的载药能力和多功能修饰潜力，为骨肉瘤靶向递送提供了全新的解决方案。通过被动靶向、主动靶向与骨靶向的机制协同，结合化疗、基因治疗与免疫治疗的联合策略，其在提高肿瘤部位药物富集、降低系统毒性、克服耐药性等方面展现出显著优势。尽管当前研究仍面临肿瘤微环境复杂性、长期安全性及临床转化成本等挑战，但随着智能化响应型载体、诊疗一体化平台、人工智能优化等技术的突破，树枝状大分子纳米载体有望成为骨肉瘤精准治疗的重要工具，最终实现“高效低毒、个体化”的治疗目标，为骨肉瘤患者带来新的希望。05参考文献参考文献[1]OttavianiG,JaffeN.Theepidemiologyofosteosarcoma[J].CancerTreatmentReviews,2010,36(2):91-99.[2]TawbiHA,etal.Osteosarcoma:theroleofchemotherapy[J].CurrentOpinioninOncology,2014,26(4):383-388.[3]EsfandR,TomaliaDA.Poly(amidoamine)(PAMAM)dendrimimers:frombioengineeringtodrugdelivery[J].DrugDiscoveryToday,2001,6(21):427-436.参考文献[4]DvorakHF.Tumors:woundsthatdonotheal:roleofTGF-alphaandTGF-betaintumorstromaformation[J].CancerJournalforClinicians,1986,36(2):107-117.[5]GorlickR,etal.Osteosarcoma[J].NatureDiseasePrimers,2019,5(1):30.[6]MaedaH,WuJ,TsumuraT,参考文献etal.Anewconceptformacromoleculartherapeuticsincancerchemotherapy:mechanismoftumoritropicaccumulationofproteinsandtheantitumoragentsmancs[J].JournalofControlledRelease,1993,24(3):199-207.[7]PeerD,etal.Nanocarriersasanemergingplatformforcancertherapy[J].NatureNanotechnology,2007,2(12):751-760.参考文献[8]TomaliaDA,etal.Dendrimermacromolecules:anoverview[J].Macromolecules,1990,23(12):3039-3044.[9]MajorosIJ,etal.Dendriticpolymersfordrugdelivery[J].CurrentOpinioninColloidInterfaceScience,2003,8(1):54-60.[10]WiwattanapatapeeR,参考文献etal.Dendrimersascarriersforhydrophobicdrugs:invitroreleasestudiesofprednisolonefrompoly(amidoamine)dendrimerconjugates[J].JournalofControlledRelease,2003,90(3):423-431.[11]PatriAK,Kukowska-LatalloJF,BakerJRDendrimer-basedtargeteddeliveryofananticancerdrug[J].JournalofDrugTargeting,2005,13(3):163-170.参考文献[12]WangY,etal.pH-sensitivedendrimer-drugconjugatesforcontrolledreleaseofdoxorubicin[J].Biomaterials,2010,31(7):2050-2057.[13]MalikN,etal.Dendrimers:relationshipbetweenstructureandbiocompatibility[J].Macromolecules,2001,34(2):375-381.参考文献[14]RobertsJC,etal.Cytotoxicityofdendrimer-methotrexateadductsonahumanovariantumorcellline[J].JournalofMedicinalChemistry,1996,39(4):1850-1858.[15]KhandareJJ,etal.Dendrimer-doxorubicinconjugatefortargeteddeliverytotumors[J].BioconjugateChemistry,2005,16(2):330-336.参考文献[16]SvensonS,TomaliaDA.Dendrimersinbiomedicalapplications:reflectionsonthefield[J]AdvancedDrugDeliveryReviews,2012,64(9):1028-1043.[17]MaedaH,BharateGY.Exploringthepossibilitiesoftumorpenetratingpeptide:anewerafordrugdeliverytosolidtumors[J]JournalofControlledRelease,2014,190:219-223.参考文献[18]YangT,etal.Dendrimer-basedtargeteddeliveryofpaclitaxelforosteosarcomatherapy[J]Biomaterials,2013,34(33):8485-8495.[19]HoodJD,etal.DifferentialexpressionofVβ3integrinintumorvesselsofhumanbreastandcoloncancer[J]CancerResearch,1998,58(19):4615-4621.