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2026年生物化学(核酸提取技术)试题及答案
(考试时间:90分钟满分100分)班级______姓名______第I卷(选择题共40分)答题要求:本大题共20小题,每小题2分,在每小题给出的四个选项中,只有一项是符合题目要求的。1.核酸提取过程中,常用的蛋白酶K的作用是A.水解蛋白质B.降解核酸C.促进核酸溶解D.抑制核酸酶活性答案:A2.以下哪种方法可用于去除核酸溶液中的蛋白质杂质A.加热B.离心C.酚/氯仿抽提D.透析答案:C3.在核酸提取时,EDTA的主要作用是A.调节pH值B.抑制核酸酶C.沉淀核酸D.促进核酸与蛋白质分离答案:B4.提取DNA时,常用的裂解细胞的方法不包括A.机械破碎B.酶解C.酸碱处理D.加热答案:C5.核酸提取过程中,异丙醇的作用是A.沉淀核酸B.溶解核酸C.去除杂质D.抑制酶活性答案:A6.用于RNA提取的试剂通常需要经过特殊处理以去除A.DNA酶B.RNA酶C.蛋白酶D.脂肪酶答案:B7.提取核酸时,氯仿的作用主要是A.使蛋白质变性B.沉淀核酸C.促进相分离D.抑制核酸降解答案:C8.以下哪种核酸提取方法适用于大量样本A.柱式提取法B.酚/氯仿抽提法C.磁珠法D.离心柱法答案:A9.在核酸提取中,乙醇沉淀核酸时,最佳的乙醇浓度一般为A.50%B.70%C.95%D.无水乙醇答案:C10.核酸提取过程中,防止RNA降解的关键步骤是A.低温操作B.加入RNase抑制剂C.快速提取D.以上都是答案:D11.提取植物核酸时,需要先进行的预处理是A.研磨B.离心C.过滤D.匀浆答案:A12.用于核酸提取的样本保存液中通常含有A.乙醇B.甲醛C.甘油D.乙二胺四乙酸答案:D13.核酸提取过程中,使用离心机的目的主要是A.沉淀杂质B.分离不同相C.浓缩核酸D.以上都是答案:D14.提取病毒核酸时,需要先进行的操作是A.病毒培养B.病毒灭活C.样本稀释D.离心答案:B15.核酸提取过程中,硅胶膜柱法的原理是A.核酸与硅胶膜特异性结合B.核酸被硅胶膜吸附C.核酸在硅胶膜上沉淀D.核酸与硅胶膜发生化学反应答案:A16.以下哪种物质可用于核酸定量A.考马斯亮蓝B.溴酚蓝C.二苯胺D.酚红答案:C17.核酸提取后,检测其纯度常用的指标是A.A260/A280B.A260/A230C.A280/A230D.以上都是答案:D18.提取动物组织核酸时,常用的缓冲液是A.Tris-HCl缓冲液B.PBS缓冲液C.柠檬酸缓冲液D.硼酸缓冲液答案:A19.在核酸提取过程中,以下哪种操作可能导致核酸降解A.剧烈振荡B.长时间离心C.高温孵育D.以上都是答案:D20.核酸提取后,保存核酸的最佳条件是A.低温干燥B.常温保存C.高温保存D.酸性环境保存答案:A第II卷(非选择题共60分)答题要求:请根据题目要求,在相应位置准确作答。21.(共10分)简述核酸提取的基本流程。答案:核酸提取基本流程包括:样本预处理,如破碎细胞等;裂解细胞,释放核酸;去除蛋白质等杂质,常用酚/氯仿抽提等方法;核酸沉淀,如用异丙醇或乙醇等;洗涤沉淀,去除残留杂质;溶解核酸于适当缓冲液中。22.(共10分)说明在核酸提取过程中,如何防止核酸的降解。答案:防止核酸降解措施有:全程低温操作,减少核酸酶活性;加入RNase抑制剂(提取RNA时)或使用无核酸酶的试剂;快速提取,减少核酸暴露于核酸酶环境的时间;避免剧烈振荡等可能损伤核酸的操作;提取后的核酸及时保存于合适条件,如低温干燥。23.(共10分)分析比较酚/氯仿抽提法和柱式提取法的优缺点。答案:酚/氯仿抽提法优点是经典,能有效去除蛋白质等杂质,适用于多种样本;缺点是操作较繁琐,有一定毒性,对操作人员要求高。柱式提取法优点是操作简便、快速,可自动化,能较好保留核酸完整性;缺点是成本相对较高,某些柱式方法对样本量和浓度有一定要求。24.(共15分)材料:从某细胞系中提取核酸,提取过程中发现核酸产量较低。请分析可能导致核酸产量低的原因,并提出相应的解决措施。答案:可能原因及解决措施:样本量不足,应确保足够的细胞量用于提取;细胞裂解不完全,可优化裂解方法或延长裂解时间;提取过程中核酸损失过多,如操作不当导致吸附、沉淀损失,需规范操作;核酸酶污染,要使用无核酸酶试剂和耗材,加入抑制剂。25.(共15分)材料:提取植物叶片核酸时,得到的核酸溶液经检测纯度较低,A260/A280比值小于1.8。请分析可能导致纯度低的原因,并说明如何提高核酸纯度。答案:可能原因:蛋白质残留,未有效
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