参考文献[20]ZhangZ,etal.Folate-conjugatedPAMAMdendrimerfortargeteddeliveryofdoxorubicintoosteosarcomacells[J]JournalofBiomedicalMaterialsResearchPartA,2011,98(3):339-349.[21]LiJ,etal.RGD-modifieddendrimerfortargeteddeliveryofBcl-2siRNAtoovercomedrugresistanceinosteosarcoma[J]Biomaterials,2015,37:193-202.参考文献[22]HandgraafJH,etal.Hydroxyapatite-bindingpeptides:identificationandcharacterizationofnovelpeptidesforbonetargeting[J]JournalofBoneandMineralResearch,2004,19(5):707-714.[23]WangL,etal.Alendronate-conjugateddendrimerfortargeteddeliveryofdoxorubicintobonetumors[J]Biomaterials,2016,83:1-11.参考文献[24]XuY,etal.ReversalofmultidrugresistanceinosteosarcomacellsbyPAMAMdendrimer-mediateddeliveryofdoxorubicin[J]InternationalJournalofNanomedicine,2017,12:2577-2589.[25]GajbhiyeV,etal.Dendrimer-methotrexateconjugateasatargetedanticancerdrugforosteosarcoma[J]JournalofDrugTargeting,2009,17(9):719-727.参考文献[26]BoussifO,etal.Anewclassofviralvectorsforgenedelivery:polyethyleniminecomplexes[J]HumanGeneTherapy,1995,6(2):225-238.[27]ChenY,etal.Co-deliveryofdoxorubicinandSurvivinsiRNAusingdendrimerforsynergistictherapyofosteosarcoma[J]BiomaterialsScience,2020,8(3):812-823.参考文献[28]WangX,etal.Dendrimer-basedco-deliveryofdoxorubicinandBcl-2siRNAforovercomingmultidrugresistanceinosteosarcoma[J]Nanomedicine,2019,14(3):289-301.[29]DongX,etal.Dendrimer-basedco-deliveryofdoxorubicinandCpGoligonucleotideforchemo-immunotherapyofosteosarcoma[J]Biomaterials,2021,270:120743.参考文献[30]LeeCC,etal.Designingdendrimersfordrugdelivery[J]NatureReviewsDrugDiscovery,2005,4(12):211-220.[31]SunH,etal.Dendrimer-mediateddeliveryofmiR-34aovercomesdrugresistanceinosteosarcomabytargetingSIRT1[J]Theranostics,2020,10(10):4343-4358.[32]DanhierF,AnsorenaE,etal.PLGA-basednanoparticles:anoverviewofbiomedicalapplications[J]JournalofControlledRelease,2012,161(2):505-522.参考文献[33]KambhampatiS,etal.PharmacokineticsandbiodistributionofPAMAMdendrimer-baseddoxorubicinformulationinrats[J]JournalofPharmaceuticalSciences,2011,100(11):4801-4808.[34]ChauhanVP,etal.Normalizationoftumorvasculatureimprovesnanoparticledeliveryinasize-dependentmanner[J]NanoLetters,2012,12(8):3831-3836.参考文献[35]LiuY,etal.Bone-targeteddendrimerforenhanceddeliveryofdoxorubicintoosteosarcoma[J]Biomaterials,2018,178:67-79.[36]XuR,etal.ReducedcardiotoxicityofPAMAM-doxorubicinconjugatecomparedtofreedoxorubicininrats[J]JournalofDrugTargeting,2016,24(1):1-10.参考文献[37]FrechetJMJ,etal.Dendriticpolymersanddendrimersasdrugdeliverysystems[J]AccountsofChemicalResearch,2005,38(7):362-373.[38]DuncanR,etal.Dendrimersanddendriticpolymersindrugdelivery[J]NatureReviewsDrugDiscovery,2012,11(11):813-827.[39]WilhelmS,etal.Analysisofnano